一種酶的提取方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種酶的提取方法，具體涉及一種超氧化物歧化酶的提取方法。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種酶的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種酶的提取方法，具體涉及一種超氧化物歧化酶的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]超氧化物歧化酶屬于氧化還原類(lèi)酶，是一種能夠清除機(jī)體中過(guò)多自由基的活性物質(zhì)，該物質(zhì)與機(jī)體的衰老、腫瘤發(fā)生、自身免疫性疾病和輻射防護(hù)等密切有關(guān)，對(duì)治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膀胱炎、紅斑狼瘡等疾病療效較好。此酶無(wú)抗原性，不良反應(yīng)小，副作用小，是一種醫(yī)療價(jià)值很高、具有廣闊前途的藥用酶。超氧化物歧化酶按金屬輔基成分的不同分為三種，第一種是含有銅鋅金屬輔基的酶，呈綠色，存在于機(jī)體細(xì)胞漿中；第二種是是含有錳金屬輔基的酶，呈紫色，存在于真核細(xì)胞的線粒體和原核細(xì)胞內(nèi)；第三種是含有鐵金屬輔基的酶，呈黃褐色，存在于原核細(xì)胞中。超氧化物歧化酶的分布極為廣泛，迄今為止已從細(xì)菌、藻類(lèi)、昆蟲(chóng)和哺乳類(lèi)動(dòng)物等各種生物體分離得到。但是，從最早發(fā)現(xiàn)超氧化物歧化酶到今天對(duì)超氧化物歧化酶的開(kāi)發(fā)應(yīng)用，超氧化物歧化酶大都是從動(dòng)物的血液中分離提取。由于分離提取超氧化物歧化酶的動(dòng)物血液的資源有限，代價(jià)也非常昂貴，進(jìn)而造成原料緊張，成本增加。在分離提取超氧化物歧化酶時(shí)，需要多次加入動(dòng)物血液再多次分離該物質(zhì)，使得分離提取工藝繁瑣復(fù)雜，容易造成化學(xué)污染。另外，由于使用的是動(dòng)物血液，提取超氧化物歧化酶時(shí)還存在艾滋病等血液中病毒的交叉感染及其它潛在危險(xiǎn)。國(guó)際衛(wèi)生組織曾經(jīng)呼吁:立刻停止從動(dòng)物血液中提取的超氧化物歧化酶的使用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]發(fā)明目的:提供一種超氧化物歧化酶的提取方法，該方法可從植物中提取超氧化物岐化酶。
[0004]技術(shù)方案:所述超氧化物歧化酶的提取方法包括以下步驟: 將蘋(píng)果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。將蘋(píng)果粉碎，在55~75°C的純凈水中對(duì)蘋(píng)果塊進(jìn)行恒溫浸提7~13h。然后將超氧化物歧化酶粗酶液通過(guò)一級(jí)濾膜，二級(jí)濾膜，三級(jí)濾膜，收集三級(jí)截留液；對(duì)超氧化物歧化酶溶液進(jìn)行PH調(diào)節(jié)，使其范圍在3.9^5.1之間；最后將超氧化物歧化酶溶液減壓真空濃縮18~30min，得到超氧化物歧化酶濃縮液。
【具體實(shí)施方式】
[0005]其步驟是將蘋(píng)果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
[0006]將蘋(píng)果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
[0007]將蘋(píng)果粉碎，在55~75°C的純凈水中對(duì)蘋(píng)果塊進(jìn)行恒溫浸提7~13h。
[0008]將超氧化物歧化酶粗酶液通過(guò)一級(jí)濾膜，二級(jí)濾膜，三級(jí)濾膜，收集三級(jí)截留液； 對(duì)超氧化物歧化酶溶液進(jìn)行PH 調(diào)節(jié)，使其范圍在3.9^5.1之間；將超氧化物歧化酶溶液減壓真空濃縮18~30min，得到超氧化物歧化酶濃縮液。
[0009]實(shí)施例1
將蘋(píng)果粉碎，得到的蘋(píng)果塊在水中浸提，得到浸提液，浸提液進(jìn)行離心分離，取上清液得到粗酶液，粗酶液進(jìn)行超濾，過(guò)濾掉雜質(zhì)得到超氧化物歧化酶溶液。將超氧化物歧化酶溶液進(jìn)行濃縮，得到超氧化物歧化酶濃縮液。[0010]將超氧化物歧化酶濃縮液離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
【權(quán)利要求】
1.一種超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: 將蘋(píng)果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
2.如權(quán)利要求1所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將超氧化物歧化酶濃縮液離心噴霧干燥得到粉末狀固體超氧化物歧化酶。
3.如權(quán)利要求1所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將蘋(píng)果粉碎，在55~75°C的純凈水中對(duì)蘋(píng)果塊進(jìn)行恒溫浸提7~13h。
4.如權(quán)利要求1所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將超氧化物歧化酶粗酶液進(jìn)行超濾:將超氧化物歧化酶粗酶液通過(guò)一級(jí)濾膜，二級(jí)濾膜，三級(jí)濾膜，收集三級(jí)截留液； 如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，對(duì)超氧化物歧化酶溶液進(jìn)行PH調(diào)節(jié)，使其范圍在3.9^5.1之間。
5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，在將蘋(píng)果粉碎之前，還包括清洗蘋(píng)果，且在烘干過(guò)程中向蘋(píng)果加硫磺。
6.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將超氧化物歧化酶 溶液減壓真空濃縮18~30min，得到超氧化物歧化酶濃縮液。
【文檔編號(hào)】C12N9/02GK103881987SQ201210565711
【公開(kāi)日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2012年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月24日
【發(fā)明者】王英俊, 郝智慧, 劉明強(qiáng) 申請(qǐng)人:青島康地恩藥業(yè)股份有限公司