專利名稱：屬于植物乳桿菌的新型乳酸菌及其應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及適于各種果汁發(fā)酵的屬于植物乳桿菌的新型乳酸菌以及含有該乳酸菌的飲食品等。
背景技術(shù)：
據(jù)認為，隨著人年齡的增長，大腸桿菌等有害菌會占優(yōu)勢，有害菌所生成的各種有害物質(zhì)會對人體帶來不良影響。乳酸菌可從自然界中廣泛分離出，在人的腸道內(nèi)，通過乳酸的生成，可將腸內(nèi)的PH維持在酸性，抑制大腸桿菌等腐敗菌、病原菌在腸內(nèi)的生長和增殖， 顯示出腸內(nèi)環(huán)境改善效果。并且，乳酸菌不僅具有該腸內(nèi)環(huán)境改善效果，而且還顯示出了改善便秘、防御感染、提高免疫力的作用、抗過敏效果、癌癥預防效果等有益的生理效果。因此，為了將這些被稱為益生菌的有用細菌供給至腸內(nèi)來增進健康，人們攝取含有這些菌的活菌的乳酸菌飲料、發(fā)酵乳、制劑等。在這樣的乳酸菌飲料、發(fā)酵乳、活菌制劑等中所用的乳酸菌主要是適于酸奶或以奶酪來源為代表的乳原料的發(fā)酵的乳酸菌，具體地說，為干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、保加利亞乳桿菌(Lactobacillusbulgaricus)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiles)、乳酸乳球菌(LactococcusIactis)等菌株。另一方面，近年來，消費者的喜好呈多樣化，希望開發(fā)出以乳原料以外的原料、例如以蔬菜汁或果汁等為發(fā)酵底物的益生菌中所用的菌株。但是，對于迄今為止在乳酸菌飲料等的制造中所用的上述菌株來說，在以蔬菜汁或果汁等為發(fā)酵底物的情況下，無法達成用于得到作為益生菌的效果的較高的到達活菌數(shù)(到達生菌數(shù))。迄今為止，作為對蔬菜汁或果汁進行發(fā)酵的能力優(yōu)異的乳酸菌，已知有屬于植物乳桿菌的乳酸菌。例如，已知植物乳桿菌ATCC 14431在以將濃縮胡蘿卜汁(可溶性固體成分36質(zhì)量％(下文簡稱為“ ％”))稀釋6倍的液體作為發(fā)酵底物時達到了 107CFU/ml以上的活菌數(shù)(專利文獻I)。另外，作為適于在降低了有機酸含量的果汁中進行發(fā)酵的乳酸菌，已知有植物乳桿菌299v(DSM 9843)。該植物乳桿菌299v(DSM 9843)中具有較強的后酸性化、顯著的官能性缺陷、產(chǎn)生二氧化碳氣體等缺點，但已知也有通過降低果汁中的有機酸含量而對其進行抑制的技術(shù)(專利文獻2)。但是，對于這些屬于植物乳桿菌的菌株來說，其針對各種蔬菜汁或果汁并不能總是得到較高的到達活菌數(shù)濃度，特別是在通常被認為不適于作為乳酸菌的發(fā)酵底物的葡萄等的果汁中無法進行使用。現(xiàn)有技術(shù)文獻專利文獻專利文獻I :日本特開2001-252012號公報
專利文獻2 :日本特表2008-541774號公報

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明所要解決的課題因而，本發(fā)明的課題在于提供新型的乳酸菌及含有該乳酸菌的飲食品等，該乳酸菌屬于植物乳桿菌，即使在以各種蔬菜汁或果汁作為發(fā)酵底物的情況下也具有較高的到達活菌數(shù)，具有優(yōu)異的發(fā)酵能力。解決課題的手段本發(fā)明人為了解決上述課題進行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對于以特定的100%果汁 為發(fā)酵底物時的到達活菌數(shù)均為108CFU/ml以上的屬于植物乳桿菌的乳酸菌來說，即使在以各種蔬菜汁或果汁為發(fā)酵底物的情況下，也有較高的到達活菌數(shù)，從而完成了本發(fā)明。S卩，本發(fā)明涉及一種屬于植物乳桿菌(Lactobacillus pi ant arum)的乳酸菌,其在以葡萄和橙的100%果汁為發(fā)酵底物時，到達活菌數(shù)均為108CFU/ml以上。本發(fā)明還涉及一種飲食品，其含有上述乳酸菌。本發(fā)明進一步涉及一種發(fā)酵物，其是通過將上述乳酸菌接種于食品材料中并進行發(fā)酵而得到的。另外，本發(fā)明還涉及一種飲食品，其含有上述發(fā)酵物。此外，本發(fā)明進一步涉及一種發(fā)酵物的制造方法，其特征在于，將上述乳酸菌接種于食品材料中并進行發(fā)酵。發(fā)明的效果本發(fā)明的屬于植物乳桿菌的乳酸菌以各種蔬菜汁或果汁(特別是果汁)為發(fā)酵底物時達到了 108CFU/ml以上的活菌數(shù)，可以制備以各種發(fā)酵底物為基礎(chǔ)的益生菌飲料等飲食品。另外，特別是本發(fā)明的屬于植物乳桿菌的乳酸菌中進行保藏的2種菌株是不具有質(zhì)粒的，因而可以提供品質(zhì)穩(wěn)定的飲料等飲食品。
具體實施例方式本說明書中的100%果汁表示的是在JAS法的果汁飲料品質(zhì)表示基準中滿足100%果汁基準的果汁。作為果汁的制法，下述任意之一均可對果實的榨取物進行熱處理等，之后進行冷凍保存的“直接果汁”；或者通過加熱使水分蒸發(fā)來進行濃縮，之后進行冷凍保存的“濃縮還原果汁”。在“濃縮還原果汁”中，作為果汁的濃縮倍率，優(yōu)選為2 10倍、進一步優(yōu)選為3 8倍是適當?shù)?。另外，只要在JAS法的果汁飲料品質(zhì)表示基準中滿足100%果汁的基準，也可以添加糖類、香料、抗氧化劑等。并且，本說明書中，所謂到達活菌數(shù)表示的是如下得到的活菌數(shù)作為前培養(yǎng)，利用在121°C進行了 15分鐘高壓釜滅菌的乳酸菌MRS肉湯(Lactobacilli MRS Broth7Difco社制造)培養(yǎng)基將種菌培養(yǎng)至穩(wěn)態(tài)，具體地說在30°C 37°C進行16 24小時培養(yǎng)，之后將O. 4%容量的前培養(yǎng)液接種至100%果汁等發(fā)酵底物中，在37°C進行48小時培養(yǎng)，該培養(yǎng)后的活菌數(shù)即為到達活菌數(shù)。另外，活菌數(shù)的測定使用MRS瓊脂平板來進行。另外，表示到達活菌數(shù)的單位CFU/ml表示的是在培養(yǎng)基中接種Iml時的菌落形成能力。
另外，本說明書中所謂的不具有質(zhì)粒表示的是如下情況按照常規(guī)方法由新鮮的乳酸菌培養(yǎng)液Iml中制備質(zhì)粒DNA，利用O. 7%的瓊脂糖凝膠進行電泳后，利用溴化乙錠對凝膠進行染色，在UV照射下可以確認到無質(zhì)粒DNA。本發(fā)明的屬于植物乳桿菌的乳酸菌(下文稱為“本發(fā)明乳酸菌”)在以葡萄和橙的100%果汁為發(fā)酵底物時，到達活菌數(shù)均為108CFU/ml以上、優(yōu)選為108CFU/ml IOltlCFU/ml ο本發(fā)明的乳酸菌是如下得到 的對于按照常規(guī)方法利用MRS瓊脂平板從醬菜(漬汁物)、發(fā)酵茶、人糞便等中分離出的植物乳桿菌，基于在上述發(fā)酵底物中的到達活菌數(shù)進行篩選，從而得到本發(fā)明的乳酸菌。通過篩選，從上述分離出的植物乳桿菌中得到下述4種菌株。 植物乳桿菌 Τ 10015株·植物乳桿菌 Τ 0069株·植物乳桿菌 Τ 0148株·植物乳桿菌 Τ 0132株這4種菌株之中，YIT 0069,YIT 0148,YIT 0132在以葡萄、葡萄柚、橙、菠蘿(pineapple)和蘋果的100%果汁為發(fā)酵底物時，用各自的到達活菌數(shù)(CFU/ml)除以IO8并相加而得到的增殖分數(shù)值(増殖7 ^ 7値)為25以上。該增殖分數(shù)值為對植物乳桿菌是否適于果汁發(fā)酵進行判斷的指標，其優(yōu)選為25以上、進一步優(yōu)選為30 50，YIT 0148和 Τ 0132的增殖分數(shù)值為30 41，因而可以特別適宜地用于果汁的發(fā)酵。另外，YIT 0132和 Τ 0148不具有質(zhì)粒。在微生物的質(zhì)粒中通常具有抗生素抗性，其向其它微生物傳遞，可能會導致具有抗生素抗性的病原菌的出現(xiàn)。并且，在目前也還不能充分闡明質(zhì)粒上功能不明的基因?qū)ζ渌⑸锏挠绊懀蚨鴱拇_保菌株安全性這一方面考慮，優(yōu)選不具有質(zhì)粒。并且，質(zhì)粒在傳代中或培養(yǎng)中有可能會缺失，從而可能會使微生物的性狀不穩(wěn)定。但是，由于YIT 0132和 Τ 0148不具有質(zhì)粒，因而可保持制品的穩(wěn)定品質(zhì)。1 YIT 0132 和 Τ 0148 分別被命名為植物乳桿菌 Τ 0132 (LactobacillusPI ant arum YIT 0132)和植物乳桿菌 YIT 0148 (Lactobacillus pi ant arum YIT 0148),于2010年2月24日以保藏編號FERM BP-11349和FERM BP-11350在獨立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心(〒305-8566茨城縣筑波市東I 丁目I番地I中央第6)進行了國際保藏。這些菌株具有以下所示的細菌學性質(zhì)。<利用乳酸菌MRS肉湯在37°C培養(yǎng)24小時后的 Τ 0132和 Τ 0148的細菌學
性質(zhì)〉(各性質(zhì))表I
權(quán)利要求
1.一種屬于植物乳桿菌的乳酸菌，其在以葡萄和橙的100%果汁為發(fā)酵底物時，到達活菌數(shù)均為108CFU/ml以上。
2.如權(quán)利要求I所述的屬于植物乳桿菌的乳酸菌，其中，該乳酸菌在以葡萄、葡萄柚、橙、菠蘿和蘋果的100%果汁為發(fā)酵底物時，用各自的到達活菌數(shù)除以IO8并相加而得到的增殖分數(shù)值為25以上，所述到達活菌數(shù)的單位為CFU/ml。
3.如權(quán)利要求I或2所述的屬于植物乳桿菌的乳酸菌，其中，該乳酸菌不具有質(zhì)粒。
4.如權(quán)利要求I至3的任一項所述的屬于植物乳桿菌的乳酸菌，其中，該乳酸菌為植物乳桿菌 YIT 0132 即 FERM BP-11349、或為植物乳桿菌 Τ 0148 即 FERMBP-11350
5.一種飲食品，該飲食品含有權(quán)利要求I至4的任一項所述的屬于植物乳桿菌的乳酸菌。
6.一種發(fā)酵物，該發(fā)酵物是通過將權(quán)利要求I至4的任一項所述的屬于植物乳桿菌的乳酸菌接種于食品材料中并進行發(fā)酵而得到的。
7.一種飲食品，該飲食品含有權(quán)利要求6所述的發(fā)酵物。
8.一種發(fā)酵物的制造方法，其特征在于，將權(quán)利要求I至4的任一項所述的屬于植物乳桿菌的乳酸菌接種于食品材料中并進行發(fā)酵。
全文摘要
本發(fā)明提供新型的乳酸菌等，該乳酸菌屬于植物乳桿菌，即使在以各種蔬菜汁或果汁為發(fā)酵底物的情況下，也有較高的到達活菌數(shù)，具有優(yōu)異的發(fā)酵能力。該屬于植物乳桿菌的乳酸菌的特征在于，在以葡萄和橙的100%果汁為發(fā)酵底物時，到達活菌數(shù)均為108CFU/ml以上。
文檔編號A23L2/38GK102971413SQ20118001441
公開日2013年3月13日 申請日期2011年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月19日
發(fā)明者飯野透, 增岡范江, 石川文保, 吉村公一, 林田英士 申請人:株式會社益力多本社