一種養(yǎng)血安神藥物的質(zhì)量控制方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種養(yǎng)血安神藥物的質(zhì)量控制方法。
【背景技術(shù)】
[0002]失眠是以體倦心悸、虛煩不眠為主要癥狀的一種病證。是少寐多夢(mèng)、頭目眩暈等多種原因引起的臨床上常見的一種疾病，臨床主要表現(xiàn)是失眠血虛陽(yáng)浮證。
[0003]針對(duì)上述病癥，本發(fā)明專利申請(qǐng)人此前推出以酸棗仁30?50重量份、柏子仁8?20重量份、五味子8?20重量份、龍骨15?35重量份、牡蠣15?35重量份、珍珠母8?20重量份、知母8?20重量份、川芎8?20重量份、茯苓15?35重量份、甘草5?15重量份為原料的提物的混合物作為新藥?；谏鲜鏊幬飳儆谛滤?，還沒有在制備過程中實(shí)施質(zhì)量控制的的技術(shù)方案。產(chǎn)品質(zhì)量難于達(dá)到持續(xù)保證。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種養(yǎng)血安神藥物的質(zhì)量控制方法，用于該藥物生產(chǎn)中的質(zhì)量控制，具體方法包括鑒別和含量測(cè)定。
[0005]1、鑒別 (I)酸棗仁鑒別
取待檢藥物適量，加甲醇10?30ml，超聲處理10?30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0?30ml使溶解，用乙醚萃取三次，每次20ml，水相用水飽和正丁醇提取兩次，每次15ml，合并提取液，用正丁醇飽和氨試液萃取兩次，每次20ml，正丁醇層蒸干，殘?jiān)蛹状?.5?2ml溶解，作為供試品溶液。另取酸棗仁皂苷A、B對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含0.5?1.5mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液，再取酸棗仁對(duì)照藥材0.5?lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2?10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(2?5:1:4?10)(體積比)的上層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，噴以2%香草醛硫酸乙醇溶液(取硫酸Iml加乙醇定容至10ml)，在100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0006](2)甘草鑒別
取待檢藥物適量，加水10?40ml，用氨試液調(diào)pH值至9，超聲處理10?30分鐘，離心(3000rpm,20分鐘)，取上清液加硫酸調(diào)pH至2，靜置2小時(shí)，離心(3000rpm、20分鐘)，棄去上清液，沉淀加水10?40ml及鹽酸2ml，加熱回流10?40分鐘，放冷，用氯仿提取兩次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)?.5?1.5 ml氯仿使溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加氯仿制成每Iml含0.5?1.5 ml的溶液，作為對(duì)照品溶液，另取甘草對(duì)照藥材0.5?lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2?5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10?20:4:1.5)(體積比)為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈(254nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
[0007](3)川芎鑒別
取待檢藥物適量，置具塞錐形瓶中，加水10?30ml，加熱至約60°C，振搖至無明顯顆粒，趁熱加石油醚(沸程60-90°C)40ml，密閉，振搖2?10分鐘，超聲處理10?30分鐘，分取石油醚提取液，揮干，殘?jiān)右颐?.5?1.5 ml溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材粉末lg，加石油醚20ml，超聲波處理10?30分鐘，濾過，揮干，殘澄加乙醚0.5?1.5 ml溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各2?5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以正己烷-乙酸乙酯(2?10:1)(體積比)為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
[0008](4)知母鑒別
取待檢藥物適量，加乙醚30?50ml，超聲處理10?30分鐘，濾過，殘?jiān)鼡]盡乙醚，加乙醇30ml及濃鹽酸3ml，回流水解I小時(shí)，水解液濃縮至約10ml，加水10?30ml，用甲苯20ml提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹妆?.5?1.5 ml溶解，作為供試品溶液。另取菝葜皂苷元對(duì)照品，加甲苯制成每Iml含0.5?1.5 ml的溶液，作為對(duì)照品溶液。另取知母對(duì)照藥材0.5?lg，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2?5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮(5?10:1)(體積比)為展開劑，展開，取出，涼干，噴以8%香草醛無水乙醇溶液與硫酸溶液(取硫酸7ml加無水乙醇至1ml)的混合液(0.5:5)(體積比)，在100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0009](5)茯苓鑒別
取待檢藥物適量，加乙醚30?50ml，超聲處理10?30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5?1.5ml溶解，作為供試品溶液。另取茯苓對(duì)照藥材粉末0.5?1.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5?8 μ 1，分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以石油醚(60?90°C )-丙酮-乙酸乙醋(80?85:15:1)(體積比)為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
[0010]2、含量測(cè)定
(I)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(40?60:40?60)(體積比)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
[0011](2)對(duì)照品溶液的制備:精密稱取五味子醇甲對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0.01?0.05mg的溶液，即得。
[0012](3)供試品溶液的制備:取待檢藥物0.1?2g，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇約40ml，超聲處理15?30分鐘(功率250W，頻率20KHZ)，以甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0013](4)測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10?20 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0014]本發(fā)明具有如下有益效果:
本發(fā)明一種養(yǎng)血安神藥物的質(zhì)量控制方法，采用薄層色譜法對(duì)處方中的酸棗仁、甘草、川芎、知母、茯苓進(jìn)行定性鑒別，該方法具有較好的專屬性、重現(xiàn)性及耐用性；采用高效液相色譜法對(duì)五味子醇甲進(jìn)行定量分析，此法具有分離度高、分析時(shí)間短且操作簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，能有效的提高生產(chǎn)效率，節(jié)約能源。同時(shí)采用DAD檢測(cè)器，考察方法的專屬性；采用不同儀器及不同色譜柱考察方法的耐用性。此方法專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確。本發(fā)明養(yǎng)血安神藥物質(zhì)量控制方法，前述組方的養(yǎng)血安神藥物藥物提供了安全有效的質(zhì)控方法，為藥品的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了有效保障。
【附圖說明】
[0015]圖1為本發(fā)明酸棗仁薄層鑒別色譜圖，其中
1、供試品I
2、供試品2
3、供試品3
4、酸棗仁對(duì)照藥材
5、酸棗仁皂苷A、B
6、陰性；
圖2為本發(fā)明甘草薄層鑒別色譜圖，其中
1、供試品I
2、供試品2
3、供試品3
4、甘草酸銨對(duì)照品
5、甘草對(duì)照藥材
6、陰性；
圖3為本發(fā)明川芎薄層鑒別色譜圖，其中
1、供試品I
2、供試品2
3、供試品3
4、川芎對(duì)照藥材
5、陰性；
圖4為本發(fā)明知母薄層鑒別色譜圖，其中
1、供試品I
2、供試品2
3、供試品3
4、知母對(duì)照藥材
5、菝葜皂苷元對(duì)照品
6、陰性；
圖5為本發(fā)明茯苓薄層鑒別色譜圖，其中
1、供試品I
2、供試品2
3、供試品3 4、茯苓對(duì)照藥材
5、陰性；
圖6為本發(fā)明五味子醇甲陰性樣品溶液高效液相色譜圖；
圖7為本發(fā)明五味子醇甲對(duì)照品溶液高效液相色譜圖；
圖8為本發(fā)明五味子醇甲供試品溶液高效液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016]待檢藥物:以一種養(yǎng)血安神藥物及其制備方法，實(shí)施例中膠囊的制備方法制成膠囊劑。
[0017]1、鑒別
(1)酸棗仁鑒別
取待檢藥物lg，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，用乙醚萃取三次，每次20ml，水相用水飽和正丁醇提取兩次，每次15ml，合并提取液，用正丁醇飽和氨試液萃取兩次，每次20ml，正丁醇層蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml溶解，作為供試品溶液。另取酸棗仁皂苷A、B對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。同時(shí)按處方比例及制法制成缺酸棗仁的陰性對(duì)照樣品，再按供試品溶液制法制成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各8 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)(體積比)的上層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，噴以2%香草醛硫酸乙醇溶液(取硫酸Iml加乙醇定容至1ml)，在100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，結(jié)果見圖1(1、供試品2、供試品3、供試品4、酸棗仁對(duì)照藥材5、酸棗仁皂苷A、B 6、陰性)。
(2)甘草鑒別
取待檢藥物5g，加水25ml，用氨試液調(diào)pH值至9，超聲處理15分鐘，離心(3000rpm、20分鐘)，取上清液加硫酸調(diào)pH至2，靜置2小時(shí)，離心(3000rpm、20分鐘)，棄去上清液，沉淀加水20ml及鹽酸2ml，加熱回流30分鐘，放冷，用氯仿提取兩次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)覫ml氯仿使溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加氯仿制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。另取甘草對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。同時(shí)按處方比例及制法制成缺甘草的陰性對(duì)照樣品，再按供試品溶液制法制成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典200