專利名稱：一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種營養(yǎng)制品，尤其是一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉。
背景技術(shù)：
目前，人們的健康受到空氣污染、食水污染、環(huán)境污染、工作壓力、經(jīng)濟壓力、細菌病毒、飲食不當?shù)榷嘀赝{，所有這些不利健康的因素，都會導致免疫力低下，嚴重地影響著人類的日常生活、工作和學習，同時可產(chǎn)生一系列的亞健康臨床癥狀，如記憶力減退、食欲不振、精神不振、嗜睡、多夢、乏力、易感冒、腸胃功能紊亂等。為了增強人體免疫力，在堅持多參加體育鍛煉和注意飲食的基礎(chǔ)上，食用具有增強免疫力功能的保健食品也很有必要。我們知道，大豆蛋白營養(yǎng)價值高，其具有以下保健功能降血脂、減肥、防骨質(zhì)疏·病的預(yù)防與治療也有一定的作用。乳清蛋白的必需氨基酸種類齊全、數(shù)量充足且比例適當，是一種營養(yǎng)價值較高的優(yōu)質(zhì)蛋白。乳清蛋白中有多種物質(zhì)參與構(gòu)成機體非特異性防御屏障，具有有效對抗細菌、病毒和免疫調(diào)節(jié)等作用，包括具有抗菌作用的乳鐵蛋白、乳過氧化物酶、免疫球蛋白、α-乳白蛋白和溶菌素，及一些酪蛋白或乳清蛋白來源的抗菌肽。利用大豆分離蛋白和濃縮乳清蛋白制備增強人體免疫力的制品，目前已有報道。例如，2012年5月30日公開的CN102475201A中國發(fā)明專利申請說明書就公開了 “一種具有保健功能的蛋白粉組合物”，該組合物包括大豆分離蛋白4-95%、乳清蛋白4-94%、果糖
O.5-30%、磷酸三鈣O. 1-10%、黃原膠O. 1-20%。但是，在上述公開的蛋白粉組合物中，甜味劑果糖，拮抗劑磷酸三鈣，增稠劑黃原膠，它們對增強人體免疫力的作用很小，且該蛋白粉營養(yǎng)單一，不利于消化吸收。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中蛋白粉組合物對增強人體免疫力作用小、營養(yǎng)單一且不利于消化吸收的不足，本發(fā)明提供一種劑量科學、增強免疫力效果好、營養(yǎng)全面、易于吸收，并具有保健功能的用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其特征在于所述的復(fù)合蛋白粉是由下列重量百分比的組分組成大豆分離蛋白60% 75%、濃縮乳清蛋白10% 30%、櫻桃粉1% 10%、菊粉1% 10%、膳食纖維粉1% 5%，其各組分的重量百分比之和為100%。上述的復(fù)合蛋白粉組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白70%、濃縮乳清蛋白20%、櫻桃粉4%、菊粉4%、膳食纖維粉2%。上述的大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上。上述的濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。上述的膳食纖維粉為果膠、樹膠、小麥糠粉、玉米糠粉、芹菜纖維粉、紅薯粉、果皮粉中的一種或者一種以上的組合。本發(fā)明的復(fù)合蛋白粉是將具有增強人體免疫功能的植物性蛋白質(zhì)大豆提取蛋白和動物性蛋白質(zhì)濃縮乳清蛋白進行了合理的配置，并進一步選取了有增強人體免疫功能的櫻桃粉、菊粉、膳食纖維粉。其中，所選用的櫻桃粉源自于針葉櫻桃。研究表明，針葉櫻桃中維生素C含量最高，是名符其實的“維生素C之王”。而維生素C與人體免疫系統(tǒng)密切相關(guān)。白細胞中含有豐富的維生素C，當機體感染時白細胞內(nèi)的維生素C急劇減少，維生素C可增強中性粒細胞的趨化性和變形能力，提高殺菌能力，促進淋巴母細胞的生成，提高機體對外來和惡變細胞的識別和殺滅；參與免疫球蛋白的合成，促進干擾素的產(chǎn)生，干擾病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄，抑制病毒的增生。除提高機體免疫功能外，維生素C還有抗氧化作用、解毒、促進鐵吸收、預(yù)防和控制炎癥等生理功能。針葉櫻桃還含有豐富的維生素A、維生素BI、維生素B2、鐵、鈣等元素。所選用的菊粉源自于菊苣，是一種純天然、可溶性的果聚糖混合物，能大大提高Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+等礦物質(zhì)及維生素的吸收，提高某段結(jié)腸鈣對蛋白質(zhì)的結(jié)合能力，從而提高機體的免疫能力；菊粉不被消化吸收而直接進入大腸，優(yōu)先被雙歧桿菌利用而 產(chǎn)生醋酸鹽和乳酸鹽，降低了大腸的PH值，從而抑制了有害菌的生長，是雙歧桿菌的增殖因子，從而刺激和提高免疫力。其所選用的膳食纖維粉是一種不能被人體消化的碳水化合物，包括非水溶性纖維和水溶性纖維兩種。其中，小麥糠粉、玉米糠粉、芹菜纖維粉、紅薯粉、果皮粉屬于非水溶性纖維，存在于植物細胞壁中，它們可降低罹患腸癌的風險，可吸收植物中有毒物質(zhì)以預(yù)防便秘和憩室炎，并且減低消化道中細菌排出的毒素；果膠和樹膠屬于水溶性纖維，它們可減緩消化速度和最快速排泄膽固醇，有助于調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能，促進體內(nèi)有毒重金屬的排出，所以可讓血液中的血糖和膽固醇控制在最理想的水平。與現(xiàn)有技術(shù)相t匕，本發(fā)明的復(fù)合蛋白粉，其配料合理、劑量科學、增強免疫力效果好、營養(yǎng)全面、易于吸收，并具有保健功能。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步說明。實施例I
一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白70%、濃縮乳清蛋白20%、櫻桃粉4%、菊粉4%、果膠2%。其中，大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上；濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。實施例2
一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白65%、濃縮乳清蛋白26%、櫻桃粉3%、菊粉1%、小麥糠粉5%。其中，大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上；濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。實施例3
一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白75%、濃縮乳清蛋白10%、櫻桃粉6%、菊粉8%、玉米糠粉O. 5%、樹膠O. 5%。其中，大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上；濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。實施例4一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白68%、濃縮乳清蛋白18%、櫻桃粉1%、菊粉10%、果皮粉1%、玉米糠粉2%。其中，大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上；濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。實施例5
一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白65%、濃縮乳清蛋白16%、櫻桃粉10%、菊粉5%、芹菜纖維粉2%、紅薯粉2%。其中，大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上；濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。實施例6
一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白60%、濃縮乳清蛋白30%、櫻桃粉3%、菊粉3%、果膠O. 5%、樹膠O. 5%、小麥糠粉O . 5%、玉米糠粉O. 5%、芹菜纖維粉1%、紅薯粉O. 5%、果皮粉O. 5%。其中，大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上；濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。本發(fā)明實施例I 6的制備方法是按照重量百分比稱量大豆分離蛋白、濃縮乳清蛋白、櫻桃粉、菊粉、膳食纖維粉，轉(zhuǎn)入30萬級潔凈區(qū)內(nèi)；然后將稱量的原料分別過60 80目篩，再共置于多向運動混合機中，混合30 45min，再進行分袋包裝，裝罐，即成成品。下面通過動物實驗來進一步說明其具有增強免疫力的功能。I、材料和方法
I.I、樣品按照本發(fā)明實施例所提供制備方法制備出的復(fù)合蛋白粉。人體口服推薦量為每日I次，每次IOg,成人體重按60kg計算,折合劑量O. 167g/kg. bw。I. 2、實驗動物與分組體重為18g_22g的SPF級昆明種雌性小鼠200只，由河南省實驗動物中心提供，生產(chǎn)許可證號SCXK(豫)2005-0001。飼料由長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技服務(wù)部提供，生產(chǎn)許可證號為SCXK (湘)2006-0001。每40只分為I組，共5組。每組隨機分為對照組、低、中、高劑量組。I. 3、實驗環(huán)境條件實驗條件為屏障環(huán)境，溫度22°C -24°C，濕度52%_54%。I. 4、劑量選擇及樣品處理據(jù)人體口服推薦量，蛋白粉低、中、高劑量分別為
O.84g/kg. bw、l. 67g/kg. bw、3. 34g/kg. bw(分別相當于人體推薦劑量的5、10、20倍)，以灌胃方式給予受試動物，每天灌胃I次，灌胃體積為0.2ml/10g.bw。對照組予以等體積的溶劑，連續(xù)30天。I. 5、主要儀器與試劑
主要儀器潔凈工作臺、二氧化碳培養(yǎng)箱、酶標儀、離心機、722分光光度計、無菌手術(shù)器械、細胞計數(shù)器、計時器、血色素吸管等；
試劑綿羊紅細胞(SRBC)、生理鹽水、Hank’ s液(pH7. 2-7. 4) ,RPMI1640培養(yǎng)液、小牛血清、青鏈霉素、ConA、lmol/L的HCl溶液、酸性異丙醇(96mL異丙醇加lmol/L的HCl溶液4mL)、MTT、PBS緩沖液(pH7. 2-7. 4)、補體、SA緩沖液、瓊脂糖、都式試劑、YAC-I細胞、乳酸鈉、硝基氯化四氮、吩嗪二甲酯硫酸鹽、氧化型輔酶I、0. 2mol/L的Tris-HCl緩沖液、2. 5%的Triton、印度墨汁、O. I %的碳酸鈉、雞紅細胞、甲醇、Giemsa染液等。I. 6、實驗方法
1.6. I、臟器/體重比值測定稱重后處死小鼠，取出脾臟和胸腺，在電子分析天平上稱重，計算臟/體比值。I. 6. 2、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)(足跖增厚發(fā))小鼠腹腔注射2%( v/v)SRBC (O. 2ml/每鼠)致敏后4天，測量左后足跖部厚度，然后在測量部位皮下注射20% (v/v)SRBC(20ul/每鼠)，注射后24h測量左后足跖部厚度，同一部位測量三次，取平均值。以攻擊前后足跖厚度差值來表示DTH的程度。1.6.3、ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗(MTT法)無菌取脾，制成細胞懸液，Hank’s液洗2次，調(diào)整細胞濃度為3X IO6個/ml。將細胞懸液分兩孔加入到24孔培養(yǎng)板中，每孔1ml，一孔加75ulConA液(7. 5ug/ml)，另一孔為對照，置5% 二氧化碳，37°C培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔吸去上清液O. 7ml，加入O. 7ml不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液，同時加入MTT(5mg/ml)50ul/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入Iml酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解，以570nm波長測定光密度值。I. 6. 4、抗體生成細胞檢測(Jerne改良玻片法):取羊血用生理鹽水洗滌3次，將壓積SRBC用生理鹽水配成2% (v/v)的細胞懸液，每鼠腹腔注射O. 2ml。免疫5天后，處死小 鼠，取脾，200目篩網(wǎng)過濾，洗滌、離心2次，最后將細胞懸浮于8mlHanks液中。調(diào)整細胞濃度為5 X IO6個/ml。將表層培養(yǎng)基加熱溶解，與等量2倍濃度Hanks液混合，分裝小試管，每管O. 5ml，加入50ull0% SRBC, 20ul脾細胞懸液，混勻，倒片，二氧化碳培養(yǎng)箱中溫育I. 5h，加入用SA液稀釋的補體(I 8)，繼續(xù)溫育I. 5h，計數(shù)溶血空斑數(shù)。I. 6. 5、半數(shù)溶血值(HC5tl)的測定取羊血用生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2% (v/v，用生理鹽水配制)SRBC進行免疫。5天后，摘眼球收集血清。試管內(nèi)加入200倍稀釋的血清lml、10% SRBCO. 5ml、補體lml，37°C水浴30min，冰浴終止反應(yīng)，離心，取上清Iml,加都氏試劑3ml, IOmin后于540nm處比色。其中，按下式計算半數(shù)溶血值
半數(shù)溶血值(HC5tl) =樣品光密度值/SRBC半數(shù)溶血時的光密度值X稀釋倍數(shù)。I. 6. 6、小鼠碳廓清實驗小鼠尾靜脈注射以生理鹽水稀釋4倍的印度墨汁，每IOg體重注射O. 1ml，分別于第2、10min內(nèi)眥取血20ul，加入到2ml碳酸鈉溶液中，600nm比色。另取肝、脾稱重，計算吞噬指數(shù)a。I. 6. 7、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗(半體內(nèi)法)小鼠腹腔注射20%雞紅細胞懸液lml，間隔30min，頸椎脫白處死，仰位固定于鼠板上，正中剪開腹壁皮膚，經(jīng)腹腔注入生理鹽水2ml，轉(zhuǎn)動鼠板lmin，取腹腔洗液1ml，滴于載玻片上，放入墊有濕紗布的搪瓷盒內(nèi)，于37°C孵箱溫育30min，孵畢，生理鹽水漂洗，晾干，以I : I丙酮甲醇溶液固定，4%Giemsa-磷酸緩沖液染色。油鏡下每片計數(shù)100個巨噬細胞，按下式計算吞噬率和吞噬指數(shù)
吞噬率(％)=吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/計算的巨噬細胞數(shù)X 100 ；
吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細胞總數(shù)/計算的巨噬細胞數(shù)。I. 6. 8、NK細胞活性的測定(乳酸脫氫酶測定法)受試小鼠頸椎脫臼處死，無菌取脾，制成脾細胞懸液，Hank’s液洗2次，調(diào)整細胞濃度為2X IO7個/ml。取靶細胞和效應(yīng)細胞各IOOul (效靶比50 I)，加入U型96孔培養(yǎng)板，靶細胞自然釋放孔加靶細胞和培養(yǎng)液各IOOul，靶細胞最大釋放孔加靶細胞和2. 5% Triton各IOOul，均設(shè)三個平行孔，于37°C、5% C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h，每孔吸取上清液IOOul置平底96孔培養(yǎng)板中，同時加入LDH基質(zhì)液IOOul,反應(yīng)3min-10min,每孔加入lmol/L的HC130ul,在酶標儀490nm處測定光密度(OD)0其中，
NK細胞活性=[(反應(yīng)孔OD-自然釋放孔OD)/(最大釋放孔OD-自然釋放孔OD)] X 100%
1.7、實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計用Spssll. O軟件進行統(tǒng)計分析。2、結(jié)果
2.I、復(fù)合蛋白粉對小鼠體重的影響(表I-表5)
表I復(fù)合蛋白粉增強免疫力功能實驗(I)組小鼠體重
權(quán)利要求
1.一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其特征在于所述的復(fù)合蛋白粉是由下列重量百分比的組分組成大豆分離蛋白60% 75%、濃縮乳清蛋白10% 30%、櫻桃粉1% 10%、菊粉1% 10%、膳食纖維粉1% 5%，其各組分的重量百分比之和為100%。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其特征在于所述的復(fù)合蛋白粉組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白70%、濃縮乳清蛋白20%、櫻桃粉4%、菊粉4%、膳食纖維粉2%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其特征在于所述的大豆分離蛋白來自大豆，其蛋白質(zhì)含量在90%以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其特征在于所述的濃縮乳清蛋白來自牛乳，其蛋白質(zhì)含量在80%以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其特征在于所述的膳食纖維粉為果膠、樹膠、小麥糠粉、玉米糠粉、芹菜纖維粉、紅薯粉、果皮粉中的一種或者一種以上的組合。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于增強人體免疫力的復(fù)合蛋白粉，其各組分的重量百分比分別為大豆分離蛋白65%-75%、濃縮乳清蛋白10%-30%、櫻桃粉1%-10%、菊粉1%-10%、膳食纖維粉1%-5%。本發(fā)明所選取的櫻桃粉、菊粉、膳食纖維粉與大豆分離蛋白、濃縮乳清蛋白配比，其配料合理，劑量科學，共同作用能增強人體免疫力，且營養(yǎng)全面，更易于吸收。
文檔編號A23L1/09GK102871019SQ20121038907
公開日2013年1月16日 申請日期2012年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月15日
發(fā)明者王麗娜, 馬云 申請人:榮成百合生物技術(shù)有限公司