一種銀杏葉中黃酮類化合物提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種銀杏葉中黃酮類化合物提取方法，屬于中藥原料藥提取技術領域。本發(fā)明以銀杏葉為原料，首先經(jīng)加熱回流后，再用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH,用氯仿萃取后再進行減壓濃縮，最后用制備的凹凸棒土濾槽純化提取，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，從銀杏葉中提取黃酮類化合物的方法，解決了純化率低、生產(chǎn)成本高等問題。實例證明，該方法以含有黃酮類化合物的銀杏葉為原料，不僅原料獲得途徑簡單，并且操作過程簡單，且操作條件易于控制，最終使得黃酮類化合物提取得率達到40～50％，黃酮化合物純度達到90%以上，適合大規(guī)模生產(chǎn)應用。
【專利說明】
一種銀杏葉中黃酮類化合物提取方法
技術領域
[0001]本發(fā)明公開了一種銀杏葉中黃酮類化合物提取方法，屬于中藥原料藥提取技術領域。
【背景技術】
[0002]黃酮類化合物泛指兩個具有酚羥基的苯環(huán)(A-與B-環(huán))通過中央三碳原子相互連結而成的一系列化合物，其基本母核為2-苯基色原酮。黃酮類化合物結構中常連接有酚羥基、甲氧基、甲基、異戊烯基等官能團。黃酮類化合物對治療冠心病、心絞痛、高血壓和支氣管哮喘等有顯著效果，能夠調(diào)節(jié)生理功能，延緩衰老，增強免疫力，防治由于血管老化和腦血管供血不足所致的疾病，引起了國內(nèi)外學者的濃厚興趣。因此從銀杏葉中提取黃酮類化合物，并且對其提取的工藝條件進行優(yōu)化至關重要。
[0003]黃酮類化合物在銀杏葉中以兩種形態(tài)存在，一是脂溶性成分如黃酮苷元類物質(zhì)，二是水溶性成分如黃酮苷成分。黃酮類化合物可以通過煎煮、加熱回流、超聲提取、冷浸、滲漉、微波提取、高壓提取等方法。為了充分提取不同極性的黃酮化合物，在實際生產(chǎn)中要采用極性低的有機溶劑或水提等方法提取。由于對醫(yī)藥產(chǎn)品和保健品的安全要求，醇水多成為常用提取溶劑，避免對機體有害的其他有機溶劑。而目前生產(chǎn)提取過程中效率偏低、提取時間長。為了解決這些問題，需要確立高教清潔的植物提取技術。近年，酶法提取藥用植物已成為中藥提取研究的重要方法，需要從基礎和應用上深入研究酶反應在植物成分轉化和提取過程的作用。專利CN201110189400.8公開了榛葉黃酮提取物及其藥物組成，用酶解法提取黃酮類化合物，存在生產(chǎn)成本高，導致殘留形成新的雜質(zhì)。由于所述銀杏時總黃酮在植物細胞中以苷元和苷的形式存在，在醇水體系中苷元由于其極性低不易被提取，黃酮苷元以9 O?9 5 %高濃度乙醇提取，黃酮苷以6 O %左右乙醇才能進行提取，專利CN201210341952.0公開了枸杞葉總黃酮提取物及其制備方法用無水乙醇提取存在純化率低等諸多問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明主要解決的技術問題:針對目前用單一酶液提取成本高和無水乙醇提取純化率低、產(chǎn)率低等問題，本發(fā)明公開了一種銀杏葉中黃酮類化合物提取方法，屬于中藥原料藥提取技術領域。本發(fā)明以銀杏葉為原料，首先經(jīng)加熱回流后，再用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)PH，用氯仿萃取后再進行減壓濃縮，最后用制備的凹凸棒土濾槽純化提取，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，從銀杏葉中提取黃酮類化合物的方法，解決了純化率低、生產(chǎn)成本高等問題。實例證明，該方法以含有黃酮類化合物的銀杏葉為原料，不僅原料獲得途徑簡單，并且操作過程簡單，且操作條件易于控制，最終使得黃酮類化合物提取得率達到40?50%，黃酮化合物純度達到90%以上，適合大規(guī)模生產(chǎn)應用。
[0005]為了解決上述技術問題，本發(fā)明所采用的技術方案是:
(I)稱取2?3kg銀杏葉將其洗凈，于55?65°C烘干過夜放入粉碎機中以5000?6000r/min的轉速粉碎后過50?60目標準篩，得到銀杏葉粉末，再將銀杏葉粉末與體積濃度為60?70%乙醇溶液按質(zhì)量比為1:10?1:13置于索氏提取器中進行混合，加熱回流提取2次，每次2?3h，提取濾液，合并濾液，再用0.5mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為5?7，在回流溫度為50?60°C條件下提取10?30h，得浸膏；
(2)按固液比1:14，將上述浸膏和去離子水混合均勻，形成混合液，再用萃取劑氯仿在60?80 0C下，攪拌萃取30?90min，萃取完全后冷卻至35 °C，靜置分層，得上層液和下層液，將上層液置于旋轉蒸發(fā)儀中在真空度為0.09MPa，60°C條件下進行減壓濃縮，即得銀杏葉總黃酮粗品提取液；
(3)稱取I?2kg的凹凸棒土與石油醚按固液比2:1混合均勾，并使用其制成高為2?3m的過濾槽，將上述銀杏葉總黃酮粗品提取液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出的液體，并加入流出液體積60%的無水乙醇混合均勻后放入蒸餾裝置中去除石油醚，收集蒸餾剩余液；
(4)使用三氯甲烷淋洗上述過濾后的過濾槽3?5次，再將上述收集蒸餾剩余液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出液，加入無水乙醇混合均勻后進行回流提純，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，即得銀杏葉總黃酮提取物。
[0006]本發(fā)明的應用方法是:將本發(fā)明制得的黃酮類化合物成品與2g糊精和2g淀粉混合均勻后再通過壓片機進行壓片，制成黃酮類化合物片劑，其中每個片劑含有I.5?2.5g黃酮類化合物，食用時，配以200?300mL溫水送服，每日早晚飯后服用一次，每次服用I?3粒，堅持服用7?14天，可以感覺人體內(nèi)分泌水平得到調(diào)節(jié)，心血管問題得到改善，還可以有效的防止癌癥的發(fā)生。
[0007]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明方法簡單易于操作，以銀杏葉為原料，不僅原料獲得途徑簡單，并且操作過程簡單，且操作條件易于控制；
(2)最終使得黃酮類化合物提取得率達到40?50%，黃酮化合物純度達到90%以上，且適合大規(guī)模生產(chǎn)應用。
[0008]
【具體實施方式】
[0009]稱取2?3kg銀杏葉將其洗凈，于55?65°C烘干過夜放入粉碎機中以5000?6000r/min的轉速粉碎后過50?60目標準篩，得到銀杏葉粉末，再將銀杏葉粉末與體積濃度為60?70%乙醇溶液按質(zhì)量比為1:10?1:13置于索氏提取器中進行混合，加熱回流提取2次，每次2?3h，提取濾液，合并濾液，再用0.5mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為5?7，在回流溫度為50?60°C條件下提取10?30h，得浸膏；按固液比1:14，將上述浸膏和去離子水混合均勻，形成混合液，再用萃取劑氯仿在60?80°C下，攪拌萃取30?90min，萃取完全后冷卻至35°C，靜置分層，得上層液和下層液，將上層液置于旋轉蒸發(fā)儀中在真空度為0.09MPa，60°C條件下進行減壓濃縮，即得銀杏葉總黃酮粗品提取液;稱取I?2kg的凹凸棒土與石油醚按固液比2:1混合均勻，并使用其制成高為2?3m的過濾槽，將上述銀杏葉總黃酮粗品提取液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出的液體，并加入流出液體積60 %的無水乙醇混合均勻后放入蒸餾裝置中去除石油醚，收集蒸餾剩余液;使用三氯甲烷淋洗上述過濾后的過濾槽3?5次，再將上述收集蒸餾剩余液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出液，加入無水乙醇混合均勻后進行回流提純，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，即得銀杏葉總黃酮提取物。
[0010]實例I
稱取2kg銀杏葉將其洗凈，于55 °C烘干過夜放入粉碎機中以5000r/min的轉速粉碎后過50目標準篩，得到銀杏葉粉末，再將銀杏葉粉末與體積濃度為60%乙醇溶液按質(zhì)量比為1:10置于索氏提取器中進行混合，加熱回流提取2次，每次2h，提取濾液，合并濾液，再用0.5mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為5，在回流溫度為50°C條件下提取10h，得浸膏;按固液比1:14，將上述浸膏和去離子水混合均勻，形成混合液，再用萃取劑氯仿在60°C下，攪拌萃取30min，萃取完全后冷卻至35°C，靜置分層，得上層液和下層液，將上層液置于旋轉蒸發(fā)儀中在真空度為0.09MPa，60°C條件下進行減壓濃縮，即得銀杏葉總黃酮粗品提取液;稱取Ikg的凹凸棒土與石油醚按固液比2:1混合均勻，并使用其制成高為2m的過濾槽，將上述銀杏葉總黃酮粗品提取液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出的液體，并加入流出液體積60 %的無水乙醇混合均勻后放入蒸餾裝置中去除石油醚，收集蒸餾剩余液;使用三氯甲烷淋洗上述過濾后的過濾槽3次，再將上述收集蒸餾剩余液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出液，加入無水乙醇混合均勻后進行回流提純，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，即得銀杏葉總黃酮提取物。
[0011]本發(fā)明的應用方法是:將本發(fā)明制得的黃酮類化合物成品與2g糊精和2g淀粉混合均勻后再通過壓片機進行壓片，制成黃酮類化合物片劑，其中每個片劑含有1.5g黃酮類化合物，食用時，配以200mL溫水送服，每日早晚飯后服用一次，每次服用I粒，堅持服用7天，可以感覺人體內(nèi)分泌水平得到調(diào)節(jié)，心血管問題得到改善，還可以有效的防止癌癥的發(fā)生。
[0012]實例2
稱取2.5kg銀杏葉將其洗凈，于60°C烘干過夜放入粉碎機中以5500r/min的轉速粉碎后過55目標準篩，得到銀杏葉粉末，再將銀杏葉粉末與體積濃度為65%乙醇溶液按質(zhì)量比為1:12置于索氏提取器中進行混合，加熱回流提取2次，每次2.5h，提取濾液，合并濾液，再用0.5mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為6，在回流溫度為55°C條件下提取20h，得浸膏；按固液比1:14，將上述浸膏和去離子水混合均勻，形成混合液，再用萃取劑氯仿在70°C下，攪拌萃取60min，萃取完全后冷卻至35 V，靜置分層，得上層液和下層液，將上層液置于旋轉蒸發(fā)儀中在真空度為0.09MPa，60°C條件下進行減壓濃縮，即得銀杏葉總黃酮粗品提取液；稱取1.5kg的凹凸棒土與石油醚按固液比2:1混合均勾，并使用其制成高為2.5m的過濾槽，將上述銀杏葉總黃酮粗品提取液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出的液體，并加入流出液體積60%的無水乙醇混合均勻后放入蒸餾裝置中去除石油醚，收集蒸餾剩余液;使用三氯甲烷淋洗上述過濾后的過濾槽4次，再將上述收集蒸餾剩余液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出液，加入無水乙醇混合均勻后進行回流提純，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，即得銀杏葉總黃酮提取物。
[0013]本發(fā)明的應用方法是:將本發(fā)明制得的黃酮類化合物成品與2g糊精和2g淀粉混合均勻后再通過壓片機進行壓片，制成黃酮類化合物片劑，其中每個片劑含有2.0g黃酮類化合物，食用時，配以250mL溫水送服，每日早晚飯后服用一次，每次服用2粒，堅持服用10天，可以感覺人體內(nèi)分泌水平得到調(diào)節(jié)，心血管問題得到改善，還可以有效的防止癌癥的發(fā)生。
[0014]實例3
稱取3kg銀杏葉將其洗凈，于65 °C烘干過夜放入粉碎機中以6000r/min的轉速粉碎后過60目標準篩，得到銀杏葉粉末，再將銀杏葉粉末與體積濃度為70%乙醇溶液按質(zhì)量比為1:13置于索氏提取器中進行混合，加熱回流提取2次，每次3h，提取濾液，合并濾液，再用0.5mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為7，在回流溫度為60°C條件下提取30h，得浸膏;按固液比1:14，將上述浸膏和去離子水混合均勻，形成混合液，再用萃取劑氯仿在80°C下，攪拌萃取90min，萃取完全后冷卻至35°C，靜置分層，得上層液和下層液，將上層液置于旋轉蒸發(fā)儀中在真空度為
0.09MPa，60°C條件下進行減壓濃縮，即得銀杏葉總黃酮粗品提取液;稱取2kg的凹凸棒土與石油醚按固液比2:1混合均勻，并使用其制成高為3m的過濾槽，將上述銀杏葉總黃酮粗品提取液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出的液體，并加入流出液體積60 %的無水乙醇混合均勻后放入蒸餾裝置中去除石油醚，收集蒸餾剩余液;使用三氯甲烷淋洗上述過濾后的過濾槽5次，再將上述收集蒸餾剩余液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出液，加入無水乙醇混合均勻后進行回流提純，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，即得銀杏葉總黃酮提取物。
[0015]本發(fā)明的應用方法是:將本發(fā)明制得的黃酮類化合物成品與2g糊精和2g淀粉混合均勻后再通過壓片機進行壓片，制成黃酮類化合物片劑，其中每個片劑含有2.5g黃酮類化合物，食用時，配以300mL溫水送服，每日早晚飯后服用一次，每次服用3粒，堅持服用14天，可以感覺人體內(nèi)分泌水平得到調(diào)節(jié)，心血管問題得到改善，還可以有效的防止癌癥的發(fā)生。
【主權項】
1.一種從銀杏葉中黃酮類化合物提取方法，其特征在于具體提取步驟為: (1)稱取2?3kg銀杏葉將其洗凈，于55?65°C烘干過夜放入粉碎機中以5000?6000r/min的轉速粉碎后過50?60目標準篩，得到銀杏葉粉末，再將銀杏葉粉末與體積濃度為60?70%乙醇溶液按質(zhì)量比為1:10?1:13置于索氏提取器中進行混合，加熱回流提取2次，每次2?3h，提取濾液，合并濾液，再用0.5mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為5?7，在回流溫度為50?60°C條件下提取10?30h，得浸膏； (2)按固液比1:14，將上述浸膏和去離子水混合均勻，形成混合液，再用萃取劑氯仿在60?80 0C下，攪拌萃取30?90min，萃取完全后冷卻至35 °C，靜置分層，得上層液和下層液，將上層液置于旋轉蒸發(fā)儀中在真空度為0.09MPa，60°C條件下進行減壓濃縮，即得銀杏葉總黃酮粗品提取液； (3)稱取I?2kg的凹凸棒土與石油醚按固液比2:1混合均勾，并使用其制成高為2?3m的過濾槽，將上述銀杏葉總黃酮粗品提取液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出的液體，并加入流出液體積60%的無水乙醇混合均勻后放入蒸餾裝置中去除石油醚，收集蒸餾剩余液； (4)使用三氯甲烷淋洗上述過濾后的過濾槽3?5次，再將上述收集蒸餾剩余液從過濾槽頂部流入，收集過濾槽底部流出液，加入無水乙醇混合均勻后進行回流提純，去除洗脫劑回收溶劑、減壓過濾、濃縮、干燥，即得銀杏葉總黃酮提取物。
【文檔編號】A61P9/00GK106074630SQ201610462050
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月23日
【發(fā)明人】吳迪, 陸娜
【申請人】吳迪