專利名稱：一種破酵母細胞細胞壁的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種新的酵母菌破壁方法，涉及堿法、變溫法及鹽法破細胞壁的方法。
背景技術(shù)：
我國啤酒工業(yè)發(fā)展迅速，2005年我國啤酒產(chǎn)量3061. 56萬噸，隨著啤酒工業(yè)的飛 速發(fā)展也帶來了大量的副產(chǎn)物-啤酒酵母。酵母細胞中含有豐富的蛋白質(zhì)、B族維生素、脂 肪、糖和酶等多種營養(yǎng)成分和某些協(xié)調(diào)因子、并具有眾多生理功能在飼料工業(yè)中被受關(guān)注， 然而酵母細胞有比較堅實的細胞壁，其細胞內(nèi)的物質(zhì)不易釋放出來，不能被動物很好的吸 收利用。為此國內(nèi)外學(xué)者進行了大量的試驗研究，以期找到理想的破壁方法。目前，關(guān)于啤 酒酵母的研究很多，大體可以歸納為化學(xué)破壁法(酸解、堿解)、物理破壁(液體剪切、固 體剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。本發(fā)明采用多種方法相結(jié)合的方法大幅度的提高了 破壁效率，且操作簡單、設(shè)備要求低。非常適合啤酒廢酵母的破壁再利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了 一種新的酵母細胞破壁方法(1)酵母細胞預(yù)處理廢酵母細胞用無菌水稀釋，所得溶液用70目分子篩篩分二次，再用90目分子篩篩 分二次，將所得溶液離心分離lOmin，得到純凈的酵母細胞。(2)利用堿法初步破碎酵母葡聚糖層配制酵母、氨混合菌懸液，其中酵母濃度為10%，氨濃度為1%，將菌懸液放入 60°C恒溫水槽中水浴加熱30min。所得溶液離心分離(3600n/min) lOmin，得到酵母沉淀。(3)利用變溫法與鹽法結(jié)合二次破碎酵母細胞壁所得酵母沉淀再用10倍無菌水稀釋，用HCl調(diào)節(jié)PH至6. 5，速凍至零下20°C，冷 凍20min，然后用微波爐微波解凍，再IOOml水加2. 5克NaCl往溶液中加一定量的食鹽，將 混合液放入70°C恒溫水槽中，加熱2. 5h，重復(fù)以上步驟3次。本發(fā)明采用堿法、鹽法和變溫法3種破壁方法相結(jié)合的方法多層次破碎細胞壁， 破碎率高。該法原料易得，設(shè)備要求低，操作簡便。在工業(yè)化大生產(chǎn)中很好的應(yīng)用前景。
權(quán)利要求
1.一種破酵母細胞細胞壁的方法，其特征包括以下幾個步驟(1)酵母細胞預(yù)處理廢酵母細胞用無菌水稀釋，所得溶液用70目分子篩篩分二次，再用90目分子篩篩分二 次，將所得溶液離心分離lOmin，得到純凈的酵母細胞。(2)利用堿法初步破碎酵母葡聚糖層配制酵母、氨混合菌懸液，其中酵母濃度為10%，氨濃度為1%，將菌懸液放入60°C恒 溫水槽中水浴加熱30min。所得溶液離心分離(3600n/min)10min，得到酵母沉淀。(3)利用變溫法與鹽法結(jié)合二次破碎酵母細胞壁所得酵母沉淀再用10倍無菌水稀釋，用HCl調(diào)節(jié)PH至6. 5，速凍至零下20°C，冷凍 20min，然后用微波爐微波解凍，再IOOml水加2. 5克NaCl往溶液中加一定量的食鹽，將混 合液放入70°C恒溫水槽中，加熱2. 5h，重復(fù)以上步驟3次。
2.如權(quán)利(1)所述的酵母細胞預(yù)處理過程，其特征在于所用的酵母菌為啤酒廢酵母。
3.如權(quán)利( 所述的酵母細胞破壁方法，其特征在于所用的酵母細胞為純凈的酵母細胞。
4.如權(quán)利C3)所述的酵母細胞破碎方法，其特征在于變溫的溫差為90°C時酵母細胞破碎率最高。
5.如權(quán)利(3)所述的酵母細胞破碎方法，其特征在于在酵母濃度10%時NaCl的加入 量為2. 5%時酵母細胞破碎率最高。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種破酵母細胞壁的方法，其步驟包括廢酵母用無菌水稀釋再用70目和90目分子篩分別篩分2次，得到純凈酵母細胞；利用氨水破壁法初步破碎酵母細胞葡聚糖層，離心得到酵母沉淀。再利用變溫法于鹽法結(jié)合的方法進一步破碎酵母細胞壁。本發(fā)明細胞破碎工藝操作簡便，設(shè)備要求低，破碎率高。
文檔編號C12N1/06GK102071151SQ20091015465
公開日2011年5月25日 申請日期2009年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月23日
發(fā)明者史利斌, 吳菁 申請人:湖州來色生物基因工程有限公司