專(zhuān)利名稱(chēng)：麻瘋樹(shù)毒蛋白提取方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛋白質(zhì)提取方法及其用途，特別是麻瘋樹(shù)毒蛋白提取方法及其用途。
背景技術(shù)：
世界上的麻瘋樹(shù)資源極其豐富，麻瘋樹(shù)(Jatropha curcas)為大戟科(Euphorbiaceae)油料植物，在我國(guó)的西南地區(qū)有著豐富的麻瘋樹(shù)資源，其含油量高達(dá)40％，麻瘋樹(shù)種仁中還含有豐富的蛋白質(zhì)，實(shí)驗(yàn)證明從麻瘋樹(shù)種仁中分離得到的麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)是一種I型核糖體失活蛋白，細(xì)胞毒性極低，對(duì)正常細(xì)胞的生長(zhǎng)幾乎沒(méi)有影響。
由于核糖體失活蛋白(RIPs)是一種細(xì)胞毒素，將其與單克隆抗體結(jié)合，制成免疫毒素(immunotoxic)，可大大提高其作用的專(zhuān)一性，用于專(zhuān)一殺傷癌細(xì)胞，在癌癥治療上有很大的潛力。60年代初，Paul Ehrlich就提出了以抗體作為藥物載體，提高藥物的選擇性的設(shè)想。直到70年代中期，才有人將RIPs與抗體偶聯(lián)制成靶藥物，表現(xiàn)出良好的專(zhuān)一性，但毒性有所降低。80年代起，人們對(duì)癌癥研究的深入迫切需要研制專(zhuān)一殺死癌細(xì)胞的藥物，將RIPs與單克隆抗體結(jié)合的設(shè)想引起了廣泛的興趣。植物核糖體失活蛋白R(shí)IPs具有廣譜的抗腫瘤活性，這可能是由于腫瘤細(xì)胞表面具有較多的植物毒素受體或其受體與毒素結(jié)合后易被內(nèi)吞。1970年，Lin等報(bào)道了ricin和abrin對(duì)小鼠腹水瘤、Yoshida肉瘤、實(shí)驗(yàn)性白血病、Bl黑色素瘤等有治療作用。Lin實(shí)驗(yàn)室直接用ricin和abrin局部注射以治療人體腫瘤，在許多病例中觀察到腫瘤消退，有的甚至完全治愈。但由于毒素對(duì)正常細(xì)胞亦有殺傷作用，故副作用較大。
所有高等植物都受多種真菌的侵害。病原真菌常導(dǎo)致農(nóng)作物的大量減產(chǎn)，真菌毒素也引起食物的嚴(yán)重污染。近年來(lái)，在植物體內(nèi)尋找和開(kāi)發(fā)研究各種抗真菌蛋白的報(bào)道日益增多，這是因?yàn)橹参锖颂求w失活蛋白R(shí)IPs植物抗真菌病害工程中漸漸表現(xiàn)出誘人的前景。
麻瘋樹(shù)的提取物對(duì)蛙糞霉屬的B.Haptosporus和B.Ranarum有較強(qiáng)的抑制作用，該蛋白作為植物抗真菌蛋白家族中的一類(lèi)，迄今為止，其抗真菌活性還未見(jiàn)報(bào)道?；趯?duì)curcin更廣泛的開(kāi)發(fā)和利用需要，我們對(duì)curcin進(jìn)行了體外抗真菌活性試驗(yàn)，擬對(duì)該蛋白的抗真菌活性進(jìn)行評(píng)估，為curcin的下一步轉(zhuǎn)基因工程的實(shí)現(xiàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用打下基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的即在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種麻瘋樹(shù)毒蛋白提取方法及其用途，麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)屬I(mǎi)型核糖體失活蛋白(RIPs)，它作為一種N-糖苷酶來(lái)阻止細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成，從而使細(xì)胞的增殖受到抑制，curcin可能通過(guò)多種機(jī)制而發(fā)揮抗腫瘤作用。核糖體失活蛋白R(shí)IPs，它能特異地水解核糖體RNA 3’-端莖環(huán)結(jié)構(gòu)的腺嘌呤殘基而導(dǎo)致核糖體失活，進(jìn)而抑制蛋白合成，但它卻不使自身的核糖體失活，只對(duì)其它物種核糖體顯示高度特異性，這顯然具有防止外來(lái)病原體侵染的功能，因?yàn)榇祟?lèi)蛋白質(zhì)可用于植物抗真菌病害。本發(fā)明提取步驟簡(jiǎn)單，可降低提取成本，全程3～5℃，可保存毒蛋白的活性和良好的溶解性，適當(dāng)?shù)柠}離子濃度和PH值，可保證毒蛋白的得率。
本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的用途，該麻瘋樹(shù)毒蛋白用于制備抑制腫瘤的藥物或用于抗植物真菌、病毒。麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法，它包括兩大步驟，粗提和純化，粗提是將麻瘋樹(shù)種子加入磷酸鹽緩沖液中，溫度為3～5℃，在植物勻漿機(jī)上勻漿后，攪拌4～6小時(shí)，溫度為3～5℃靜置20～30小時(shí)，勻漿液以8000～12000g離心15～30min，取上清，上清液移入干凈容器，加入硫酸銨固體至終濃度為60％，靜置3～6小時(shí)，以14000～18000g離心8～12min，保存上清，將沉淀溶于30-40ml的磷酸鹽緩沖液中，將保存的上清液繼續(xù)加入硫酸銨固體至終濃度達(dá)80％，以14000～18000g離心15～30min，棄上清，收集沉淀，并溶于30-40ml的磷酸鹽緩沖液中。將上述蛋白溶液合并，低溫透析45～50小時(shí)，將透析袋以14000～18000g離心15～30min，棄沉淀，取上清，-15～-30℃保存?zhèn)溆?，即為毒蛋白粗提液；純化是將毒蛋白粗提液進(jìn)行凝膠柱層析，上樣前柱先用磷酸鹽緩沖液平衡，上樣后用同一緩沖液洗脫，洗脫速度為12～20ml/h，然后進(jìn)行收集，將收集的溶液進(jìn)行紫外檢測(cè)，然后SDS-PAGE檢測(cè)，最后冷凍干燥保存。
通過(guò)上面的敘述可以看出，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1、抗腫瘤的優(yōu)點(diǎn)●對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的強(qiáng)抑制作用；●毒性低麻瘋樹(shù)毒蛋白屬I(mǎi)型核糖體失活蛋白，細(xì)胞毒性極低，對(duì)正常細(xì)胞的生長(zhǎng)幾乎沒(méi)有影響；●產(chǎn)量高、成本低世界上的麻瘋樹(shù)資源極其豐富，胚乳毒蛋白含量高，可與生物柴油共同開(kāi)發(fā)，降低綜合成本。
2、用于抗植物真菌病，●作用譜廣在一定的濃度范圍下，對(duì)多種主要農(nóng)作物和森林樹(shù)種的真菌病害的生長(zhǎng)有抑制作用；●可與其它抗真菌病資源協(xié)同作用，提高作用強(qiáng)度和增加作用譜；●作用專(zhuān)一性強(qiáng)，對(duì)植物自身影響??；●降解產(chǎn)物無(wú)毒，對(duì)環(huán)境危害小。
3、毒蛋白提取優(yōu)點(diǎn)●減少了提取步驟，降低了提取成本●全程3～5℃，保存了毒蛋白的活性和良好的溶解性。
●適當(dāng)?shù)柠}離子濃度和PH值保證了毒蛋白的得率。


圖1為不同純化階段麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)液對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制曲線2為麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的抑制曲線3為麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)病原真菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用示意圖
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述實(shí)施例一麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法包括兩大步驟，粗提和純化，粗提是將麻瘋樹(shù)種子加入磷酸鹽緩沖液中，溫度為3℃，在植物勻漿機(jī)上勻漿后，用磁力攪拌器攪拌4小時(shí)，溫度為3℃靜置30小時(shí)，勻漿液以10 000g離心15min，上清液移入干凈容器，加入硫酸銨固體至終濃度為60％，靜置3小時(shí)，以15000g離心12min，保存上清，將沉淀溶于30ml的磷酸鹽緩沖液中，將保存的上清液繼續(xù)加入硫酸銨固體至終濃度達(dá)80％，以15000g離心15min，棄上清，收集沉淀，并溶于30ml的磷酸鹽緩沖液中。將上述蛋白溶液合并，低溫透析45小時(shí)，將透析袋以14000g離心30min，棄沉淀，取上清，-15℃保存?zhèn)溆?，即為毒蛋白粗提液；純化是將毒蛋白粗提液進(jìn)行凝膠柱層析，上樣前柱先用磷酸鹽緩沖液平衡，上樣后用同一緩沖液洗脫，洗脫速度為20ml/h，然后進(jìn)行收集，將收集的溶液進(jìn)行紫外檢測(cè)，然后SDS-PAGE檢測(cè)，最后凍干保存。
上述的硫酸銨呈弱酸性，需慢慢加入，并用NaOH(1M)中和，所以在加硫酸銨時(shí)，需磁力攪拌，并用PH試紙隨時(shí)檢測(cè)溶液PH值，從而決定加硫酸銨還是滴加NaOH(1M)。
透析時(shí)，外液為磷酸鹽緩沖液，需磁力攪拌，間斷換磷酸鹽緩沖液，于4℃攪拌50小時(shí)。
研究發(fā)現(xiàn)，不同純化階段的麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制率不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表1。從表1可以看出蛋白粗提物可抑制胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活，并且隨著濃度的增加，細(xì)胞存活率逐漸降低，并且隨著蛋白質(zhì)的進(jìn)一步純化，相同抑制率下的蛋白濃度也相應(yīng)的減少，從圖1電泳圖上顯示，在峰II只有分子量為28.2kDa蛋白一條帶，由此可說(shuō)明，麻瘋樹(shù)蛋白粗提液中具有的抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用的成分是這種蛋白，也就是我們純化出的麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)。
表1 不同純化階段麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)胃癌細(xì)胞的存活率的影響

由于細(xì)胞的抑制率與蛋白濃度的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，因此把細(xì)胞抑制率與相應(yīng)的蛋白濃度的對(duì)數(shù)各點(diǎn)進(jìn)行直線回歸和統(tǒng)計(jì)處理。以細(xì)胞的抑制率為縱坐標(biāo)，蛋白濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)進(jìn)行直線作圖，如圖1，根據(jù)直線圖計(jì)算出麻瘋樹(shù)curcin浸提液、峰I、峰II對(duì)胃癌細(xì)胞的IC50分別為14.27±4.4μg/ml、187.80±6.8μg/ml、0.23±0.004μg/ml。
體外實(shí)驗(yàn)表明，麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)可以抑制小鼠骨髓瘤細(xì)胞(Sp2/0)、人肝癌細(xì)胞(Human hepatoma)的生長(zhǎng)，對(duì)HeLa細(xì)胞、正常人胚肺二倍體細(xì)胞(MRC)的生長(zhǎng)影響很小，這可說(shuō)明curcin不具細(xì)胞毒性，與I型RIPs的性質(zhì)相似，也顯示了curcin對(duì)腫瘤細(xì)胞有選擇性作用，同時(shí)各種腫瘤細(xì)胞對(duì)它的敏感性也不同。
表2 麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的存活率的影響

以細(xì)胞的抑制率為縱坐標(biāo)，蛋白濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)進(jìn)行直線作圖，見(jiàn)圖2，根據(jù)直線圖計(jì)算出麻瘋樹(shù)curcin對(duì)小鼠骨髓瘤細(xì)胞(Sp2/0)、人肝癌細(xì)胞(Human hepatoma)的生長(zhǎng)的IC50分別為0.66±0.015μg/ml、3.16±0.031μg/ml。但在最大濃度750μg/ml下對(duì)HeLa細(xì)胞、正常人胚肺二倍體細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率分別為45.33％和46.89％。curcin對(duì)三種腫瘤細(xì)胞(SGC-7901，Sp2/0，Humanhepatoma)呈現(xiàn)殺傷作用，但其敏感性有所差別。敏感性為SGC-7901＞Sp2/0＞Human hepatoma，不同curcin劑量組的抑制率與這三種敏感細(xì)胞株相比較差異不顯著(p＞0.05)。從圖中我們還可以看出，curcin對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率是隨著濃度的升高而增大的，并且curcin的濃度對(duì)數(shù)值與抑制率之間呈直線相關(guān)(r值分別為0.98511，0.99897，0.99871，p＜0.001)，說(shuō)明curcin濃度對(duì)數(shù)值與其抑制率呈正相關(guān)。從圖中我們還可看到，curcin對(duì)HeLa細(xì)胞、正常人胚肺二倍體細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率很弱，并且未表現(xiàn)出curcin的濃度對(duì)數(shù)值與抑制率之間的直線相關(guān)性(r值分別為0.80228，0.78449，p＝0.03)，說(shuō)明curcin濃度對(duì)數(shù)值與其抑制率之間無(wú)相關(guān)性。
實(shí)施例二麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法，它包括兩大步驟，粗提和純化，粗提是將麻瘋樹(shù)種子加入磷酸鹽緩沖液中，5℃，在植物勻漿機(jī)上勻漿后，攪拌6小時(shí)，溫度為5℃靜置30小時(shí)，勻漿液以10000g離心15min，取上清，上清加入硫酸銨固體至終濃度為60％，靜置6小時(shí)，以15000g離心8min，保存上清，將沉淀溶于30ml的磷酸鹽緩沖液中，將保存的上清液繼續(xù)加入硫酸銨固體至終濃度達(dá)80％，以15000g離心15min，棄上清，收集沉淀，并溶于30ml的磷酸鹽緩沖液中。將上述蛋白溶液透析45小時(shí)，將透析袋以15000g離心15min，棄沉淀，取上清，-15℃保存?zhèn)溆?，即為毒蛋白粗提液；純化是將毒蛋白粗提液進(jìn)行凝膠柱層析，上樣前柱先用磷酸鹽緩沖液平衡，上樣后用同一緩沖液洗脫，洗脫速度為12ml/h，然后進(jìn)行收集，將收集的溶液進(jìn)行紫外檢測(cè)，然后SDS-PAGE檢測(cè)，最后凍干保存。以上勻漿需間斷勻漿。硫酸銨呈弱酸性，需慢慢加入，并用NaOH(1M)中和，所以在加硫酸銨時(shí)，需磁力攪拌，并用PH試紙隨時(shí)檢測(cè)溶液PH值，從而決定加硫酸銨還是滴加NaOH(1M)。透析時(shí)，外液為磷酸鹽緩沖液，需磁力攪拌，間斷換磷酸鹽緩沖液，于5℃攪拌45小時(shí)。
如圖3所示，在經(jīng)7種供試菌種的試驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)5種病原真菌菌絲生長(zhǎng)有強(qiáng)烈的抑制作用。對(duì)水稻稻瘟病菌(P.oryzae Cav.)、松赤枯病菌(P.funerea)、油菜菌核病菌[S.sclerotiorum(Lib)de Bary]的最低抑制濃度為5μg/mL。當(dāng)curcin濃度為100μg/mL時(shí)抑制率均可達(dá)100％；對(duì)玉米紋枯病菌(R.solani Kuha)的抑制效果稍弱，其最低抑制濃度在15μg/mL，curcin濃度達(dá)100μg/mL時(shí)，抑制率為89.2％；對(duì)膠胞炭疽桿菌[C.gloeosporioides(Perz.)sacc.]最低抑制濃度為5μg/mL，當(dāng)麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)濃度為100μg/mL時(shí)，對(duì)菌絲的生長(zhǎng)抑制達(dá)80％。
麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)真菌孢子的形成有明顯的阻礙作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)水稻稻瘟病菌(P.oryzae Cav.)孢子形成的抑制作用最強(qiáng)，在120h內(nèi)，當(dāng)麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)濃度大于50μg/mL時(shí)，病原真菌基本上不能產(chǎn)生孢子，抑制率為100％；Curcin對(duì)松赤枯病菌(P.funerea)孢子形成的抑制效果稍弱，但麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)濃度大于75μg/mL時(shí)，抑制率均可達(dá)100％；當(dāng)麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)濃度大于15μg/mL時(shí)，在120小時(shí)內(nèi)，可抑制油菜菌核病菌[S.sclerotiorum(Lib)de Bary]菌核的形成(Fig.3.4C)；在觀察期間，玉米紋枯病菌(R.solani Kuha)的對(duì)照與處理樣均沒(méi)有產(chǎn)生孢子；對(duì)膠胞炭疽桿菌[C.gloeosporioides(Perz.)sacc.]的作用表現(xiàn)為在curcin濃度為15μg/mL時(shí)可抑制孢子形成，當(dāng)curcin濃度為75μg/mL時(shí)抑制率達(dá)100％。
以產(chǎn)生孢子較多的松赤枯病菌(P.funerea)、水稻稻瘟病菌(P.oryzae Cav.)和膠胞炭疽桿菌[C.gloeosporioides(Perz.)sacc.]為實(shí)驗(yàn)菌，測(cè)定curcin對(duì)病原真菌孢子萌發(fā)的抑制作用。在16h后觀察發(fā)現(xiàn)，curcin對(duì)這3種真菌孢子萌發(fā)的抑制效果并不明顯，幾乎未受到影響。
用50μg/mL的麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)處理植物病原真菌。28℃培養(yǎng)24h后，光鏡下發(fā)現(xiàn)松赤枯病菌(P.funerea)、玉米紋枯病菌(R.solani Kuha)、油菜菌核病菌[S.sclerotiorum(Lib)de Bary]、與水稻稻瘟病菌(P.oryzae Cav.)、膠胞炭疽桿菌[C.gloeosporioides(Perz.)sacc.]等5種病原真菌菌絲的生長(zhǎng)形態(tài)發(fā)生異常，其中以玉米紋枯病菌(R.solani Kuha)和稻瘟病菌(P.oryzae Cav.)最為明顯。大部分菌絲扭曲，原生質(zhì)分布不均勻，發(fā)生聚集現(xiàn)象。菌絲明顯變小。
通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)麻瘋樹(shù)毒蛋白(curcin)對(duì)菌絲蛋白質(zhì)合成的影響。玉米紋枯病菌(R.solani Kuha)經(jīng)curcin處理后菌絲在52kD處有蛋白帶消失(line 2)；稻瘟病菌(P.oryzae Cav.)在27kD和40kD處有蛋白帶消失(line 4)；赤枯病菌(P.funerea)在約22kD和36kD處有蛋白帶消失(line 6)。油菜菌核病菌[S.sclerotiorum(Lib)de Bary]在經(jīng)curcin處理后，在52kD處有蛋白帶消失(line 7)；膠胞炭疽桿菌[C.gloeosporioides(Perz.)sacc.]在28kD處蛋白帶消失(line 9)。
表3 麻瘋樹(shù)毒蛋白(Curcin)對(duì)病原真菌孢子形成的影響(孢子數(shù)×103個(gè))

權(quán)利要求
1.一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的用途，其特征在于該麻瘋樹(shù)毒蛋白用于制備抑制腫瘤的藥物或用于植物抗真菌病毒。
2.一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法，其特征在于它包括兩大步驟，粗提和純化，粗提是將麻瘋樹(shù)種子加入磷酸鹽緩沖液中，溫度為3～5℃，在植物勻漿機(jī)上勻漿后，攪拌4～6小時(shí)，溫度為3～5℃靜置20～30小時(shí)，勻漿液以8000～12000g離心15～30min，取上清，上清液移入干凈容器，加入硫酸銨固體至終濃度為60％，靜置3～6小時(shí)，以14000～18000g離心8～12min，保存上清，將沉淀溶于30-40ml的磷酸鹽緩沖液中，將保存的上清液繼續(xù)加入硫酸銨固體至終濃度達(dá)80％，以14000～18000g離心15～30min，棄上清，收集沉淀，并溶于30-40ml的磷酸鹽緩沖液中。將上述蛋白溶液合并，低溫透析45～50小時(shí)，將透析袋以14000～18000g離心15～30min，棄沉淀，取上清，-15～-30℃保存?zhèn)溆茫礊槎镜鞍状痔嵋海患兓菍⒍镜鞍状痔嵋哼M(jìn)行凝膠柱層析，上樣前柱先用磷酸鹽緩沖液平衡，上樣后用同一緩沖液洗脫，洗脫速度為12～20ml/h，然后進(jìn)行收集，將收集的溶液進(jìn)行紫外檢測(cè)，然后SDS-PAGE檢測(cè)，最后冷凍干燥保存。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法，其特征在于勻漿需在低溫下勻漿。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法，其特征在于硫酸銨呈弱酸性，需慢慢加入，并用NaOH(1M)中和，所以在加硫酸銨時(shí)，需進(jìn)行攪拌，并用PH試紙隨時(shí)檢測(cè)溶液PH值，從而決定加硫酸銨還是滴加NaOH(1M)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的提取方法，其特征在于透析時(shí)，外液為磷酸鹽緩沖液，需進(jìn)行攪拌，間斷換磷酸鹽緩沖液，于3～5℃攪拌45～50小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種麻瘋樹(shù)毒蛋白的用途和提取麻瘋樹(shù)毒蛋白的方法，提取方法包括兩大步驟，粗提和純化，粗提是通過(guò)勻漿、攪拌、透析等制得毒蛋白粗提液；純化是將毒蛋白粗提液進(jìn)行凝膠柱層析，然后進(jìn)行收集，將收集的溶液進(jìn)行紫外檢測(cè)，然后SDS－PAGE檢測(cè)，最后凍干保存。該麻瘋樹(shù)毒蛋白用于制備抑制腫瘤的藥物或用于植物抗真菌病毒。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的強(qiáng)抑制作用；細(xì)胞毒性極低，對(duì)正常細(xì)胞的生長(zhǎng)幾乎沒(méi)有影響；用于抗植物真菌病，作用譜廣，在一定的濃度范圍下，對(duì)多種主要農(nóng)作物和森林樹(shù)種的真菌病害的生長(zhǎng)有抑制作用。
文檔編號(hào)A01N37/18GK1714863SQ20051002100
公開(kāi)日2006年1月4日 申請(qǐng)日期2005年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月31日
發(fā)明者陳放, 徐鶯, 林娟 申請(qǐng)人:四川大學(xué)