專利名稱：一種微生物固態(tài)發(fā)酵花生粕制備花生肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于花生蛋白加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法。
背景技術(shù)：
花生是我國(guó)重要的油料作物和食用作物，產(chǎn)量和出口量高居世界首位。目前，中國(guó)對(duì)花生的利用多在食用油脂的提取一面，對(duì)花生蛋白的利用較少?；ㄉ鞍资腔ㄉ谔崛∮椭⒅竞蟮氖Ｓ辔镔|(zhì)，也稱之為花生柏?；ㄉ牡鞍踪|(zhì)含量為25% 30%，花生蛋白含有人體必需的八種氨基酸，精氨酸含量高于其它堅(jiān)果，生物學(xué)效價(jià)高于大豆。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的花生蛋白產(chǎn)品主要是花生蛋白粉，一般是作為食品加工中的基礎(chǔ)原料?；ㄉ鞍追鄞嬖谥灰孜?、生理活性較差等缺點(diǎn)，所以在花生蛋白粉的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用這一巨大的潛在蛋白資源生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品成了當(dāng)務(wù)之急。研究表明，花生蛋白活性肽是有3 6個(gè)氨基酸組成的，分子量在130 5000Dalton,主要在500 2000 Dalton間呈正態(tài)分布的低聚肽，其呈粉末狀，無(wú)結(jié)塊現(xiàn)象，無(wú)雜質(zhì)，無(wú)異味，且有花生原有的淡淡的清香氣味，具有良好的水溶性，持水性，能在PH2 10的條件下完全溶解?；ㄉ鞍谆钚噪哪芘c其他食品配料完全融合，并保持各有的物化營(yíng)養(yǎng)特性?；ㄉ鞍谆钚噪陌被峤M成均衡，全面，含人體必需的8種氨基酸，特別是谷氨酸和天門冬氨酸的含量較高，對(duì)促進(jìn)人體腦細(xì)胞發(fā)育和增加記憶力都有良好的作用?；ㄉ被崤c人體氨基酸的組成非常相近，極易被人體吸收利用，而且不含膽固醇。具有易于消化吸收、恢復(fù)體力、增強(qiáng)免疫力、降低血壓、促進(jìn)脂肪代謝、保健養(yǎng)生等功效?；ㄉ鳛閮?yōu)質(zhì)食品來(lái)源，花生肽具有它特有的優(yōu)勢(shì)。當(dāng)前常見(jiàn)的花生肽的制備方法有酶解法和微生物發(fā)酵法。酶解法具有產(chǎn)品安全性高、生產(chǎn)條件溫和、水解易控制、可定位生產(chǎn)特定的花生肽等優(yōu)點(diǎn)，其缺點(diǎn)是花生蛋白利用率不高。酶解法僅限于少數(shù)幾種微生物蛋白酶、動(dòng)物蛋白酶和植物蛋白酶，酶解產(chǎn)肽率相對(duì)較低且成本高,肽酶價(jià)格和脫苦成本也都相應(yīng)增加。微生物發(fā)酵法因其把蛋白酶的發(fā)酵生產(chǎn)和花生肽的酶解生產(chǎn)結(jié)合在一起，降低了花生肽的生產(chǎn)成本。微生物發(fā)酵法生產(chǎn)花生肽主要利用的是發(fā)酵菌株的產(chǎn)酶及酶解能力，目前應(yīng)用較廣的微生物主要是枯草桿菌1389、放線菌166、棲土曲霉3942、黑曲霉3350和地衣型芽抱桿菌2709等。應(yīng)用于微生物發(fā)酵生產(chǎn)花生肽的技術(shù)方法，當(dāng)前主要是液態(tài)發(fā)酵技術(shù)。液態(tài)發(fā)酵液產(chǎn)品提取后產(chǎn)生大量廢液，生產(chǎn)規(guī)模越大，廢液越多，污染越重。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決現(xiàn)有的液態(tài)發(fā)酵技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法，包括以下步驟1、制備混合發(fā)酵菌枯草芽孢桿菌、熱帶假絲酵母、黑曲霉和乳酸鏈球菌分別活化培養(yǎng)；將花生柏粉、淀粉、NaCl和水按照50 10 I 150的重量比混合，調(diào)節(jié)pH值為7. O
7.5，121 °C滅菌30min，將四種活化菌種以1:1:1:1的重量比接入，搖瓶培養(yǎng)48h得混合發(fā)酵菌種；
2、將花生柏粉碎，過(guò)篩，加入麩皮、水，接種混合發(fā)酵菌種，制成固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基；
3、將步驟2的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基于40 42°C振搖發(fā)酵72 80h，得發(fā)酵物料，發(fā)酵物料經(jīng)90 95°C熱風(fēng)烘10 12h至干燥，得到干燥發(fā)酵物料粗制品；
4、將上述發(fā)酵物料粗制品經(jīng)膜分離、真空濃縮、冷凍干燥即得到花生肽成品。所述的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基各種成分按照重量份為花生柏60 70份，水20 30份，麩皮6 10份，混合發(fā)酵菌種5 6份。本發(fā)明的微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法，解決了傳統(tǒng)液態(tài)發(fā)酵法發(fā)酵液產(chǎn)品提取后產(chǎn)生大量廢液，污染嚴(yán)重的難題，具有節(jié)水、節(jié)能的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，且沒(méi)有廢液產(chǎn)生，屬于清潔生產(chǎn)技術(shù)，而且其投資規(guī)模和生產(chǎn)成本要比液態(tài)法低，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本實(shí)施例的微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法，具體步驟如下所述
1、微生物菌種的選擇、活化培養(yǎng)
選擇產(chǎn)酶能力強(qiáng)，且有效互補(bǔ)的菌種枯草芽孢桿菌、熱帶假絲酵母、黑曲霉和乳酸鏈球菌，活化培養(yǎng)
將枯草芽孢桿菌菌種接種于LB培養(yǎng)基于30°C,振蕩培養(yǎng)48h,備用；
熱帶假絲酵母菌菌種接種于LB培養(yǎng)基搖瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度35°C，振蕩培養(yǎng)48h備用； 黑曲霉接種于PDA培養(yǎng)基于37°C靜止培養(yǎng)36h，備用；
乳酸鏈球菌接種于MRS培養(yǎng)基于37 °C靜止厭氧培養(yǎng)72h，備用；
2、制備混合發(fā)酵菌種
將花生柏粉、淀粉、NaCl和水按照50 10 1: 150的重量比混合，調(diào)節(jié)pH值為7. O 7.5，121°C滅菌30min，將步驟I中的四種活化菌種等重量比接入(四種菌的接種比例為重量比1:1:1:1 )，搖瓶培養(yǎng)48h得混合發(fā)酵菌種，備用；
3、將花生柏粉碎，過(guò)篩，加入麩皮、水，接種混合發(fā)酵菌種，制成固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基；發(fā)酵體系各種成分按照重量份為花生柏70份，30份，麩皮10份，混合發(fā)酵菌種6份；
4、將固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基于42°C振搖發(fā)酵80h，得發(fā)酵物料，發(fā)酵物料經(jīng)93°C熱風(fēng)烘IOh至干燥，得到干燥發(fā)酵物料粗制品；
5、將上述粗制品經(jīng)膜分離、真空濃縮、冷凍干燥即得到花生肽成品。實(shí)施例2本實(shí)施例的微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法，具體步驟如下所述1、微生物菌種的選擇、活化培養(yǎng)
選擇產(chǎn)酶能力強(qiáng)，且有效互補(bǔ)的菌種枯草芽孢桿菌、熱帶假絲酵母、黑曲霉和乳酸鏈球菌，活化培養(yǎng) 將枯草芽孢桿菌菌種接種于LB培養(yǎng)基于30°C,振蕩培養(yǎng)48h,備用；
熱帶假絲酵母菌菌種接種于LB培養(yǎng)基搖瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度35°C，振蕩培養(yǎng)48h，備用； 黑曲霉接種于PDA培養(yǎng)基于37°C靜止培養(yǎng)36h，備用；
乳酸鏈球菌接種于MRS培養(yǎng)基于37 °C靜止厭氧培養(yǎng)72h，備用；
2、制備混合發(fā)酵菌種
將花生柏粉、淀粉、NaCl和水按照50 10 1:150的重量比混合，調(diào)節(jié)pH值為7. O 7.5，121°C滅菌30min，將步驟I中的四種活化菌種等重量比接入(四種菌的接種比例為重量比1:1:1:1 )，搖瓶培養(yǎng)48h得混合發(fā)酵菌種，備用；
3、將花生柏粉碎，過(guò)篩，加入麩皮、水，接種混合發(fā)酵菌種，制成固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基；發(fā)酵體系各種成分按照重量份為花生柏60份，水20份，麩皮8份，混合發(fā)酵菌種5份；
4、將固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基于40°C振搖發(fā)酵72h，得發(fā)酵物料，發(fā)酵物料經(jīng)90°C熱風(fēng)烘IOh至干燥，得到干燥發(fā)酵物料粗制品；
5、將上述粗制品經(jīng)膜分離、真空濃縮、冷凍干燥即得到花生肽成品。
權(quán)利要求
1.一種微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法，包括以下步驟 (1)、制備混合發(fā)酵菌枯草芽孢桿菌、熱帶假絲酵母、黑曲霉和乳酸鏈球菌分別活化培養(yǎng)；將花生柏粉、淀粉、NaCl和水按照50 10 I 150的重量比混合，調(diào)節(jié)pH值為7. O 7.5，121 °C滅菌30min，將四種活化菌種以1:1:1:1的重量比接入，搖瓶培養(yǎng)48h得混合發(fā)酵菌種； (2)、將花生柏粉碎，過(guò)篩，加入麩皮、水，接種混合發(fā)酵菌種，制成固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基； (3)、將步驟2的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基于40 42°C振搖發(fā)酵72 80h，得發(fā)酵物料，發(fā)酵物料經(jīng)90 95°C熱風(fēng)烘10 12h至干燥，得到干燥發(fā)酵物料粗制品； (4)、將上述發(fā)酵物料粗制品經(jīng)膜分離、真空濃縮、冷凍干燥即得到花生肽成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物固態(tài)發(fā)酵花生柏制備花生肽的方法，其特征在于，所述的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基各種成分按照重量份為花生柏60 70份，水20 30份，麩皮6 10份，混合發(fā)酵菌種5 6份。
全文摘要
本發(fā)明屬于花生蛋白加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微生物固態(tài)發(fā)酵花生粕制備花生肽的方法。該方法通過(guò)菌種選擇、活化；制備混合發(fā)酵菌；制備固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基；固態(tài)發(fā)酵、粗制品、分離、真空濃縮、冷凍干燥的步驟得到花生肽成品。本發(fā)明的微生物固態(tài)發(fā)酵花生粕制備花生肽的方法，解決了傳統(tǒng)液態(tài)發(fā)酵法發(fā)酵液產(chǎn)品提取后產(chǎn)生大量廢液，污染嚴(yán)重的難題，具有節(jié)水、節(jié)能的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，且沒(méi)有廢液產(chǎn)生，屬于清潔生產(chǎn)技術(shù)，而且其投資規(guī)模和生產(chǎn)成本要比液態(tài)法低，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
文檔編號(hào)A23J1/14GK103053787SQ201310045269
公開(kāi)日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2013年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月5日
發(fā)明者楊慶利, 孫杰, 于麗娜, 朱鳳, 張初署, 畢潔, 魏明秀, 明強(qiáng)強(qiáng) 申請(qǐng)人:楊慶利