專利名稱：轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，屬于醫(yī)療和實驗室設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
轉(zhuǎn)基因技術(shù)是將人工分離和修飾過的基因?qū)氲缴矬w基因組中，由于導(dǎo)入基因的表達，引起生物體的性狀的可遺傳的修飾，這一技術(shù)稱之為轉(zhuǎn)基因技術(shù)Transgenetechnology。人們常說的〃遺傳工程"、〃基因工程"、〃遺傳轉(zhuǎn)化〃均為轉(zhuǎn)基因的同義詞。比如動物轉(zhuǎn)基因就是基因組中含有外源基因的動物，這些動物是按照預(yù)先的設(shè)計，通過細胞融合、細胞重組、遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移、染色體工程和基因工程技術(shù)將外源基因?qū)刖印⒙鸭毎蚴芫?，再以生殖工程技術(shù)，有可能育成轉(zhuǎn)基因動物。動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)已在牛、羊、豬、雞、魚等家養(yǎng)動物中取得一定成果，比如通過生長素基因、多產(chǎn)基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、角蛋白基因、抗寄生蟲基因、抗病毒基因等基因轉(zhuǎn)移，可育成生長周期短，產(chǎn)仔、生蛋多和泌乳量高，肉類、皮毛品質(zhì)與加工性能好，并具有抗病性的動物品種。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究過程中，細胞培養(yǎng)是最基本的實驗操作，沒有細胞，一切都無從談起。目前，在細胞培養(yǎng)過程中，為了達到特定目的，需要將轉(zhuǎn)基因細胞如牛成纖維細胞等方便快速地培養(yǎng)起來，整個過程需要較大的物質(zhì)消耗，特別是滅菌過程，所使用的器具越多，需要消耗的物品越多，實驗成本也隨之增加，所以，有關(guān)細胞的實驗都需要大量的資金支持，否則就無法完成。經(jīng)過長期的實踐觀察，我們發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)裝置在轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炦^程中的使用量是最大的，也是最難控制的一個環(huán)節(jié)，有時一個小失誤就可能造成大面積的污染，給實驗帶來較大的影響。因此減小污染的機會就變得非常重要，如何設(shè)計一種可以降低細胞培養(yǎng)裝置使用量并使培養(yǎng)的轉(zhuǎn)染細胞能夠在一個密閉的環(huán)境中可以被挑揀轉(zhuǎn)移進而降低培養(yǎng)的轉(zhuǎn)染細胞被污染的機會成為急需解決的一大難題，所以利用在細胞培養(yǎng)裝置內(nèi)增加細胞生長的貼壁面積從而降低細胞培養(yǎng)裝置使用量和加設(shè)一個可以手控的挑揀裝置的方法，發(fā)明一種具有多層結(jié)構(gòu)和挑揀裝置可 供細胞貼壁生長并可在裝置外手工挑揀目的細胞的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置是必要的。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服細胞生物學(xué)實驗過程中因細胞培養(yǎng)裝置使用過多和傳代培養(yǎng)過程中多次轉(zhuǎn)移細胞過程中常給實驗增加各種風(fēng)險的難題，本發(fā)明提供了一種轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，該轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置利用在細胞培養(yǎng)裝置內(nèi)增加多層可供細胞貼壁生長的生長板，設(shè)置液盒來保證每塊生長板均可使其上的細胞得到充足的培養(yǎng)液，同時設(shè)置可在裝置外由操作人員手動操作的挑揀裝置，從而達到較好完成細胞培養(yǎng)的目的。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:
本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置由瓶蓋1、瓶口 2、瓶頭3、瓶頸4、瓶上面5、瓶下面6、瓶體7、瓶腔8、支撐柱9、生長板10、透液板11、液盒上腔12、生長板插孔13、液盒14、瓶底15、瓶側(cè)壁16、透液板體17、板間支撐18、支撐軸19、生長板卡槽20、托層立壁21、托層22、吸液層23、生長透液貼壁層24、透液孔25、支撐軸孔26組成，其特征在于:生長板10由托層立壁
21、生長透液貼壁層24、吸液層23、托層22、透液孔25、支撐軸孔26組成，生長板10長4_14厘米，寬2.5-7厘米，厚1-3毫米，包括三層結(jié)構(gòu)，從上到下依次為生長透液貼壁層24、吸液層23、托層22。生長透液貼壁層24是一層纖維膜，厚0.01-0.1毫米，上面有很多透液孔25，吸液層23中從液盒14中吸附過來的培養(yǎng)液可以通過透液孔25順利地滲透到生長透液貼壁層24膜的外表面，以利接種在膜外表面上細胞的生長；吸液層23是一層脫脂棉，厚度為0.69-1.9毫米，可以吸附培養(yǎng)液；托層22塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，厚0.3-1毫米，前緣和兩側(cè)緣向上折起，形成托層立壁21，以免培養(yǎng)液向外滲出。支撐軸孔26是生長板10上與支撐軸19相對應(yīng)處的長條孔，長度為3-13厘米、寬度為2.1-3.1毫米，用于支撐軸19穿插生長板10后，與板間支撐18 —起將生長板10固定在特定位置，以及生長板10可以以支撐軸孔26邊緣和支撐軸19形成滑道，從板與板之間推進或拉出，以便觀察生長板上細胞的生長情況，或者在生長板10進行清洗死亡細胞、挑揀單克隆細胞等操作。所述的瓶蓋I外形塑料質(zhì)地，外形及結(jié)構(gòu)同公知的瓶蓋，蓋口內(nèi)表面有凸出的旋絲，可與瓶頭3外表面外凸的旋絲相互旋接在一起，以便瓶蓋I將瓶口 2封住，防止瓶腔8中液體流出。瓶口 2是瓶頭3游離端的開口，即外加液體注入瓶腔8或瓶腔8內(nèi)的液體流出的開口。瓶頭3是瓶頸4末端向外伸出的一段圓環(huán)形結(jié)構(gòu)，內(nèi)表面光滑，夕卜表面有外凸的旋絲。瓶頸4是瓶頭3和瓶體7之間相連接的部分，下面長，上面短，使得瓶頭3位于瓶體7中軸面的上方，以免細胞培養(yǎng)裝置放置在水平面上后，液體從瓶口 2流出，瓶頸4內(nèi)腔與瓶頭3和瓶腔8連成一體。所述的瓶體7長方體形，長5-15厘米，寬3-8厘米，高2_5厘米，其壁厚1_3毫米，質(zhì)地為塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，前面沒有瓶壁，是個開口，放置在水平面上后，上面為瓶上面5，下面為瓶下面6，兩側(cè)為瓶側(cè)壁16，后面為瓶底15，其內(nèi)由各個面圍成的空腔為瓶腔8。所述的支撐柱9是連接于瓶上面5和瓶下面6正中柱形結(jié)構(gòu)，塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，包括板間支撐18、支撐軸19、生長板卡槽20。板間支撐18圓柱形環(huán)套，內(nèi)徑為2.2-3.2毫米，外徑為3-4毫米，長度為2-3毫米；支撐軸19是支撐柱9中央的軸，圓柱形，直徑為2-3毫米；上下兩個板間支撐18之間的縫隙形成生長板卡槽20，用于卡住生長板10，使得相鄰兩塊生長板10之間相距2-3毫米。所述的透液板11是連接瓶體7兩側(cè)壁和下壁的長方體形板，塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，包括生長板插孔13和透液板體17兩部分，長2.8-6.4厘米，寬1.6-3.8厘米，厚度為1-3毫米。生長板插孔(13)由細胞培養(yǎng)生長板插孔(49)和單克隆篩選生長板插孔(51)組成，是生長板(10)后面伸出的插頭插入后浸浴在液盒(14)內(nèi)培養(yǎng)液中的孔道，長度為0.5-1厘米，寬度為0.1-0.3厘米，位于透液板體17的兩邊，同時也可以和支撐柱(9)形成生長板(10)的支撐結(jié)構(gòu)，相鄰兩個生長板插孔(13)之間上下相距2-3毫米。所述的液盒14是透液板11與瓶底15之間的形成的盒狀結(jié)構(gòu)，由胰蛋白酶溶液槽38、D-hanks液體槽39、篩選培養(yǎng)液槽40、 廢液槽41、緩沖液槽42、生長培養(yǎng)液槽43、轉(zhuǎn)染試劑槽44、質(zhì)粒槽45、質(zhì)粒孵育液槽46、轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽47、注射器針頭插孔48、細胞培養(yǎng)生長板插孔49、廢液排出孔50、單克隆篩選生長板插孔51組成，用于盛納培養(yǎng)液；液盒上腔12為透液板11與瓶上面5之間的空間，是培養(yǎng)液進出液盒14的開口。
所述的挑揀裝置37由吸力膠頭27、瓶蓋轉(zhuǎn)球28、伸縮封管29、玻璃管30、單向進氣閥31、單向控氣閥32、玻璃管頸33、挑細胞管34、進細胞口 35、出細胞口 36組成；吸力膠頭27是市售的膠頭滴管用的膠頭，直徑為0.5-1厘米，長度為1-2厘米，膠頭壁厚度為1-2毫米，膠頭口處圓筒形，直徑為0.5厘米，長度為0.5-1厘米；瓶蓋轉(zhuǎn)球28為直徑為1-1.5厘米的圓球形密封件，由外殼和內(nèi)球組成，外殼圓片形，共2片，每片的直徑為1-1.5厘米，厚度為0.5-0.75厘米，可用螺栓將瓶蓋轉(zhuǎn)球28固定在瓶蓋I底面上，同時兩片外殼通過疊在一起形成的圓柱體，在該圓柱體中央有一個直徑為0.75-1.25厘米的圓球形空間，以便固定直徑為0.75-1.25厘米的內(nèi)球在此空間中被固定并可在其中轉(zhuǎn)動；過內(nèi)球中央有一個直徑為0.5厘米的孔道，是玻璃管30插入的空間，當玻璃管30插入內(nèi)球孔道后，操作者將吸力膠頭27套在玻璃管30 —端，由于內(nèi)球可以自由轉(zhuǎn)動而且密封性能好，操作者就可以控制挑揀裝置的瓶內(nèi)部分進行操作；伸縮封管29為塑料質(zhì)可伸縮的長管，上口直徑為
0.75-1.25厘米，下口直徑為0.5厘米，結(jié)構(gòu)同公知牛奶吸管的彎處，可以伸縮，整個伸縮封管29套在玻璃管30的外面；玻璃管30是直徑為0.5厘米玻璃質(zhì)地的長管，總長度為整個裝置內(nèi)部長度，壁厚1-2毫米，外端從瓶蓋轉(zhuǎn)球28穿出瓶蓋1，開口處有微孔濾膜封住；內(nèi)端連接在玻璃管頸33中央，內(nèi)腔與玻璃管頸33的內(nèi)腔相通；單向進氣閥31位于玻璃管30上伸縮封管29內(nèi)端內(nèi)側(cè)0.5-1厘米處，結(jié)構(gòu)同公知的單向進氣閥，可讓裝置內(nèi)的氣體單向進入玻璃管30腔；單向控氣閥32結(jié)構(gòu)同公知的單向控氣閥，位于玻璃管30內(nèi)端部內(nèi)，當吸力膠頭27被捏或松開時，可以在玻璃管頸33和挑細胞管34形成一股吸力，讓被挑揀的細胞從進細胞口 35進入挑細胞管34，然后由出細胞口 36出來，進而被放置在特定位置；玻璃管頸33是玻璃管30末端延伸的部分，基部結(jié)構(gòu)同玻璃管30，然后逐漸變細，與挑細胞管34相連處的直徑為0.2-0.3厘米，整個玻璃管頸33的長度為1-2厘米；挑細胞管34弧形，弧度為10-30°，長度為1-2厘米，進細胞口 35在前，口徑為1-2毫米，開口方向與玻璃管頸33前端開口方向一致；出細胞口 36在后，口徑為2-3毫米，開口方向與玻璃管頸33前端開口方向相反。所述的制造轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置時，先生產(chǎn)出細胞培養(yǎng)裝置的上下兩部分，然后在下部的里面加上透液板11形成液盒14，插入生長板10，在生長板10的支撐軸孔26上下放置板間支撐18，插入支撐軸19，使支撐軸19下端連接在瓶下面6的內(nèi)表面上，然后將細胞培養(yǎng)裝置的上下兩部分熱合在一起即成。本發(fā)明的有益效果為，轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置利用在細胞培養(yǎng)裝置內(nèi)增加多層可供細胞貼壁生長的生長板，設(shè)置液盒來保證每塊生長板均可使其上的細胞得到充足的培養(yǎng)液，同時設(shè)置可在裝置外由操作人員手動操作的挑揀裝置，從而達到較好完成細胞培養(yǎng)的目的。轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置制作簡單，功能多樣，可操作性強，成本低廉，效果明顯。


下面結(jié)合附圖對本發(fā)明進一步說明。圖1為本發(fā)明轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的整體結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為本發(fā)明轉(zhuǎn)基 因細胞培養(yǎng)裝置的透液板的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3為本發(fā)明轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的支撐柱的結(jié)構(gòu)示意圖。圖4為本發(fā)明轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的生長板的結(jié)構(gòu)示意圖。圖5為本發(fā)明轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的挑揀裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖6為本發(fā)明轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的液盒的結(jié)構(gòu)示意圖。圖中1.瓶蓋，2.瓶口，3.瓶頭，4.瓶頸，5.瓶上面，6.瓶下面，7.瓶體，8.瓶腔，
9.支撐柱，10.生長板，11.透液板，12.液盒上腔，13.生長板插孔，14.液盒，15.瓶底，16.瓶側(cè)壁，17.透液板體，18.板間支撐，19.支撐軸，20.生長板卡槽，21.托層立壁，
22.托層，23.吸液層，24.生長透液貼壁層，25.透液孔，26.支撐軸孔，27.吸力膠頭，28.瓶蓋轉(zhuǎn)球，29.伸縮封管，30.玻璃管，31.單向進氣閥，32.單向控氣閥，33.玻璃管頸，34.挑細胞管，35.進細胞口，36.出細胞口，37.挑揀裝置，38.胰蛋白酶溶液槽，39.D-hanks液體槽，40.篩選培養(yǎng)液槽，41.廢液槽，42.緩沖液槽，43.生長培養(yǎng)液槽，44.轉(zhuǎn)染試劑槽，45.質(zhì)粒槽，46.質(zhì)粒孵育液槽，47.轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽，48.注射器針頭插孔，49.細胞培養(yǎng)生長板插孔，50.廢液排出孔，51.單克隆篩選生長板插孔，52.生長板推拉環(huán)?！?br> 具體實施例方式實施例一:
如圖所示，本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置具體為:由瓶蓋1、瓶口 2、瓶頭3、瓶頸4、瓶上面5、瓶下面6、瓶體7、瓶腔8、支撐柱9、生長板IO、透液板11、液盒上腔12、生長板插孔13、液盒14、瓶底15、瓶側(cè)壁16、透液板體17、板間支撐18、支撐軸19、生長板卡槽20、托層立壁21、托層22、吸液層23、生長透液貼壁層24、透液孔25、支撐軸孔26、吸力膠頭27、瓶蓋轉(zhuǎn)球28、伸縮封管29、玻璃管30、單向進氣閥31、單向控氣閥32、玻璃管頸33、挑細胞管34、進細胞口 35、出細胞口 36、挑揀裝置37、胰蛋白酶溶液槽38、D-hanks液體槽39、篩選培養(yǎng)液槽40、廢液槽41、緩沖液槽42、生長培養(yǎng)液槽43、轉(zhuǎn)染試劑槽44、質(zhì)粒槽45、質(zhì)粒孵育液槽46、轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽47、注射器針頭插孔48、細胞培養(yǎng)生長板插孔49、廢液排出孔50、單克隆篩選生長板插孔51、生長板推拉環(huán)52組成。瓶蓋I外形塑料質(zhì)地，外形及結(jié)構(gòu)同公知的瓶蓋，蓋口內(nèi)表面有凸出的旋絲，可與瓶頭3外表面外凸的旋絲相互旋接在一起，以便瓶蓋I將瓶口 2封住，防止瓶腔8中液體流出。瓶口 2是瓶頭3游離端的開口，即外加液體注入瓶腔8或瓶腔8內(nèi)的液體流出的開口。瓶頭3是瓶頸4末端向外伸出的一段圓環(huán)形結(jié)構(gòu)，內(nèi)表面光滑，外表面有外凸的旋絲。瓶頸4是瓶頭3和瓶體7之間相連接的部分，下面長，上面短，使得瓶頭3位于瓶體7中軸面的上方，以免細胞培養(yǎng)裝置放置在水平面上后，液體從瓶口 2流出，瓶頸4內(nèi)腔與瓶頭3和瓶腔8連成一體。瓶體7長方體形，長5-15厘米，寬3-8厘米，高2-5厘米，其壁厚1-3毫米，質(zhì)地為塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，前面沒有瓶壁，是個開口，放置在水平面上后，上面為瓶上面5，下面為瓶下面6，兩側(cè)為瓶側(cè)壁16，后面為瓶底15，其內(nèi)由各個面圍成的空腔為瓶腔8。支撐柱9是連接于瓶上面5和瓶下面6正中柱形結(jié)構(gòu)，塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，包括板間支撐18、支撐軸19、生長板卡槽20。板間支撐18圓柱形環(huán)套，內(nèi)徑為2.2-3.2毫米，外徑為3_4毫米，長度為2_3毫米；支撐軸19是支撐柱9中央的軸，圓柱形，直徑為2-3毫米；上下兩個板間支撐18之間的縫隙形成生長板卡槽20，用于卡住生長板10，使得相鄰兩塊生長板10之間相距2-3毫米。透液板11是連接瓶體7兩側(cè)壁和下壁的長方體形板，塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，包括生長板插孔13和透液板體17兩部分，長2.8-6.4厘米，寬1.6-3.8厘米，厚度為1_3毫米。生長板插孔(13)由細胞培養(yǎng)生長板插孔(49)和單克隆篩選生長板插孔(51)組成，是生長板(10)后面伸出的插頭插入后浸浴在液盒(14)內(nèi)培養(yǎng)液中的孔道，長度為0.5-1厘米，寬度為0.1-0.3厘米，位于透液板體17的兩邊，同時也可以和支撐柱(9)形成生長板(10)的支撐結(jié)構(gòu)，相鄰兩個生長板插孔(13)之間上下相距2-3毫米。液盒14是透液板11與瓶底15之間的形成的盒狀結(jié)構(gòu)，用于盛納培養(yǎng)液。液盒上腔12為透液板11與瓶上面5之間的空間，是培養(yǎng)液進出液盒14的開口。液盒14由胰蛋白酶溶液槽38、D-hanks液體槽39、篩選培養(yǎng)液槽40、廢液槽41、緩沖液槽42、生長培養(yǎng)液槽43、轉(zhuǎn)染試劑槽44、質(zhì)粒槽45、質(zhì)粒孵育液槽46、轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽47、注射器針頭插孔48、細胞培養(yǎng)生長板插孔49、廢液排出孔50、單克隆篩選生長板插孔51組成，胰蛋白酶溶液槽38位于液盒14上部一端，容積為5-10毫升，內(nèi)盛有胰蛋白酶，胰蛋白酶的量根據(jù)細胞傳代所需胰蛋白酶溶液的量來定，所用比例為0.25%。即按質(zhì)量百分數(shù)于100毫升D-hanks液體中添加0.25克胰蛋白酶。D-hanks液體槽39容積為5-10毫升，內(nèi)盛無鈣鎂離子的平衡鹽緩沖液，pH 8.0。篩選培養(yǎng)液槽40容積為15-40毫升，用于盛裝單克隆篩選生長板所需要的培養(yǎng)液，真核細胞篩選用氨基糖苷類抗生素G418，濃度為400-500微克/毫升；其上部有胰蛋白酶溶液槽38和D-hanks液體槽39，前面壁即透液板體17上的生長板插孔13，有5-7個，又稱單克隆篩選生長板插孔51，每個單克隆篩選生長板插孔51長度為0.5-1厘米，寬度為0.1-0.3厘米，是培養(yǎng)單克隆細胞的生長板10插入和培養(yǎng)液進入生長板10的地方。廢液槽41容積為20-50毫升，是收集轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的各種廢液的空間，其下部有廢液排出孔50，以便廢液儲集量廢液槽41容積一半時，在超凈工作臺上，將廢液用無菌注射器抽出。廢液排出孔50位于廢液槽41下部，是個直徑為1-2毫米、長度為3-5毫米、壁厚0.1-0.5毫米的玻璃管，廢液排出孔50內(nèi)端開口于廢液槽41腔，外端口被一個直徑為1-2毫米的橡膠皮套套住，以免細胞培養(yǎng)過程中外界細菌進入和廢液溢出。緩沖液槽42容積為20-50毫升，內(nèi)盛PBS磷酸鹽緩沖液。因為在轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)過程中，每進行一次操作，就必須對挑揀裝置進行清洗，所需要的緩沖液較多，但是由于轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的空間有限，為了解決這一難題，在緩沖液槽42上部設(shè)置有注射器針頭插孔48，以便注射器插入，同時注射器射出的液流也可以較好地沖洗挑揀裝置等需要清洗的部件。注射器針頭插孔48的結(jié)構(gòu)同廢液排出孔50，也是I個直徑為1-2毫米、長度為3-5毫米、壁厚0.1-0.5毫米的玻璃管，內(nèi)端開口于緩沖液槽42，外端口被一個直徑為1-2毫米的橡膠皮套套住，以免細胞培養(yǎng)過程中外界細菌進入和緩沖液溢出。生長培養(yǎng)液槽43，容積為15-40毫升，用于盛裝細胞培養(yǎng)生長板所需要的培養(yǎng)液，例如牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液按體積百分數(shù)于90毫升DMEM培養(yǎng)基中添加10毫升標準胎牛血清，其上部有轉(zhuǎn)染試劑槽44、質(zhì)粒槽45、質(zhì)粒孵育液槽46和轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽47，前面壁即透液板體17上的生長板插孔13只有I個，又稱細胞培養(yǎng)生長板插孔49，每個細胞培養(yǎng)生長板插孔49長度為0.5-1厘米，寬度為0.1-0.3厘米，是培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因細胞的生長板10插入和培養(yǎng)液進入生長板10的地方。轉(zhuǎn)染試劑槽44容積為3-5毫升，內(nèi)盛有PEI聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑，該試劑排除了細胞培養(yǎng)中使用血清對轉(zhuǎn)染效率的影響，且該試劑轉(zhuǎn)染效率高、成本低、重復(fù)性好，能夠很好的適用于牛成纖維細胞等的轉(zhuǎn)染研究。質(zhì)粒槽45容積為3-5毫升，內(nèi)盛有根據(jù)轉(zhuǎn)基因的目的進行選擇的含有外源基因且希望其在宿主細胞中表達的質(zhì)粒載體，比如線性化處理后的IRES-EGFP質(zhì)粒綠色熒光蛋白基因的質(zhì)粒表達載體，質(zhì)粒濃度為I微克/微升，采用這種限制性內(nèi)切酶提前對綠色熒光蛋白的表達載體IRES-EGFP進行酶切處理，使其成為線性化的載體片段，從而能夠通過轉(zhuǎn)染，更好地整合到牛成纖維細胞的基因組中，提高綠色熒光蛋白穩(wěn)定表達的效率。質(zhì)粒孵育液槽46容積為3-5毫升，內(nèi)盛有DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基)，為質(zhì)粒的孵育溶液。轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽47容積為3-5毫升，內(nèi)盛有DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基)，為轉(zhuǎn)染試劑的孵育溶液。生長板推拉環(huán)52是直徑為1-5毫米通過環(huán)柄連接在生長板10的前面的玻璃環(huán)，每塊生長板前面設(shè)置3個生長板推拉環(huán)52，分別位于生長板10前面中間及中間與邊緣之間的中間，當需要觀察某一塊生長板10上轉(zhuǎn)基因細胞生長情況時，可以用挑揀裝置拽動生長板10，讓生長板10在支撐軸19上沿支撐軸孔26移動，并被拉至裝置可以用倒置顯微鏡觀察的位置。生長板10由托層立壁21、生長透液貼壁層24、吸液層23、托層22、透液孔25、支撐軸孔26組成，長4-14厘米，寬2.5-7厘米，厚1_3毫米，從上到下依次為生長透液貼壁層24、吸液層23、托層22。生長透液貼壁層24是一層纖維膜，厚0.01-0.1毫米，上面有很多透液孔25，一方面細胞 只有幾個微米大小，0.01-0.1毫米的厚度足以為細胞生長提供可以浸沒細胞的深度的培養(yǎng)液，另一方面，吸液層23中從液盒14中吸附過來的培養(yǎng)液可以通過透液孔25很順利并源源不斷滲透到膜的外表面，以利接種在膜外表面上細胞的生長；吸液層23是一層脫脂棉，厚度為0.69-1.9毫米，結(jié)合液盒14內(nèi)液體的壓力可以吸附培養(yǎng)液，形成生長板10的墊層；托層22塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，厚0.3-1毫米，前緣和兩側(cè)緣向上折起，形成托層立壁21，以免培養(yǎng)液向外滲出。支撐軸孔26是生長板10上與支撐軸19相對應(yīng)處的長條孔，長度為3-13厘米、寬度為2.1-3.1毫米，用于支撐軸19穿插生長板10后，與板間支撐18—起將生長板10固定在特定位置，以及生長板10可以以支撐軸孔26邊緣和支撐軸19形成滑道，從板與板之間推進或拉出，以便用倒置顯微鏡觀察生長板上細胞的生長情況，或者在生長板10進行清洗死亡細胞、挑揀單克隆細胞等操作。挑揀裝置37由吸力膠頭27、瓶蓋轉(zhuǎn)球28、伸縮封管29、玻璃管30、單向進氣閥31、單向控氣閥32、玻璃管頸33、挑細胞管34、進細胞口 35、出細胞口 36組成。吸力膠頭27是市售的膠頭滴管用的膠頭，直徑為0.5-1厘米，長度為1-2厘米，膠頭壁厚度為1-2毫米，膠頭口處圓筒形，直徑為0.5厘米，長度為0.5-1厘米，以便吸力膠頭27在挑揀轉(zhuǎn)基因細胞時套在玻璃管外端，通過捏松膠頭，產(chǎn)生吹力和吸力，進而移動所需要的陽性克隆細胞株到指定的生長板
10。挑揀完畢后，將吸力膠頭27取下，在火焰旁在玻璃管30外端口粘貼一層微孔濾膜，以便讓外界空氣中的氧氣進入培養(yǎng)裝置內(nèi)，供細胞生長利用。瓶蓋轉(zhuǎn)球28為直徑為1-1.5厘米的圓球形密封件，由外殼和內(nèi)球組成，外殼圓片形，共2片，每片的直徑為1-1.5厘米，厚度為0.5-0.75厘米，可用螺栓將瓶蓋轉(zhuǎn)球28固定在瓶蓋I底面上，同時兩片外殼通過疊在一起形成的圓柱體，在該圓柱體中央有一個直徑為0.75-1.25厘米的圓球形空間，以便固定直徑為0.75-1.25厘米的內(nèi)球在此空間中被固定并可在其中轉(zhuǎn)動。過內(nèi)球中央有一個直徑為0.5厘米的孔道，是玻璃管30插入的空間，當玻璃管30插入內(nèi)球孔道后，操作者將吸力膠頭27套在玻璃管30 —端，由于內(nèi)球可以自由轉(zhuǎn)動而且密封性能好，操作者就可以控制挑揀裝置的瓶內(nèi)部分進行操作。伸縮封管29為塑料質(zhì)可伸縮的長管，上口直徑為0.75-1.25厘米，下口直徑為0.5厘米，結(jié)構(gòu)同公知牛奶吸管的彎處，可以伸縮，整個伸縮封管29套在玻璃管30的外面，一方面可固定玻璃管30，另一方面可以進一步密封瓶口 2，防止細菌從瓶蓋轉(zhuǎn)球28中的縫隙進入裝置內(nèi)，也就是在玻璃管30抽出或插進瓶蓋轉(zhuǎn)球28時增設(shè)一道屏障，以減小細胞被污染的幾率。玻璃管30是直徑為0.5厘米玻璃質(zhì)地的長管，總長度為整個裝置內(nèi)部長度，壁厚1-2毫米，壁上具有最小為I毫米的刻度，以便挑揀過程中精確吸取定量液體，外端從瓶蓋轉(zhuǎn)球28穿出瓶蓋1，開口處有微孔濾膜封住，以供應(yīng)細胞生長過程中所需要的氧氣；內(nèi)端連接在玻璃管頸33中央，內(nèi)腔與玻璃管頸33的內(nèi)腔相通。單向進氣閥31位于玻璃管30上伸縮封管29內(nèi)端內(nèi)側(cè)0.5-1厘米處，結(jié)構(gòu)同公知的單向進氣閥，可讓裝置內(nèi)的氣體進入玻璃管30腔。單向控氣閥32結(jié)構(gòu)同公知的單向控氣閥，位于玻璃管30內(nèi)端部內(nèi)，當吸力膠頭27被捏或松開時，可以在玻璃管頸33和挑細胞管34形成一股吸力，讓被挑揀的細胞從進細胞口 35進入挑細胞管34，然后由出細胞口 36出來，進而被放置在特定位置。玻璃管頸33是玻璃管30末端延伸的部分，基部結(jié)構(gòu)同玻璃管30，然后逐漸變細，與挑細胞管34相連處的直徑為0.2-0.3厘米，整個玻璃管頸33的長度為1_2厘米。挑細胞管34弧形，弧度為10-30°，長度為1-2厘米，進細胞口 35在前，口徑為1_2毫米，開口方向與玻璃管頸33前端開口方向一致；出細胞口 36在后，口徑為2-3毫米，開口方向與玻璃管頸33前端開口方向相反。制造轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置時，先生產(chǎn)出細胞培養(yǎng)裝置的上下兩部分，然后在下部的里面加上透液板11形成液盒14，插入生長板10，在生長板10的支撐軸孔26上下放置板間支撐18，插入支撐軸19，使支撐軸19下端連接在瓶下面6的內(nèi)表面上，然后將細胞培養(yǎng)裝置的上下兩部分熱合在一起即成。為驗證本發(fā)明的實用性，即轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置可執(zhí)行細胞培養(yǎng)、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染及篩選功能，在轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置應(yīng)用過程中，以牛成纖維細胞為例，經(jīng)過多次實驗，優(yōu)選的具體操作如下:
①轉(zhuǎn)染前I天，取對數(shù)生長期的牛成纖維細胞接種入轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的生長板10上，之后細胞的清洗、消化及培養(yǎng)分別采用液盒14不同槽中的PBS磷酸鹽緩沖液、0.25%胰蛋白酶及牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液，12小時后觀察細胞的生長情況，以細胞貼壁面積占據(jù)整個生長板10的70-80%時為最佳的細胞生長及轉(zhuǎn)染密度，挑選生長狀態(tài)最好的細胞置于下面的生長板10上進行下一步轉(zhuǎn)染的操作；
②于轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的液盒14相應(yīng)槽中，分別盛有100微升DMEM培養(yǎng)基，其中I槽中盛有8微升的PEI轉(zhuǎn)染試劑，另外I槽中加入4微升濃度為I微克/微升線性化處理后的IRES-EGFP質(zhì)粒，在相應(yīng) 的孵育槽中分別孵育5分鐘。將2個槽中的試劑進行充分的混勻，并孵育15分鐘，從而獲得了 PEI轉(zhuǎn)染試劑與IRES-EGFP質(zhì)粒的復(fù)合物；
③于步驟②進行的同時，取步驟①中選取好的待轉(zhuǎn)染的細胞，棄掉覆蓋在其上的牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液，采用2毫升的PBS磷酸鹽緩沖液覆蓋細胞，并輕輕晃轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置以清洗細胞，然后棄掉PBS磷酸鹽緩沖液，并重復(fù)I次該清洗步驟，之后于待轉(zhuǎn)染的生長板10上從篩選培養(yǎng)液槽40中引入足量的牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液；
④采用步驟②用挑揀裝置37將獲得的PEI轉(zhuǎn)染試劑與IRES-EGFP質(zhì)粒的復(fù)合物逐滴滴加到待轉(zhuǎn)染的細胞表面，邊滴加邊輕晃轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的生長板10。然后置于37°C的CO2細胞培養(yǎng)箱中孵育4小時后，棄掉轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置中生長板10的混合溶液，以2毫升的試劑瓶中的牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液替換之。并于37°C的CO2細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)；
⑤繼續(xù)培養(yǎng)48小時后棄掉覆蓋在其上的牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液，采用2毫升的PBS磷酸鹽緩沖液覆蓋細胞，并輕輕晃轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置以清洗細胞，然后棄掉PBS磷酸鹽緩沖液，并重復(fù)I次該清洗步驟，于細胞的表面加入0.5毫升0.25%胰蛋白酶細胞消化液，1-2分鐘之后采用2毫升牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液終止消化反應(yīng)，并將細胞吹打混勻，然后接種傳代至轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置中的生長板10中，繼續(xù)添加牛成纖維細胞生長所需培養(yǎng)液使該生長板10中的最終的溶液體積為20毫升。并于37°C的CO2細胞培養(yǎng)箱中繼
續(xù)培養(yǎng)；
⑥繼續(xù)培養(yǎng)24小時之后，轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置中的生長板10中細胞呈現(xiàn)出貼壁生長的狀態(tài)時，棄掉覆蓋于細胞上的溶液，以20毫升試劑瓶中的濃度為400-500微克/毫升的真核細胞篩選用氨基糖苷類抗生素G418溶液替換之，以進行藥物篩選。每隔2天更換I次G418溶液，于7天左右即可于倒置熒光顯微鏡下能夠觀察到若干由單個細胞形成的發(fā)出綠色熒光的陽性克隆細胞集落。即為本試劑盒制備的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因牛成纖維細胞株。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明 精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)，本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書其等效物界定。
權(quán)利要求
1.轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置由瓶蓋(I)、瓶口(2)、瓶頭(3)、瓶頸(4)、瓶上面(5)、瓶下面(6)、瓶體(7)、瓶腔(8)、支撐柱(9)、生長板(10)、透液板(11)、液盒上腔(12)、生長板插孔(13)、液盒(14)、瓶底(15)、瓶側(cè)壁(16)、透液板體(17)、板間支撐(18)、支撐軸(19)、生長板卡槽(20)、托層立壁(21)、托層(22)、吸液層(23)、生長透液貼壁層(24)、透液孔(25)、支撐軸孔(26)、吸力膠頭(27)、瓶蓋轉(zhuǎn)球(28)、伸縮封管(29)、玻璃管(30)、單向進氣閥(31)、單向控氣閥(32)、玻璃管頸(33)、挑細胞管(34)、進細胞口(35)、出細胞口(36)、挑揀裝置(37)、胰蛋白酶溶液槽(38)、D-hanks液體槽(39)、篩選培養(yǎng)液槽(40)、廢液槽(41)、緩沖液槽(42)、生長培養(yǎng)液槽(43)、轉(zhuǎn)染試劑槽(44)、質(zhì)粒槽(45)、質(zhì)粒孵育液槽(46)、轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽(47)、注射器針頭插孔(48)、細胞培養(yǎng)生長板插孔(49)、廢液排出孔(50)、單克隆篩選生長板插孔(51)、生長板推拉環(huán)(52)組成，其特征在于:生長板(10)由托層立壁(21)、生長透液貼壁層(24)、吸液層(23)、托層(22)、透液孔(25)、支撐軸孔(26)組成，生長板(10)長4-14厘米，寬2.5-7厘米，厚1-3毫米，包括三層結(jié)構(gòu)，從上到下依次為生長透液貼壁層(24)、吸液層(23)、托層(22);生長透液貼壁層(24)是一層纖維膜，厚0.01-0.1毫米，上面有很多透液孔(25)，吸液層(23)中從液盒(14)中吸附過來的培養(yǎng)液可以通過透液孔(25)順利地滲透到生長透液貼壁層(24)膜的外表面，以利接種在膜外表面上細胞的生長；吸液層(23)是一 層脫脂棉，厚度為0.69-1.9毫米，可以吸附培養(yǎng)液；托層(22)塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，厚0.3-1毫米,前緣和兩側(cè)緣向上折起,形成托層立壁(21)，以免培養(yǎng)液向外滲出；支撐軸孔(26)是生長板(10)上與支撐軸(19)相對應(yīng)處的長條孔，長度為3-13厘米、寬度為2.1-3.1毫米，用于支撐軸(19)穿插生長板(10)后，與板間支撐(18)—起將生長板(10)固定在特定位置，以及生長板(10)可以以支撐軸孔(26)邊緣和支撐軸(19)形成滑道而從板與板之間推進或拉出，以便觀察生長板上細胞的生長情況，或者在生長板(10)進行清洗死亡細胞、挑揀單克隆細胞等操作。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的瓶蓋(I)外形塑料質(zhì)地，外形及結(jié)構(gòu)同公知的瓶蓋，蓋口內(nèi)表面有凸出的旋絲，可與瓶頭(3)外表面外凸的旋絲相互旋接在一起，以便瓶蓋(I)將瓶口( 2 )封住，防止瓶腔(8 )中液體流出；瓶口( 2 )是瓶頭(3)游離端的開口，S卩外加液體注入瓶腔(8)或瓶腔(8)內(nèi)的液體流出的開口 ；瓶頭(3)是瓶頸(4)末端向外伸出的一段圓環(huán)形結(jié)構(gòu)，內(nèi)表面光滑，外表面有外凸的旋絲；瓶頸(4)是瓶頭(3)和瓶體(7)之間相連接的部分，下面長，上面短，使得瓶頭(3)位于瓶體(7)中軸面的上方，以免轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置放置在水平面上后，液體從瓶口(2)流出，瓶頸(4)內(nèi)腔與瓶頭(3)和瓶腔(8)連成一體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的瓶體(7)長方體形，長5-15厘米，寬3-8厘米，高2-5厘米，其壁厚1-3毫米，質(zhì)地為塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，前面沒有瓶壁，是個開口，放置在水平面上后，瓶體(7)上面為瓶上面(5)，下面為瓶下面(6)，兩側(cè)為瓶側(cè)壁(16)，后面為瓶底(15)，瓶體(7)內(nèi)由各個面圍成的空腔為瓶腔(8)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的支撐柱(9)是連接于瓶上面(5)和瓶下面(6)正中柱形結(jié)構(gòu)，塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，包括板間支撐(18)、支撐軸(19)、生長板卡槽(20);板間支撐(18)圓柱形環(huán)套，內(nèi)徑為2.2-3.2毫米，外徑為3-4毫米，長度為2-3毫米；支撐軸(19)是支撐柱(9)中央的軸，圓柱形，直徑為2-3毫米；上下兩個板間支撐(18)之間的縫隙形成生長板卡槽(20)，用于卡住生長板(10)，使得相鄰兩塊生長板(10)之間相距2-3毫米。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的透液板(11)是連接瓶體(7)兩側(cè)壁和下壁的長方體形板，塑料質(zhì)地或玻璃質(zhì)地，優(yōu)選玻璃質(zhì)地，包括生長板插孔(13)和透液板體(17)兩部分，長2.8-6.4厘米，寬1.6-3.8厘米，厚度為1_3毫米；生長板插孔(13)由細胞培養(yǎng)生長板插孔(49)和單克隆篩選生長板插孔(51)組成，是生長板(10)后面 伸出的插頭插入后浸浴在液盒(14)內(nèi)培養(yǎng)液中的孔道，長度為0.5-1厘米，寬度為0.1-0.3厘米，位于透液板體17的兩邊，同時也可以和支撐柱(9)形成生長板(10)的支撐結(jié)構(gòu)，相鄰兩個生長板插孔(13)之間上下相距2-3毫米。
6.根據(jù)權(quán) 利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的液盒(14)是透液板(11)與瓶底(15 )之間的形成的盒狀結(jié)構(gòu)，由胰蛋白酶溶液槽(38 )、D-hanks液體槽(39 )、篩選培養(yǎng)液槽(40)、廢液槽(41)、緩沖液槽(42)、生長培養(yǎng)液槽(43)、轉(zhuǎn)染試劑槽(44)、質(zhì)粒槽(45)、質(zhì)粒孵育液槽(46)、轉(zhuǎn)染試劑孵育液槽(47)、注射器針頭插孔(48)、細胞培養(yǎng)生長板插孔(49)、廢液排出孔(50)、單克隆篩選生長板插孔(51)組成，用于盛納培養(yǎng)液；液盒上腔(12)為透液板(11)與瓶上面(5)之間的空間，是培養(yǎng)液進出液盒(14)的開口。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的挑揀裝置(37)由吸力膠頭(27)、瓶蓋轉(zhuǎn)球(28)、伸縮封管(29)、玻璃管(30)、單向進氣閥(31)、單向控氣閥(32)、玻璃管頸(33)、挑細胞管(34)、進細胞口(35)、出細胞口(36)組成；吸力膠頭(27)是市售的膠頭滴管用的膠頭，直徑為0.5-1厘米，長度為1-2厘米，膠頭壁厚度為1-2毫米，膠頭口處圓筒形，直徑為0.5厘米，長度為0.5-1厘米；瓶蓋轉(zhuǎn)球(28)為直徑為1-1.5厘米的圓球形密封件，由外殼和內(nèi)球組成，外殼圓片形，共2片，每片的直徑為1-1.5厘米，厚度為0.5-0.75厘米，可用螺栓將瓶蓋轉(zhuǎn)球(28)固定在瓶蓋(I)底面上，同時兩片外殼通過疊在一起形成的圓柱體，在該圓柱體中央有一個直徑為0.75-1.25厘米的圓球形空間，以便固定直徑為0.75-1.25厘米的內(nèi)球在此空間中被固定并可在其中轉(zhuǎn)動；過內(nèi)球中央有一個直徑為0.5厘米的孔道，是玻璃管(30)插入的空間，當玻璃管(30)插入內(nèi)球孔道后，操作者將吸力膠頭(27)套在玻璃管(30)—端，由于內(nèi)球可以自由轉(zhuǎn)動而且密封性能好，操作者就可以控制挑揀裝置的瓶內(nèi)部分進行操作；伸縮封管(29)為塑料質(zhì)可伸縮的長管，上口直徑為0.75-1.25厘米，下口直徑為0.5厘米，結(jié)構(gòu)同公知牛奶吸管的彎處，可以伸縮，整個伸縮封管(29)套在玻璃管(30)的外面；玻璃管(30)是直徑為0.5厘米玻璃質(zhì)地的長管，總長度為整個裝置內(nèi)部長度，壁厚1-2毫米，外端從瓶蓋轉(zhuǎn)球(28 )穿出瓶蓋(I)，開口處有微孔濾膜封?。粌?nèi)端連接在玻璃管頸(33)中央，內(nèi)腔與玻璃管頸(33)的內(nèi)腔相通；單向進氣閥(31)位于玻璃管(30 )上伸縮封管(29 )內(nèi)端內(nèi)側(cè)0.5-1厘米處，結(jié)構(gòu)同公知的單向進氣閥，可讓裝置內(nèi)的氣體單向進入玻璃管(30 )腔；單向控氣閥(32 )結(jié)構(gòu)同公知的單向控氣閥，位于玻璃管(30)內(nèi)端部內(nèi)，當吸力膠頭(27)被捏或松開時，可以在玻璃管頸(33)和挑細胞管(34)形成一股吸力，讓被挑揀的細胞從進細胞口(35)進入挑細胞管(34)，然后由出細胞口(36)出來，進而被放置在特定位置；玻璃管頸(33)是玻璃管(30)末端延伸的部分，基部結(jié)構(gòu)同玻璃管(30)，然后逐漸變細，與挑細胞管(34)相連處的直徑為0.2-0.3厘米，整個玻璃管頸(33)的長度為1-2厘米；挑細胞管(34)弧形，弧度為10-30°，長度為1_2厘米，進細胞口(35)在前，口徑為1-2毫米，開口方向與玻璃管頸(33)前端開口方向一致；出細胞口(36)在后，口徑為2-3毫米，開口方向與玻璃管頸(33)前端開口方向相反。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的制造轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置時，先生產(chǎn)出轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的上下兩部分，然后在下部的里面加上透液板(11)形成液盒(14)，插入生長板(10)，在生長板(10)的支撐軸孔(26)上下放置板間支撐(18)，插入支 撐軸(19)，使支撐軸(19)下端連接在瓶下面(6)的內(nèi)表面上，然后將轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置的上下兩部分熱合在一起即成。
全文摘要
轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置，屬于醫(yī)療和實驗室設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域，由瓶蓋、瓶口、瓶頭、瓶頸、瓶上面、瓶下面、瓶體、瓶腔、支撐柱、生長板、透液板、液盒上腔、生長板插孔、液盒、瓶底、瓶側(cè)壁、透液板體、板間支撐、支撐軸、生長板卡槽、托層立壁、托層、吸液層、生長透液貼壁層、透液孔、支撐軸孔、挑揀裝置組成，其特征在于生長板由托層立壁、生長透液貼壁層、吸液層、托層、透液孔、支撐軸孔組成，生長透液貼壁層是一層纖維膜，上面有很多透液孔，以利接種在膜外表面上細胞的生長；吸液層可以吸附培養(yǎng)液；托層塑料前緣和兩側(cè)緣向上折起，形成托層立壁，以免培養(yǎng)液向外滲出。轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)裝置制作簡單，功能多樣，可操作性強，成本低廉，效果明顯。
文檔編號C12M1/18GK103146578SQ20131010635
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月29日
發(fā)明者嚴云勤, 佟慧麗, 李樹峰, 金慧然, 李光鵬 申請人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)