專利名稱：一種治療心血管疾病藥物組合物在制備對保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損傷藥物中的應(yīng)用的制作方法
一種治療心血管疾病藥物組合物在制備對保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損傷藥物中的應(yīng)用
本發(fā)明屬醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療心血管疾病藥物組合物在制備對保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損 傷藥物中的應(yīng)用。
自Furchgottl980年[Furchgott , Zawadzki. The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine. Nature , 1980 , 288 :373 —376.]報(bào)道兔主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性舒張作用以來，內(nèi)皮細(xì)胞已被認(rèn)為不僅是一層血管 壁內(nèi)面的屏障，而是具有多種生理功能的組織或器官。它可分泌釋放多種生物活性物質(zhì)調(diào)節(jié)血 管張力和平滑肌生長,參與凝血及抗血栓形成，影響血管通透性和物質(zhì)交換。血管內(nèi)皮細(xì)胞直 接與循環(huán)血液接觸，易于受到血液中活性物質(zhì)的影響，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，引起多種血管性 疾病。1993年,Rubanyi認(rèn)為內(nèi)皮是一種兼有感覺與效應(yīng)功能的器官，在感受血流壓力變化、炎 性反應(yīng)及循環(huán)中激素水平等信號的同時(shí),做出調(diào)節(jié)反應(yīng)，從而維持正常血管功能和血液供應(yīng)狀 態(tài)[Rubanyi GM. The role of endothelium in cardiovascular homeostasis and diseases[J]. J Cardio vase Pharmacol, 1993, 22 (S卿l 4) : S1-S4.]。
內(nèi)皮細(xì)胞是維持正常血管生理功能動(dòng)態(tài)平衡的重要結(jié)構(gòu)，其在調(diào)節(jié)血管張力、抗血小板 聚集、抑制白細(xì)胞黏附和減輕血管壁炎癥反應(yīng)等方面具有重要作用。心血管疾病的危險(xiǎn)因素 如高血脂、高血糖、高血壓、吸煙、衰老[lerman. A， Zeiher A. Endothelial function: cardiacevents[J]. Circulation, 2005,111 (3) :363- 368.]等可以損傷內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和 功能，最終導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)生和發(fā)展。尋找能夠保護(hù)和修復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞的藥物對于心血管 疾病的防治有著重要的意義。建立可靠的內(nèi)皮損傷的動(dòng)物模型對于臨床篩選藥物和探討心血 管疾病的發(fā)生機(jī)理十分必要。
正是由于這些發(fā)現(xiàn)，對于內(nèi)皮細(xì)胞功能的研究越來越令人矚目。用藥物等手段對內(nèi)皮細(xì) 胞的內(nèi)環(huán)境及其分泌物進(jìn)行調(diào)整,從而逆轉(zhuǎn)內(nèi)皮功能失調(diào)，己成為心血管疾病治療領(lǐng)域的一個(gè) 新的研究方向。近年對血管內(nèi)皮的研究使人們重新認(rèn)識血管內(nèi)皮的功能和多種心血管疾病的 發(fā)病機(jī)理，積極尋找血管內(nèi)皮功能障礙的早期診斷與治療的方法具有重要意義。
TNF-ci是單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的與炎癥和免疫有關(guān)的重要細(xì)胞因子，其通過與 細(xì)胞表面的受體結(jié)合而起作用。對人和動(dòng)物多種腫瘤細(xì)胞有細(xì)胞毒和細(xì)胞生長抑制作用。在 正常情況下,TNF-a具有抗腫瘤、抗感染等作用，但如持續(xù)釋放或產(chǎn)生過多或與其他細(xì)胞因子關(guān)系失調(diào)，TNF-ci可以誘發(fā)血管內(nèi)皮細(xì)胞及微循環(huán)中一系列炎癥反應(yīng)，刺激合成急性期反應(yīng) 蛋白，催化并放大炎癥反應(yīng)和毒性作用，因此,TNF- a可造成組織廣泛損傷。TNF- a是通過影 響靶細(xì)胞膜的磷脂代謝，導(dǎo)致氧自由基的產(chǎn)生和溶酶體的破裂，還可以激活核酸內(nèi)切酶將DNA 裂解成片斷導(dǎo)致細(xì)胞死亡，激活炎癥細(xì)胞產(chǎn)生多種炎癥介質(zhì)，損傷微循環(huán)和內(nèi)皮細(xì)胞[Harris PR, Mobley HL, Perez—perez GI，et al.Helicobacterpylori urease is a potent stimulus of mononuclear phagocyteactivation and inflamemator cytokine production [ J ]. Gastroenterology, 1996， 111 :419-425.]。在許多以血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷為發(fā)病關(guān)鍵環(huán)節(jié)的疾 病(動(dòng)脈粥樣硬化、血栓形成、肺水腫、妊高征等)中均可觀察到這種細(xì)胞因子的改變。腫瘤 壞死因子可通過多種途徑損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷又促使腫瘤壞死因子的釋 放，再次損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，兩者互為因果，形成惡性循環(huán)。
NO是獨(dú)立存于血管、巨噬細(xì)胞和神經(jīng)系統(tǒng)中的生理性調(diào)節(jié)因子，是由L-精氨酸和氧在一氧 化氮合酶(NOS)催化下合成的。N0S不足，則直接影響NO的合成。近年研究表明NO能舒張血 管、抑制血小板黏附聚集、清除氧自由基、維持正常的心輸出量、保護(hù)細(xì)胞作用。當(dāng)NO減少 時(shí)，血小板活化并釋放血栓素、5-羥色胺、腺嘌呤核苷酸及血小板源性生長因子等。引起血管 收縮,血管平滑肌細(xì)胞增殖，導(dǎo)致微循環(huán)障礙而引起心肌缺血變性壞死，出現(xiàn)心功能減退及心 律失常等變化。[李中言，趙連友.一氧化氮與心血管疾病.中華心血管病雜志，1996,24 (1) :73-76;郭志剛，沈令剛，翁昌鴻,等.冠心病、高血壓病人血漿自由基、 一氧化氮及纖溶 活性的變化.第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999, 19(2) :124-126.]。
CRP是一種非特異性炎癥標(biāo)志物，在感染和組織損傷時(shí)血漿濃度快速升高,現(xiàn)在認(rèn)為它不 僅是炎癥標(biāo)志物,還可能直接參與AS等多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展，是目前心血管疾病的的預(yù) 不因子禾卩危險(xiǎn)因子[Koenig W. Predicting risk and treatment benefit in atherosclerosis: the role of C-reactive protein. Int J Cardiol, 2005, 98 (2) :199-206; Ridker PM, He皿ekens CH, Buring JE, et al. C-reactive protein and other markers of inflammation in the prediction of cardiovascular disease in women. N Engl J Med, 2000, 342(12): 836-843.]。 CRP由肝臟合成，可促進(jìn)補(bǔ)體激活導(dǎo)致免疫損傷。炎癥細(xì)胞含有CRP受體，CRP和 受體結(jié)合活化細(xì)胞,通過直接浸潤、聚集或間接產(chǎn)生細(xì)胞因子導(dǎo)致血管損傷。CRP是急性炎癥 狀態(tài)下血液中最常見的一種非抗體性蛋白質(zhì)，CRP的增加程度在--定范圍內(nèi)與機(jī)體炎癥反應(yīng) 程度成正相關(guān)。
內(nèi)皮素(Endothelin, ET)是1988年由日本學(xué)者Yanagisawa[Tamirisa P， Frishman WH, Kumar A. Endothelin and endothelin antagonism: roles in cardiovascular health and disease. AmHeart J, 1995， 130:601-610.]等從豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液中分離純化出來的-- 種由21個(gè)氨基酸組成的血管活性肽，是目前所知功能最強(qiáng)的縮血管物質(zhì)。ET可促進(jìn)平滑肌細(xì) 胞的增殖和成纖維細(xì)胞的有絲分裂反應(yīng)[張海濤，吳清玉.內(nèi)皮素的臨床研究進(jìn)展[J].心血管 病學(xué)進(jìn)展，1999， 20(3): 131.]。 ET在體內(nèi)與其他血管活性物質(zhì)的相互作用，參與調(diào)節(jié)血壓和 血流動(dòng)力學(xué)的變化[Baumer TM, Wiece KA， Koko TF, et al. Para/endocrime function of the vascular endothelium of healthy pregnant women and pregnant~with preecla叩sis and their meonattes[J]. Pol Arch Med Wewn, 2001,105(4): 271-278.]。是調(diào)節(jié)心血管功能的 重要因子，對維持基礎(chǔ)血管張力與心血管系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)有重要作用。其引起的血管收縮、代謝紊 亂和細(xì)胞增殖是與血管損傷有關(guān)疾病的共同致病因素。
上述TNF-ci、 N0、 CRP、 ET四個(gè)物質(zhì)是反映內(nèi)皮細(xì)胞損傷的重要指示性標(biāo)志，研究其變 化情況對于了解內(nèi)皮細(xì)胞早期損傷具有重要的意義。而內(nèi)皮細(xì)胞損傷與微循環(huán)障礙有密切關(guān) 系，可引發(fā)多種心血管疾病。
發(fā)明人已經(jīng)獲得了一種治療心血管疾病的藥物組合物專利權(quán)，該組合物專利號為 ZL00111303.8,其是由人參、丹參、麝香、蟾酥等名貴中藥材組成。具有芳香益氣通脈、活 血化瘀止痛之功效，主治冠心病心絞痛(氣虛血瘀證)，癥見胸痛胸悶(胸憋)、心悸氣短、神倦
乏力、面色紫暗、舌淡紫、脈弱而澀者。i、 n、 in期臨床研究顯示該藥治療冠心病、心絞 痛療效確切，無毒副作用。按照本處方比例可以制成藥劑學(xué)上任何一種劑型，包括滴丸、水 丸、片劑、膠囊等制劑。
目前中藥復(fù)方藥物在闡述藥物作用機(jī)理等基礎(chǔ)研究還比較薄弱，大部分藥物沒有進(jìn)行藥 物作用機(jī)理的研究，藥物作用機(jī)理研究還存在作用靶點(diǎn)不明確，藥物作用基礎(chǔ)物質(zhì)不明確， 觀測指標(biāo)確定難等問題。該藥物組合物屬中藥復(fù)方藥物，其作用機(jī)理十分復(fù)雜，因此對其機(jī) 理的深入研究，有利于進(jìn)一步闡明該藥的作用機(jī)制，利于發(fā)現(xiàn)新的用途。該藥物組合物是新 開發(fā)的中藥，至今為止未見關(guān)于其保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞早期損傷作用的報(bào)道。 [發(fā)明內(nèi)容]
本發(fā)明的目的是提供上述治療心血管病的藥物組合物在制備對保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞早期損傷治 療藥物中的應(yīng)用。
上述藥物組合物的處方組成和重量百分比為
人參皂苷7-15份，丹參水溶性提取物20-45份，人工麝香4-10份，人工牛黃12-24份， 熊去氧膽酸l-8份，蟾毒配基l-8份，冰片12-22份。
人參皂苷10份，丹參水提取物40份，人工麝香6份，人工牛黃20份，熊去氧膽酸3.3 份，蟾毒配基3.3份，冰片17.4。按照上述配比，該藥物組合物可以制成任意一種藥劑學(xué)上可以接受的劑型。其中滴丸劑
的制備方法如下
將上述組分中的人參皂甙與丹參水溶性提取物分別以水為溶媒溶解，人工麝香、人工牛 黃、熊去氧膽酸、蟾毒配基和冰片分別以無水乙醇為溶媒溶解，然后將上述溶解后的藥物分
別經(jīng)高壓均質(zhì)超微乳化至粒徑不超過lum;按藥物與載體聚乙二醇6000的比例1: 9取聚乙 二醇6000加熱至85'C全部融化；然后將所有成分加入到聚乙二醇中去，在85。C溫度的儲液 罐中保溫待用。
在低溫箱內(nèi)將液體硅油灌入高度不低于40cm的玻璃管中分層降溫，使上層降至15'C， 下層降至5'C;將儲液罐中的藥液注入裝有不同直徑的滴頭和真空吸附裝置的滴制管中。滴 頭距硅油液面距離小于5cra。調(diào)整真空吸附開關(guān)，使液體按預(yù)定頻率滴入玻璃管的液體硅油 中，藥滴緩緩沉落，依靠自身的張力逐漸收縮成丸。成丸后，插凈表明硅油，室溫干燥而得 成品。
本發(fā)明利用大鼠埋植血管緊張素緩釋泵的方法成功制作了血管內(nèi)皮損傷的模型，建立假 手術(shù)組、內(nèi)皮損傷組、藥物組合物組三組進(jìn)行對比研究。通過測定血液中CRP、 TNF-a、 ET、 NO四個(gè)觀察指標(biāo)以及用透射和掃描電鏡手段觀察三個(gè)對照組細(xì)胞形態(tài)變化的方法來研究該藥 物對內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
血管內(nèi)皮細(xì)胞直接與循環(huán)血液接觸，易于受到血液中活性物質(zhì)的影響，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞的損 傷，引起多種血管性疾病。腫瘤壞死因子TNF-ci可通過多種途徑損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，血管內(nèi) 皮細(xì)胞的損傷又促使腫瘤壞死因子的釋放，再次損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，兩者互為因果，形成惡 性循環(huán)。NO引起血管收縮，血管平滑肌細(xì)胞增殖，導(dǎo)致微循環(huán)障礙而引起心肌缺血變性壞死， 出現(xiàn)心功能減退及心律失常等變化。CRP是目前心血管疾病的的預(yù)示因子和危險(xiǎn)因子。ET引 起的血管收縮、代謝紊亂和細(xì)胞增殖是與血管損傷有關(guān)疾病的共同致病因素。這四種物質(zhì)的 異常是微循環(huán)障礙的重要標(biāo)志之一 。
發(fā)明的有益效果本發(fā)明中該藥物組合物能夠降低血漿CRP、 TNF-a、 ET的水平，升高 血液NO的水平，通過改變這四種物質(zhì)的變化，可知其能夠保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞早期損傷，隨著給藥 時(shí)間延長，保護(hù)作用更明顯。電鏡結(jié)果顯示藥物組合物治療組內(nèi)皮細(xì)胞損傷已經(jīng)修復(fù)，形態(tài) 未見明顯異常。首次闡明了該藥物組合物對內(nèi)皮細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用的用途。


圖1藥物組合物對大鼠內(nèi)皮損傷后血漿ET含量的影響 圖2藥物組合物對大鼠內(nèi)皮損傷后血漿NO含量的影響圖3藥物組合物對大鼠內(nèi)皮損傷后血漿TNF- a含量的影響 圖4藥物組合物對大鼠內(nèi)皮損傷后血漿CRP含量的影響 圖5三組大鼠胸主動(dòng)脈掃描電鏡圖 圖6三組大鼠腎動(dòng)脈透射電鏡圖 [具體實(shí)施方式
]
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，下面實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而并非對本發(fā)明 的限制。
實(shí)施例藥物組合物對大鼠血管內(nèi)皮早期損傷保護(hù)作用
材料和方法
1動(dòng)物及分組
8周齡雄性SD大鼠125只(中國科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購買)，體重200g土15g，分為ld、 3d、 7d、 14d和28d五個(gè)組。每組25只再分為成假手術(shù)組(sham組)5只，內(nèi)皮損傷組10只(Np 組)、藥物組合物治療組10只(sx組)?？辔端崛芤簶?biāo)記。大鼠在新飼養(yǎng)環(huán)境適應(yīng)一周。室內(nèi) 詞養(yǎng)，自然光照，通風(fēng)條件良好，環(huán)境清潔,室溫18-25'C，濕度合適。動(dòng)物均飼普通飲食，自由 飲水。
2. 內(nèi)皮損傷模型的制作
假手術(shù)組僅埋植生理鹽水緩釋泵，內(nèi)皮損傷組在背部皮下埋置AngII緩釋泵，藥物組合 物組在埋AngII緩釋泵同時(shí)，在埋泵前3d和埋泵后用藥物組合物灌胃。每天一次。灌胃是動(dòng) 作輕柔，以防止灌胃針頭對消化道造成的損傷。
3. 藥物組合物劑量和配制方法。
藥物組合物的配制方法藥物組合物超微粉濃度0.04g/ml,均按lml/100g動(dòng)物體重 配制。藥物組合物超微粉用0. 5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na， sodium carboxymethycellulose) 溶解。每天灌胃一次。
4. 取材及檢測內(nèi)容
所有動(dòng)物情況良好，未出現(xiàn)死亡。分別在埋泵后的第ld、 3d、 7d、 14d和28d，動(dòng)物麻醉 后仰臥固定于解剖臺上。在胸骨左緣旁開0.5cm處自下而上依次剪開左側(cè)肋軟骨，暴露胸腔， 剪開心包，右心室抽血(每只動(dòng)物約可以采血6 8ml)，用作血清學(xué)檢測。取下長約1.5cm的 胸主動(dòng)脈，縱行剪開，先在肝素生理鹽水內(nèi)漂洗三次，置于冷2.5%的戊二醛溶液固定。制作 掃描電鏡標(biāo)本。取下左腎動(dòng)脈，也置于冷2.5%的戊二醛溶液，制作透射電鏡標(biāo)本。此外還取 出肝臟、腎臟、脾臟、胸腺、心臟和主動(dòng)脈， 一分為二，分別固定與10%中性福爾馬林溶液和液氮保存，以備將來檢測之用。
從右心室抽血(每只動(dòng)物約可以采血6 8ml)，置于含10。/。EDTA 2Na 30u L和抑肽酶800u 的試管中，3500卬m離心15 min,分離血漿于-20。C保存，測CRP和ET;另取不抗凝的血標(biāo)本 1. 5mL,3500 rpm離心10 min，分離血清-20。C保存，測TNF-a 、 NO。 ET采用放射免疫分析法，試 劑盒由北京東亞免疫技術(shù)研究所提供，儀器為FJ-2008G全自動(dòng)Y計(jì)數(shù)器;NO水平通過其代謝產(chǎn) 物亞硝酸鹽濃度測定，試劑盒由南京聚力生物醫(yī)學(xué)工程研究所提供。CRP采用免疫濁度法，試 劑為Beckon,儀器為貝克曼公司的IMMAGE特定蛋白定量儀。TNF-a采用ELISA，儀器為雷勃公 司的Wellscan II型酶標(biāo)儀器。實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。 5透射電鏡標(biāo)本處理程序
取出腎動(dòng)脈，肝素生理鹽水洗滌。2. 5y。戊二醛前固定2h、 PBS洗滌三次，1%鋨酸后固定1 2h。 PBS漂洗20min。分別用70%、 80%、 90%、 100%梯度丙酮脫水，每次10min。 Epon812包埋、 烤箱內(nèi)45'C(12h)、 6(TC(36h)。半薄切片定位，超薄切片于銅網(wǎng)上。醋酸雙氧鈾和檸檬酸鉛 染色。Philips TECNAI-12型電鏡觀察拍照。 6掃描電鏡標(biāo)本處理程序
取出胸主動(dòng)脈，肝素生理鹽水洗滌。2.5%戊二醛前固定21!、緩沖液漂洗20min。分別用 70%、 80%、 90%、 100°/。丙酮梯度脫水，臨界點(diǎn)干燥，噴金。Philips XL30ESEM型電鏡觀察拍照。
結(jié) 果
由圖l顯示藥物組合物能夠降低血漿中內(nèi)皮素的含量，在用藥第—、天，與內(nèi)皮損傷組無顯 著差異，其余四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，兩者之間均有顯著性差異(P<0.01)。
由圖2顯示在ld、 3d、 7d三個(gè)時(shí)間段，藥物組合物治療組和內(nèi)皮損傷組相比，NO含量無 顯著性差異。但在14d和28d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，兩者有顯著性差異(P<0.01)。說明隨著用藥時(shí)間的 延長，藥物組合物能夠升高NO的濃度。
由圖3顯示藥物組合物治療組和內(nèi)皮損傷組相比，TNF-a水平在ld、 3d兩個(gè)時(shí)間段無顯著 性差異，在第7d，兩者有顯著性差異(P<0.05)，在14d和28d，兩組間有顯著性差異(P<0. 01)。 隨著用藥時(shí)間的延長，藥物組合物能夠降低TNF-a的濃度。
由圖4顯示在第3d、 7d、 14d和28d四個(gè)時(shí)間段，藥物組合物治療組能夠顯著降低血漿中CRP 含量，兩者有顯著性差異(P〈O.OD。隨著用藥時(shí)間的延長，藥物組合物能降低CRP的濃度。
由圖5顯示掃描電鏡可見假手術(shù)組，細(xì)胞形態(tài)呈梭形或不規(guī)則形結(jié)構(gòu)，細(xì)胞結(jié)構(gòu)輪廓較清 晰，中央部隱約可見隆起的細(xì)胞核。內(nèi)皮細(xì)胞的長軸于血流的方向相一致。內(nèi)皮損傷模型組， 見內(nèi)皮細(xì)胞成片脫落，皮下組織和內(nèi)彈力版裸露，表面粗糙不平，有時(shí)見血小板和白細(xì)胞粘 附。藥物組合物組內(nèi)皮僅有輕微的損傷，多出見內(nèi)皮大部分已經(jīng)修復(fù)。由圖6顯示假手術(shù)組見內(nèi)皮細(xì)胞完整，內(nèi)皮細(xì)胞間見有細(xì)胞連接，胞核清楚，連于呈波浪 形的內(nèi)彈力版上。在內(nèi)皮損傷組，可以見到內(nèi)皮細(xì)胞不同程度的充血，腫脹，剝脫，在某些 部位還可見到內(nèi)彈力板暴露。但在藥物組合物組僅有輕微的內(nèi)皮改變，新生內(nèi)皮基本覆蓋在 內(nèi)彈力板上。部分區(qū)域內(nèi)皮細(xì)胞較完整，病變輕，僅細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體略腫脹。平滑肌細(xì)胞未見 明顯異常。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，下述該實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而對本發(fā)明 沒有限制。 實(shí)施例一
1、 配方
按下述配比稱取原料
人參皂苷0. 45克丹參水溶性提取物1. 35克人工麝香0. 3克人工牛黃0. 72 克 熊去氧膽酸0.24克蟾毒配基0.24克 冰片O. 66克 聚乙二醇6000 34克制成 1000粒滴丸。
2、 制備方法
將上述組分中的人參皂甙與丹參水溶性提取物分別以水為溶媒溶解，人工麝香、人工牛 黃、熊去氧膽酸、蟾毒配基和冰片分別以無水乙醇為溶媒溶解，然后將上述溶解后的藥物分 別經(jīng)高壓均質(zhì)超微乳化至粒徑不超過lum;按藥物與載體聚乙二醇6000的比例1: 9取聚乙 二醇6000加熱至85'C全部融化；然后將已經(jīng)溶解超微乳化的藥物按先水溶性成分后脂溶性 成分的順序， 一一加入到聚乙二醇中去，在85'C溫度的儲液罐中保溫待用。
在低溫箱內(nèi)將液體硅油灌入高度不低于40cm的玻璃管中分層降溫，使上層降至15'C, 下層降至5'C;將儲液罐中的藥液注入裝有不同直徑的滴頭和真空吸附裝置的滴制管中。滴 頭距硅油液面距離小于5cm。調(diào)整真空吸附開關(guān)，使液體按預(yù)定頻率滴入玻璃管的液體硅油 中，藥滴緩緩沉落，依靠自身的張力逐漸收縮成丸。成丸后，插凈表明硅油，室溫干燥而得 成品。
實(shí)施例二 1.配方
人參皂苷0. 3克丹參水溶性提取物1. 2克人工麝香0. 18克人工牛黃0. 6克熊去氧膽酸O. l克蟾毒配基O. l克 冰片O. 52克 聚乙二醇6000 27克制成1000粒 滴丸。
2、制備方法
同實(shí)施例一。 實(shí)施例三
1. 配方
人參皂苷0. 21克 丹參水溶性提取物0. 6克 人工麝香0. 12克 人工牛黃0. 36 克 熊去氧膽酸0. 03克蟾毒配基0. 03克 冰片0. 36克 聚乙二醇6000 15克制成 1000粒滴丸。
2、 制備方法
同實(shí)施例一。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物在制備對保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損傷藥物中的應(yīng)用
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所說的用途，其特征在于該藥物組合物在制備改善內(nèi)皮細(xì)胞損傷所致心血 管疾病藥物中的應(yīng)用。
3. 根據(jù)權(quán)利要求l所說的內(nèi)皮細(xì)胞損傷，其特征在于引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷的因素為CRP因子、 TNF-a因子、ET因子、NO因子中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物在制備對保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞早期損傷藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明利用大鼠埋植血管緊張素緩釋泵的方法成功制作了血管內(nèi)皮損傷的模型，建立假手術(shù)組、內(nèi)皮損傷組、藥物組合物組三組進(jìn)行對比研究。通過測定血液中CRP、TNF-α、ET、NO四個(gè)觀察指標(biāo)以及觀察三個(gè)對照組細(xì)胞形態(tài)變化的方法來研究藥物組合物對內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。藥物組合物能夠通過降低血漿CRP、TNF-α、ET的水平，升高血液中NO的水平，因此首次闡明該藥物組合物對內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用。
文檔編號A61K38/19GK101406693SQ200710163509
公開日2009年4月15日 申請日期2007年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月12日
發(fā)明者斌 何, 劍 劉, 劉艷紅, 王未沫, 王鵬義, 解小剛 申請人:內(nèi)蒙古伊泰藥業(yè)有限責(zé)任公司