專利名稱：凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)用材料，特別是一種凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
凝血酶是一種快速止血藥，其直接作用于凝血過程中的最后步驟，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，其一步到位式的作用方式具有其它任何一種止血藥無法比擬的止血速度和作用強(qiáng)度，這種快速高效的止血作用的特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于外科、手術(shù)及消化系統(tǒng)部位出血的止血。我國市場上使用的凝血酶全部為動物來源制品，由于世界各地出現(xiàn)動物疫情，人們要求使用人源性且經(jīng)過病毒滅活的人凝血酶，而目前世界上使用的人凝血酶的病毒滅活為單一滅活方法，臨床使用仍有不安全的因素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是采用一種雙重滅活病毒的技術(shù)生產(chǎn)人凝血酶，確保其臨床應(yīng)用更安全。本發(fā)明的技術(shù)案是這樣的，該凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法包括有以下工藝步驟，以人血漿低溫乙醇分步分離法得到的組份FIII為原料進(jìn)行溶解、PEG沉淀、S/D滅活病毒、超濾濃縮、激活、陽離子交換層析純化、超濾除菌分裝、凍干，其特征在于在激活步驟中所用的激活劑為CaCl2，對凍干的瓶裝制品在沸水浴中保持30分鐘進(jìn)行干熱滅活病毒。沸水浴的水溫為98-100℃。本發(fā)明由于采用了CaCl2激活劑和S/D及干熱雙重病毒滅活技術(shù)，因而本發(fā)明生產(chǎn)的人凝血酶具有活性高，病毒滅活徹底，使用更安全的顯著優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法工藝步驟為(1)取3千克F III原料，加入12升注射用水進(jìn)行溶解，溶解溫度為25℃，溶解后的體積為15升，(2)在溶解液中加入2.14升PEG溶液，后加入600毫升NaHCO3調(diào)整PH至6.8，冷卻至5℃，(3)離心過濾得體積15.5升，(4)將上述濾液置入滅活病毒罐中，加入含155克TWeen-80及51.7毫升TNBP的S/D母液1.55升，在25℃下緩慢滅活6個小時，滅活后的體積為17升，(5)加DEAE-Sephadex A-50凝膠吸附60分鐘，去除S/D殘留物，(6)用洗滌液洗凝膠5次，洗脫液洗凝膠2次，收集液脫液5升進(jìn)行過濾，(7)超濾濃縮后體積為0.5升，(B)加入激活劑1mol/L的CaCl23.5毫升進(jìn)行激活，(9)過濾，得體積0.5升，(10)用SP-SepharoseFF層析膠層析，(11)洗脫后體積100毫升，其效價約700IU/毫升，(12)用孔徑為0.2μm的膜進(jìn)行過濾除菌分裝，分裝規(guī)格為1毫升/瓶、2毫升/瓶、5毫升/瓶，(13)凍干，(14)將凍干后的制品置于98-100℃的沸水中進(jìn)行30分鐘干熱病毒滅活。
權(quán)利要求
1.凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法，它包括有以下工藝步驟，以人血漿低溫乙醇分步分離法得到的組份FIII為原料進(jìn)行溶解、PEG沉淀、S/D滅活病毒、超濾濃縮、激活、陽離子交換層析純化、超濾除菌分裝、凍干，其特征在于在激活步驟中所用的激活劑為CaCl2，對凍干的瓶裝制品在沸水浴中保持30分鐘進(jìn)行干熱滅活病毒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法，其特征在于沸水浴的水溫為98-100℃。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種凍干人凝血酶的生產(chǎn)方法，它包括有以下工藝步驟，以人血漿低溫乙醇分步分離法得到的組份F III為原料進(jìn)行溶解、PEG沉淀、S/D滅活病毒、超濾濃縮、激活、陽離子交換層析純化、超濾除菌分裝、凍干，其特征在于在激活步驟中所用的激活劑僅為單一的無機(jī)物CaCl
文檔編號A61K38/43GK1410537SQ0211715
公開日2003年4月16日 申請日期2002年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月25日
發(fā)明者安康, 馬小偉, 潘若文, 劉文芳, 范蓓 申請人:華蘭生物工程股份有限公司