本發(fā)明屬于醫(yī)藥學領域，尤其涉及一種林蛙油肽微粒的制備方法。

背景技術：

林蛙油又稱為哈蟆油、雪蛤油，為中國林蛙雌蛙的輸卵管，經(jīng)采制干燥而得。林蛙油是我國東北地區(qū)名貴的中藥材和滋補品，具有補腎益精，潤肺養(yǎng)陰的功效，對于治療神疲乏力、心悸失眠、癆嗽咳血有很好效果。此外，大量研究顯示，林蛙油中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，食用后可增加人體優(yōu)良蛋白質(zhì)、氨基酸和礦物質(zhì)的攝入量；同時林蛙油中還含有豐富的多糖、脂肪、雌二醇及其他生物活性物質(zhì)，可以增強人體免疫力，延緩人體衰老，增強人體對惡劣環(huán)境的抵抗能力，具有良好的保健功效。

近年來，隨著人們對林蛙副產(chǎn)品開發(fā)利用的重視，利用林蛙油進行新產(chǎn)品的開發(fā)，引起了國內(nèi)外學者和林蛙加工企業(yè)的極大興趣。

動物模型試驗證明:林蛙油蛋白水解產(chǎn)生的生物活性多肽易消化吸收，可為那些由飲食不能滿足蛋白質(zhì)營養(yǎng)需要的人員提供氮素營養(yǎng)，如胰腺炎、短腸綜合癥和crohn氏病患者及嬰幼兒、老年人和運動員等。作為腸道營養(yǎng)液同時可起到降血壓、降膽固醇等生理功能，同時提高機體抗擊疾病的能力。

微膠囊化技術是一種利用天然或合成的高分子材料，將氣體、液體或固體包裹起來，形成一種封閉微小粒子的包埋技術。采用微膠囊技術制得的產(chǎn)品有良好的功能性和貯存穩(wěn)定性，使用方便且可以解決林蛙油傳統(tǒng)的風干及熱處理加工工藝中所不能解決的產(chǎn)品異味嚴重、性狀不穩(wěn)定、貨架期短等眾多問題。它作為一種食品加工新方法，在歐美等發(fā)達國家應用已十分普遍，利用微膠囊技術生產(chǎn)的產(chǎn)品已成為國際現(xiàn)代食品工業(yè)中一類十分重要的食品原料或配料。

綜上所述，現(xiàn)有技術存在的問題是：

目前市場林蛙油產(chǎn)品類型單一，制作復雜，不適合工業(yè)化生產(chǎn)；不能將林蛙油中天然風味成分的加工、保存及再現(xiàn)；而且現(xiàn)有技術在林蛙油產(chǎn)品制備中，不能有效避免了原料受到污染，造成安全性差、貨架期短等問題。

技術實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術存在的問題，本發(fā)明提供了一種林蛙油肽微粒的制備方法，

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，一種林蛙油肽微粒的制備方法，包括以下步驟：

冷凍干燥林蛙油的制備：進行原料選擇、純凈水發(fā)制、去除筋膜、磨漿、超高壓殺菌、打入均質(zhì)機進行均質(zhì)處理，制得冷凍干燥林蛙油，創(chuàng)新性的采用了先冷凍干燥，再酶解的方法，不僅大大提高了酶解效率，而且呈現(xiàn)異味的雜質(zhì)大大減少，為后續(xù)產(chǎn)品提供良好的品質(zhì)保障；

進行酶解：將冷凍干燥林蛙油干品放入酶解罐中，調(diào)ph，按林蛙油干重的體積比例添加木瓜蛋白酶，酶解后，調(diào)整水浴溫度，滅酶處理，冷卻至室溫，離心后即得林蛙油肽粗提物，酶解過程中，通過試驗設計，科學的選擇了單一酶酶解，適當比例的復合酶酶解的方法，提高了酶解效率，降低了工業(yè)化生產(chǎn)成本；

進行膜過濾、濃縮、配料：將獲得的林蛙油肽粗提物經(jīng)過多級膜過濾系統(tǒng)處理；進一步獲得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；采用雙效濃縮器將林蛙油肽水解物進行濃縮處理，得林蛙油肽濃縮液；向林蛙油肽濃縮液中加入預處理的大豆肽、人參提取物、靈芝提取物中的一種或幾種進行均勻混合后備用；

保護劑的制作、混合：稱取乳清蛋白粉、β-環(huán)狀糊精、麥芽糊精、單硬脂酸甘油酯；均加入到蒸餾水中進行均勻混合；調(diào)ph；將溶液在微波或高壓條件下加熱，保溫，冷卻至室溫后備用；將林蛙油濃縮液與保護劑均勻混合后，采用高剪切均質(zhì)機乳化處理；

噴霧干燥、分裝、入庫：調(diào)節(jié)噴霧干燥機進口溫度，出口溫度，進料流量，進行噴霧干燥；將噴霧干燥后產(chǎn)品裝入包裝袋內(nèi)進行真空包裝，入庫后即得林蛙油肽微粒。

進一步，冷凍干燥林蛙油的制備，具體包括：選質(zhì)量符合標準的干品林蛙油作為冷凍干燥林蛙油原料；將挑選出的林蛙油與長白山純凈水按1:50~1:110比例加水泡發(fā)，發(fā)至水分完全吸盡，蛙油充分膨脹、松軟；手工去除筋膜及其它雜質(zhì)；將輔料提取液加入林蛙油中，同時按1:12~1:15質(zhì)量比例向攪拌均勻的林蛙油中加入長白山純凈水，研磨2分鐘~4分鐘，并與按質(zhì)量比0.5%~3%的復合調(diào)味料進行均勻混合，加入酸味調(diào)節(jié)劑0.05%~0.8%進行口味調(diào)配；使用的調(diào)味料包括糖，酸味調(diào)節(jié)劑包括食品級檸檬酸和乳酸；

在121℃，0.1mpa條件下，將磨漿后林蛙油進行高壓滅菌15分鐘~30分鐘，打入均質(zhì)機進行均質(zhì)處理，備用。

進一步，所述進行酶解，具體包括：將林蛙油干品放入酶解罐中，調(diào)ph至5.0-6.5，按林蛙油干重的體積比0.1%~1%(w/w)添加木瓜蛋白酶，50℃~60℃條件下，酶解2h~4h后，調(diào)整水浴溫度至95℃~100℃，滅酶處理5min~15min，冷卻至室溫后，5000rpm離心20min后即得林蛙油肽粗提物。

進一步，所述保護劑的制作、混合，具體包括：稱取乳清蛋白粉100g~200g、β-環(huán)狀糊精50g~100g、麥芽糊精50g~100g，單硬脂酸甘油酯5g~10g；均加入到1l蒸餾水中進行均勻混合；調(diào)整保護劑ph至7.0~9.5，將溶液在加熱至80℃，保溫30分鐘~60分鐘，冷卻至室溫后備用；

按照1:3~5的質(zhì)量比例將林蛙油濃縮液與保護劑均勻混合后，采用高剪切均質(zhì)機乳化處理3分鐘~5分鐘。

進一步，所述噴霧干燥、分裝、入庫，具體包括：調(diào)節(jié)噴霧干燥機進口溫度120℃~150℃，出口溫度65℃~85℃，進料流量250ml/h~350ml/h，進行噴霧干燥；將噴霧干燥后產(chǎn)品裝入包裝袋內(nèi)進行真空包裝，入庫后即得林蛙油肽微粒。

本發(fā)明另一目的在于提供一種利用上述的林蛙油肽微粒的制備方法制備的用于治療短腸綜合癥的林蛙油肽微粒。

本發(fā)明另一目的在于提供一種利用上述的林蛙油肽微粒的制備方法制備的用于治療crohn氏病的林蛙油肽微粒。

本發(fā)明另一目的在于提供一種利用上述的林蛙油肽微粒的制備方法制備的用于降血壓的林蛙油肽微粒。

本發(fā)明另一目的在于提供一種利用上述的林蛙油肽微粒的制備方法制備的用于降膽固醇的林蛙油肽微粒。

本發(fā)明另一目的在于提供一種利用上述的林蛙油肽微粒的制備方法制備的用于增強人體免疫力林蛙油肽微粒。

本發(fā)明的優(yōu)點及積極效果為：

按照本發(fā)明制備的林蛙油，既可以保證林蛙油的營養(yǎng)價值，解決傳統(tǒng)產(chǎn)品食用方法、樣式單一問題，此外，還可作為動物源食品的替代品應用于一些特殊市場，使得用林蛙油制備的優(yōu)質(zhì)蛋白類食品應用于地質(zhì)勘探、航空航天等領域成為可能，具有傳統(tǒng)林蛙油產(chǎn)品無法比擬的的應用前景。

本發(fā)明應用酶解及微膠囊化技術制備出的林蛙油肽微粒，不僅可以提高林蛙油肽的營養(yǎng)價值，解決林蛙油中天然風味成分的加工、保存及再現(xiàn)等問題，產(chǎn)品無異味，貨架期延長50%以上，且符合天然綠色、健康、美食的要求，而且還可以作為配料用于方便食品、休閑食品，特別是能很好地滿足老年人、小孩及女士的對健康食品的需求。此外，還為林蛙油肽在食品、醫(yī)藥、畜牧、化妝品等各行業(yè)應用及林蛙油肽相關保健產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)，同時促進林蛙深加工技術發(fā)展和相關生物保健產(chǎn)品開發(fā)提供技術支撐。

本發(fā)明制備的林蛙油肽微粒不僅產(chǎn)品質(zhì)量好、純度高，噴霧干燥過程是在封閉的環(huán)境中進行，不與外界接觸，避免了原料受到污染、安全性高，且改善了產(chǎn)品口感，降低了林蛙油肽的不良風味，更方便運輸、貯存和生產(chǎn)加工。此外，工藝簡單，成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實施例提供的林蛙油肽微粒的制備方法流程圖。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的應用原理作詳細描述。

如圖1所示，本發(fā)明實施例提供的林蛙油肽微粒的制備方法，包括：

s101:冷凍干燥林蛙油的制備：選質(zhì)量符合標準的干品林蛙油作為冷凍干燥林蛙油原料；將挑選出的林蛙油與長白山純凈水按1:50~1:110比例加水泡發(fā)，發(fā)至水分完全吸盡，蛙油充分膨脹、松軟；手工去除筋膜及其它雜質(zhì)；將輔料提取液加入林蛙油中，同時按1:12~1:15質(zhì)量比例向攪拌均勻的林蛙油中加入長白山純凈水，研磨2分鐘~4分鐘，并與按質(zhì)量比0.5%~3%的復合調(diào)味料進行均勻混合，加入酸味調(diào)節(jié)劑0.05%~0.8%進行口味調(diào)配；使用的調(diào)味料包括糖，酸味調(diào)節(jié)劑包括食品級檸檬酸和乳酸；121℃，0.1mpa條件下，將磨漿后林蛙油進行高壓滅菌15~30分鐘，冷卻至室溫；打入均質(zhì)機進行均質(zhì)處理，制得冷凍干燥林蛙油，備用。

s102:進行酶解：將林蛙油干品放入酶解罐中，調(diào)ph至5.0-6.5，按林蛙油干重的0.1%~1%(w/w)添加木瓜蛋白酶，50℃~60℃條件下，酶解2~4h后，調(diào)整水浴溫度至95~100℃，滅酶處理5~15min，冷卻至室溫后，5000rpm離心20min后即得林蛙油肽粗提物；

s103:進行膜過濾、濃縮、配料：將獲得的林蛙油肽粗提物經(jīng)過多級膜過濾系統(tǒng)處理；進一步獲得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；采用雙效濃縮器將林蛙油肽水解物進行濃縮處理，得林蛙油肽濃縮液；向林蛙油肽濃縮液中加入預處理的大豆肽、人參提取物、靈芝提取物中的一種或幾種進行均勻混合后備用；

s104:保護劑的制作、混合：稱取乳清蛋白粉100~200g、β-環(huán)狀糊精50~100g、麥芽糊精50~100g，單硬脂酸甘油酯5~10g、加入到1l蒸餾水中進行均勻混合；

調(diào)ph：調(diào)整保護劑ph至7.0~9.5，將溶液在微波或高壓條件下加熱至80℃以上，保溫30~60min，冷卻至室溫后備用；按照1:3~5的比例將林蛙油濃縮液與保護劑均勻混合后，采用高剪切均質(zhì)機乳化處理3~5min；

s105:噴霧干燥、分裝、入庫：調(diào)節(jié)噴霧干燥機進口溫度120℃~150℃，出口溫度65℃~85℃，進料流量250ml/h~350ml/h，進行噴霧干燥；將噴霧干燥后產(chǎn)品裝入包裝袋內(nèi)進行真空包裝，入庫后即得林蛙油肽微粒。

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的應用原理作進一步描述。

實施例1綠茶味冷凍干燥林蛙油的制備：

原料選擇：挑選質(zhì)量符合標準的黃色或淡黃色塊狀半透明的干品林蛙油作為林蛙油原料；

預處理：將干品林蛙油挑選除雜；

發(fā)制：將去除雜質(zhì)的林蛙油與長白山山泉水按照1:80比例進行泡發(fā)，發(fā)制時間12h，使得林蛙油充分膨脹、松軟；

去筋膜：采用人工方式去除發(fā)制好的林蛙油中筋膜、黑蛙卵，并清洗除雜；

煮制脫腥：按1:12（w/v）比例向預混林蛙油中加入長白山山泉水，85℃條件下煮制15min；

調(diào)配：將煮制脫腥后的林蛙油與抹茶粉、綠茶香精并與按質(zhì)量比0.5%~3%的復合調(diào)味料進行均勻混合，加入酸味調(diào)節(jié)劑0.05%~0.8%進行口味調(diào)配；使用的調(diào)味料包括糖，酸味調(diào)節(jié)劑包括食品級檸檬酸和乳酸；

加入食品添加劑；121℃，0.1mpa條件下，將磨漿后林蛙油進行高壓滅菌15~30分鐘，冷卻至室溫；打入均質(zhì)機進行均質(zhì)處理，制得冷凍干燥即食林蛙油，備用；

酶解：將林蛙油干品放入酶解罐中，調(diào)ph至5.0，按林蛙油干重的0.5%(w/w)添加木瓜蛋白酶，60℃酶解2h后，調(diào)整水浴溫度至95℃，滅酶處理10min，冷卻至室溫后，5000rpm離心20min后即得林蛙油肽粗提物；

膜過濾：將獲得的林蛙油肽粗提物經(jīng)過多級膜過濾系統(tǒng)處理；進一步獲得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；

濃縮：采用雙效濃縮器將林蛙油肽水解物進行濃縮處理，得林蛙油肽濃縮液；

配料：向林蛙油肽濃縮液中加入預處理的大豆肽、進行均勻混合后備用;

保護劑的制作：稱取乳清蛋白粉100g、β-環(huán)狀糊精50g、麥芽糊精

50g，單硬脂酸甘油酯5g、加入到1l蒸餾水中進行均勻混合；

調(diào)ph：調(diào)整保護劑ph至7.0，將溶液在微波或高壓條件下加熱至80℃以上，保溫30~60min；

混合：按照1:5的比例將林蛙油濃縮液與保護劑均勻混合后，采用高剪切均質(zhì)機乳化處理5min；

噴霧干燥：調(diào)節(jié)噴霧干燥機進口溫度150℃，出口溫度80℃，進料流量300ml/h，進行噴霧干燥；

分裝、入庫：將噴霧干燥后產(chǎn)品裝入包裝袋內(nèi)進行真空包裝，入庫后即得林蛙油肽微粒。

實施例2山楂味冷凍干燥即食林蛙油的制備

原料選擇：選質(zhì)量符合標準的黃色或淡黃色塊狀半透明的干品林蛙油作為冷凍干燥林蛙油原料；

預處理：將干品林蛙油挑選除雜；

發(fā)制：將去除雜質(zhì)的干品林蛙油與長白山山泉水按照1:100比例進行泡發(fā)，發(fā)制時間10h，使得蛙油充分膨脹、松軟；

去筋膜：將發(fā)制好的林蛙油去除筋膜、黑蛙卵并清洗除雜；

添加輔料：按1:7（w/w）比例將預處理的林蛙油與輔料混合均勻，使用的輔料包括、活性炭吸附、甘草、八角、等中的一種或幾種；

煮制脫腥：按1:13（w/v）比例向預混林蛙油中加入長白山山泉水，90℃煮制12min；

調(diào)配：將脫腥后的林蛙油與山楂粉并與按質(zhì)量比0.5%~3%的復合調(diào)味料進行均勻混合，加入酸味調(diào)節(jié)劑0.05%~0.8%進行口味調(diào)配；使用的調(diào)味料包括糖，酸味調(diào)節(jié)劑包括食品級檸檬酸和乳酸；

121℃，0.1mpa條件下，將磨漿后林蛙油進行高壓滅菌15~30分鐘，冷卻至室溫；打入均質(zhì)機進行均質(zhì)處理，制得冷凍干燥即食林蛙油，備用；

酶解：將林蛙油干品放入酶解罐中，調(diào)ph至5.5，按林蛙油干重的0.3%(w/w)添加木瓜蛋白酶，60℃酶解3h后，調(diào)整水浴溫度至100℃，滅酶處理10min，冷卻至室溫后，5000rpm離心20min后即得林蛙油肽粗提物；

膜過濾：將獲得的林蛙油肽粗提物經(jīng)過多級膜過濾系統(tǒng)處理；進一步獲得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；

濃縮：采用雙效濃縮器將林蛙油肽水解物進行濃縮處理，得林蛙油肽濃縮液；

配料：向林蛙油肽濃縮液中加入適量預處理的人參提取物、進行均勻混合后備用；

保護劑的制作：稱取乳清蛋白粉150g、β-環(huán)狀糊精60g、麥芽糊精70g，單硬脂酸甘油酯6g、加入到1l蒸餾水中進行均勻混合；

調(diào)ph：調(diào)整保護劑ph至8.0，將溶液在微波或高壓條件下加熱至80℃以上，保溫30~60min，冷卻至室溫后備用；

混合：按照1:3的比例將林蛙油濃縮液與保護劑均勻混合后，采用高剪切均質(zhì)機乳化處理3min；

噴霧干燥：調(diào)節(jié)噴霧干燥機進口溫度140℃，出口溫度85℃，進料流量280ml/h，進行噴霧干燥；

分裝、入庫：將噴霧干燥后產(chǎn)品裝入包裝袋內(nèi)進行真空包裝，入庫后即得林蛙油肽微粒。

實施例3榛仁味冷凍干燥即食林蛙油的制備

原料選擇：選質(zhì)量符合標準的黃色或淡黃色塊狀半透明的干品林蛙油作為冷凍干燥林蛙油原料；

預處理：將干品林蛙油挑選除雜；

發(fā)制：按料液比為1:110（w/v）向去除雜質(zhì)的干品林蛙油中添加長白山山泉水進行泡發(fā)，發(fā)制時間12h，使蛙油充分膨脹、松軟；

去筋膜：將發(fā)制好的林蛙油去除筋膜、黑蛙卵并清洗除雜；

添加輔料：按1:80w/w）比例向預處理林蛙油中加入輔料并混合均勻，使用的輔料包括姜、桂皮、丁香、白醋、白酒、檸檬酸等中的一種或幾種；

煮制腥脫：按料液比1:12（w/v）為向預混林蛙油中加入長白山山泉水混合均勻，100℃煮制10min；

調(diào)配：將煮制脫腥后的林蛙油與榛仁粉并與按質(zhì)量比0.5%~3%的復合調(diào)味料進行均勻混合，加入酸味調(diào)節(jié)劑0.05%~0.8%進行口味調(diào)配；使用的調(diào)味料包括糖，酸味調(diào)節(jié)劑包括食品級檸檬酸和乳酸調(diào)味料；

121℃，0.1mpa條件下，將磨漿后林蛙油進行高壓滅菌15~30分鐘，冷卻至室溫；打入均質(zhì)機進行均質(zhì)處理，制得冷凍干燥即食林蛙油，備用；

酶解：將林蛙油干品放入酶解罐中，調(diào)ph至5.5，按林蛙油干重的0.4%(w/w)添加木瓜蛋白酶，55℃酶解4h后，調(diào)整水浴溫度至100℃，滅酶處理10min，冷卻至室溫后，5000rpm離心20min后即得林蛙油肽粗提物；

膜過濾：將獲得的林蛙油肽粗提物經(jīng)過多級膜過濾系統(tǒng)處理；進一步獲得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；

濃縮：采用雙效濃縮器將林蛙油肽水解物進行濃縮處理，得林蛙油肽濃縮液；

配料：向林蛙油肽濃縮液中加入適量預處理的人參提取物、進行均勻混合后備用；

保護劑的制作：稱取乳清蛋白粉170g、β-環(huán)狀糊精60g、麥芽糊精85g，單硬脂酸甘油酯6g、加入到1l蒸餾水中進行均勻混合；

調(diào)ph：調(diào)整保護劑ph至8.0，將溶液在微波或高壓條件下加熱至80℃以上，保溫30~60min，冷卻至室溫后備用；

混合：按照1:6的比例將林蛙油濃縮液與保護劑均勻混合后，采用高剪切均質(zhì)機乳化處理2min；

噴霧干燥：調(diào)節(jié)噴霧干燥機進口溫度170℃，出口溫度80℃，進料流量330ml/h，進行噴霧干燥；

分裝、入庫：將噴霧干燥后產(chǎn)品裝入包裝袋內(nèi)進行真空包裝，入庫后即得林蛙油肽微粒。

按照本發(fā)明制備的林蛙油，既可以保證林蛙油的營養(yǎng)價值，解決產(chǎn)品單一問題，同時符合天然綠色、健康、美食的要求，又可以作為配料用于方便食品、休閑食品，特別是能很好地滿足老年人、小孩及愛吃零食又害怕發(fā)胖的女士的需要。此外，還可作為動物源食品的替代品應用于一些特殊市場，例如地質(zhì)勘探、部隊野營訓練以及航空航天專用食品等，具有廣闊的應用前景。

本發(fā)明應用酶解及微膠囊化技術制備出的林蛙油肽微粒，不僅可以提高林蛙油肽的營養(yǎng)價值，解決林蛙油中天然風味成分的加工、保存及再現(xiàn)等問題，且符合天然綠色、健康、美食的要求，而且還可以作為配料用于方便食品、休閑食品，特別是能很好地滿足老年人、小孩及女士的對健康食品的需求。此外，還為林蛙油肽在食品、醫(yī)藥、畜牧、化妝品等各行業(yè)應用及林蛙油肽相關保健產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)，同時促進林蛙深加工技術發(fā)展和相關生物保健產(chǎn)品開發(fā)提供技術支撐。

本發(fā)明制備的林蛙油肽微粒不僅產(chǎn)品質(zhì)量好、純度高，噴霧干燥過程是在封閉的環(huán)境中進行，不與外界接觸，避免了原料受到污染、安全性高，且改善了產(chǎn)品口感，降低了林蛙油肽的不良風味，更方便運輸、貯存和生產(chǎn)加工。此外，工藝簡單，成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。