專利名稱：：一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于保健品領(lǐng)域，尤其涉及一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品及其制備方法。
背景技術(shù)：
：隨著生活節(jié)奏的加快，大部份人忽視或無暇顧及對自身體質(zhì)的保養(yǎng)，造成免疫力降低，容易被各種細(xì)菌、病毒所侵?jǐn)_，以至于形成各種疾病。另外，我國逐步進(jìn)入老齡化社會，老齡人口越來越多，在老齡人健康方面的投入也會越來越大。這部份人群中的大多數(shù)因?yàn)榛加懈鞣N疾病、體質(zhì)差而需要經(jīng)常服藥以維持健康。眾所周知，老齡人的各種細(xì)胞功能逐步退化，由此而引發(fā)機(jī)體其他功能相繼逐漸衰退，特別是腎臟功能，由此而引發(fā)機(jī)體其他功能相繼逐漸衰退。因此，需要研究開發(fā)可增強(qiáng)人體免疫力的保健品，尤其是防治腎陽虛引起的免疫功能4氐下的保健品。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明實(shí)施例的目的在于提供一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品，旨在解決人體免疫力降低的問題。本發(fā)明實(shí)施例的另一目的在于提供一種上述增強(qiáng)人體免疫力的保健品的制備方法。本發(fā)明實(shí)施例提供的增強(qiáng)人體免疫力的保健品，含有的組分及其重量份如下人參提取物50-200份黃芪提取物30~300份淫羊藿提取物30~200份巴戟天提取物10~80份本發(fā)明實(shí)施例提供的增強(qiáng)人體免疫力的保健品的制備方法，包括如下步驟(1)將淀粉或微晶纖維素，以及人參提取物、黃芪提取物、淫羊藿提取物、巴戟天提取物分別過60200目篩；(2)將步驟(1)中各組分按照如下重量份置于混合機(jī)內(nèi)均勻混合人^^是取物50200份黃芪提耳又物30300份淫羊藿提取物30~200份巴戟天4是取物108(H分淀粉或微晶纖維素50300份(3)加入步驟(2)所得混合物總重量1~10%的水混合制成軟材，1030目篩制粒；(4)將步驟(3)中顆粒置烘箱內(nèi)，80。C以下烘干，用10~30目篩整粒。上述技術(shù)方案，為腎陽虛引起的免疫功能低下而設(shè)。由于陽之生有賴陰、氣之助，故本配方中又配以補(bǔ)氣之藥。配方中淫羊藿辛溫入腎，巴戟天辛孩i溫，也入腎，二味具為補(bǔ)腎陽，強(qiáng)筋骨。善補(bǔ)陽者，必用氣送，則陽得氣助，而無有不達(dá)。故再用人參、黃芪大補(bǔ)元?dú)?，調(diào)補(bǔ)五臟，強(qiáng)精通脈，有氣中求陽之功。四藥合用，補(bǔ)腎之中皆補(bǔ)五臟，使腎精得充而虛損易復(fù)。具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。本發(fā)明提供一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品，含有的組分及其重量份如下5人參提取物黃芪提取物淫羊藿提取物巴戟天提取物優(yōu)選含量為人參提取物黃芪提取物淫羊藿提取物巴戟天提取物更優(yōu)選方案為:人參提取物黃芪提取物淫羊藿提取物巴戟天提取物50~200份30300份30-200份10-80份50~150份30100份30-100份10-50份75~9050~7045~5520~30還含有重量份為的50300淀粉或微晶纖維素。優(yōu)選為上述實(shí)施例中100~150的淀斗分。上述實(shí)施例中，人參提取物是以人參為原料，經(jīng)乙醇提取濃縮成稠膏，再用的乙醇醇降除雜，濃縮，噴霧干燥等工藝精制得到，有效成份為人參皂苷；黃芪4是if又物主要是以黃芪為原料，由乙醇回流4是^a余掉脂溶性成分，藥渣用乙醇進(jìn)一步回流提取除掉脂溶性成分、藥渣水提，濃縮，乙醇沉降得多糖沉淀，干燥等工藝制得，有效成份為黃芪多糖；淫羊藿提耳又物以淫羊藿為原料，由乙醇提取、濃縮，水沉降，去渣，濃縮，噴霧干燥等工藝制得，有效成份為淫羊藿苷；巴戟天提取物是以巴戟天為原料，由乙醇回流去雜，水煮后再經(jīng)乙醇沉降精制得到，主要成份為巴戟天多糖。而且，根據(jù)"衛(wèi)生部關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健食品原料管理的通知(衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]51號)規(guī)定，，人參、黃芪、淫羊藿、巴戟天不能在普通食品中使用，但可以在保健食品中使用。另外，淀粉常作為食6品添加劑用于食品中，也是一種常用的藥用輔料，食用安全可靠。經(jīng)發(fā)明人研究，人參提取物可以增強(qiáng)免疫活性細(xì)胞的功能。人參皂苷和人參多糖可使網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能增強(qiáng)。人參在升高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)的同時，也增加其細(xì)胞面積。巨噬細(xì)胞面積的增加，使受體數(shù)及靶細(xì)胞的接觸面積增加，因而提高了吞噬功能。人參對實(shí)驗(yàn)動物能促進(jìn)抗體和補(bǔ)體的生成，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。人參能提高天然殺傷細(xì)胞(NKC)的活性，促進(jìn)干擾素(IFN)和白細(xì)胞間素(lL-2)的產(chǎn)生，人參花皂苷在體外實(shí)驗(yàn)中對天然殺傷細(xì)胞NKC—IFN—IL—2調(diào)節(jié)網(wǎng)起正調(diào)節(jié)作用。人參總皂苷對環(huán)核苷酸含量的影響隨機(jī)體免疫反應(yīng)水平不同而呈雙相調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)證明，人參能使免疫受抑制動物免疫功能低下得以恢復(fù)，能對抗輻射引起的免疫功能下降，它還有抑制結(jié)核桿菌生長作用。經(jīng)發(fā)明人研究，人參之所以可提高小鼠的非特異性免疫力，是因?yàn)槿藚⒅泻械闹饕煞軷gl，對大鼠具有免疫促進(jìn)作用。目前很多感染性疾病、腫瘤、自身免疫性疾病，都是輔助T細(xì)胞在分化時，Thl/Th2的比例失衡造成的，而Rgl從某種程度上可以糾正這種失衡。在以Th2為主要免疫途徑的BALB/c小鼠中，當(dāng)用Rgl預(yù)處理后接種念珠菌，免疫途徑由Th2改為Thl,從而使小鼠對抗念珠菌病(Rgl本身對念J朱菌無作用)；并且在用抗IFN-y的抗體后，小鼠即使用Rgl預(yù)處理，仍不能對抗念珠菌病，更證實(shí)了Rgl激活Thl免疫途徑。經(jīng)發(fā)明人研究，還發(fā)現(xiàn)黃芪及部份提取物能提高小鼠血漿cAMP含量，從而調(diào)節(jié)免疫平tf,加速淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，增加T細(xì)胞功能，還可抑制自身抗體引起的免疫性疾病。對異種移植物宿主反應(yīng)的動物模型試驗(yàn)，顯示出全部逆轉(zhuǎn)因環(huán)磷酰胺而造成的免疫抑制現(xiàn)象。黃芪在惡性腫瘤治療中，有提高巨噬細(xì)胞吞峻率及T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化作用，表明提高了細(xì)胞免疫功能。對細(xì)胞免疫功能降低的肝炎病人可增強(qiáng)細(xì)胞免疫，改善肝功能，對慢性支氣管炎病人有升高IgM、IgG作用，表明黃芪是一種免疫調(diào)節(jié)劑。發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)去除黃芪總黃酮后，黃芪中其它功能成份具有明顯調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的效能。而且，黃芪多糖促進(jìn)脾7細(xì)胞增殖反應(yīng)，對亞適量ConA和LPS誘導(dǎo)脾細(xì)胞增殖反應(yīng)也有顯著促進(jìn)作用，對脾細(xì)胞干擾素-y和腹腔巨噬細(xì)胞肺瘤壞死因子-a的產(chǎn)生有顯著促進(jìn)作用。表明黃芪多糖顯著增強(qiáng)小鼠免疫功能。淫羊藿，又名仙靈脾，其藥用歷史悠久，李時珍在《本草綱目》中稱其有"益精氣，堅(jiān)筋骨，補(bǔ)腰膝，強(qiáng)心力"之功效?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，淫羊藿能增加心腦血管血流量，促進(jìn)造血功能、免疫功能及骨代謝，具抗衰老，抗腫瘤等功效?，F(xiàn)代化學(xué)成份研究顯示，淫羊藿的主要有效成份是淫羊藿總黃酮(totflavonoidsofEpimedium，TFE)和淫羊藿多糖(EPS)。淫羊藿總黃酮(TFE)是從小蘗科淫羊藿屬(EpimediumL)植物的莖葉中提取的總黃酮類成份，主要含有淫羊藿苷(icariine)和淫羊藿次苷等，藥理研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿總黃酮是淫羊藿促進(jìn)免疫功能，參與骨代謝，抗腫瘤，增強(qiáng)心血管活動等功能的有效成份。用外源性皮質(zhì)酮(CORT)造成大鼠下丘腦一垂體一腎上A泉一胸腺(HPAT)軸抑制模型，觀察補(bǔ)腎助陽要藥淫羊藿對受抑大鼠的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，模型大鼠垂體、腎上腺、胸腺重量明顯減輕；下丘腦室核小細(xì)胞區(qū)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)陽性細(xì)胞及正中隆起CRF陽性神經(jīng)纖維及垂體前葉促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)陽性細(xì)胞明顯減少，胞體變小，染色變淡，腎上腺及胸腺小體明顯減少；血漿ACTH皮質(zhì)酮以及淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)、NK細(xì)胞活性、IFN-Y誘生能力明顯降低，淫羊藿灌胃[10g/(kg.d)，連續(xù)14d]能有效改善皮質(zhì)酮對HPAT軸形態(tài)與功能的抑制，與模型組比較，下丘腦室室核和正中隆起的CRF及神經(jīng)纖維明顯增多，腎上腺皮質(zhì)束狀帶增寬，結(jié)構(gòu)完整；胸腺皮質(zhì)萎縮減輕，胸腺細(xì)胞數(shù)量增多。血漿ACTH、CORT含量明顯上升，NK細(xì)胞活性及IFN-Y誘生能力顯著提高。提示淫羊藿對實(shí)驗(yàn)性HPAT軸抑制大鼠有顯著的改善作用，從而調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌免疫的功能。巴戟天是茜草科植物巴戟天的干燥根，具有補(bǔ)腎陽、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕的功效，用于陽痿遺精、宮冷不孕、月經(jīng)不調(diào)、少腹冷痛、風(fēng)濕痹痛、筋骨痿軟等癥，巴戟天是歷代醫(yī)家補(bǔ)腎常用的藥物之一，對內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及神經(jīng)系統(tǒng)等通過不同的途徑發(fā)揮一定的作用，毒理實(shí)驗(yàn)證明它是一種安全的藥物。發(fā)明人采用環(huán)磷酸胺(CTX)兔疫抑制模型法在小鼠兔疫抑制模型上，灌胃巴戟天水提液對抗CTX引起的兔疫抑制，使外周血中自細(xì)胞明顯上升；給小鼠灌胃戟天水提液10天，能促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)對剛果紅的廓清率(統(tǒng)計(jì)概率P<0.05);小鼠灌胃戟天水提液10天，能增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬紅細(xì)胞的能力(統(tǒng)計(jì)概率P<0.01)。表明戟天水提液對小鼠兔疫功能有一定的促進(jìn)作用，具有增強(qiáng)細(xì)胞兔疫的功效。實(shí)驗(yàn)顯示，巴戟天多糖能增加幼年小鼠胸腺重量，明顯提高小鼠巨噬細(xì)胞呑噬百分率，并能明顯提高小鼠RFC的形成。人參、淫羊藿對所測定的免疫功能指標(biāo)都有明顯的增強(qiáng)作用，人參、淫羊藿共同灌胃，則可以使淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、補(bǔ)體活性、巨噬細(xì)胞的吞噬功能3項(xiàng)指標(biāo)超過單獨(dú)使用兩種藥物，說明兩者具有一定的協(xié)同效應(yīng)。本發(fā)明實(shí)施例的保健品劑型為膠囊，包括硬膠嚢、軟膠囊等，優(yōu)選硬膠囊中腸溶膠囊。腸溶膠嚢一般能在腸液的環(huán)境中迅速崩解，在一般環(huán)境下不易吸潮，能防止水份的滲透，能有效保證產(chǎn)品的重量；膠嚢劑可以掩蓋其內(nèi)容物不良滋味，攜帶和食用方便。而且，人參皂苷的部份有效成份是在腸道菌群的作用下分解成能被吸收的物質(zhì)，然后被腸道吸收，而這些成份容易在胃酸環(huán)境中部份被分解，顯然，按照常規(guī)的服用方法，很多有效成份在被腸道吸收前已經(jīng)被胃酸破壞，從而達(dá)不到效果。制成腸溶制劑，則能避免有效成份被胃酸破壞。本發(fā)明實(shí)施例提供的增強(qiáng)人體免疫力的保健品的制備方法，包括如下步驟(1)將淀粉或微晶纖維素，以及人參提取物、黃芪提取物、淫羊藿提取物、巴戟天提耳又物分別過60200目篩；(2)將步驟(1)中各組分按照如下重量份置于混合機(jī)內(nèi)均勻混合人參提取物50~200份黃芪提耳又物3030(H分淫羊藿提取物30~200份9巴戟天提取物10-8(H分淀粉或微晶纖維素50~300份(3)加入步驟(2)所得混合物總重量1~10%的水混合制成軟材，10~30目篩制粒；(4)將步驟(3)中顆粒置烘箱內(nèi)，80。C以下烘干，用10~30目篩整粒。上述人參提取物是以人參為原料，經(jīng)70%乙醇提取濃縮成稠膏，再用85%的乙醇醇降除雜，濃縮，噴霧干燥制得；上述黃芪4是取物是以黃芪為原料，由95%乙醇回流4是取除掉脂溶性成分，藥渣用80%乙醇進(jìn)一步回流提取除掉脂溶性成分、藥渣水提，濃縮，60%乙醇沉降得多糖沉淀后干燥制得；上述淫羊藿提^取物以淫羊藿為原料，由70%乙醇#是取、濃縮，水沉降，去渣，濃縮，噴霧干燥制得；上述巴戟天提取物是以巴戟天為原料，由80°/。乙醇回流去雜，水煮后再經(jīng)80%乙醇沉降制得。上述實(shí)施例還包括將步驟(4)所得顆粒送檢，取合格顆粒，在膠嚢填充機(jī)上灌裝步驟，以及之后的膠嚢外包步驟。該膠嚢每粒0.35g。上述實(shí)施例中混合才兒采用江蘇瑰寶制藥機(jī)械廠生產(chǎn)的GHJ-500V型混合機(jī)或者江蘇瑰寶制藥機(jī)械廠生產(chǎn)的CH-200型曹式混合機(jī)；采用江蘇瑰寶制藥機(jī)械廠生產(chǎn)的YK-160型搖擺式顆粒機(jī)制粒；采用無錫華星藥化設(shè)備公司生產(chǎn)的FZG型真空干燥機(jī)進(jìn)行干燥；膠囊充填機(jī)采用北京航天成機(jī)電設(shè)備廠生產(chǎn)的QJC-800型全自動膠囊充填機(jī)；數(shù)粒/片機(jī)采用天津中藥機(jī)械廠生產(chǎn)的BP100-A型全自動數(shù)粒/片機(jī)。本發(fā)明的保健品為腎陽虛引起的免疫功能低下而設(shè)。由于陽之生有賴陰、氣之助，故本配方中又配以補(bǔ)氣之藥。配方中淫羊藿辛溫入腎，巴戟天辛微溫，也入腎，二味具為補(bǔ)腎陽，強(qiáng)筋骨。善補(bǔ)陽者，必用氣送，則陽得氣助，而無有不達(dá)。故再用人參、黃芪大補(bǔ)元?dú)猓{(diào)補(bǔ)五臟，強(qiáng)井奮通月永，有氣中求陽之功。四藥合用，補(bǔ)腎之中皆補(bǔ)五臟，使腎精得充而虛損易復(fù)。本品服用劑量為一日兩次，每次兩粒，在保證服用方便的同時，更重要的是保證了保健效果。加上制成易于服用、無其它異味、便于攜帶的膠嚢劑型，適宜現(xiàn)代社會高節(jié)奏的需要。實(shí)施例1按如下步驟制備本發(fā)明的增強(qiáng)人體免疫力的保健品(1)取淀粉、人參提取物、黃芪提取物、淫羊藿提取物、巴戟天提取物分別過100目篩；(2)取過篩后人參提取物50g,黃芪提取物30g，淫羊藿提取物30g,巴戟天提取物10g,淀粉50g置于混合機(jī)內(nèi)均勻混合。(3)加入步驟(2)所得混合物總重量5%的水混合制成軟材，20目篩制粒;(4)將步驟(3)中顆粒置烘箱內(nèi)，80。C以下烘干，用20目篩整粒。(5)將步驟(4)中所得顆粒送檢，取合格顆粒，在膠嚢填充機(jī)上以每粒0.35g灌裝，隨后將膠嚢外包。實(shí)施例2本實(shí)施例基本步驟與實(shí)施例1相同，主要不同在于步驟(2)中所選取材料的重量不同，本實(shí)施例中選取人參提取物75g,黃芘提取物50g,淫羊藿提取物45g,巴戟天提取物20g，淀粉120g。實(shí)施例3本實(shí)施例基本步驟與實(shí)施例l相同，主要不同在于步驟(2)所選取材料的重量不同，本實(shí)施例中選取人參提取物80g,黃芪提取物60g,淫羊藿提取物50g,巴戟天4是耳又物25g,淀粉135g。實(shí)施例4本實(shí)施例基本步驟與實(shí)施例l相同，主要不同在于步驟(2)所選取材料的重量不同，本實(shí)施例中選取人參提取物150g,黃芪提耳又物100g，淫羊藿提取物100g，巴戟天提取物50g，淀粉200g。實(shí)施例5本實(shí)施例基本步驟與實(shí)施例l相同，主要不同在于步驟(2)所選取材料的重量不同，本實(shí)施例中選取人參提取物90g，黃芪提取物70g,淫羊藿提取物55g，巴戟天提取物30g，150g微晶纖維素。配方篩選(500粒)按照上述實(shí)施例3的方案，500粒膠嚢應(yīng)取人參提取物40g、黃芪提取物30g、淫羊藿提取物25g、巴戟天提取物12.5g，選取適量的輔料，過篩混合均勻，以適量的水?dāng)嚢柚栖洸模^20目制粒，干燥，整粒，裝入膠嚢。以制粒難易、崩解時間長短、裝量差異等指標(biāo)對輔料種類、用量等參數(shù)進(jìn)行篩選確定。篩選輔料為淀粉、糊精、微晶纖維素和磷酸氫鈣，配方篩選見表1(單位g)。表1配方1配方2配方3酉己:^r4人參提取物40404040黃芪提取物30303030淫羊藿提取物25252525巴戟天提取物12.512.512.512.5淀粉(g)67.5--8.0--糊精(g)--67.5----磷酸氫鈣(g)--67.5--微晶纖維素(g)----67.5制粒情況軟材較適合，容易過篩制濕顆粒，顆粒硬度一般，細(xì)制得的軟糸太粘，無法ii篩制濕顆粒軟材粘性較差，易過篩制粒，顆粒松散，硬度較大，細(xì)粉少軟材較適合，容易過篩制濕顆粒，硬度適宜干顆粒重量(g)170.5172.0171.5平均裝量(g/粒)0.35050.38240.3566裝量差異符合規(guī)定不符合規(guī)定符合規(guī)定裝囊數(shù)量(粒)475440475崩解時限(min)28--303012注以上均20目篩制濕顆粒，80。C干燥，20目篩整粒。配方篩選結(jié)果發(fā)明人篩選了淀粉、糊精、磷酸氫鈣、微晶纖維素等輔料作為本品的稀釋劑，結(jié)果糊精制得的軟材較粘，無法過篩制濕顆粒，不適合作為本品的稀釋劑；磷酸氫鈣均作為本品的稀釋劑所得的顆粒較結(jié)，顆粒流動性不好，裝量差異偏重。以淀粉和微晶纖維素為稀釋劑，易制粒，顆粒硬度適中，流動性好，都可以選用，但考慮到微晶纖維素市場價格較淀粉高很多，生產(chǎn)成本較高，因此發(fā)明人優(yōu)選淀粉作為本品的稀釋劑。三批放大樣品制備依照上述配方及工藝，生產(chǎn)三批放大樣品以驗(yàn)證工藝參數(shù)，三批樣品制備情況及檢測數(shù)據(jù)見表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>崩解時限(min)282728結(jié)論三批膠嚢各項(xiàng)數(shù)據(jù)比較穩(wěn)定，說明此制備工藝可行。增強(qiáng)免疫力功能試驗(yàn)報(bào)告該報(bào)告由湖北省疾病預(yù)防控制中心根據(jù)申請人提供的上述批號為080603的樣品進(jìn)行檢測得出的結(jié)論。檢測依據(jù)為《保健食品檢驗(yàn)與評價技術(shù)規(guī)范》2003年版(功能學(xué)評價檢驗(yàn)方法)牙企測結(jié)i侖以人群推薦日攝入量0.0233g/kgBW擴(kuò)大10、20、30倍設(shè)置低、中、高三個劑量組，即0.233、0.467、0.700g/kgBW，另設(shè)陰性對照組。釆用SPF級昆明種小鼠，連續(xù)灌胃給予，30天后開始檢測有關(guān)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以P<0.05判斷為顯著性差異，各劑量組與陰性對照組比較，結(jié)果顯示1)各劑量組小鼠體重、淋巴器官/體重比值差異均無顯著性；2)高劑量組明顯增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力，差異有顯著性；3)高劑量組明顯增強(qiáng)二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，差異有顯著性；4)高劑量組明顯升高小鼠血清溶血素含量,差異有顯著性；5)高劑量組明顯增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能，差異有顯著性；6)高劑量組明顯增強(qiáng)、鼠碳廓清能力,差異有顯著性；7)高劑量組明顯增強(qiáng)抗體生成細(xì)胞能力,差異有顯著性；8)高劑量組明顯增強(qiáng)小鼠NK細(xì)胞活性，差異有顯著性；按照增強(qiáng)免疫力功能作用評價程序規(guī)定，該受試物具有增強(qiáng)免疫力功能作用。報(bào)告內(nèi)容141材料與方法1.1樣品來源及處理申請人提供的上述批號為080603的樣品，人群推薦日攝入量為1.4g/60kgBW(即0.0233g/kgBW)。樣品配制準(zhǔn)確稱取受試物1.165、2.335、3.500g,分別用蒸餾水定容至100mL，作低、中、高劑量組小鼠灌胃用。1.2實(shí)驗(yàn)動物及環(huán)境SPF級昆明種雌性小鼠，18-22g,由湖北省實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供。實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證號SCXK(鄂)2003-0005;實(shí)-瞼動物使用許可證號SYXK(鄂)2003-0014。動物飼養(yǎng)室溫度為20-25°C，濕度為40-70%。1.3劑量分組按人群推薦日攝入量0.0233g/kgBW擴(kuò)大10、20、30倍設(shè)置低、中、高三個劑量組，即0.233、0.467、0.700g/kgBW,共分四個實(shí)一驗(yàn)組，每實(shí)"驗(yàn)組包括陰性對照組、低、中、高劑量組，各劑量組實(shí)驗(yàn)動物數(shù)為10只。免疫實(shí)驗(yàn)一組進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)；免疫實(shí)驗(yàn)二組進(jìn)行淋巴器官/體重比值測定和碳廓清實(shí)驗(yàn)；免疫實(shí)驗(yàn)三組進(jìn)行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和NK細(xì)胞活性測定；免疫實(shí)驗(yàn)四組進(jìn)行血清溶血素的測定和抗體生成細(xì)胞纟企測。小鼠連續(xù)灌胃30天后開始試驗(yàn)。各實(shí)驗(yàn)組均按0.20ml/10gBW容量經(jīng)口灌胃給予。1.4試-驗(yàn)方法1.4.1ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法無菌取脾，置于盛有適量無菌Hank's液平亞中，用鑷子輕輕將脾磨碎，制成單個細(xì)胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，用Hank's液洗2次，每次離心10min(1000r/min)。然后將細(xì)胞懸浮于lmL的完全培養(yǎng)液中，用臺酚蘭染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95%以上)，調(diào)整細(xì)胞濃度為3\106個/mL。將每一^f分月皁細(xì)胞懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔lmL,—孔力卩75pLConA液(相當(dāng)于7.5)ig/mL),另一孔作為對照，置5%C02，37。CC02孵箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔輕輕吸去上清液0.7mL,加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液，同時加入MTT(5mg/mL)50pL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入lmL酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解。然后分裝到96孔培養(yǎng)板中，每個孔作3個平行孔(100pL/孔)，用酶標(biāo)儀以570nm波長測定光密度值。1.4.2二硝基氟苯(DNFB)誘導(dǎo)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)方法:耳腫脹法。用P/。DNFB(以1:1的丙酮麻油溶液配制)致敏小鼠后，第5天再用DNFB攻擊右耳，24h后處死動物剪下左右耳殼用打孔器取下直經(jīng)8mm的耳片,稱重，以左右耳的重量之差來表示DTH的程度。1.4.3血清溶血素的測定方法:血凝法。取羊血，用生理鹽水洗滌3次，每次離心(2000r/min)10min。將壓積SRBC用生理鹽水配成2%(v/v)的細(xì)胞懸液，每只鼠腹腔注射0.2mL進(jìn)行免疫。4~5天后，摘除眼球取血于離心管內(nèi)，放置約lh，將凝固血與管壁剝離，使血清充分析出，2000r/min離心10min,收集血清。凝集反應(yīng)用生理鹽水將血清倍比稀釋，將不同稀釋度的血清分別置于微量血凝實(shí)驗(yàn)板內(nèi)，每孔100pL，再加入100|aL0.5%(v/v)SRBC懸液，混勻，放入濕潤的平盤內(nèi)并加蓋,于37。C溫箱孵育3h,觀察血球凝集程度。根據(jù)血清凝聚程度的級別計(jì)算出抗體積數(shù)。1.4.4腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)方法:半體內(nèi)法。制備20%的雞紅細(xì)胞懸液;每只鼠腹腔注射lmL該懸液,30min后處死動物,將其仰位固定于鼠板上,開腹，經(jīng)腹腔注入生理鹽水2mL，轉(zhuǎn)動鼠板lmin，然后，吸出腹腔洗液lmL,平均分滴于2片載玻片上，37。C溫育30min;育畢用生理鹽水漂洗，晾千,以l:l的丙酮甲醇溶液固定4。/。Giemsa-磷酸緩沖液染色3min，再用蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計(jì)數(shù)100個巨噬細(xì)胞，按下式計(jì)算吞噬16率和吞噬指凄t吞喧雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)吞噬率(％)=-xlOO吞噬指數(shù)=-計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞數(shù)1.4.5小鼠碳廓清試驗(yàn)方法按體重從小鼠尾靜脈注入稀釋的印度墨汁(10mL/kg),待墨汁注入，立即計(jì)時注入墨汁后2、10min，分別從內(nèi)眥靜脈叢耳5Uk20pL，并立即將其加到2mL0.1%Na2C03溶液中。各吸O.lmL于96孔酶標(biāo)板中，用酶標(biāo)儀在600nm波長處測光密度值(OD)，以Na2C03溶液作陰性對照。將小鼠處死.取肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器表面血污，分別稱重。以吞噬指數(shù)表示小鼠碳廓清的能力。按下式計(jì)算吞噬指數(shù)a。受試樣品組的吞噬指數(shù)顯著高于對照組，可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。LgOD「lgOD2k=-體重吞噬指數(shù)a=-xk1/3肝重十脾重1.4.64元體生成細(xì)月包沖全測取脫纖維的羊血，用生理鹽水洗滌3次，每次離心(2000r/min)10min，每只鼠經(jīng)腹腔注射2。/。(v/v)SRBC0.2mL。將SRBC免疫4~5天后的小鼠頸推脫臼處死，取出脾臟，放在盛裝有Hank's液的小平皿內(nèi)，輕輕磨碎脾臟，制成細(xì)胞懸液，經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，離心(1000/min)10min，用Hank's液洗2遍，最后將細(xì)胞懸浮在5mLRPMI1640培養(yǎng)液中，計(jì)數(shù)細(xì)胞，并將細(xì)胞濃度調(diào)整為5x106個/mL。17空斑的測定將表層培養(yǎng)基(lg瓊脂糖加雙蒸水至100mL)加熱溶解后，放入4550。C水浴保溫，與等量pH7.27.4、2倍濃度的Hank's液混合，分裝小試管，每管0.5mL，再向管內(nèi)加50pL10%SRBC(v/v,用SA緩沖液配制)，20pL脾細(xì)胞懸液(5xl()S個/mL),迅速混勻，傾倒于己刷瓊脂糖薄層的玻片上，做平行片，待瓊脂凝固后，將玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育1.5h，然后用SA緩沖液稀釋的補(bǔ)體(1:8)加入玻片架凹槽內(nèi)，繼續(xù)溫育1.5h后，計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)。1.4.7NK細(xì)胞活性測定方法乳酸脫氫酶(LDH)測定法。乾細(xì)胞的傳代(YAC-1細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)前24h將靶細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。用前以Hank's液洗3次，用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為4xl()S個/mL。脾細(xì)胞懸液的制備(效應(yīng)細(xì)胞)無菌取脾，置于盛有適量無菌Hank's液的小平皿中，用鑷子輕輕將脾磨碎，制成單細(xì)胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，用Hank's液洗2次，每次離心10min(1000r/min)。棄上清將細(xì)胞漿彈起，加入0.5mL滅菌水20秒，裂解紅細(xì)胞后再加入0.5mL2倍Hank's液及8mLHanks液，1000r/min，10min離心，用lmL含10%小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液重懸，用1%冰醋酸稀釋后計(jì)數(shù)(活細(xì)胞數(shù)應(yīng)在95%以上)，用臺酚蘭染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95%以上)，最后用RPM11640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為2xl(^個/mL。NK細(xì)胞活性纟企測取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100pL(效靶比50:1)，加入U型96孔培養(yǎng)板中靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各lOO(iL,靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1%NP40各100pL;上述各項(xiàng)均設(shè)三個平行孔，于37。C、5%(302培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h,然后將96孔培養(yǎng)板以1500r/min離心5min'每孔吸取上清100juL置平底96孔培養(yǎng)板中，同時加入LDH基質(zhì)液100|iL,才艮據(jù)室溫不同反應(yīng)3~10min,每孔加入lmol/L的HCL30pL，在酶標(biāo)儀490nm處測定光密度值(OD)。按下式計(jì)算NK細(xì)胞活性，受試樣品組的NK細(xì)胞活性顯著高于對照組的NK細(xì)胞活性，即可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。反應(yīng)孔OD-自然釋放孔ODNK細(xì)胞活性(％)=_x100最大釋放孔OD—自然釋i文孔OD2結(jié)果2.1本發(fā)明實(shí)施例的增強(qiáng)人體免疫力的保健品對小鼠體重的影響:見表3、表4、表5、表6,各實(shí)驗(yàn)組小鼠試驗(yàn)前后體重與對照組比較PX).05，表明該保健品對小鼠體重?zé)o明顯影響。表3實(shí)驗(yàn)一組試驗(yàn)前后小鼠體重記錄(；士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>各組與陰性對照組比較p>0.05表4實(shí)驗(yàn)二組試驗(yàn)前后小鼠體重記錄(5±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表5實(shí)驗(yàn)三組試驗(yàn)前后小鼠體重記錄(S士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>各組與陰性對照組比較p>0.05表6實(shí)驗(yàn)四組試驗(yàn)前后小鼠體重記錄(^士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>各組與陰性對照組比較p>0.052.2本實(shí)施例的保健品對動物淋巴器官/體重比值的影響:見表7。各組小鼠胸腺/體重比值和脾臟/體重比值與陰性對照組比較，差異均無顯著性(PX).05)。表7對小鼠淋巴器官/體重比值的影響(7士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>各組與陰性對照組比較p>0.052.3本實(shí)施例的保健品淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果:見表8。從表8可見，與陰性對照組比較，該保健品高劑量組顯著性增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力(PO.01)。表8對細(xì)胞免疫功能的影響(S士S)組別劑量(g/kgBW)動物數(shù)(只)ConA誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞增殖OD差值P值DNFB誘導(dǎo)DTH左右耳重量差(mg)P值陰性對照組0.0100,064±0.016一9.38±2.74_低劑量組0.233100.083±0,0330.29111.33±3.810.387中劑量組0.467100.086±0.0240.17912.44±3.690.094高劑量組0.700100.109±0.0290,00213.49±2.130.0172.4本實(shí)施例的保健品對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響:見表8。從表8可見與陰性對照組比較，高劑量組顯著性增強(qiáng)小鼠對DNFB誘發(fā)的DTH反應(yīng)(p〈0.05)。2.5本實(shí)施例的保健品對小鼠血清溶血素滴度水平的影響:見表9。從表9可見，與陰性對照組比較，本實(shí)施例高劑量組可顯著性升高血清溶血素含量(P<0.05)。表9本實(shí)施例對小鼠溶血素滴度水平的影響(^士S)組別劑量(g/kgBW)動物數(shù)(只)血清溶血素(抗體積數(shù))P值陰性對照組0.01056.4±14.3一低劑量組0.751063.2士14.20.445中劑量組1.501065.0士9.80.264高劑量組2.251072.2±8.00.0142.6本實(shí)施例的保健品腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果:見表10。從表10可見，與陰性對照組比較,高劑量組明顯提高吞噬率、吞噬指數(shù)(pO.Ol、PO.05)。表10對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(^土s)組別劑量(g/kgBW)動物數(shù)(只)吞噬百分率(%)P值吞噬指數(shù)P值陰性對照組0.01022.40±2.27一0.321±0.034一低劑量組0.2331024.50±3.170.3060.346±0.0370.410中劑量組0.4671025.20±3.290.1220.351±0.0340.270高劑量組0.7001026.70±2,910.0070.378±0.0570.012212.7本實(shí)施例的的保健品碳廓清實(shí)驗(yàn)結(jié)果:見表11。從表ll可見，與陰性對照組比較，高劑量組顯著提高d、鼠碳廓清吞噬指數(shù)(PO.01)。表11對小鼠碳廓清功能的影響(；士S)組別劑量(g/kgBW)動物數(shù)(只)吞噬指數(shù)aP值陰性對照組0.0105.39±0.51一低劑量組0.233105.7U0.630.461中劑量組0.467105.87±0.520.160高劑量組0,700106.35±0.610.0022.8本實(shí)施例的保健品抗體生成細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表12。從表12見，與陰性對照組比較，高劑量組能明顯提高抗體生成細(xì)胞數(shù)量(P0.05)。表12對抗體生成細(xì)胞功能的影響(；士S)組別劑量(g/kgBW)動物數(shù)(只)溶血空斑數(shù)(/106脾細(xì)胞)P值陰性對照組0.010177.0±20.58一低劑量組0.23310193.0±29.080.371中劑量組0.46710197.0±29.460.208高劑量組0.70010212.0±21.500.0112.9本實(shí)施例的保健品NK細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表13。從表13可見，與陰性對照組比較，高劑量組明顯增強(qiáng)小鼠NK細(xì)胞活性(P0.05)。表13對小鼠NK細(xì)胞活性的影響(S士S)組別劑量(g/kgBW)動物數(shù)(只)細(xì)胞活性(%)P值陰性對照組0.01018.77±4.48一低劑量組0.2331022.55±5.640.313中劑量組0.4671023.64土4.450.137高劑量組0.7001026.49土7.330.0123結(jié)論1)各劑量組與陰性對照組比較，小鼠體重、淋巴器官/體重比值差異均無22顯著性；2)高劑量組能明顯增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力；3)高劑量組能明顯增強(qiáng)二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)；4)高劑量組能明顯升高小鼠血清溶血素含量；5)高劑量組明顯增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能；6)高劑量組明顯增強(qiáng)小鼠碳廓清能力；7)高劑量組能明顯增強(qiáng)抗體生成細(xì)胞能力；8)高劑量組明顯增強(qiáng)小鼠NK細(xì)胞活性。按照增強(qiáng)免疫力功能作用評價程序規(guī)定，該受試物具有增強(qiáng)免疫力功能作用。臨床資料中醫(yī)腎陽虛癥狀腰膝酸軟,畏寒肢冷,尤以下肢為甚，頭目眩暈,精神萎靡，面色白，或黎黑，舌淡胖苔白，脈沉弱?；虼蟊憔眯共恢?，完谷不化，五更泄瀉，或浮腫，腰以下為甚，按之凹餡不起，甚則腹部脹痛，心悸咳喘。選擇60例中醫(yī)腎陽虛病例臨床觀察。其中，男41例、女19例，年齡為5182歲，平均年齡67歲，無其它嚴(yán)重疾病。療效判定1、顯效體質(zhì)增強(qiáng)，四肢有力，精力充沛，臉色改善，消化、排便等方面明顯改善。2、有效狀況有所緩解，臉色、體力和消化方面均有一定程度的改善。3、無效癥狀無變化。實(shí)驗(yàn)時，停服其他藥物和保健營養(yǎng)品。服用本發(fā)明膠囊，一日兩次，每次兩粒，々反前S^用，60天為一個療程。30天后癥狀即有纟爰解，一個療程后，癥狀有明顯改善。臨床實(shí)驗(yàn)的60人中，顯效19人，有效38人，無效3人，總有效率95.00%。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。權(quán)利要求1、一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品，含有的組分及其重量份數(shù)比如下人參提取物50～200份黃芪提取物30～300份淫羊藿提取物30～200份巴戟天提取物10～80份。2、如權(quán)利要求1所述的保健品，其特征在于，含有的組分及其重量份數(shù)比如下人參提取物50150份黃芪4是耳又物3010(H分淫羊藿提耳又物30~100份巴戟天提耳又物10~50份。3、如權(quán)利要求2所述的保健品，其特征在于，含有的組分及其重量份如下人參提取物75卯份黃芪提耳又物5070份淫羊藿提取物45~55份巴戟天才是耳又物20~30份。4、如權(quán)利要求1所述的保健品，其特征在于，還含有重量份為50300的淀粉或4鼓晶纖維素。5、如權(quán)利要求4所述的保健品，其特征在于，淀粉或微晶纖維素重量份為100150。6、如權(quán)利要求15任一項(xiàng)所述的保健品，其特征在于，所述保健品采用劑型為膠嚢。7、如權(quán)利要求6所述的保健品，其特征在于，所述保健品劑型為腸》容力交嚢。8、一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品的制備方法，包括如下步驟(1)將淀粉或微晶纖維素，以及人參提取物、黃芪提取物、淫羊藿提取物、巴戟天提取物分別過60-200目篩；(2)將步驟(1)中各組分按照如下重量份置于混合機(jī)內(nèi)均勻混合人參提取物50200份黃芪提取物30300份淫羊藿提取物30~200份巴戟天4是耳又物10~80份淀粉或樣i晶纖維素50300份(3)加入步驟(2)所得混合物總重量1~10%的水混合制成軟材，10-30目篩制粒；(4)將步驟(3)中顆粒置烘箱內(nèi)，80。C以下烘干，用1CK30目篩整粒。9、如權(quán)利要求8的保健品的的制備方法，其特征在于，所述人參提取物是以人參為原料，經(jīng)乙醇提取濃縮成稠膏，再用乙醇醇降除雜，濃縮，噴霧干燥制得；所述黃芪提取物是以黃芪為原料，由乙醇回流提取除掉脂溶性成分，藥渣用乙醇進(jìn)一步回流提取除掉脂溶性成分、藥渣水提，濃縮，乙醇沉降得多糖沉淀后干燥制得；所述淫羊藿提取物以淫羊藿為原料，由乙醇提取、濃縮，水沉降，去渣，濃縮，噴霧干燥制得；所述巴戟天提取物是以巴戟天為原料，由乙醇回流去雜，水煮后再經(jīng)乙醇沉降制得。10、如權(quán)利要求8的保健品的的制備方法，其特征在于，還包括將步驟(4)所得顆粒送檢，取合格顆粒，在膠嚢填充機(jī)上灌裝步驟，以及之后的膠嚢外包步驟。全文摘要本發(fā)明提供了一種增強(qiáng)人體免疫力的保健品及其制備方法，該保健品含有的組分及其重量份為50～200份人參提取物，30～300份黃芪提取物，30～200份淫羊藿提取物，10～80份巴戟天提取物。該保健品的制備方法包括步驟(1)過篩；(2)將步驟(1)中各組分按照一定重量份置于混合機(jī)內(nèi)均勻混合；(3)加水混合制成軟材，制粒；(4)將步驟(3)中顆粒置烘箱內(nèi)，80℃以下烘干，整粒。本發(fā)明的保健品為腎陽虛引起的免疫功能低下而設(shè)。人參、黃芪、淫羊藿和巴戟天四藥合用，補(bǔ)腎之中皆補(bǔ)五臟，使腎精得充而虛損易復(fù)。文檔編號A23L1/30GK101491343SQ20091010566公開日2009年7月29日申請日期2009年2月27日優(yōu)先權(quán)日2009年2月27日發(fā)明者榮杜申請人:榮基泰實(shí)業(yè)(深圳)有限公司