專利名稱：從菌糠中制備纖維素酶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及纖維素酶的制備方法，尤其涉及一種以菌糠為原料制備纖 維素酶的方法。
背景技術(shù)：
纖維素酶(Cdlulase)是降解纖維素生成葡萄糖的一組酶的總稱，包括內(nèi) 切葡聚糖酶(EG)、外切葡聚糖酶(CBH)禾n卩-葡萄糖苷酶(CB)。首 先是纖維素酶分子吸附到纖維素表面，然后，EG在葡聚糖鏈的隨機(jī)位點(diǎn)水 解底物，產(chǎn)生寡聚糖；CBH從葡聚糖鏈的非還原端進(jìn)行水解，主要產(chǎn)物為 纖維二糖；而CB可水解纖維素二糖為葡萄糖。纖維素的降解過程需要這3 種酶的協(xié)同作用。不同來源的纖維素酶其分子特征和催化活性不盡相同。
纖維素酶從被發(fā)現(xiàn)起就受到產(chǎn)業(yè)界的廣泛關(guān)注。纖維素酶的應(yīng)用已擴(kuò) 展到紡織(印染，2000， 1， 29_32)、日用化工、造紙(廣西輕工業(yè)，1997， 3， 12—15)、食品發(fā)酵(廣州化學(xué)，1996， 4， 8—14)、煙草、石油開采、 廢水處理及飼料(中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，1999， 1， 84 — 88)等各個(gè)領(lǐng)域，其應(yīng)用 前景十分廣闊。當(dāng)今世界，能源和資源供應(yīng)日趨緊張，人們都十分期望能 借助纖維素酶將地球上最豐富(占全球總生物量80%)、最廉價(jià)的可再生 資源纖維素轉(zhuǎn)化為能直接利用的能源和資源。專家預(yù)測(cè)，針對(duì)扮演綠色化 學(xué)品的纖維素酶的研究開發(fā)是新世紀(jì)的可再生性資源的關(guān)鍵技術(shù)之一。對(duì) 于解決工農(nóng)業(yè)原料來源、能源危機(jī)、環(huán)境污染等問題具有十分重要的意義。
自然界中廣泛地存在著能降解纖維素的微生物，它們種類繁多，包括 細(xì)菌、真菌和放線菌等，生產(chǎn)上以木霉(7Wc/20&rma)及其近緣的菌株應(yīng)
用最為廣泛?，F(xiàn)有的纖維素酶生產(chǎn)方法主要是采用產(chǎn)纖維素酶的微生物進(jìn) 行發(fā)酵制備。
伍紅等將誘變過的黑曲霉轉(zhuǎn)于以麩皮、甘蔗渣等為主要原料的固體培 養(yǎng)基上，采用固態(tài)發(fā)酵的方式制備纖維素酶(菌物學(xué)報(bào)，2006， 3， 475 — 480)。廣泛用于纖維素酶制備的綠色木霉在固態(tài)條件下的產(chǎn)酶能力也較高(河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2007， 1， 46 — 48)。纖維素酶的固 態(tài)發(fā)酵法雖然具備設(shè)備簡(jiǎn)單、投資少等特點(diǎn)，但其發(fā)酵水平不穩(wěn)定、產(chǎn)酶 效率低、且易污染雜菌，目前只能適于小規(guī)模制備。
哈茨木霉在麩皮為唯一碳源時(shí)，在相對(duì)較優(yōu)條件下濾紙酶活為 0.96U/mL (山東大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版)，2005， 3， 110—115)。里氏木霉在 50L全自動(dòng)發(fā)酵罐中以較優(yōu)的條件進(jìn)行纖維素酶液體發(fā)酵，120hr后發(fā)酵液 中纖維素酶的濾紙酶活達(dá)到48.9 U /mL( 1 U定義為酶解反應(yīng)中每分鐘生成 l.O(amol葡萄糖所需的酶量)(河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2006， 5， 47 — 50)。靈芝在PDY培養(yǎng)基(馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，酵母膏5 g，加水至1,000 mL)中進(jìn)行液體發(fā)酵，得純化倍數(shù)提高了 3.16倍的纖維 素酶的羧甲基纖維素酶活為6.89 U (1U定義為每lhr產(chǎn)生l.Omg還原糖所 需的酶量)(南京理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2006， 3， 356 — 360)。纖維素酶液體深 層發(fā)酵培養(yǎng)具有條件容易控制、生產(chǎn)效率高和適于大規(guī)模生產(chǎn)等特點(diǎn)，但 其需要使用系統(tǒng)設(shè)備進(jìn)行發(fā)酵，工藝過程中控制參數(shù)較多，對(duì)技術(shù)人員的 操作水平要求高，對(duì)于所要配制的設(shè)備也有相當(dāng)高的要求，造成設(shè)備投入 過大，不利于降低生產(chǎn)成本。
到目前為止，尚未見任何從廢棄菌糠料中提取纖維素酶的相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，利用含有 纖維素酶的菌糠為原料，使得農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的廢物得到有效再利用、改善環(huán) 境，降低纖維素酶制取的成本。 ，
菌糠是指以棉籽殼、木屑、稻草、玉米芯、甘蔗渣及多種農(nóng)作物秸稈、 工業(yè)廢料為主要原料栽培食用菌后的廢棄培養(yǎng)基。食用菌菌絲在培養(yǎng)基中 生長時(shí)，需要產(chǎn)生大量的纖維素酶來分解基質(zhì)中的纖維素以獲得營養(yǎng)，因 此，廢棄菌糠中含有豐富的纖維素酶。菌糠是用以培養(yǎng)食用菌，為食用菌 生長提供必要的營養(yǎng)，菌糠的具體組成不能作為對(duì)本發(fā)明所述纖維素酶制 備方法的限定。
工業(yè)廢料主要選自于酒糟、醋糟、造紙廠廢液及制藥廠黃漿廢液。食用菌為人工培養(yǎng)或野生環(huán)境下可為生物食用的菌類，其生長過程中 能分泌纖維素酶來分解基質(zhì)中的纖維素以獲得營養(yǎng)。所述食用菌主要選自
于蘑燕 (vigW7'c船cam/ es^s1)、 木耳 (J鵬'CM/or/a鹿n'cw/")、 冬蟲夏草 (Coniyce^ w'"e"w's )、 靈芝 (C 朋ocie，(3 /w",dwm )、 金耳 (7Vewe〃a awraw"fl/Z fl)、魚包魚燕(尸/ewra加a6a/o廂s)、平燕(/VeMroto/Za6e〃a加)、 金針燕(F/awww/zVza ve/w印es)、杏鮑恭(尸/ewrato ^;;，'/)、秀珍燕(7 /6紅0加 、雞月退燕(Co/ nV Ms cowans1)、白靈燕(P/ew(3/7^ e6n <iera/5)、 香燕ecfo(ies1)、 茶樹燕 (Jgroqy6e 等。
本發(fā)明提供的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，包括菌糠的預(yù)處理、 菌糠纖維素酶的初歩提取和纖維素酶純化幾個(gè)步驟。 1、菌糠的預(yù)處理
先除去菌糠上層覆土或菌皮后加入增效劑，然后在20 — 3(TC堆積發(fā)酵。
所用增效劑能調(diào)節(jié)體系pH值和碳/氮(C/N)比，促進(jìn)菌糠中食用菌 菌絲的二次生長，增加體系中纖維素酶產(chǎn)量。其選自于有機(jī)胺，具體選自 于人或畜的尿液或尿素。
一種具體實(shí)施方式
，當(dāng)增效劑為人或畜的尿液時(shí)，其在每100kg菌糠 中的通常加入量為1 —5L，可進(jìn)一步選擇1.5 —4L，當(dāng)具體選擇1.5、 1.8、 2.0、 2.2、 2.4、 2.6、 2.8、 3.0、 3.2、 3.4、 3.6、 3.8或4.0L時(shí)能夠高效促進(jìn) 菌糠中食用菌菌絲的二次生長，增加體系中纖維素酶產(chǎn)量。
另一種具體實(shí)施方式
，當(dāng)增效劑為尿素時(shí)，其在每100kg菌糠中的加 入量通常加入量為0.1 — 0.5kg，可進(jìn)一步選擇0.15 — 0.35 kg，當(dāng)具體選擇 0.15、 0.18、 0.20、 0.22、 0.24、 0.26、 0.28、 0.30、 0.31、 0.33或0.35 kg時(shí) 能夠高效促進(jìn)菌糠中食用菌菌絲的二次生長，增加體系中纖維素酶產(chǎn)量。
堆積發(fā)酵的時(shí)間通常為3 — 10天，可進(jìn)一步選擇4一8天，當(dāng)具體選擇 5、 6或7天時(shí)可以得到發(fā)酵完全的菌糠，且時(shí)間占用也較少。
一種具體實(shí)施方式
，堆積發(fā)酵的時(shí)間為3 —10天，或進(jìn)一步選擇4一8 天時(shí)，以人或畜的尿液增效劑，每100kg菌糠中的加入量為1一5L，或進(jìn) 一歩選擇1.5 — 4L,或具體選擇1.5、 1.8、 2.0、 2.2、 2.4、 2.6、 2.8、 3.0、 3.2、 3.4、 3.6、 3.8或4.0L時(shí)能得到后續(xù)工藝所需的含纖維素酶量較高的發(fā)
6酵菌糠。當(dāng)堆積發(fā)酵的時(shí)間為5、 6或7天時(shí)，能得到發(fā)酵完全且含纖維素 酶量高的菌糠，更有利于后續(xù)工藝。
另一種具體實(shí)施方式
，堆積發(fā)酵的時(shí)間為3—10天，或進(jìn)一步選擇4 _8天時(shí)，以尿素為增效劑時(shí)，每100kg菌糠中的加入量加入量為0.1 — 0.5kg，或進(jìn)一歩選擇0.15 —0.35kg，或具體選擇0.15、 0.18、 0.20、 0.22、 0.24、 0.26、 0.28、 0.30、 0.31、 0.33或0.35 kg時(shí)能得到后續(xù)工藝所需的含 纖維素酶量較高發(fā)酵菌糠。當(dāng)堆積發(fā)酵的時(shí)間為5、 6或7天時(shí)，能得到發(fā) 酵完全且含纖維素酶量高的菌糠，更有利于后續(xù)工藝。
2、 菌糠纖維素酶的初步提取
將步驟1所制得的發(fā)酵菌糠，用水浸泡，0 — 30。C浸泡5 — 48小時(shí)，進(jìn) 行固液分離，收集濾液即為菌糠纖維素酶的粗酶液。
發(fā)酵菌糠與浸泡用水的質(zhì)量體積比通常為1 : 1一20，可以進(jìn)一歩選擇
i : i一io，當(dāng)具體選擇質(zhì)量體積比為l:3、 l:4、 i : 5、 i : 6或i : 8時(shí)
能使發(fā)酵菌糠得到較好的浸泡效果。當(dāng)質(zhì)量體積比過低時(shí)，會(huì)使得浸泡出
來的纖維素酶總量較少；而當(dāng)質(zhì)量體積比過大時(shí)，后續(xù)處理所用沉淀劑就
會(huì)較多，增加處理成本。
最適浸泡時(shí)間為24 — 30小時(shí)；最佳浸泡溫度為25 — 28°C。 一種具體實(shí)施方式
，發(fā)酵菌糠與浸泡用水的質(zhì)量體積比為1 : 1一20，
或進(jìn)一歩選擇1 : 1一10，配合以24 — 30小時(shí)浸泡時(shí)間和25 — 28。C浸泡溫
度，能得到純化纖維素酶所需的粗酶液，提高生產(chǎn)效率，節(jié)省成本。
另一種具體實(shí)施方式
，發(fā)酵菌糠與浸泡用水的質(zhì)量體積比選擇質(zhì)量體
積比為l:3、 l:4、 l:5、 i : 6或i : 8，并配合以24—30小時(shí)浸泡時(shí)間
和25 — 28。C浸泡溫度，能得到純化纖維素酶所需纖維素酶含量高的粗酶液， 進(jìn)一步提高生產(chǎn)效率，更有效節(jié)省成本。
固液分離的方法主要為壓濾、抽濾和離心，也可以選擇離子交換色譜、 疏水作用色譜和親和色譜等分離方法。
3、 菌糠纖維素酶的純化
將步驟2所得粗酶液中加入(NH4)2S04或丙酮或乙醇進(jìn)行沉淀，然后離 心并收集沉淀物，然后將沉淀物溶于水中，得菌糠纖維素酶溶液，纖維素 酶酶活為1.5 — 3.5U。所述酶活力定義為在5(TC，反應(yīng)30 min條件下，單位體積的粗酶液每小時(shí)釋放出1 fimol還原糖所需酶量為1個(gè)活力單位，
用u表示。
當(dāng)沉淀劑為(NH4^S04時(shí)，其目的是將溶液中的纖維素酶沉淀出來。分 離純化相關(guān)教科書中關(guān)于硫酸銨鹽沉淀法的一般技術(shù)即可實(shí)現(xiàn)此目的。
其具體的實(shí)施方式可以為，先將飽和度為30% (w/v)的(NH4)2S04加
入粗酶液中，離心去除沉淀物。然后在上清液中再加入(NH4)2S04至飽和度
達(dá)到80。/。(w/v)，離心收集沉淀物即為纖維素酶，酶活為1.5 — 3.5U。
沉淀劑為乙醇時(shí)，其目的是將溶液中的纖維素酶沉淀出來。分離純化
相關(guān)教科書中關(guān)于有機(jī)溶劑沉淀法的一般技術(shù)即可實(shí)現(xiàn)此目的。
其具體的實(shí)施方式可以為，先將乙醇加入粗酶液中，當(dāng)其占總體積的
百分比為30% (v/v)時(shí)，離心去除沉淀物。然后在上清液中再加入乙醇至
其在總體積中的百分比為70% (v/v)，離心收集沉淀物即為纖維素酶，酶
活1.5 — 3.5U。
沉淀劑為丙酮時(shí)，其目的是將溶液中的纖維素酶沉淀出來。分離純化 相關(guān)教科書中關(guān)于有機(jī)溶劑沉淀法的一般技術(shù)即可實(shí)現(xiàn)此目的。
其具體的實(shí)施方式可以為，先將丙酮加入粗酶液中，當(dāng)占在總體積的 百分比為35% (v/v)時(shí)，離心去除沉淀物。然后在上清液中再加入丙酮至 其在總體積中的百分比為60% (v/v)，離心收集沉淀物即為纖維素酶，酶 活為1.5 — 3.0U。
在以上三種沉淀方法中，以乙醇沉淀的效果較好；以硫酸銨處理時(shí)收 率雖然較高，但纖維素酶溶液中含鹽量亦高，而丙酮較乙醇更容易揮發(fā)， 操作難度相對(duì)較大。
將所得纖維素酶沉淀溶于水中制成纖維素酶溶液，其質(zhì)量體積比為
i : 10—20，最適用量為i : 15。
本發(fā)明技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的有益效果
從菌糠中制備纖維素酶，是菌糠資源化利用的一種新途徑，是一種全 新的纖維素酶制備方法，相對(duì)于其他所有已經(jīng)報(bào)道過的有關(guān)纖維素酶生產(chǎn) 方法，省去了菌體生長發(fā)酵和產(chǎn)酶的過程，節(jié)約了能源和材料，是所有已 經(jīng)報(bào)道過的有關(guān)纖維素酶生產(chǎn)方法中成本最低的。因此，利用廢棄菌糠制 備纖維素酶，既可以做到廢物利用、改善環(huán)境，又可以降低纖維素酶制取的成本。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合附圖
詳細(xì)描述本發(fā)明的技術(shù)方案。實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明 的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本 領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同 替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán) 利要求范圍中。
實(shí)施例1 纖維素酶活測(cè)定方法
纖維素酶在適當(dāng)條件下，水解羧甲基纖維素鈉(CMC)產(chǎn)生還原糖， 還原糖與3,5-二硝基水楊酸(DNS)試劑反應(yīng)，發(fā)生顏色變化，顯色基團(tuán) 在540 nm處的吸光度值與產(chǎn)生的還原糖量成正比，即與各種酶活力成正 比，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算纖維素酶活力。
酶活力定義為在5(TC，反應(yīng)30min條件下，單位體積的粗酶液每小 時(shí)釋放出1 pmol還原糖所需酶量為1個(gè)活力單位，用U表示。
纖維素酶活的測(cè)定取3支25mL的刻度試管，l支管作空白對(duì)照，2 支管作平行樣品管。取待測(cè)酶液lmL (空白對(duì)照中加的是經(jīng)沸水浴煮沸 10min已滅活的待測(cè)酶液)和1 mL CMC溶液(w/v=l% )加到刻度試管中， 混均，50。C下保溫30min。加入1.5 mL DNS顯色液，沸水浴10min。冷 卻后，用蒸餾水定容至25mL，然后在540 nm下測(cè)吸光值，用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì) 算出該吸光值所對(duì)應(yīng)的還原糖含量，即可根據(jù)酶活定義，得出樣品中纖維 素酶的活力單位。
實(shí)施例2 乙醇沉淀法制取菌糠纖維素酶
取100kg廢棄菌糠，加入豬尿3L，堆積發(fā)酵4d，保持堆溫于30。C。 稱取500 g發(fā)酵菌糠，破碎后置于1500 mL水中室溫浸泡48 hr減壓抽濾去 除固型物，收集濾液，此時(shí)所得濾液即為粗酶液，得粗酶液1300 mL。在 粗酶液中緩慢加入500 mL濃度為95% (w/v)的乙醇，并均速攪拌，然后 靜置30 min后離心去除沉淀，收集上清液；在上清液中再緩慢加入1500 mL濃度為95% (w/v)的乙醇，并均速攪拌，靜置30min后離心收集沉淀， 將沉淀物用100mL蒸餾水溶解后即得菌糠纖維素酶溶液。用實(shí)施例1中方 法測(cè)得其纖維素酶活力為2.36 U。
實(shí)施例3 丙酮沉淀法制取菌糠纖維素酶
取100 kg廢棄菌糠，加入尿素0.3 kg，堆積發(fā)酵5 d，保持堆溫于30°C 。 稱取500 g發(fā)酵菌糠，破碎后置于2000 mL水中室溫浸泡36 hr減壓抽濾去 除固型物，收集濾液，此時(shí)所得濾液即為粗酶液，得粗酶液1800 mL。在 粗酶液中緩慢加入800 mL丙酮(已經(jīng)冷凍處理24hr)，并均速攪拌，然 后靜置30min后低溫離心去除沉淀，收集上清液；在上清液中再緩慢加入 2000 mL丙酮(已經(jīng)冷凍處理24hr)，并均速攪拌，靜置30min后低溫離 心收集沉淀，將沉淀物用lOOmL蒸餾水溶解后即得菌糠纖維素酶溶液。用 實(shí)施例1中方法測(cè)得其纖維素酶活力為2.86 U。
實(shí)施例4 硫酸銨沉淀法制取菌糠纖維素酶
取100 kg廢棄菌糠，加入尿素0.3 kg，堆積發(fā)酵5 d，保持堆溫于30°C 。 稱取500 g菌糠，破碎后置于500 mL水中4"C浸泡48 hr壓濾去除固型物， 收集濾液，此時(shí)所得濾液即為粗酶液，得粗酶液470 mL。在粗酶液中緩慢 加入82.7g硫酸銨，并均速攪拌，然后靜置30min后離心去除沉淀，收集 上清液；在上清液中再緩慢加入89.1 g硫酸銨，并均速攪拌，靜置30min 后低溫離心收集沉淀，將沉淀物用lOOOmL蒸熘水溶解后即得菌糠纖維素 酶溶液。將上述所得酶液經(jīng)過超濾處理去除小分子后，用實(shí)施例l中方法 測(cè)得其纖維素酶活力為3.23 U。
權(quán)利要求
1、一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在于包括菌糠的預(yù)處理、菌糠纖維素酶的初步提取以及菌糠纖維素酶的純化。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在于所述方法具體為1) 菌糠的預(yù)處理，先除去菌糠上層覆土后加入增效劑，然后在20 — 3(TC 堆積發(fā)酵；2) 菌糠纖維素酶的初歩提取，將步驟1所制得的發(fā)酵菌糠，用水浸泡， 0—3(TC浸泡5—48小時(shí)，進(jìn)行固液分離，收集濾液即為菌糠纖維素酶的粗酶3) 菌糠纖維素酶的純化，將步驟2所得粗酶液中加入(NH4)2S04或丙酮 或乙醇進(jìn)行沉淀，然后離心并收集沉淀物，然后將沉淀物溶于水中，得菌糠 纖維素酶溶液。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在 于所述的增效劑為人或畜的尿液或尿素。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在 于所述的增效劑為人或畜的尿液時(shí)，每100kg菌糠中增效劑的加入量為l一 5L。
5、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在 于所述的增效劑為人或畜的尿液時(shí)，每100kg菌糠中增效劑的加入量為1.5、 1.8、 2.0、 2.2、 2.4、 2.6、 2.8、 3.0、 3.2、 3.4、 3.6、 3.8或4.0L。
6、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在 于所述的增效劑為尿素時(shí)，每100kg菌糠中增效劑的加入量為0.1—0.5kg。
7、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在 于所述的增效劑為尿素時(shí)，，每100kg菌糠中增效劑的加入量為0.15、 0.18、 0.20、 0.22、 0.24、 0.26、 0.28、 0.30、 0.31、 0.33或0.35 kg。
8、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在 于所述的發(fā)酵時(shí)間為3 — 10天。
9、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在于所述的發(fā)酵時(shí)間為5、 6或7天。
10、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在于所述的發(fā)酵菌糠與浸泡用水的質(zhì)量體積比為i : l一20。
11、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征在于所述的發(fā)酵菌糠與浸泡用水的質(zhì)量體積比為i : 3、 i : 4、 i : 5、 i : 6或 l:8。
12、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征 在于所述的浸泡時(shí)間為24 — 30小時(shí)。
13、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，其特征 在于所述的浸泡溫度為25—28°C。
14、 根據(jù)權(quán)利要求1一13之一所述的一種從菌糠中制備纖維素酶的方法， 其特征在于所制得的纖維素酶酶活為1.5 — 3.5U。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從菌糠中制備纖維素酶的方法，具體包括菌糠的預(yù)處理、菌糠纖維素酶的初步提取以及菌糠纖維素酶的純化等步驟，經(jīng)酶活測(cè)定，所制得的纖維素酶酶活1.5-3.5U。相對(duì)于其他所有有關(guān)纖維素酶生產(chǎn)方法的現(xiàn)有技術(shù)，該方法省去了菌體生長發(fā)酵和產(chǎn)酶的過程，節(jié)約了能源和材料，從而既做到了廢物利用、改善環(huán)境，又能有效降低纖維素酶制取的成本。
文檔編號(hào)C12N9/42GK101423825SQ20081020425
公開日2009年5月6日 申請(qǐng)日期2008年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月9日
發(fā)明者李加友 申請(qǐng)人:嘉興學(xué)院