專(zhuān)利名稱(chēng)：降血糖活性的白術(shù)糖復(fù)合物、生產(chǎn)方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從中藥材中提取得糖復(fù)合物、生產(chǎn)方法和用途，特別是涉及白術(shù)糖復(fù)合物、生產(chǎn)方法和用途。
本發(fā)明的制備方法是將生藥白術(shù)浸泡獲得白術(shù)水提液，有機(jī)溶劑沉淀、沉淀用水溶解，上清液經(jīng)透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗多糖，粗多糖經(jīng)柱層析分離獲得白術(shù)糖復(fù)合物。具體來(lái)說(shuō)，將干燥后的生藥白術(shù)粉碎或切片，其目的是為提高浸出率。推薦常溫、常壓浸泡，尤其推薦0～30℃浸泡，浸泡液和水提液的pH值推薦保持在5.0-8.0。
其中生藥白術(shù)與浸泡水重量比推薦白術(shù)∶水＝1∶5-15，尤其推薦用10-12倍重量或更多的水，推薦浸泡12-72小時(shí)，尤其推薦24-72小時(shí)，所用水推薦為無(wú)離子水。
過(guò)濾，濾液經(jīng)或不經(jīng)濃縮，用有機(jī)溶劑沉淀后離心，離心所得沉淀用水溶解，推薦用1-5倍重量的水溶解。
離心，上清液透析或膜分離，透析時(shí)間推薦為24-72小時(shí)，透析膜、透析袋其孔徑推薦截留分子量在1000以下，尤其推薦截留分子量為500～1000。
濃縮干燥獲得粗品白術(shù)糖復(fù)合物，最好采用低溫真空濃縮或冷凍干燥，以便保持白術(shù)糖復(fù)合物的生物活性。其中干燥或減壓濃縮溫度推薦低于60℃進(jìn)行。例如在30～60℃干燥或濃縮，壓強(qiáng)推薦控制在0.08～0.1MPa。
所得粗品白術(shù)糖復(fù)合物再經(jīng)柱層析進(jìn)一步分離純化，層析填料推薦為DEAE-纖維素，洗脫液推薦為0.25M NaHCO3溶液，收集糖吸收峰，經(jīng)膜分離后冷凍干燥獲得精品白術(shù)糖復(fù)合物。
前述的用有機(jī)溶劑沉淀，所述有機(jī)溶劑推薦與水互溶的有機(jī)溶劑，水提液與有機(jī)溶劑的體積比推薦為水提液有機(jī)溶劑＝1∶2～6。與水互溶的有機(jī)溶劑推薦低碳鏈的醇或酮，例如C1～C6的醇或酮等；尤其推薦乙醇，例如用2～6倍體積的75％～95％的乙醇；沉淀時(shí)間推薦為12-72小時(shí)，尤其推薦24-72小時(shí)。
本發(fā)明的白術(shù)糖復(fù)合物，具有降血糖功能，其可用于制備治療糖尿病的藥品和降血糖的保健品。
本發(fā)明首次從白術(shù)中提取得到白術(shù)糖復(fù)合物。本發(fā)明的提取分離方法簡(jiǎn)便，產(chǎn)率高和適于工業(yè)化生產(chǎn)。該多糖適用于口服用藥，具有顯著降低血糖作用。


圖1是氣相色譜測(cè)得的單糖組成的標(biāo)準(zhǔn)圖譜，作為對(duì)照使用，圖中數(shù)據(jù)如表1所示表1

圖2是氣相色譜測(cè)得的本分明的樣品的單糖組成，圖中數(shù)據(jù)如表2所示表2

具體實(shí)施方式
實(shí)施例1白術(shù)根莖粉碎后，稱(chēng)取200g，加入去離子水2000ml，室溫浸泡48小時(shí)，其間多次攪拌利于有效成分浸出。浸泡液先用四層紗布過(guò)濾，然后濾液離心，轉(zhuǎn)速4500r/min，離心時(shí)間8min。上清液減壓濃縮，溫度控制范圍50℃-55℃，濃縮體積至600ml。在600ml濃縮液中，加入95％乙醇3600ml進(jìn)行醇沉，醇沉?xí)r間為24小時(shí)。醇沉結(jié)束后，輕輕傾出上清液，沉淀部分離心分離，轉(zhuǎn)速4500r/min，離心時(shí)間8min。取出沉淀物加入500ml去離子水溶解，溶解后同樣離心除去不溶物。上清液用截留分子量為1000的膜進(jìn)行透析分離，可采用流動(dòng)的自來(lái)水，透析時(shí)間48小時(shí)。透析后減壓濃縮，溫度控制范圍50℃-55℃，濃縮體積至200ml，然后冷凍干燥，即獲得白術(shù)糖復(fù)合物。產(chǎn)率為1.0％左右。元素分析C＝40.57％，H＝6.42％，N＝2.69％；糖含量41.44％；糖醛酸含量28.35％；蛋白質(zhì)含量21.95％。
實(shí)施例2將生藥白術(shù)1公斤洗凈干燥，粉碎，用10升無(wú)離子水室溫浸泡24小時(shí)，過(guò)濾。殘?jiān)?升無(wú)離子水繼續(xù)浸泡24小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，60℃減壓濃縮至2-4升。然后用95％的乙醇沉淀，乙醇終濃度為80％，醇沉24小時(shí)。離心，沉淀用2.5升水溶解，離心，無(wú)離子水透析48-72小時(shí)。60℃減壓濃縮后冷凍干燥，即獲得白術(shù)糖復(fù)合物12克。元素分析C＝37.99％，H＝6.20％，N＝2.19％；糖含量52.7％；糖醛酸含量15.9％；蛋白質(zhì)含量16.7％。
實(shí)施例3將生藥白術(shù)500g洗凈干燥，粉碎，用5升無(wú)離子水室溫浸泡24小時(shí)，過(guò)濾。殘?jiān)?升無(wú)離子水繼續(xù)浸泡24小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，60℃減壓濃縮至2升。然后用95％的乙醇沉淀，乙醇終濃度為85％，醇沉24小時(shí)。離心，沉淀用1升水溶解，離心，無(wú)離子水透析48-72小時(shí)。60℃減壓濃縮后冷凍干燥，即獲得白術(shù)糖復(fù)合物6.2克。元素分析C＝45.02％，H＝6.01％，N＝1.05％；糖含量58.0％；糖醛酸含量28.1％；蛋白質(zhì)含量11.0％。
實(shí)施例4白術(shù)粗多糖500mg溶于10ml蒸餾水中，離心(4500r/min，8min)。取上清液上玻璃柱(3.0cm*30cm)，先用蒸餾水洗脫，流速為0.6ml/min，洗脫10小時(shí)后改為0.25M NaHCO3溶液洗脫，同樣速度洗脫12小時(shí)，收集糖峰，膜分離后冷凍干燥獲得白術(shù)糖復(fù)合物。得率20～25％。元素分析C＝37.62％，H＝6.59％，N＝1.36％；糖含量42.6％；糖醛酸含量32.3％；蛋白質(zhì)含量11.4％。
實(shí)施例5白術(shù)多糖降血糖藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果第0天第5天 第10天體重 血糖 體重血糖 體重 血糖對(duì)照組200.6±3.14.18±0.45 233.6±6.7 4.54±0.60 262.0±7.83.91±0.54模型組191.4±7.222.53±2.49216.8±13.3 21.39±2.86 229.2±21.4 19.62±2.33低劑量192.4±6.621.89±2.71222.5±14.1 18.03±8.46*238.5±20.7 14.51±5.54***中劑量193.8±7.720.01±3.48227.3±10.4 16.12±6.70*235.3±18.2 13.18±5.83***高劑量190.9±9.920.36±2.45220.9±17.1 17.60±4.98 228.0±32.1 13.53±6.02**注與給藥前比較，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001.
給藥第4天，低劑量組2只大鼠血糖恢復(fù)正常，中劑量組2只大鼠血糖恢復(fù)正常，高劑量組1只大鼠血糖恢復(fù)正常。給藥第10天，中劑量組3只大鼠血糖恢復(fù)正常，高劑量組3只大鼠血糖恢復(fù)正常。
權(quán)利要求
1.一種具有降血糖活性的白術(shù)糖復(fù)合物，其特征如下元素分析C＝35％～45％，H＝5.5％～7.0％，N＝1.0％～3.0％；多糖含量40％～60％；糖醛酸含量15％～45％；蛋白質(zhì)含量10％～25％。
2.如權(quán)利要求1所述的白術(shù)糖復(fù)合物，其特征是其單糖組成中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。
3.如權(quán)利要求1所述的白術(shù)糖復(fù)合物的生產(chǎn)方法，其特征是包括將中藥材用水浸泡、有機(jī)溶劑沉淀、沉淀用水溶解，經(jīng)透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗品白術(shù)糖復(fù)合物，粗品經(jīng)柱層析分離獲得精品白術(shù)糖復(fù)合物。
4.如權(quán)利要求3所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物方法，其特征是生藥白術(shù)切片或粉碎。
5.如權(quán)利要求3所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物方法，其特征是所用水為無(wú)離子水。
6.如權(quán)利要求3所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物方法，其特征是有機(jī)溶劑是與水互溶的有機(jī)溶劑，水提液與有機(jī)溶劑的體積比為水提液∶有機(jī)溶劑＝1∶2～6。
7.如權(quán)利要求3所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物方法，其特征是所述的有機(jī)溶劑是與水互溶的有機(jī)溶劑。
8.如權(quán)利要求3所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物方法，其特征是透析用透析膜、透析袋及超濾膜，其孔徑控制在分子量1000以下。
9.如權(quán)利要求3所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物方法，其特征是透析后的上清液干燥或濃縮溫度等于或低于60℃進(jìn)行。
10.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)白術(shù)糖復(fù)合物的用途，其特征是用于制備治療糖尿病的藥品和降血糖的保健品。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從中藥材白術(shù)中提取的糖復(fù)合物、其生產(chǎn)方法和用途。本發(fā)明采用浸泡獲得白術(shù)水提液，有機(jī)溶劑沉淀、沉淀用水溶解，上清液經(jīng)透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗品，粗品經(jīng)柱層析分離獲得精品白術(shù)糖復(fù)合物。本發(fā)明方法工藝簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高，適宜工業(yè)化生產(chǎn)。該白術(shù)糖元素分析C＝35％～45％，H＝5.5％～7.0％，N＝1.0％～3.0％；多糖含量40％～60％；糖醛酸含量15％～45％；蛋白質(zhì)含量10％～25％；單糖組成中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。該多糖無(wú)毒副作用，具有明顯的降血糖功能作用。
文檔編號(hào)A61K31/7004GK1398630SQ02136740
公開(kāi)日2003年2月26日 申請(qǐng)日期2002年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月30日
發(fā)明者田庚元, 單俊杰 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所, 浙江京新藥業(yè)股份有限公司