專利名稱：藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種原料藥為丹參丹酚酸A和人參皂苷Rg1 的藥物組合物。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)中藥復(fù)方是以中藥原藥材或其有效部位進(jìn)行組方，進(jìn)行簡(jiǎn)單的提取工藝，制 備成制劑，缺乏物質(zhì)基礎(chǔ)研究，質(zhì)量控制模糊，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定不均一，臨床療效不穩(wěn)定；現(xiàn) 代天然藥物是以活性物質(zhì)研究為基礎(chǔ)，經(jīng)提取、分離與純化等現(xiàn)代工藝獲得有效成分或組 分有效部位，將彼此具有藥效協(xié)同與互補(bǔ)作用的、在活性物質(zhì)清楚并精確定量及量效關(guān)系 明確的基礎(chǔ)上進(jìn)行科學(xué)優(yōu)選組方，活性有效成分采用精確定量，全面客觀定量組方中有效 成分的含量，質(zhì)量控制系統(tǒng)精確，客觀全面反應(yīng)產(chǎn)品的質(zhì)量，達(dá)到產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定均一，藥效 作用強(qiáng)，并且療效穩(wěn)定；傳統(tǒng)中藥配伍研究多停留在藥材配伍或有效部位配伍的基礎(chǔ)上， 雖然可以用中醫(yī)理論進(jìn)行解釋，但其科學(xué)性一直存在爭(zhēng)議，天然活性有效成分在量效關(guān)系 /時(shí)效關(guān)系等研究的基礎(chǔ)上，通過配伍/比例優(yōu)選，進(jìn)行科學(xué)組方，是開發(fā)高效天然藥物特 別是天然藥物制劑的核心和靈魂所在，是在傳承中醫(yī)藥特色和優(yōu)勢(shì)基礎(chǔ)上，發(fā)展天然藥物 創(chuàng)新、現(xiàn)代化與國(guó)際化的科學(xué)基礎(chǔ)與科學(xué)發(fā)展發(fā)展之路；它既不是簡(jiǎn)單的藥材在作用上、數(shù) 量上的相加，也不是機(jī)械的毒性反應(yīng)的抵消，而是通過一系列科學(xué)的研究，在辨證法的基礎(chǔ) 上，成為有機(jī)組合。天然藥物有效成分的組方不能簡(jiǎn)單的看成中藥藥味復(fù)方的延續(xù)，中藥藥味的復(fù)方 是很多化合物組合的復(fù)方，而有效成分的復(fù)方是在純度提高、用量加大的基礎(chǔ)上進(jìn)行的組 合，同時(shí)，也不是任何有效成分之間都能組合，必須通過科學(xué)的實(shí)驗(yàn)才能確認(rèn)這種組合是否 可行，因此，天然藥物有效成分的組合研究是一個(gè)系統(tǒng)的工程，不能想當(dāng)然的認(rèn)為藥味、有 效部位或其他有效成分能夠組合，與其相似或相近的有效成分也能夠組合，這對(duì)于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)?醫(yī)藥學(xué)學(xué)科是不可取的，因此，有效成分之間的組方需要科學(xué)人員根據(jù)現(xiàn)有的、科學(xué)的方法 進(jìn)行深入的研究才能確定。中國(guó)專利200310100813. χ公開了丹參總酚酸與人參總皂苷配伍的藥物組合物， 二者是有效部位的藥物組合，雖然經(jīng)過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明二者具有協(xié)同作用，但這種協(xié)同作 用的物質(zhì)基礎(chǔ)是不明確的，無法揭示其機(jī)理；本院申請(qǐng)的中國(guó)專利200710097272. 8公開了 丹酚酸A與三七總皂苷或人參皂苷Rb1配伍的藥物組合物，這篇文獻(xiàn)給出了丹參丹酚酸A 與三七總皂苷或人參皂苷Rbl具有協(xié)同作用的技術(shù)啟示，但人參總皂苷中還含有人參皂苷 Rg1、三七皂苷R1等成分，將上述成分單獨(dú)與丹參丹酚酸A配伍，是否也具有協(xié)同作用，無法 進(jìn)行推測(cè)，只有通過創(chuàng)造性的技術(shù)實(shí)驗(yàn)才能獲得。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，我們?cè)趯⒌⒌し铀酇和人參皂苷的組合進(jìn)行廣泛而深入的 研究，發(fā)現(xiàn)二者在一定重量份下進(jìn)行組方具有協(xié)同的藥理作用，即二者在一定重量份下可
3以組方，并且優(yōu)于人參和丹參藥味或有效部位的組方，在節(jié)省資源、具有更好的藥效作用的 基礎(chǔ)上，有效成分組合物具有更好的安全性。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。一種藥物組合物，原料藥為丹參丹酚酸A和人參皂苷Rg1，其中丹參丹酚酸A2-32 重量份，人參皂苷Rg1I-S重量份。其中丹參丹酚酸A2-32重量份，人參皂苷Rgl2_4重量份。其中丹參丹酚酸A4-16重量份，人參皂苷Rg1I-S重量份。其中丹參丹酚酸A4-16重量份，人參皂苷Rgl2_4重量份。上述丹參丹酚酸A包括但不限于純度為50% -100%的丹參丹酚酸A，上述人參皂 苷Rg1包括但不限于純度為50% -100%的人參皂苷Rg1。上述丹參丹酚酸A包括但不限于純度為90% -100%的丹參丹酚酸A，上述人參皂 苷Rg1包括但不限于純度為90% -100%的人參皂苷Rg1。原料藥為丹參丹酚酸A和人參皂苷Rg1，本發(fā)明丹參丹酚酸A和人參皂苷可以 由現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行制備，其中人參皂苷Rg1也可以由人參、三七、西洋參、越南人參、竹節(jié)參，葫 蘆科絞股藍(lán)屬絞股藍(lán)、緣果絞股藍(lán)等植物的根、莖、葉、花蕾中得到總皂苷，再經(jīng)過高效液相 色譜制備方法進(jìn)行純化得到，也可以由硅膠柱層析進(jìn)行單體分離，高效液相色譜法控制終 點(diǎn)得到，等等；本發(fā)明人參皂苷包括但不限于由下述方法得到取三七、人參、西洋參或絞股藍(lán)提取得到的總皂苷，總皂苷加水溶解，濾過，濾液通 過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫液棄去，20% -60%乙醇洗脫，收集洗脫液， 濃縮、干燥，干燥物加水溶解，濾過，濾液通過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫 液棄去，再用10% -50%乙醇洗脫，洗脫液棄去，再用20% -60%乙醇洗脫，收集洗脫液， 濃縮干燥，得人參皂苷粗品，加入有機(jī)溶劑加熱回流提取，提取液濾過，濾液回收溶劑 至干，殘?jiān)稍?，得到人參皂苷；其中非極性或弱極性大孔樹脂為HPD-100、HPD-100A、 HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有機(jī)溶劑為乙酸乙 酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一種或幾種?；蛘呷∪?、人參、西洋參或絞股藍(lán)提取得到的總皂苷，總皂苷加水溶解；溶解 液濾過，濾液通過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫液棄去，20 %-60 %乙醇洗 脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，得到人參皂苷粗品，加入有機(jī)溶劑提取，提取液濾過，濾液 回收溶劑至干，殘?jiān)稍铮玫饺藚⒃碥誖g1 ；其中非極性或弱極性大孔樹脂為HPD-100、 HPD-100A, HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、DlOl、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有機(jī)溶 劑為乙酸乙酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一種或幾種。上述藥物組合物制備的單位劑量的藥物制劑。其中制劑中單位劑量為10_4000mg。上述藥物組合物在制備治療心腦血管疾病、微循環(huán)障礙、老年性癡呆、器官纖維化 或腫瘤疾病藥物方面中應(yīng)用。一、檢測(cè)分析方法1、丹參丹酚酸A的檢測(cè)分析實(shí)驗(yàn)方法
色譜柱CW反相色譜柱，250*4. 6mm, ODS ；色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速1.0ml/ min ；柱溫35 °C ；檢測(cè)波長(zhǎng)286nm ；以乙腈-0. 2%醋酸水溶液為流動(dòng)相，按下述梯度洗脫條件 進(jìn)行梯度洗脫，運(yùn)行90分鐘；0-15分鐘時(shí)，乙腈的比例由10%升至20%，0. 2%醋酸水溶液的比例由90%降 至80% ； 15-55分鐘時(shí)，乙腈的比例由20%升至30%，0. 2%醋酸水溶液的比例由80%降 至70% ；55-65分鐘時(shí)，乙腈的比例由30%升至50%，0.2%醋酸水溶液的比例由70%降 至50% ；65-72分鐘時(shí)，乙腈的比例由50%升至80%，0. 2%醋酸水溶液的比例由50%降至 20% ；72-77分鐘時(shí)，乙腈的比例80%,0. 2%醋酸水溶液的比例20% ；77-80分鐘時(shí)，乙腈 的比例由80 %降至10%，0. 2%醋酸水溶液的比例由20%升至90% ；80-90分鐘時(shí)，保持乙 腈-0. 2%醋酸水溶液以10 90的比例進(jìn)行洗脫；對(duì)照品溶液的配制精密稱取丹酚酸A對(duì)照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并稀 釋至刻度；樣品溶液的配制取丹酚酸A樣品，加入甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；或精密量 取或稱取制劑，加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和樣品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，采 用外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得；2、人參皂的檢測(cè)分析實(shí)驗(yàn)方法采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定；色譜柱C18反相色譜柱；色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠 為填充劑；流速1. Oml/min ；柱溫25°C;檢測(cè)波長(zhǎng)203nm ；理論板數(shù)按人參皂苷I^1計(jì)應(yīng)不低 于2500 ；以水乙腈為流動(dòng)相，按下述梯度洗脫條件進(jìn)行梯度洗脫，運(yùn)行60分鐘；0-40分鐘時(shí)，水的比例由80%降至50%，乙腈的比例由20%升至50% ；40-43分 鐘時(shí)，水的比例由50%降至20%，乙腈的比例由50%升至80% ；43-48分鐘時(shí)，保持水的比 例為20%，保持乙腈的比例為80% ；48-50分鐘時(shí)，水比例由20%升至80%，乙腈的比例由 80%降至20% ；50-60分鐘保持水的比例為20%，乙腈的比例80% ；對(duì)照品溶液的配制精密稱取人參皂苷對(duì)照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻， 并稀釋至刻度；供試品溶液的配制精密稱取樣品到容量瓶中加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各，注入液相色譜儀，采用按外標(biāo) 法以峰面積計(jì)算，即得。注本發(fā)明人參皂苷恥工對(duì)照品是法定標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)買自中國(guó)藥品生物制品鑒定所。二、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1對(duì)麻醉大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康SD大鼠，體重M0460g。實(shí)驗(yàn)藥物生理鹽水；人參皂苷Rgl、本發(fā)明藥物組合物。實(shí)驗(yàn)試劑20%烏拉坦按；碘酒；試劑盒；TTC0實(shí)驗(yàn)儀器呼吸機(jī)；心電圖機(jī)；眼科鑷；全自動(dòng)生化分析儀；數(shù)碼相機(jī)。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分組模型組、丹參總酚酸和人參總皂苷組、丹酚酸A和人參皂苷Rb1組、人參皂苷組、本發(fā)明不同重量份藥物組合物實(shí)驗(yàn)組。置于相同環(huán)境預(yù)飼 養(yǎng)2天，自由飲食。預(yù)飼養(yǎng)結(jié)束后，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物稱重，20%烏拉坦按0.6ml/100g腹腔注 射，待麻醉滿意后，仰臥固定于鼠板上，氣管插管，接呼吸機(jī)，按10 12ml潮氣量，70次/ 分的頻率給予呼氣，持續(xù)正壓呼吸，吸呼比為1 1。根據(jù)呼吸頻率及深度調(diào)整呼吸參 數(shù)。隨后接心電圖機(jī)，測(cè)正常心電圖。剪去胸前手術(shù)區(qū)毛，碘酒消毒，剪開皮膚、皮下組織、 胸前肌肉及筋膜3 km，用18#血管鉗沿第三肋間鈍性分離肋間肌3cm長(zhǎng)，打開胸腔及心 包膜，記錄心電圖，撐開3、4肋骨，用左手四指托住大鼠右側(cè)胸腔，助手用眼科鑷將胸腺向 上推，在左心耳與肺動(dòng)脈圓錐之間找到結(jié)扎標(biāo)志血管左冠狀靜脈，在左心耳下方2mm處用 無創(chuàng)小圓針帶6-0絲線穿線，進(jìn)針深度為1 1.5mm，寬2 3mm，穿線后記錄心電圖，經(jīng)尾 靜脈給予相應(yīng)藥液，給藥IOmin后記錄心電圖，并用一帶凹槽的小塑料管墊在結(jié)扎部位，兩 端線頭在其上結(jié)扎。結(jié)扎后即刻記錄心電圖，以左室前壁呈紫紺或II導(dǎo)聯(lián)S-T段弓背向上 抬高大于0. Imv并持續(xù)0. 5h以上為結(jié)扎成功標(biāo)志(S-T段無改變者淘汰)。結(jié)扎后IOmin 再次記錄心電圖，結(jié)扎30min后剪開結(jié)扎線，實(shí)現(xiàn)再灌注，并記錄再灌注即刻心電圖，清除 胸腔內(nèi)積血后逐層縫合胸壁，撤呼吸機(jī)，動(dòng)物恢復(fù)自主呼吸，氣管切口不做處理。再灌即刻、 10min、20min、40min、lh、2h、3h分別記錄心電圖。再灌3小時(shí)，經(jīng)腹主動(dòng)脈取血，4000rpm離 心IOmin取血清，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)LDH、CK及CK-MB活性，并采用相應(yīng)試劑盒檢 測(cè)血清S0D、MDA(以上指標(biāo)具體檢測(cè)步驟詳見說明書)，解剖取心臟，冰生理鹽水洗去殘血， 剪去心房及右心室，立即放入冰箱中冷凍。將心臟在冰箱中冷凍IOmin后，自心尖向心底平 行房室溝方向?qū)⒆笫仪谐上嗟群穸鹊?片，放入TTC染液中，37°C染色lOmin，未壞死區(qū) 為暗紅色，壞死區(qū)呈灰白色。數(shù)碼相機(jī)拍照。將壞死區(qū)和非壞死區(qū)分別稱重，計(jì)算壞死區(qū)占 左心室重量的百分比，即梗死范圍。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于原料藥為丹參丹酚酸A和人參皂苷Rg1,其中丹參丹酚 酸A2-32重量份，人參皂苷Rgll_8重量份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A2-32重量份，人參皂苷 Rgl2-4重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A4-16重量份，人參皂苷 Rg11-8重量份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A4-16重量份，人參皂苷 Rgl2-4重量份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A的純度為 50 % -100 %，人參皂苷的純度為50 % -100 %。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的一種藥物，其中丹參丹酚酸A純度為90%-100%, 人參皂的純度為90% -100%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的一種藥物組合物，原料藥為丹參丹酚酸A和人參皂 苷Rg1,其中人參皂苷Rg1的制備方法為取三七、人參、西洋參或絞股藍(lán)提取得到的總皂苷，總皂苷加水溶解，濾過，濾液通過非 極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫液棄去，20% -60%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮、 干燥，干燥物加水溶解，濾過，濾液通過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫液棄 去，再用10% -50%乙醇洗脫，洗脫液棄去，再用20% -60%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮干 燥，得人參皂苷粗品，加入有機(jī)溶劑加熱回流提取，提取液濾過，濾液回收溶劑至干，殘 渣干燥，得到人參皂苷；其中非極性或弱極性大孔樹脂為HPD-100、HPD-100A、HPD-300、 HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、丙酮、 正丁醇、乙醇、甲醇中的一種或幾種；或者取三七、人參、西洋參或絞股藍(lán)提取得到的總皂苷，總皂苷加水溶解；溶解液濾 過，濾液通過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫液棄去，20 %-60 %乙醇洗脫，收 集洗脫液，濃縮、干燥，得到人參皂苷粗品，加入有機(jī)溶劑提取，提取液濾過，濾液回收溶 劑至干，殘?jiān)稍?，得到人參皂苷Rg1 ；其中非極性或弱極性大孔樹脂為HPD-100、HPD-100A、 HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有機(jī)溶劑為乙酸乙 酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一種或幾種。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的一種藥物組合物制備的單位劑量的藥物制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種藥物組合物制備的單位劑量的藥物制劑，其中制劑制備 方法中單位劑量為10-4000mg。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療心腦血管疾病、微循環(huán)障 礙、老年性癡呆、器官纖維化或腫瘤疾病藥物方面中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物，其特征在于原料藥為丹參丹酚酸A和人參皂苷Rg1，其中丹參丹酚酸A2-32重量份，人參皂苷Rg11-8重量份。優(yōu)選丹參丹酚酸A2-32重量份，人參皂苷Rg12-4重量份。優(yōu)選丹參丹酚酸A4-16重量份，人參皂苷Rg11-8重量份。優(yōu)選丹參丹酚酸A4-16重量份，人參皂苷Rg12-4重量份。藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明藥物組合物具有協(xié)同作用，與人參、丹參有效部位等組合物比較，具有更好的藥理作用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102085206SQ20091024175
公開日2011年6月8日 申請(qǐng)日期2009年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月7日
發(fā)明者孫德杰, 渠守峰, 米長(zhǎng)江, 郭小鵬, 顧群 申請(qǐng)人:北京本草天源藥物研究院