一種多價(jià)聯(lián)合疫苗的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，每劑量含A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20μg，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20μg，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20μg，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20μg，B群腦膜炎球菌減毒活疫苗10-20μg，麻疹減毒活疫苗10-20μg。多價(jià)聯(lián)合疫苗可以減少免疫針次、降低免疫成本、增加疫苗的可接受性；為滿足嬰幼兒需求提供了研究方向，并有望減輕嬰幼兒的痛苦和家長(zhǎng)的精神負(fù)擔(dān)；利用不同疫苗間的協(xié)同作用，能夠降低菌血癥的爆發(fā)概率，增強(qiáng)B群腦膜炎球菌LOS類疫苗的免疫原性，或者B群腦膜炎球菌外模蛋白的免疫作用、延長(zhǎng)免疫時(shí)間。
【專利說(shuō)明】一種多價(jià)聯(lián)合疫苗
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種多價(jià)聯(lián)合疫苗。
【背景技術(shù)】
[0002]腦膜炎雙球菌，又名腦膜炎奈瑟菌或腦脊髓膜炎雙球菌，簡(jiǎn)稱為腦膜炎球菌，是一種革蘭氏陰性菌，因其所導(dǎo)致的腦膜炎而聞名。 [0003]腦膜炎雙球菌主要導(dǎo)致人體流行性腦脊髓膜炎的發(fā)生，也可引起肺炎等其他呼吸道疾病。病菌存在于病人或帶菌者的鼻咽分泌物中，通過(guò)呼吸道傳染。流腦的流行有明顯的季節(jié)性和周期性，冬春季發(fā)病率高，一般從每年I月份開(kāi)始發(fā)病，三四月份是高峰期。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年的2到4月，“流腦”的發(fā)病率占全年的60%左右，其特點(diǎn)使起病急、病情重、變化多、傳播快、流行廣，來(lái)勢(shì)兇猛，病死率高，危害極大。人群對(duì)流腦球菌普遍易感，在各年齡組人群中均可發(fā)生，但更易于發(fā)生在小年齡段兒童，患者主要是15歲以下的少年兒童，特別是6個(gè)月至2歲的嬰幼兒。近年來(lái)，臨床上也發(fā)現(xiàn)有成年人患此病，而成人的病死率不高。
[0004]根據(jù)其莢膜多糖的特異性可以將腦膜炎球菌分成A、B、C、D、29E、H、1、K、L、W135、X、Y和Z13個(gè)血清群，所有血清群的細(xì)菌均可致病。但A、B、C、Y和W135最厲害，差不多是造成所有人類患病個(gè)案的血清群。
[0005]國(guó)際上，針對(duì)A、C、Y和W135血清群的單價(jià)疫苗或者多價(jià)聯(lián)合疫苗已經(jīng)非常成熟。但是由于B群多糖由于結(jié)構(gòu)與人體神經(jīng)組織中的一個(gè)成份類似，在人體中基本不產(chǎn)生免疫應(yīng)答。業(yè)已證實(shí)，人體免疫系統(tǒng)對(duì)B群莢膜多糖耐受，因其具有存在于神經(jīng)或其它組織的人表面粘附分子N-CAMl的表位。
[0006]近年來(lái)，人們已嘗試研制各種類型的疫苗用于B類腦膜炎疾病的預(yù)防和控制。主要包括蛋白類疫苗(0MV)、莢膜多糖類疫苗、LOS類疫苗及減毒活疫苗。OMV的缺陷:①候選抗原具有高度變異性從流行株的分離到疫苗的應(yīng)用需要一個(gè)相對(duì)長(zhǎng)期的過(guò)程；③嬰幼兒是N群腦膜炎的主要感染人群，而這種疫苗在嬰幼兒體內(nèi)的保護(hù)性較低；④只產(chǎn)生短期的免疫保護(hù)作用。LOS類疫苗作為B群腦膜炎球菌疫苗的缺陷:①?gòu)哪壳傲餍胁W(xué)資料來(lái)看，以LOS作為主要抗原的B群腦膜炎球菌疫苗還不足以具有覆蓋全球的保護(hù)性；@L0S本身的性質(zhì)決定了其弱的免疫原性，若要發(fā)展此類疫苗首先必須提高其免疫原性；③LOS疫苗的臨床試驗(yàn)對(duì)象主要為大齡人群，在嬰幼兒體內(nèi)其免疫原性較差。
[0007]B型嗜血流感桿菌(Hib)是引起兒童細(xì)菌性腦炎、肺炎、蜂窩組織炎等疾病的主要病原體在使用有效的疫苗前，美國(guó)每年有1.6~2.5萬(wàn)多名兒童因Hib引起感染；其中60%的兒童患上最嚴(yán)重的永久性功能喪失。其他感染包括菌血癥、肺炎、膿胸、心包炎、蜂窩組織炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎及會(huì)咽炎等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的在于針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，可同時(shí)預(yù)防A、B、C、Y、W135血清型的流行性腦膜炎球菌、麻疹、B型嗜血流感桿菌中多種菌類的感染，滿足上述需要。
[0009]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:提供一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，其特征在于，其中每劑量含A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 Ug, Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，B群腦膜炎球菌減毒活疫苗10-20 μ g，麻疹減毒活疫苗10-20 μ g。
[0010]一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，其特征在于，其中每劑量含A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，B群腦膜炎球菌減毒活疫苗10-20 μ g，麻疹減毒活疫苗10-20 μ g，B型流感嗜血桿菌莢膜多糖10-20 μ go
[0011]一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，其特征在于，其中每劑量含A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g, B群腦膜炎球菌減毒活疫苗10-20 Ug, B型流感嗜血桿菌莢膜多糖10-20 μ g。
[0012]一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，其特征在于，其中每劑量含A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g, B群腦膜炎球菌外模蛋白35-45 Ug, B型流感嗜血桿菌莢膜多糖10-20 μ g。
[0013]一種多價(jià)聯(lián)合疫苗，其特征在于，其中每劑量含A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖15-20 μ g, B群腦膜炎球菌LOS類疫苗20-30 yg, B型流感嗜血桿菌莢膜多糖10-20 μ g。
[0014]本發(fā)明的重點(diǎn)在于發(fā)現(xiàn):
[0015](一)將A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，B群腦膜炎球菌減毒活疫苗，麻疹減毒活疫苗配制成聯(lián)合疫苗后，能夠降低菌血癥的爆發(fā)概率，并增強(qiáng)麻疹減毒活疫苗的免疫作用；
[0016](二)將A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，B群腦膜炎球菌LOS類疫苗，B型流感嗜血桿菌莢膜多糖配制成聯(lián)合疫苗后，可增強(qiáng)B群腦膜炎球菌LOS類疫苗的免疫原性；
[0017](三)A群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，C群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，Y群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，W135群流行性腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜多糖，B群腦膜炎球菌外模蛋白，B型流感嗜血桿菌莢膜多糖配制成聯(lián)合疫苗，可以增強(qiáng)B群腦膜炎球菌外模蛋白的免疫作用，延長(zhǎng)免疫時(shí)間。
[0018]需要強(qiáng)調(diào)的是，本發(fā)明并非是將流腦、B型流感嗜血桿菌或者麻疹抗原分別簡(jiǎn)單地混合成流腦-麻疹聯(lián)合疫苗、流腦-麻疹-B型流行嗜血桿菌聯(lián)合疫苗、流腦-B型流行嗜血桿菌聯(lián)合疫苗，而是依據(jù)上述三項(xiàng)獨(dú)立發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的核心內(nèi)容。[0019]上述各多價(jià)聯(lián)合疫苗還包含0.5-lmg的鋁佐劑成份和可提高人體免疫反應(yīng)的人細(xì)胞因子、單磷脂A等。
[0020]上述各多價(jià)聯(lián)合疫苗可以通過(guò)以下制備工藝制備:
[0021]多糖原料:選用A、C、Y、W135群腦膜炎球菌菌種、B型流感嗜血桿菌菌種經(jīng)過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)出A、C、Y、W135群腦膜炎球菌莢膜多糖、B型流感嗜血桿菌莢膜多糖，其純化步驟可以為目前通用的常規(guī)步驟。
[0022]B群腦膜炎球菌減毒活疫苗，用DNA重組技術(shù)制備減毒活疫苗經(jīng)鼻內(nèi)免疫。參見(jiàn)Tang C，Moxon Rj Levine M M.For discussion live attenuated vaccines for group BMeningococcus[J].Vaccine, 1999，17(2):114-117。
[0023]麻疹減毒活疫苗，采用專利
【發(fā)明者】侯文禮, 馮曉 申請(qǐng)人:成都康華生物制品有限公司