一種他克莫司類脂質(zhì)體及其凝膠和制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種他克莫司類脂質(zhì)體及其凝膠和制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 他克莫司（tacrolimus，Tac)是一種大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑，局部外用可用于特 應(yīng)性皮炎（AD)、銀肩病等皮膚病的治療，療效確切，目前已有Tac軟膏上市。由于Tac的分 子量大（8〇4Dalton)，分子中含有大環(huán)內(nèi)酯剛性結(jié)構(gòu)，難以透過皮膚角質(zhì)層，外用藥物皮膚 內(nèi)滯留時(shí)間短，給藥頻繁且臨床療效變異大。此外，上市Tac軟膏為油性基質(zhì)，涂在皮膚上 有油膩感，清洗困難，患者順應(yīng)性差。延長藥物在皮膚內(nèi)的滯留時(shí)間，改變Tac外用制劑的 基質(zhì)性質(zhì)，具有重要臨床意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明解決的技術(shù)問題是，他克莫司軟膏難以滲透皮膚，涂在皮膚上有油膩感，清 洗困難，在皮膚內(nèi)的滯留時(shí)間短。
[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案是，提供一種他克莫司類脂質(zhì)體，按重量份，以80-120份類脂 質(zhì)體作為5份他克莫司的藥物載體；所述類脂質(zhì)體的主材料為失水山梨醇硬脂酸酯。
[0005] 進(jìn)一步地，所述他克莫司類脂質(zhì)體的制備方法為：按重量份，稱取失水山梨醇硬 脂酸酯80-120份、他克莫司5份、膽固醇8-12份，加入氯仿溶解，減壓蒸干有機(jī)溶劑，得到 均勻半透明的薄膜；向裝有所述薄膜的容器中加入含穩(wěn)定劑的水溶液，再加入水化珠，在 55-65Γ下水化得到他克莫司類脂質(zhì)體混懸液，探頭超聲，得到他克莫司類脂質(zhì)體；所述超 聲的參數(shù)為：每工作2-4s、間隔5-7s，共超聲2-3分鐘，振幅30-40%。
[0006] 進(jìn)一步地，所述超聲的參數(shù)為：每工作3s、間隔6s，共超聲2. 5分鐘，振幅35%。
[0007] 進(jìn)一步地，所述含穩(wěn)定劑的水溶液中含穩(wěn)定劑5-8份，水8000-12000份；所述穩(wěn)定 劑為膽酸鈉。
[0008] 進(jìn)一步地，各物質(zhì)的加入量分別為：失水山梨醇硬脂酸酯107份，他克莫司5份，膽 固醇9. 7份，膽酸鈉6. 7份，水10000份。
[0009] 考慮到類脂質(zhì)體（NS)為混懸液，其黏附性不足，不便于直接外用于皮膚；如將NS 混懸液分散到水凝膠中，既可以鞏固N(yùn)S的穩(wěn)定性，同時(shí)還有利于保持皮膚水分、控制藥物 釋放及增加藥物在皮膚的粘附性的作用。
[0010] 本發(fā)明進(jìn)一步地提供一種他克莫司類脂質(zhì)體凝膠，以卡波姆-934為凝膠基質(zhì)，將 權(quán)利要求1所述的他克莫司類脂質(zhì)體制備成他克莫司類脂質(zhì)體凝膠，所述他克莫司類脂質(zhì) 體凝膠中卡波姆-934與他克莫司的質(zhì)量比為5-15:1。
[0011] 進(jìn)一步地，他克莫司類脂質(zhì)體凝膠制備方法為：按重量份，取1份卡波姆-934， 再加入4-6份甘油，研磨均勻，加水使其溶脹；再按卡波姆-934與他克莫司的質(zhì)量比為 5-15:1的比例加入權(quán)利要求1所述的他克莫司類脂質(zhì)體，攪拌均勻，滴加三乙醇胺調(diào)節(jié)pH 后再加蒸餾水，攪拌均勻即可。
[0012] 類脂質(zhì)體（Niosomes，NS)是一種由非離子表面活性劑和膽固醇為主要成分的可 包載脂溶性藥物的納米脂質(zhì)體類似物，又稱為非離子表面活性劑囊泡或類脂囊泡；NS能顯 著提高藥物穿透角質(zhì)層屏障進(jìn)入皮膚的能力，能均勻分散于水性凝膠基質(zhì)中形成穩(wěn)定的半 固體制劑，進(jìn)入皮膚的類脂囊泡能緩慢釋放藥物，從而減少給藥頻率。
[0013] 現(xiàn)已有大量研究將NS作為非留體抗炎藥、激素、抗生素、肽類、細(xì)胞因子等經(jīng)皮穿 透的載體。由于NS雙分子層既具有親水性又具有親脂性，使其既能包載水溶性藥物，又能 作為脂溶性藥物的載體。他克莫司（Tac)屬于難溶性藥物，其大環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的剛性較強(qiáng)，難 以透過皮膚，而將Tac包裹于NS中將使得其透皮能力極大增強(qiáng)。
[0014] 非離子表面活性劑是NS的主要成囊材料，一般要求其具有生物可降解、毒性低、 與藥物相容性好等特點(diǎn)，比較常用的有聚甘油脂肪酸類、脂肪酸山梨坦類（Span類）、聚山 梨酯類（Tween類）、聚氧乙烯脂肪酸醚類（Brij類）以及合成的嵌段共聚物等。查閱相關(guān)文 獻(xiàn)，采用Span、Brij系列的表活作為囊材往往能獲得粒徑均一，穩(wěn)定性好的NS。因此，本文 首先選擇Span-40、Span-60、Bri j-52及Bri j-93為囊材制備NS，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四者均能形成粒 徑均一的NS，但Span-40、Brij-52及Brij-93對(duì)Tac的包裝率（EE%)遠(yuǎn)低于Span-60。推 測(cè)原因可能為不同類型的表活、同一類型但鏈長不同的表活對(duì)藥物的親和性不同，Span-60 對(duì)親脂性藥物如Tac有較好的親和性，易于形成EE %高、穩(wěn)定性好的NS，因此，我們選擇 Span-60做為囊材。
[0015] 本發(fā)明以薄膜水化-超聲法制備了 Tac-NS，以卡波姆為基質(zhì)構(gòu)建Tac-NS凝膠，通 過比較Tac-NS凝膠、市售Tac軟膏與普通凝膠的離體皮膚滲透性，及在大鼠的經(jīng)皮吸收特 征，評(píng)價(jià)Tac-NS凝膠在提高Tac皮膚滯留量、延長藥物釋放的作用規(guī)律及特點(diǎn)，為Tac新型 外用制劑的研究開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[0016] 薄膜水化法制得的NS初始粒徑很大且大小及不均一，因此需要采用超聲的方法 減少NS粒徑。為了獲得粒徑均一的NS，同時(shí)防止NS被超聲破碎導(dǎo)致藥物析出，以包封率 (EE% )、平均粒徑（nm)、PDI為指標(biāo)對(duì)超聲溫度及時(shí)間進(jìn)行了進(jìn)一步的考察。
[0017] 隨著超聲溫度的變化，Tac-NS各指標(biāo)均有顯著變化，當(dāng)溫度為4°C時(shí)，NS有較大的 粒徑和Η)Ι，EE%也較低，而當(dāng)溫度增加到55-65°C時(shí)，粒徑和PDI均有明顯改善，EE%也顯 著提高，推測(cè)由于60°C為NS的水化溫度，當(dāng)NS被超聲波破碎后，其材料仍能重組形成NS， 而4°C時(shí)則很難重組再形成NS，從而導(dǎo)致EE%下降。
[0018] 以卡波姆-934為凝膠基質(zhì)，采用堿法制備載藥量為0. 1%的Tac-NS凝膠，該凝膠 的pH值為6. 1±0. 3,稠度為181. 5±14. 1。凝膠在室溫和4°C條件下放置30天，其pH值、 Tac量及NS粒徑等均無明顯變化（P>0. 05)，說明其穩(wěn)定性較好。
[0019] 以0· 1%十二烷基硫酸鈉（SDS)-磷酸鹽緩沖液（0· lmol/L，pH 7. 4，PBS)為釋放介 質(zhì)，考察Tac-NS的體外釋放。結(jié)果表明，Tac-NS在前8h累積釋藥約20%，24h內(nèi)的藥物釋 放量約為28 %;而Tac-NS材料混合物前8h累積釋藥超過50 %，24h內(nèi)的釋放量接近80 %， 說明Tac-NS具有良好的緩釋效果。
[0020] 以0. 1% SDS-PBS (pH 7. 4)為接收介質(zhì)，以乳豬腹部皮膚為滲透屏障，采用改良 的直立式Franz擴(kuò)散池法研究比較Tac-NS及Tac-NS材料混合物的體外經(jīng)皮滲透規(guī)律；結(jié) 果顯示，Tac-NS在24h內(nèi)的單位質(zhì)量皮膚滯留量（Qskin)約為Tac-NS材料混合物的2. 4倍 (P〈0. 05)，而二者24h內(nèi)的單位面積累積滲透量（Q24)相當(dāng)（P>0. 05)，與物理混合物相比，NS 能顯著提高Tac的皮膚滯留量。而Tac軟膏組的藥物^^在0-24h不同時(shí)間點(diǎn)與Tac-NS 凝膠組相比，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 〇. 05)，說明二者對(duì)藥物的促滲能力是相當(dāng)?shù)摹?br>[0021 ] 本發(fā)明的有益效果是，Tac-NS及其凝膠相比于Tac和NS混合物的釋放速度慢，可 明顯增加藥物在皮膚內(nèi)的滯留量，NS能顯著延長Tac在皮膚內(nèi)的滯留時(shí)間，說明其具有緩 釋作用；采用薄膜水化-超聲法制備的Tac-NS包封率高、粒徑小、分布均勻。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0023] 實(shí)施例1
[0024] 本實(shí)施例提供一種他克莫司類脂質(zhì)體，所述類脂質(zhì)體為失水山梨醇硬脂酸酯，所 述他克莫司類脂質(zhì)體的制備方法為：按重量份，稱取失水山梨醇硬脂酸酯1〇〇份、他克莫司 5份、膽固醇10mg，加入氯仿5mL溶解，減壓蒸干有機(jī)溶劑，得到均勻半透明的薄膜；向裝有 所述薄膜的容器中加入含穩(wěn)定劑的水溶液，再加入水化珠，在55-65Γ下水化得到他克莫司 類脂質(zhì)體混懸液，探頭超聲，得到他克莫司類脂質(zhì)體；所述超聲的參數(shù)為：每工作3s、間隔 6s，超聲時(shí)間分別為2、2. 5、3分鐘，振幅35%。
[0025] 薄膜水化法制得的NS初始粒徑很大且大小及不均一，因此需要采用超聲的方法 減少NS粒徑。為獲得粒徑均一的NS，但同時(shí)要防止NS被超聲破碎導(dǎo)致藥物析出，本實(shí)施例 對(duì)其中重要的指標(biāo)進(jìn)行考察，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下標(biāo)1所示。
[0026] 表1超聲時(shí)間對(duì)各指標(biāo)的影響
[0028] 結(jié)果表明，隨著超聲時(shí)間增加，NS的粒徑及（多分散系數(shù)）