一種注射用他克莫司脂肪乳劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種注射用他克莫司脂肪乳劑，含有他克莫司，注射用油性溶劑，表面活性劑，兩親性嵌段共聚物，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑，抗氧劑，穩(wěn)定劑。另外，本發(fā)明還公開了該脂肪乳劑的制備方法。本發(fā)明可有效增加藥物的化學穩(wěn)定性，他克莫司脂肪乳劑中，大部分藥物分布在油相或油水界面，避免藥物與水直接接觸；藥物增溶于油相中，隔離藥物，水相的藥物量少，大大降低了藥物水解的量，對藥物的穩(wěn)定性有很大提高。本發(fā)明的注射用他克莫司脂肪乳劑系將藥物部分包裹于油相或界面膜中，避免了與體液的直接接觸，因此降低了藥物自身可能產(chǎn)生的局部及血管刺激性。
【專利說明】一種注射用他克莫司脂肪乳劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種注射用他克莫司脂肪乳劑及其制備方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 器官移植被稱為20世紀人類醫(yī)學三大進步之一。器官移植作為器官衰竭治療的 最后有效手段，在中國的需求很大，如今全國有100多家醫(yī)院和200多位專家已經(jīng)可以進行 包括腎臟、肝臟、心臟、胰腺、肺、骨髓及角膜等25種同種異體器官移植，器官移植患者需要 在移植后終身服用免疫抑制劑，免疫抑制劑對器官移植患者存活時間、保持移植器官良好 功能等方面都起著重要作用。故免疫抑制劑作為器官移植用藥的開發(fā)具有臨床應用價值。
[0003] 他克莫司（Tacrolimus, FK506,商品名Prograf)是日本藤澤（Fujisawa)制藥公 司1984年首次從Tsukubaensis鏈霉菌第9993株發(fā)酵產(chǎn)物中提純的一種23元大環(huán)內(nèi)酯類 新型免疫抑制劑。其分子式為C 44H69NO12，分子量804. 02。室溫下呈白色結(jié)晶或晶狀粉末，易 溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿及乙醚中，略溶于己烷、石油醚，不溶于水，其熔點為 127 ?129°C，旋光度為-84.4°。
[0004] 他克莫司除具有抗真菌作用外，還具有很強的免疫抑制作用，他克莫司作用機理 為：他克莫司與內(nèi)源性細胞內(nèi)受體（胞漿結(jié)合蛋白FKBP12)結(jié)合，形成親免素復合物，該復 合物競爭性地與鈣調(diào)素特異性地結(jié)合并抑制鈣調(diào)素，有效地抑制T細胞激活，抑制白細胞 介素-2 (IL-2)的產(chǎn)生。他克莫司的效力比應用較廣的環(huán)孢素A (cyclosporine A，CsA)高 近100倍。在低于1/100環(huán)孢素濃度的情況下，也具抑制混合淋巴細胞培養(yǎng)物的反應，他克 莫司能夠有效防止器官移植后的排斥反應，并能逆轉(zhuǎn)對環(huán)孢素無效的排斥反應。
[0005] 目前市場上已有的以他克莫司為有效活性成份的藥物制劑有注射液、膠囊和軟膏 三種。他克莫司軟膏用于非特異性皮炎，他克莫司注射劑和他克莫司膠囊劑用于預防肝臟 或腎臟移植術(shù)后的移植物排斥反應及治療肝臟或腎臟移植術(shù)后應用其他免疫抑制藥物無 法控制的移植物排斥反應。
[0006] 在臨床上，由于他克莫司體內(nèi)吸收過程中所受的干擾因素很多，所以即便增加了 他克莫司的溶出速度，他克莫司口服制劑仍然存在著相當大的個體差異，導致血藥濃度的 波動很大；他克莫司注射劑適用于不能接受口服給藥或需要在短期內(nèi)達到較高血藥濃度、 迅速起效的患者。因此，他克莫司注射劑在臨床治療上仍然是口服制劑無法代替的。
[0007] 目前臨床上他克莫司注射劑常采用非水溶媒系統(tǒng)，S卩：將他克莫司溶解于聚氧乙 烯氫化蓖麻油和無水乙醇的混合溶劑中。聚氧乙烯氫化蓖麻油存在著藥理活性和不良反 應，臨床應用上往往會帶來毒副作用。且注射劑在稀釋時存在藥物析出的風險。他克莫司 在堿性條件下不穩(wěn)定。
[0008] 鑒于上述特性，為使他克莫司更好的發(fā)揮免疫抑制作用，開發(fā)一種不含具有藥理 活性的表面活性劑及有機試劑的注射液，并保持其穩(wěn)定性具有十分重要的意義。
[0009] 靜脈注射脂肪乳劑作為水難溶性藥物的載體，近來得到廣泛的應用。其特殊的理 化特性和低毒性決定了其可以作為脂溶性藥物的良好載體。與傳統(tǒng)注射液相比較，脂肪乳 劑可以降低血管刺激性。載藥脂肪乳是通過將藥物溶于脂肪油中，并經(jīng)磷脂乳化分散于水 相后制成，是一種以脂肪油為軟基質(zhì)而被磷脂膜包封的微粒分散體系，作為藥物載體具有 提高藥物溶解度和穩(wěn)定性等優(yōu)點。
[0010]日本藤澤制藥公司研制生產(chǎn)并在中國、日本、美國等國上市的他克莫司注射液，其 采用的表面活性劑是聚氧乙烯60氫化菌麻油（Polyoxyl60Hydrogenated Castor Oil,以下 簡稱HC0-60)，每毫升他克莫司注射液中含200mg HC0-60。韓國專利No. 0177158公開了一 種溶液制劑，該溶液制劑含有他克莫司或其藥學上可接受的鹽、包括氫化蓖麻油聚氧乙烯 醚的藥學上可接受的表面活性劑和藥學上可接受的非水溶劑。韓國專利No. 0206722公開 了一種溶液組合物，該組合物含有他克莫司或其藥學上可接受的鹽；選自由蛋黃卵磷脂、大 豆卵磷脂和氫化蓖麻油聚氧乙烯醚所組成的藥學上可接受的乳化劑；和選自由大豆油和芝 麻油所組成的液體炭氫化合物的藥學上可接受的油。韓國特開No. 2001-0006070公開了一 種藥用組合物，該藥用組合物含有水不溶性藥物和兩種以上的表面活性劑，至少一種表面 活性劑能夠溶解其它水不溶性表面活性劑和水不溶性藥物。
[0011] 美國公開了一種他克莫司注射液制劑，該制劑包含他克莫司、蓖麻油聚烴氧酯 (35)及非水溶劑。藥劑學上，主張制劑配方中盡量減少與治療作用無關(guān)的組分或其含量，而 達到相似或更好的藥物質(zhì)量和臨床療效。任何與治療作用無關(guān)的組分的增加或其加入量的 增大都會給臨床使用帶來安全性問題。從藥劑學角度分析，以上公開資料中采用多種表面 活性劑組合的發(fā)明均不是最佳的發(fā)明，其臨床應用的療效和安全性尚未有相關(guān)研究數(shù)據(jù)， 其安全性值得商榷。
[0012] 此外，現(xiàn)有溶液組合物存在一些問題，藥物在產(chǎn)期儲存的過程中會產(chǎn)生沉淀，并且 隨著藥物含量的降低，其藥學穩(wěn)定性將會下降。因此，傳統(tǒng)的溶液組合物不適于用作人體注 射用制劑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種注射用他 克莫司脂肪乳劑。該脂肪乳劑可有效增加藥物的化學穩(wěn)定性，他克莫司脂肪乳劑中，大部分 藥物分布在油相或油水界面，避免藥物與水直接接觸；藥物增溶于油相中，隔離藥物，水相 的藥物量少，大大降低了藥物水解的量，對藥物的穩(wěn)定性有很大的提高；注射用他克莫司脂 肪乳劑系將藥物部分包裹于油相或界面膜中，避免了與體液的直接接觸，因此降低了藥物 自身可能產(chǎn)生的局部及血管刺激性。另外，藥物在體內(nèi)是由油相中緩慢釋放，可避免藥物在 注射時由于初期濃度過高引起的不良反應。
[0014] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種注射用他克莫司脂肪乳劑， 其特征在于，每IOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中含有他克莫司0. Olg?10g，注射用油性 溶劑2g?20g，表面活性劑0. 5g?7g，兩親性嵌段共聚物0. Ig?2g，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑 0. 5g?7g，抗氧劑0?3g，穩(wěn)定劑0. Ig?5g ;所述抗氧劑為水溶性抗氧劑和/或油溶性抗 氧劑。
[0015] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每IOOmL注射用他克莫司脂 肪乳劑中含有他克莫司〇. Olg?5g，注射用油性溶劑IOg?20g，表面活性劑Ig?3g，兩親 性嵌段共聚物Ig?2g，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑Ig?4g，抗氧劑Ig?2g，穩(wěn)定劑0. 5g?2g。
[0016] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每IOOmL注射用他克莫司脂 肪乳劑中含有他克莫司〇. 2g，注射用油性溶劑20g，表面活性劑2. 05g，兩親性嵌段共聚物 I. 4g，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑2. 5g，抗氧劑I. 5g，穩(wěn)定劑0. 8g。
[0017] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每IOOmL注射用他克莫司脂 肪乳劑中還含有金屬螯合劑0. OOlg?3g，所述金屬螯合劑為依地酸二鈉和/或依地酸鈉 鈣。
[0018] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述注射用他克莫司脂肪乳 劑中還含有pH調(diào)節(jié)劑，pH調(diào)節(jié)劑的用量為使注射用他克莫司脂肪乳劑的pH值為4.0? 9. 0,所述pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸。
[0019] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述注射用油性溶劑為蓖麻 油、玉米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚 油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的一種或幾種；所述表 面活性劑為卵磷脂、司盤、吐溫、普朗尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的一種或幾種。
[0020] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述兩親性嵌段共聚物中的 親水鏈段為聚乙二醇，疏水鏈段為左旋聚乳酸、右旋聚乳酸或消旋聚乳酸。
[0021] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述親水鏈段的粘均分子量 為2000?10000,疏水鏈段的粘均分子量為8000?100000。
[0022] 上述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述穩(wěn)定劑為膽固醇和/或 膽固醇硫酸酯鈉；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、甘油和山梨醇中的 一種或幾種；所述水溶性抗氧劑為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸和L-半胱 氨酸中的一種或幾種，所述油溶性抗氧劑為維生素 E。
[0023] 另外，本發(fā)明還提供了一種制備上述的注射用他克莫司脂肪乳劑的方法，其特征 在于，該方法包括以下步驟：
[0024] 步驟一、將他克莫司、油溶性抗氧劑和穩(wěn)定劑加入注射用油性溶劑中，在溫度為 50°C?80°C的條件下攪拌均勻，得到油相；
[0025] 步驟二、將注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑、表面活性劑、兩親性嵌段共聚物、金屬螯合劑和 水溶性抗氧劑加入注射用水中，在溫度為50°C?80°C的條件下攪拌至所述原料全部溶解， 得到水相；
[0026] 步驟三、利用高速組織搗碎機，將步驟一中所述油相加入步驟二中所述水相中 或者將步驟二中所述水相加入步驟一中所述油相中，然后以6000rpm?20000rpm攪拌 2min?8min，得到初乳；
[0027] 步驟四、用pH調(diào)節(jié)劑將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至4.0?9.0,然后用 注射用水定容，將定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為20 °C?60 °C，以 300bar?1200bar壓力均質(zhì)4?12次，得到終乳，再用pH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié) 至 4. 0 ?9. 0 ;
[0028] 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，得到注射用 他克莫司脂肪乳劑。
[0029] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：
[0030] 1、本發(fā)明的注射用他克莫司脂肪乳劑可有效增加藥物的化學穩(wěn)定性，他克莫司脂 肪乳劑中，大部分藥物分布在油相或油水界面，避免藥物與水直接接觸；藥物增溶于油相 中，隔離藥物，水相的藥物量少，大大降低了藥物水解的量，對藥物的穩(wěn)定性有很大的提高。
[0031] 3、本發(fā)明的注射用他克莫司脂肪乳劑系將藥物部分包裹于油相或界面膜中，避免 了與體液的直接接觸，因此降低了藥物自身可能產(chǎn)生的局部及血管刺激性。另外，藥物在體 內(nèi)是由油相中緩慢釋放，可避免藥物在注射時由于初期濃度過高引起的不良反應。
[0032] 4、本發(fā)明的注射用他克莫司脂肪乳劑采用表面活性劑與兩親性嵌段共聚物復配 來提高制劑的物理穩(wěn)定性。兩親性嵌段共聚物中的疏水部分可以全部或部分地插入到油相 中，親水部分在水相中自由舒展，有效地阻止了乳滴間的聚集，提高了制劑的穩(wěn)定性。
[0033] 5、本發(fā)明的注射用他克莫司脂肪乳劑中的穩(wěn)定劑為膽固醇和/或膽固醇硫酸酯 鈉，穩(wěn)定劑可以調(diào)節(jié)脂肪乳界面膜的流動性，有很好的膜穩(wěn)定作用，加入穩(wěn)定劑的乳劑不僅 能經(jīng)受高溫熱壓滅菌，而且常溫或低溫放置穩(wěn)定，藥物不易析出。
[0034] 6、本發(fā)明將他克莫司90%以上的藥物包裹于脂肪乳的脂質(zhì)核心內(nèi)部，其余藥物分 布于油水界面膜中，減慢藥物降解，提高了藥物制劑的物理化學穩(wěn)定性，延長了藥物在體內(nèi) 的作用時間。
[0035] 7、將本發(fā)明的他克莫司脂肪乳劑經(jīng)注射給藥后表現(xiàn)為注射時對血管的刺激性顯 著降低，制劑在貯存過程中表現(xiàn)為較好的化學物理穩(wěn)定性，無藥物的滲漏現(xiàn)象。
[0036] 8、本發(fā)明制備的注射用他克莫司脂肪乳劑具有包封率高，穩(wěn)定性良好等優(yōu)點，是 一種有效的靜脈注射用藥，具有廣闊的開發(fā)前景。
[0037] 下面結(jié)合附圖和實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的詳細描述。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0038] 圖1為市售他克莫司注射液和本發(fā)明實施例1制備的注射用他克莫司脂肪乳劑給 藥后的藥時曲線。
[0039] 圖2為本發(fā)明實施例1制備的注射用他克莫司脂肪乳劑零時粒徑分布。

【具體實施方式】
[0040] 實施例1
[0041] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑，每IOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中含 有他克莫司〇. 2g，大豆油10g，中鏈脂肪酸甘油三酯10g，卵磷脂（蛋黃卵磷脂）2g，油酸 〇. 〇5g，左旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物（中科院長春應用化學研究所提供，其中聚乙二醇 的粘均分子量為2000,左旋聚乳酸的粘均分子量為14000) I. 4g，甘油2. 5g，維生素 E I. 5g， 膽固醇0. 8g，依地酸二鈉 0. 02g，鹽酸（用量為使注射用他克莫司脂肪乳劑的pH值為6. 0)， 余量為注射用水。
[0042] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑的制備方法為：
[0043] 步驟一、將他克莫司、維生素 E和膽固醇加入大豆油和中鏈脂肪酸甘油三酯的混 合溶劑中，在溫度為70°C的條件下攪拌均勻，得到油相；
[0044] 步驟二、將甘油、卵磷脂、油酸、左旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物和依地酸二鈉加 入注射用水中，在溫度為70°C的條件下攪拌至所述原料全部溶解，得到水相；
[0045] 步驟三、利用高速組織搗碎機，將步驟一中所述油相加入步驟二中所述水相中，然 后以IOOOOrpm攪拌5min，得到初乳；
[0046] 步驟四、用氫氧化鈉將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至6. 0,然后用注射用水定 容，將定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為40°C，以800bar壓力均質(zhì)8次， 得到終乳，再用PH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié)至6. 0 ;
[0047] 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，滅菌條件為 103. 4kPa，121°C滅菌lOmin，得到注射用他克莫司脂肪乳劑。
[0048] 實施例2
[0049] 本實施例與實施例1相同，其中不同之處在于：所述注射用油性溶劑為蓖麻油、玉 米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、葵 花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的一種或三種以上，或者為 蓖麻油、玉米油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、 葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的兩種，或者為蓖麻油、玉 米油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花 椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的一種與大豆油的混合物；所述表面活性劑為卵磷脂、司 盤、吐溫、普朗尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的一種或三種以上，或者為司盤、吐溫、普朗 尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的兩種，或者為司盤、吐溫、普朗尼克、油酸鈉和去氧膽酸 中的一種與卵磷脂的混合物；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇或山梨 醇，或者為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、甘油和山梨醇中的至少兩種；所述抗氧劑為亞硫酸鈉、 焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸或L-半胱氨酸，或者為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸 氫鈉、抗壞血酸、L-半胱氨酸和維生素 E中的至少兩種；所述穩(wěn)定劑為膽固醇硫酸酯鈉，或 膽固醇和膽固醇硫酸酯鈉；所述金屬螯合劑為依地酸鈉鈣，或依地酸二鈉和依地酸鈉鈣。
[0050] 實施例3
[0051] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑，每IOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中含有 他克莫司〇. 〇lg，鴉膽子油l〇g，卵磷脂（蛋黃卵磷脂）〇. 5g，油酸鈉0. Ig,吐溫800. 4g，右 旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物（中科院長春應用化學研究所提供，其中聚乙二醇的粘均分 子量為5000,左旋聚乳酸的粘均分子量為8000) lg，甘油lg，抗壞血酸lg，膽固醇硫酸酯鈉 0. 5g，依地酸鈉鈣0. Olg，氫氧化鈉（用量為使注射用他克莫司脂肪乳劑的pH值為9. 0)，余 量為注射用水。
[0052] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑的制備方法為：
[0053] 步驟一、將他克莫司和膽固醇硫酸酯鈉加入鴉膽子油中，在溫度為50°C的條件下 攪拌均勻，得到油相；
[0054] 步驟二、將甘油、卵磷脂、油酸鈉、吐溫80、右旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物、依地 酸鈉鈣和抗壞血酸加入注射用水中，在溫度為50°C的條件下攪拌至所述原料全部溶解，得 到水相；
[0055] 步驟三、利用高速組織搗碎機，將步驟二中所述水相加入步驟一中所述油相中，然 后以6000rpm攪拌8min，得到初乳；
[0056] 步驟四、用氫氧化鈉將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至9. 0,然后用注射用水定 容，將定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為20°C，以1200bar壓力均質(zhì)12 次，得到終乳，再用pH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié)至9. O ;
[0057] 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，滅菌條件為 103. 4kPa，121°C滅菌lOmin，得到注射用他克莫司脂肪乳劑。
[0058] 實施例4
[0059] 本實施例與實施例3相同，其中不同之處在于：所述注射用油性溶劑為蓖麻油、玉 米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、棕櫚油、葵花籽油、沙 棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油或川穹油，或者為蓖麻油、玉米油、大豆油、芝麻油、 棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽油、當 歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的至少兩種；所述表面活性劑為卵磷脂、司盤、吐 溫、普朗尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的一種、兩種或四種以上，或者為司盤、吐溫、普朗 尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的三種，或者為司盤、普朗尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸 中的兩種與卵磷脂的混合物，或者為司盤、普朗尼克、油酸和去氧膽酸中的一種與卵磷脂和 吐溫的混合物；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇或山梨醇，或者為氯化 鈉、葡萄糖、甘油、甘露醇和山梨醇中的兩種以上；所述抗氧劑為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞 硫酸氫鈉、L-半胱氨酸或維生素 E，或者為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸、 L-半胱氨酸和維生素 E中的至少兩種；所述穩(wěn)定劑為膽固醇，或膽固醇和膽固醇硫酸酯鈉； 所述金屬螯合劑為依地酸二鈉，或依地酸二鈉和依地酸鈉鈣。
[0060] 實施例5
[0061] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑，每IOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中含有 他克莫司5g，大豆油20g，卵磷脂（蛋黃卵磷脂）3g，消旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物（中科 院長春應用化學研究所提供，其中聚乙二醇的粘均分子量為5000,消旋聚乳酸的粘均分子 量為100000) 2g，氯化鈉 Ig,山梨醇Ig,甘油2g，L-半胱氨酸Ig,維生素 E Ig,膽固醇Ig,膽 固醇硫酸酯鈉 lg，依地酸二鈉〇. 5g，依地酸鈉鈣0. 5g，鹽酸（用量為使注射用他克莫司脂肪 乳劑的pH值為4. 0)，余量為注射用水。
[0062] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑的制備方法為：
[0063] 步驟一、將他克莫司、維生素 E、膽固醇和膽固醇硫酸酯鈉加入大豆油中，在溫度為 80°C的條件下攪拌均勻，得到油相；
[0064] 步驟二、將山梨醇、甘油、卵磷脂、消旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物、依地酸二鈉、 依地酸鈉鈣和L-半胱氨酸加入注射用水中，在溫度為80°C的條件下攪拌至所述原料全部 溶解，得到水相；
[0065] 步驟三、利用高速組織搗碎機，將步驟一中所述油相加入步驟二中所述水相中，然 后以20000rpm攪拌2min，得到初乳；
[0066] 步驟四、用鹽酸將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至4. 0,然后用注射用水定容，將 定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為60°C，以300bar壓力均質(zhì)4次，得到終 乳，再用PH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié)至4. O ;
[0067] 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，滅菌條件為 103. 4kPa，121°C滅菌lOmin，得到注射用他克莫司脂肪乳劑。
[0068] 實施例6
[0069] 本實施例與實施例5相同，其中不同之處在于：所述注射用油性溶劑為菌麻油、玉 米油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、 沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的一種或幾種，或者為蓖麻油、玉米 油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、葵花 籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的至少兩種；所述表面活性劑 為司盤、吐溫、普朗尼克、油酸鈉、油酸或去氧膽酸，或者為卵磷脂、司盤、吐溫、普朗尼克、油 酸鈉、油酸和去氧膽酸中的至少兩種；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、 甘油和山梨醇中的一種、兩種、四種或五種，或者為葡萄糖、甘露醇、甘油和山梨醇中的三 種，或者為葡萄糖、甘露醇和山梨醇中的兩種與氯化鈉的混合物，或者為氯化鈉、葡萄糖和 甘露醇；所述抗氧劑為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸、維生素 E和L-半胱氨 酸中的一種或三種以上，或者為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸和L-半胱氨 酸中的兩種，或者為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉和抗壞血酸中的一種與維生素 E的 混合物；所述穩(wěn)定劑為膽固醇或膽固醇硫酸酯鈉；所述金屬螯合劑為依地酸二鈉或依地酸 鈉鈣。
[0070] 實施例7
[0071] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑，每IOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中含有 他克莫司〇. 5g，蓖麻油0. 5g，中鏈脂肪酸甘油三酯0. 5g，棕櫚油0. 8g，莪術(shù)油0. 2g，普朗尼 克0. 2g，去氧膽酸0. 3g，消旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物（中科院長春應用化學研究所提 供，其中聚乙二醇的粘均分子量為10000,消旋聚乳酸的粘均分子量為50000)0. lg，葡萄糖 0. 5g，膽固醇硫酸酯鈉0. lg，依地酸二鈉0. 001g，氫氧化鈉（用量為使注射用他克莫司脂肪 乳劑的pH值為8.0)，余量為注射用水。
[0072] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑的制備方法為：
[0073] 步驟一、將他克莫司和膽固醇硫酸酯鈉加入蓖麻油、中鏈脂肪酸甘油三酯、棕櫚油 和莪術(shù)油的混合溶劑中，在溫度為60°C的條件下攪拌均勻，得到油相；
[0074] 步驟二、將葡萄糖、普朗尼克、去氧膽酸、消旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物和依地 酸二鈉加入注射用水中，在溫度為60°C的條件下攪拌至所述原料全部溶解，得到水相；
[0075] 步驟三、利用高速組織搗碎機，步驟二中所述水相加入步驟一中所述油相中，然后 以12000rpm攪拌4min，得到初乳；
[0076] 步驟四、用pH調(diào)節(jié)劑將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至8. 0,然后用注射用水定 容，將定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為30°C，以IOOObar壓力均質(zhì)6次， 得到終乳，再用PH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié)至8. 0 ;
[0077] 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，滅菌條件為 103. 4kPa，121°C滅菌lOmin，得到注射用他克莫司脂肪乳劑。
[0078] 實施例8
[0079] 本實施例與實施例7相同，其中不同之處在于：所述注射用油性溶劑為蓖麻油、 玉米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、 葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的一種、兩種、三種或五種 以上，或者為玉米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽 子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的四種，或 者為玉米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽 油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的三種與蓖麻油的混合物，或者為玉米油、 大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、鴉膽子油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、 大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的兩種與蓖麻油和中鏈脂肪酸甘油三酯的混合物，或者為玉米 油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、鴉膽子油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒 油、大蒜油和川穹油中的兩種與蓖麻油、中鏈脂肪酸甘油三酯和莪術(shù)油的混合物；所述表 面活性劑為卵磷脂、司盤、吐溫、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的一種或三種以上，或者為卵磷 月旨、司盤、吐溫、油酸鈉和油酸中的一種與普郎尼克的混合物；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為 氯化鈉、甘露醇、甘油和山梨醇，或者為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、甘油和山梨醇中的至少兩 種；所述穩(wěn)定劑為膽固醇，或膽固醇和膽固醇硫酸酯鈉；所述金屬螯合劑為依地酸鈉鈣，或 者為依地酸二鈉和依地酸鈉鈣。
[0080] 實施例9
[0081] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑，每IOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中含有 他克莫司l〇g，中鏈脂肪酸甘油三酯20g，卵磷脂（蛋黃卵磷脂）5g，油酸鈉2g，左旋聚乳酸 聚乙二醇嵌段共聚物（中科院長春應用化學研究所提供，其中聚乙二醇的粘均分子量為 5000,左旋聚乳酸的粘均分子量為20000) 2g，甘露醇2g，甘油3g，山梨醇2g，焦亞硫酸鈉2g， 維生素 E lg，膽固醇5g，依地酸鈉鈣3g，氫氧化鈉（用量為使注射用他克莫司脂肪乳劑的 pH值為9. 0)，余量為注射用水。
[0082] 本實施例的注射用他克莫司脂肪乳劑的制備方法為：
[0083] 步驟一、將他克莫司、維生素 E和膽固醇加入注射用油性溶劑中，在溫度為50°C的 條件下攪拌均勻，得到油相；
[0084] 步驟二、將甘露醇、甘油、山梨醇、卵磷脂、油酸鈉、左旋聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚 物、依地酸鈉鈣和焦亞硫酸鈉加入注射用水中，在溫度為50°C的條件下攪拌至所述原料全 部溶解，得到水相；
[0085] 步驟三、利用高速組織搗碎機，將步驟一中所述油相加入步驟二中所述水相中或 者將步驟二中所述水相加入步驟一中所述油相中，然后以6000rpm攪拌8min，得到初乳；
[0086] 步驟四、用pH調(diào)節(jié)劑將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至9. 0,然后用注射用水定 容，將定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為60°C，以500bar壓力均質(zhì)8次， 得到終乳，再用PH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié)至9. 0 ;
[0087] 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，滅菌條件為 103. 4kPa，121°C滅菌lOmin，得到注射用他克莫司脂肪乳劑。
[0088] 實施例10
[0089] 本實施例與實施例9相同，其中不同之處在于：所述注射用油性溶劑為蓖麻油、玉 米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽油、當 歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油或川穹油，或者為蓖麻油、玉米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花 生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三酯、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒 油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的至少兩種；所述表面活性劑為卵磷脂、司盤、吐溫、普朗尼 克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中的一種或三種以上，或者為司盤、吐溫、普朗尼克、油酸鈉、油 酸和去氧膽酸中的兩種，或者為司盤、吐溫、普朗尼克、油酸和去氧膽酸中的一種和卵磷脂 的混合物；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、甘油和山梨醇中的一種、兩 種、四種或五種，或者為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇和甘油中的三種，或者為氯化鈉、葡萄糖和 甘露醇中的兩種和山梨醇的混合物，或者為氯化鈉、甘油和山梨醇，或者為葡萄糖、甘油和 山梨醇；所述抗氧劑為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸、L-半胱氨酸和維生 素 E中的一種或三種以上，或者為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸、L-半胱氨酸和維生素 E 中的兩種，或者為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸和維生素 E中的一種與焦亞硫酸鈉的混 合物；所述穩(wěn)定劑為膽固醇或膽固醇和膽固醇硫酸酯鈉；所述金屬螯合劑為依地酸二鈉或 依地酸二鈉和依地酸鈉鈣。
[0090] 對本發(fā)明的注射用他克莫司脂肪乳劑的各項性能進行考察：
[0091] 一、血管刺激性實驗
[0092] 取健康家兔15只，隨機分成5組，每組3只。5組家兔左耳均注射氯化鈉注射液， 右耳分別注射本發(fā)明實施例1、3、5、7和9的注射用他克莫司脂肪乳劑，每天給藥1次，連續(xù) 3天。給藥期間每天肉眼觀察給藥局部血管有無血栓形成，周圍組織有無紅腫淤血等炎癥反 應。給藥結(jié)束后處死，自給藥處向心方向3cm處取下耳組織，以10%福爾馬林固定、石錯包 埋、制片、染色，光鏡下觀察血管機周圍組織形態(tài)學改變。
[0093] 表1血管刺激試驗結(jié)果

【權(quán)利要求】
1. 一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每lOOmL注射用他克莫司脂肪乳劑中 含有他克莫司〇. 〇lg?l〇g，注射用油性溶劑2g?20g，表面活性劑0. 5g?7g，兩親性嵌段 共聚物〇. lg?2g，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑0. 5g?7g，抗氧劑0?3g，穩(wěn)定劑0. lg?5g ;所 述抗氧劑為水溶性抗氧劑和/或油溶性抗氧劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每lOOmL注射 用他克莫司脂肪乳劑中含有他克莫司〇.〇lg?5g，注射用油性溶劑10g?20g，表面活性劑 lg?3g，兩親性嵌段共聚物lg?2g，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑lg?4g，抗氧劑lg?2g，穩(wěn)定 劑 0. 5g ?2g。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每100mL注射用 他克莫司脂肪乳劑中含有他克莫司〇. 2g，注射用油性溶劑20g，表面活性劑2. 05g，兩親性 嵌段共聚物1. 4g，注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑2. 5g，抗氧劑1. 5g，穩(wěn)定劑0. 8g。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，每100mL 注射用他克莫司脂肪乳劑中還含有金屬螯合劑〇. 〇〇lg?3g，所述金屬螯合劑為依地酸二 鈉和/或依地酸鈉鈣。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述注射用他 克莫司脂肪乳劑中還含有pH調(diào)節(jié)劑，pH調(diào)節(jié)劑的用量為使注射用他克莫司脂肪乳劑的pH 值為4. 0?9. 0,所述pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述注射 用油性溶劑為蓖麻油、玉米油、大豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、紅花油、中鏈脂肪酸甘油三 酯、鴉膽子油、棕櫚油、葵花籽油、沙棘籽油、當歸油、花椒油、大蒜油、莪術(shù)油和川穹油中的 一種或幾種；所述表面活性劑為卵磷脂、司盤、吐溫、普朗尼克、油酸鈉、油酸和去氧膽酸中 的一種或幾種。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述兩親 性嵌段共聚物中的親水鏈段為聚乙二醇，疏水鏈段為左旋聚乳酸、右旋聚乳酸或消旋聚乳 酸。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述親水鏈段 的粘均分子量為2000?10000,疏水鏈段的粘均分子量為8000?100000。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種注射用他克莫司脂肪乳劑，其特征在于，所述穩(wěn)定 劑為膽固醇和/或膽固醇硫酸酯鈉；所述注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、 甘油和山梨醇中的一種或幾種；所述水溶性抗氧劑為亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、 抗壞血酸和L-半胱氨酸中的一種或幾種，所述油溶性抗氧劑為維生素 E。
10. -種制備如權(quán)利要求5所述的注射用他克莫司脂肪乳劑的方法，其特征在于，該方 法包括以下步驟： 步驟一、將他克莫司、油溶性抗氧劑和穩(wěn)定劑加入注射用油性溶劑中，在溫度為50°C? 80°C的條件下攪拌均勻，得到油相； 步驟二、將注射用滲透壓調(diào)節(jié)劑、表面活性劑、兩親性嵌段共聚物、金屬螯合劑和水溶 性抗氧劑加入注射用水中，在溫度為50°C?80°C的條件下攪拌至所述原料全部溶解，得到 水相； 步驟三、利用高速組織搗碎機，將步驟一中所述油相加入步驟二中所述水相中或者將 步驟二中所述水相加入步驟一中所述油相中，然后以6000rpm?20000rpm攪拌2min? 8min，得到初乳； 步驟四、用pH調(diào)節(jié)劑將步驟三中所述初乳的pH值調(diào)節(jié)至4. 0?9. 0,然后用注射用 水定容，將定容后的初乳轉(zhuǎn)移至高壓均質(zhì)機中，控制均質(zhì)溫度為20°C?60°C，以300bar? 1200bar壓力均質(zhì)4?12次，得到終乳，再用pH調(diào)節(jié)劑將所述終乳的pH值調(diào)節(jié)至4. 0? 9. 0 ； 步驟五、用高壓蒸汽滅菌鍋對步驟四中調(diào)節(jié)pH值后的終乳進行滅菌，得到注射用他克 莫司脂肪乳劑。
【文檔編號】A61P37/06GK104274406SQ201410571019
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月23日
【發(fā)明者】王亞軒, 唐星 申請人:西安德天藥業(yè)股份有限公司