專利名稱：一種藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，特別涉及一種用于治療婦科炎癥的藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
慢性盆腔炎包括慢性子宮內(nèi)膜炎、附件炎、慢性輸卵管卵巢炎及慢性盆腔結(jié)締組織炎，是婦產(chǎn)科的常見病和多發(fā)病，也是引起異位妊娠、不孕、婦科盆腔疼痛及盆腔粘連性疾病的常見原因之一。屬于中醫(yī)學(xué)“帶下病”范疇。常為急性盆腔炎不能徹底治療或患者體質(zhì)較差，病程遷延所致，但亦可無急性炎癥病史。病情較頑固，當(dāng)?shù)挚沽^差時(shí)，可有急性發(fā)作。由于慢性盆腔炎反復(fù)發(fā)作，遷延難愈，抗生素多已形成耐藥，給患者帶來痛苦。
目前慢性盆腔炎發(fā)病率有上升趨勢(shì)。在一些性開放、性病泛濫國(guó)家，該病尤為常見。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，性傳播疾病泛濫導(dǎo)致全世界每年新增3億3千多萬性病患者，其中有10％～20％將發(fā)展為盆腔炎，其結(jié)果是帶來長(zhǎng)期慢性盆腔痛、不育不孕或?qū)m外孕等一系列家庭和社會(huì)問題。據(jù)報(bào)道，中國(guó)女性中40％患有不同程度的生殖道感染等婦科疾病，已婚婦女患病率更是高達(dá)70％。
由于目前對(duì)慢性盆腔炎的發(fā)病機(jī)理仍缺乏足夠的了解，每年有成千上萬的患者因得不到及時(shí)徹底的治療而留下一系列后遺癥。化學(xué)藥物對(duì)此病療效不佳，而中醫(yī)藥以其獨(dú)特的辨證論治理論治療該病，有著療效顯著、副作用小、復(fù)發(fā)率低等優(yōu)勢(shì)，日益受到國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)專家的重視。目前臨床運(yùn)用中醫(yī)藥治療本病的報(bào)道較多，顯示了中醫(yī)藥治療該病的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)和廣闊前景。
綜合上述，慢性盆腔炎發(fā)病率高，對(duì)患者的身心健康及家庭、社會(huì)的危害極大。在治療該病方面，化學(xué)藥物療效不佳而中醫(yī)藥則具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和廣闊的前景。但目前市場(chǎng)上能有效治療慢性盆腔炎的中成藥尚不太多，故研究開發(fā)一個(gè)高效無毒、服用方便的治療慢性盆腔炎的中藥新藥，將會(huì)產(chǎn)生較高的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于公開一種藥物組合物；本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開一種用于治療婦科炎癥的藥物組合物；本發(fā)明的第三個(gè)目的在于公開一種藥物組合物的制備方法；本發(fā)明目的還在于公開一種藥物組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比如下(按重量份)苦玄參10-95重量份 三白草10-80重量份 黃 柏10-85重量份金櫻根50-200重量份 延胡索10-60重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份)苦玄參85重量份 三白草15重量份 黃 柏80重量份金櫻根60重量份 延胡索50重量份。
還可以在以上基礎(chǔ)上加上菝葜50-200重量份或/和當(dāng)歸10-80重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份)苦玄參85重量份三白草15重量份 黃 柏80重量份金櫻根60重量份菝 葜180重量份或/和當(dāng)歸20重量份延胡索50重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份)苦玄參20重量份 三白草70重量份 黃 柏20重量份金櫻根180重量份菝 葜70重量份或/和當(dāng)歸70重量份延胡索15重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份)苦玄參60重量份 三白草40重量份 黃 柏40重量份金櫻根140重量份 菝 葜100重量份或/和當(dāng)歸40重量份延胡索27重量份。
本發(fā)明藥物組合物的制備方法苦玄參加4-12倍量水煎煮2-3次，每次0.5～2小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.1-0.3體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用35～75％的0.2體積份乙醇和0.03-0.1體積份量水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，加75-99％乙醇使含醇量達(dá)50-70％，充分?jǐn)嚢瑁o置2-4小時(shí)，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加4～12倍量0.2-0.5％的硫酸溶液，煎煮2-3次，每次0.5-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.01～1.10的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量12-18％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加1-3倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物可制成臨床可接受的劑型，包括片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸等。
本發(fā)明藥物組合物的制備方法還可以是苦玄參加4-12倍量水煎煮2-3次，每次0.5～2小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.1-0.3體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用35～75％的0.2體積份乙醇和0.03-0.1體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、菝葜和/或當(dāng)歸、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，加75-99％乙醇使含醇量達(dá)50-70％，充分?jǐn)嚢?，靜置2-4小時(shí)，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加4～12倍量0.2-0.5％的硫酸溶液，煎煮2-3次，每次0.5-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.01～1.10的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量12-18％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加1-3倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物可制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
上述所用原料藥與洗脫液的重量體積比為g/L。
本組合物制劑的質(zhì)量控制方法含有如下鑒別和/或含量測(cè)定，鑒別方法選自如下方法中的一種或幾種a.取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，研細(xì)，加甲醇20ml超聲處理20-40分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10-15∶4-8∶2-4∶2-4∶1-2比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡12-18分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
b.取a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以8-12∶4-6∶1-2比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
c.取b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以15-18∶2-5比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定方法為
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；35-40∶60-65∶0.4-0.6比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理40-50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物日服用制劑量含苦玄參以苦玄參苷IA(C41H62O13)計(jì)，不得少于4.68mg。
本藥物組合物日服用劑量相當(dāng)日服用生藥量40.23克。
本發(fā)明有清熱燥濕、止帶止癢、散瘀止痛、解毒消腫的功效。所治療的疾病的癥狀主要表現(xiàn)帶下量多，色黃質(zhì)稠，或色白豆渣樣，外陰瘙癢，小腹脹痛，口苦口膩，胸悶納呆，小便短赤，舌紅苔黃膩，脈滑數(shù)等；慢性盆腔炎見上述證候者。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的制劑穩(wěn)定，質(zhì)量可控。
對(duì)本七味原料藥的藥物組合物片劑(暫名三金婦炎片)的藥效學(xué)部分進(jìn)行初步研究，結(jié)果表明本藥物組合物具有抗炎、解熱、止癢的作用；對(duì)熱刺激有鎮(zhèn)痛作用，但對(duì)化學(xué)刺激無鎮(zhèn)痛作用；對(duì)金黃色葡萄球菌、淋球奈瑟菌、大腸埃希菌、乙型鏈球菌和銅綠假單胞菌等細(xì)菌具有抑制作用，對(duì)無菌性及細(xì)菌性婦科炎癥均有顯著的抑制作用；具有擴(kuò)張微血管，改善微循環(huán)的作用。下述實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例1抗炎試驗(yàn)小鼠耳廓二甲苯致炎試驗(yàn)取小鼠75只，隨機(jī)分成6組，每組至少10只，每口給藥一次，對(duì)照組給以等體積生理鹽水，連續(xù)灌胃給藥5天。最后一次給藥后1h將二甲苯0.02ml用磨平4(1/2)號(hào)針頭于每只鼠右耳前后兩而均勻涂布。15分鐘后將動(dòng)物處死，用直徑8mm打孔器將小鼠雙耳同部位等面積切下，電子天平稱重。每鼠右耳片重量減去左耳片重量并計(jì)算腫脹度。
腫脹度＝右耳片重量-左耳片重量結(jié)果三金婦炎片的低、中、高劑量組及阿司匹林組對(duì)二甲苯所致耳腫脹的腫脹度與對(duì)照組相比有降低，差異有顯著性(P＜0.05，P＜0.01)。提示三金婦炎片有抗炎作用。
實(shí)驗(yàn)例2鎮(zhèn)痛試驗(yàn)常規(guī)熱板法試驗(yàn)試驗(yàn)前對(duì)小鼠進(jìn)行篩選，將其置于55±1℃的熱板上，以放置熱板至出現(xiàn)小鼠舔后足所需時(shí)間(s)為該鼠的正常痛閾值。凡在5s內(nèi)或在30s后才出現(xiàn)舔后足者及跳躍者均棄之不用。選出合格小鼠90只，隨機(jī)分成6組。合格小鼠于試驗(yàn)前禁食12h，供飲水。重復(fù)測(cè)定各鼠的正常痛閾值.然后按各組劑量灌胃給藥，對(duì)照組給以等體積生理鹽水，分別于給藥后15、30、60及120min分別測(cè)定各組小鼠的痛閾值。小鼠在熱板上停留超過60s仍無反應(yīng)者，其痛閾以60s計(jì)算。按以下公式計(jì)算藥后痛閾提高的百分率(％)痛閾提高的百分率＝(用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值)/用藥前平均痛閾值*100％結(jié)果與對(duì)照組相比，三金婦炎片高劑量組在給藥后15和30分鐘的閾值升高，差異有顯著性意義(P＜0.05)，同時(shí)阿司匹林組在給藥后60和120分鐘的閾值升高，差異有顯著性意義(P＜0.05)，其它組沒有顯著性意義。提示本品是通過中樞鎮(zhèn)痛而不是通過外周鎮(zhèn)痛來發(fā)揮其藥理作用。
實(shí)驗(yàn)例3解熱試驗(yàn)取新西蘭大白兔36只，每只動(dòng)物每日體溫波動(dòng)不超過0.4℃，購(gòu)買后再每日于上下午各測(cè)一次體溫，連續(xù)二天。于第三天測(cè)體溫后耳靜脈注射內(nèi)毒素(24EU/Kg)造模型，1小時(shí)后測(cè)體溫，按體溫隨機(jī)分成6組，所列藥物及劑量灌胃給藥，對(duì)照組給予等體積的大豆色拉油。以后每隔1小時(shí)測(cè)一次體溫。各時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的體溫與基礎(chǔ)體溫(造型前五次體溫的均值)的差值(即升高值)與對(duì)照組比較，用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，并以時(shí)間為橫坐標(biāo)，體溫升高值為縱坐標(biāo)繪制時(shí)間—肛溫曲線。
試驗(yàn)結(jié)果與對(duì)照組相比，給藥后3小時(shí)和4小時(shí)的三金婦炎片高劑量組的溫度降低有顯著性差異(P＜0.05)，給藥后4、5和6小時(shí)的三金婦炎片中劑量組的溫度降低有顯著性差異(P＜0.05)，且三金婦炎片在給藥后3小時(shí)和4小時(shí)的溫度降低是呈劑量依賴性的，阿司匹林組在2、3、4、5和6小時(shí)組溫度降低有顯著性差異(P＜0.05)，但是金雞片組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)都無顯著性差異(P＞0.05)。提示本發(fā)明具有解熱作用。
實(shí)驗(yàn)例4止癢試驗(yàn)取豚鼠50只，隨機(jī)分5組，每組10只，設(shè)正常對(duì)照組、陽性組、受試驗(yàn)藥物高、中、低三個(gè)劑量組，對(duì)照組給以等體積生理鹽水，連續(xù)灌胃給藥5天。試驗(yàn)前一日，給各組豚鼠右后足背去毛，試驗(yàn)當(dāng)日，用粗沙紙擦傷右后足背去毛處，面積為1cm2，給藥一次。末次用藥后1h，開始在創(chuàng)面滴0.01％磷酸組織胺0.05ml/只，此后每隔3分鐘依0.01％、0.02％、0.03％、0.04％--遞增濃度，每次0.05ml/只。直致豚鼠出現(xiàn)回頭舔后足時(shí)給予的磷酸組織胺總量為致癢閾。
結(jié)果與對(duì)照組相比，三金婦炎片低、中、高劑量組及苯海拉明組有升高致癢閾的作用，差異有顯著性意義(P＜0.05)。提示本品具有止癢作用。
實(shí)驗(yàn)例5體外抗菌試驗(yàn)按照美國(guó)臨床試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)推薦的瓊脂稀釋法進(jìn)行[1]。具體方法如下稱取10g該中藥，加無菌蒸餾水15ml，攪拌均勻后制成666mg/ml(W/V)的藥懸液，再分別用無菌瓊脂培養(yǎng)基依次對(duì)其進(jìn)行稀釋，分別制成含66.6mg/ml、33.3mg/ml、16.65mg/ml、8.3mg/ml、4.2mg/ml藥物的試驗(yàn)瓊脂平板。各試驗(yàn)菌(黑曲霉用孢子)先用生理鹽水稀釋并校正至0.5麥?zhǔn)蠁挝?菌濃度約108CFU/mL)，然后各組試驗(yàn)瓊脂平板分別接種相應(yīng)的試驗(yàn)菌，每個(gè)平板接種菌量均為約104個(gè)細(xì)菌。37C培養(yǎng)18-24小時(shí)觀察結(jié)果，判定最小抑菌濃度(MIC)。以瓊脂培養(yǎng)基稀釋的各相應(yīng)稀釋度的藥液，不加細(xì)菌，作為藥物對(duì)照；陽性對(duì)照為加相同菌量但不加藥液的瓊脂培養(yǎng)基；陰性對(duì)照為不加細(xì)菌的瓊脂培養(yǎng)基。
結(jié)果三金婦炎片對(duì)金黃色葡萄球菌、淋病奈瑟菌最小抑菌濃度(MIC)均為8.3mg/ml，對(duì)大腸埃希菌的MIC為33.3mg/ml，對(duì)乙型鏈球菌和銅綠假單胞菌的MIC均為66.6mg/ml，而對(duì)真菌如白假絲酵母菌和黑曲霉的MIC均大于66.6mg/ml。提示本品具有抗菌作用。
實(shí)驗(yàn)例6慢性子宮內(nèi)膜炎試驗(yàn)取70只未交配的雌性大鼠，10％水合氯醛0.3ml/100g麻醉，常規(guī)消毒，下腹部下中切口約2cm，暴露子宮，用4號(hào)針頭分別在子宮分叉處小心進(jìn)針，向卵巢方向緩慢注入25％苯酚膠漿0.04ml，注射完畢，分層關(guān)腹，消毒。其中10只大鼠不注射苯酚作為假手術(shù)組。術(shù)后七日開始灌胃給藥治療，給藥量體積為1.0ml/100g，劑量見表20-7。用藥4周后，末次給藥后1h，取血測(cè)定外周血白細(xì)胞，處死，肉眼觀察并記錄子宮大體變化，摘取左側(cè)子宮，稱重后用中性福爾馬林固定，常規(guī)切片，HE染色，進(jìn)行病理學(xué)檢查，半定量分析。
腫脹率(％)＝(左側(cè)子宮重-右側(cè)子宮重)/右側(cè)子宮重；抑制率(％)＝(模型對(duì)照組腫脹率-各藥物組腫脹率)/模型對(duì)照組腫脹率結(jié)果與假手術(shù)組相比，三金婦炎片各劑量組的白細(xì)胞數(shù)呈劑量依賴性的降低；三金婦炎片高劑量組及阿司匹林組的子宮腫脹率都明顯降低，差異有顯著性意義(分別為P＜0.05和P＜0.01)，病理結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，阿司匹林和高劑量組子宮內(nèi)膜層和肌層均見少量嗜酸性白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，同時(shí)中劑量和金雞片組子宮內(nèi)膜層和肌層均見較多量嗜酸性白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，而低劑量組子宮內(nèi)膜層和肌層均見多量嗜酸性白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。提示本發(fā)明具有抑制無菌性子宮內(nèi)膜炎癥的作用。
實(shí)驗(yàn)例7慢性盆腔炎試驗(yàn)取70只未交配的雌性大鼠，10％水合氯醛0.3ml/100g麻醉，常規(guī)消毒，下腹部下中切口約2cm，暴露子宮，用4號(hào)針頭分別在子宮分叉處小心進(jìn)針，向左側(cè)卵巢方向緩慢注入菌液(106～107/ml 0.08ml)，注射完畢，分層關(guān)腹，消毒。其中10只大鼠不注射菌液作為假手術(shù)組。術(shù)后七日開始灌胃給藥治療，給藥量體積為1.0ml/100g。用藥4周后，末次給藥后1h，取血測(cè)定外周血白細(xì)胞，處死，肉眼觀察并記錄子宮大體變化，摘取左側(cè)子宮，稱重后用中性福爾馬林固定，常規(guī)切片，HE染色，進(jìn)行病理學(xué)檢查，半定量分析。
腫脹率(％)＝(左側(cè)子宮重-右側(cè)子宮重)/右側(cè)子宮重；抑制率(％)＝(模型對(duì)照組腫脹率-各藥物組腫脹率)/模型對(duì)照組腫脹率結(jié)果與假手術(shù)組相比，三金婦炎片各劑量組的白細(xì)胞數(shù)呈劑量依賴性的降低；三金婦炎片中、高劑量組及阿莫西林組都明顯降低，差異有顯著性意義(分別為P＜0.05和P＜0.01)。病理結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，阿司匹林和高劑量組子宮內(nèi)膜層和肌層均見少量嗜酸性白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，同時(shí)中劑量和金雞片組子宮內(nèi)膜層和肌層均見較多量嗜酸性白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，而低劑量組子宮內(nèi)膜層和肌層均見多量嗜酸性白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。提示本品具有抗金黃色葡萄球菌所致盆腔炎癥的作用。
實(shí)驗(yàn)例8微循環(huán)試驗(yàn)取健康昆明小鼠60只，隨機(jī)分成六組，即生理鹽水組，阿司匹林組，復(fù)方丹參組及三金婦炎片的低，中，高劑量組。其中阿司匹林組0.225g/kg，復(fù)方丹參片0.42g/kg，三金婦炎片的低，中，高劑量分別為0.2g/kg，0.4g/kg及0.8g/kg。生理鹽水組給予相同體積的量0.3ml灌胃。每組10只，稱重并隨機(jī)編號(hào)。將小鼠用烏拉坦麻醉后，將小鼠仰位固定在小鼠耳托上，調(diào)節(jié)顯微鏡上觀測(cè)臺(tái)的高度，使耳廓平展在耳托上。在耳片、耳廓背面涂少許香柏油，調(diào)節(jié)冷光源適當(dāng)亮度，在透射光下，用50～100倍顯微鏡下選適宜部位觀察動(dòng)，靜脈血管口徑，毛細(xì)血管開放數(shù)，血液流態(tài)及流速，標(biāo)記觀察部位，灌胃給藥，觀察給藥后15min，30min，45min及60min后于同一倍觀察小鼠耳廓同一部位動(dòng)、靜脈血管口徑，毛細(xì)血管開放數(shù)，血液流態(tài)及流速。同時(shí)用攝像系統(tǒng)及醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行動(dòng)態(tài)分析。
結(jié)果給藥后15、30、45、60分鐘，三金婦炎片高和中劑量組的靜脈與動(dòng)脈口徑增大、靜脈血流速度變化與對(duì)照組相比均有顯著性差異(p＜0.01)；給藥后30、45、60分鐘，三金婦炎片高和中劑量組的毛細(xì)血管開放數(shù)、靜脈血液流態(tài)評(píng)分與對(duì)照組相比均有顯著性差異(p＜0.01)；給藥后30、45、60分鐘，三金婦炎片低劑量組的靜脈與動(dòng)脈口徑、毛細(xì)血管開放數(shù)、靜脈血流速度變化、靜脈血液流態(tài)評(píng)分與對(duì)照組相比均有顯著性增加(p＜0.05，p＜0.01)。顯示本品具有擴(kuò)張微血管，改善微循環(huán)的作用。
實(shí)施例1苦玄參60g 三白草40g 黃柏40g 金櫻根140g 延胡索27g苦玄參加8倍量水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.2L水洗脫，棄去洗脫液，再依次用50％乙醇0.2L和水0.05L洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、延胡索(醋制)加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16(60℃)的清膏，加85％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢?，靜置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加8倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04(60℃)的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，加入適量的淀粉，混勻，制成顆粒，加入羧甲基淀粉鈉、滑石粉和硬脂酸鎂混勻，壓制成片劑，包薄膜衣，即得。所制成的片劑每片重0.24g，一次3片，每日3次。
實(shí)施例2苦玄參85g 三白草15g 黃 柏80g金櫻根60g菝葜180g當(dāng) 歸20g 延胡索50g苦玄參加5倍量水煎煮二次，第一次0.5小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.15L水洗脫，棄去洗脫液，再依次用40％乙醇0.2L和水0.04L洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、菝葜、三白草、當(dāng)歸、延胡索(醋制)加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16(60℃)的清膏，加90％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢瑁o置2小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加5倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04(60℃)的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉。加入適量的淀粉，混勻，制成顆粒劑。所制成的顆粒劑每袋重5g，一次2袋，每日3次。
實(shí)施例3苦玄參20g 三白草70g 黃柏20g 金櫻根180g 延胡索15g苦玄參加10倍量水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.2L水洗脫，棄去洗脫液，再依次用70％乙醇0.2L和水0.08L洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、延胡索(醋制)加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16(60℃)的清膏，加95％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢?，靜置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加10倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04(60℃)的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉。制成膠囊劑。所制成的膠囊劑每粒重0.5g，一次3粒，每日3次。
實(shí)施例4苦玄參60g 三白草40g 黃柏40g 金櫻根140g 延胡索27g苦玄參加8倍量水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.2L水洗脫，棄去洗脫液，再依次用50％乙醇0.2L和水0.05L洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、延胡索(醋制)加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16(60℃)的清膏，加85％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢?，靜置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加8倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04(60℃)的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，加入適量的淀粉，混勻，制成顆粒，加入羧甲基淀粉鈉、滑石粉和硬脂酸鎂混勻，壓制成片劑，包薄膜衣，即得。所制成的片劑每片重0.24g，一次3片，每日3次。
實(shí)施例5苦玄參85g 三白草15g 黃 柏80g金櫻根60g菝 葜180g 當(dāng) 歸20g 延胡索50g苦玄參加5倍量水煎煮二次，第一次0.5小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.15L水洗脫，棄去洗脫液，再依次用40％乙醇0.2L和水0.04L洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、菝葜、三白草、當(dāng)歸、延胡索(醋制)加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16(60℃)的清膏，加90％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢瑁o置2小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加5倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04(60℃)的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉。加入適量的淀粉，混勻，制成顆粒劑。所制成的顆粒劑每袋重5g，一次2袋，每日3次。
實(shí)施例6苦玄參20g三白草70g黃 柏20g金櫻根180g菝 葜70g當(dāng) 歸70g延胡索15g苦玄參加10倍量水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.2L水洗脫，棄去洗脫液，再依次用70％乙醇0.2L和水0.08L洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、菝葜、三白草、當(dāng)歸、延胡索(醋制)加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16(60℃)的清膏，加95％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢?，靜置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18(60℃)的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加10倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04(60℃)的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉。制成膠囊劑。所制成的膠囊劑每粒重0.5g，一次3粒，每日3次。
實(shí)施例7苦玄參85g三白草15g黃 柏80g
金櫻根60g 菝 葜180g 延胡索50g常規(guī)工藝制成膠囊劑。所制成的膠囊劑每粒重0.5g，一次3粒，每日3次。
實(shí)施例8苦玄參20g 三白草70g 黃 柏20g金櫻根180g 菝 葜70g 延胡索15g常規(guī)工藝制成顆粒劑，每袋重5g，一次2袋，每日3次。
實(shí)施例9苦玄參60g 三白草40g 黃 柏40g金櫻根140g菝 葜100g 延胡索27g常規(guī)工藝制成片劑，每片重0.24g，一次3片，每日3次。
實(shí)施例10苦玄參85g三白草15g黃 柏80g金櫻根60g當(dāng) 歸20g延胡索50g常規(guī)工藝制成膠囊劑。所制成的膠囊劑每粒重0.5g，一次3粒，每日3次。
實(shí)施例11苦玄參20g 三白草70g 黃 柏20g金櫻根180g 當(dāng) 歸70g 延胡索15g常規(guī)工藝制成顆粒劑，每袋重5g，一次2袋，每日3次。
實(shí)施例12苦玄參60g 三白草40g黃 柏40g金櫻根140g 當(dāng) 歸40g延胡索27g常規(guī)工藝制成片劑，每片重0.24g，一次3片，每日3次。
實(shí)施例13本組合物片劑的鑒別方法取本藥物組合物片劑20片，研細(xì)，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡15分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)施例14本組合物的鑒別方法a.取實(shí)施例4的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10∶5∶1比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
b.本實(shí)施例a項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以17∶3比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例15本組合物膠囊劑的鑒別方法
a.取本藥物組合物膠囊劑20粒，研細(xì)，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡15分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
b.取本實(shí)施例a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10∶5∶1比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
c.取本實(shí)施例b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以17∶3比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例16本組合物片劑的含量測(cè)定方法用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；38∶62∶0.5比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取實(shí)施例1中本藥物組合物20片，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物片劑每片含苦玄參以苦玄參苷IA(C41H62O13)計(jì)，不得少于0.52mg。
實(shí)施例17本組合物片劑的質(zhì)量控制方法鑒別方法a.取本藥物組合物片劑20片，研細(xì)，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡15分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
b.取a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10∶5∶1比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
c.取b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以17∶3比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定方法為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；38∶62∶0.5比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取實(shí)施例1中本藥物組合物20片，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物片劑每片含苦玄參以苦玄參苷IA(C41H62O13)計(jì)，不得少于0.52mg。
權(quán)利要求
1.一種治療婦科炎癥的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的苦玄參10-95重量份 三白草10-80重量份 金櫻根50-200重量份黃 柏10-85重量份 延胡索10-60重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的苦玄參85重量份三白草15重量份黃 柏80重量份金櫻根60重量份延胡索50重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物加上以下原料藥制成菝葜50-200重量份或/和當(dāng)歸10-80重量份。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的苦玄參85重量份 三白草15重量份黃 柏80重量份金櫻根60重量份 菝 葜180重量份或/和當(dāng)歸20重量份延胡索50重量份。
5.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的苦玄參20重量份三白草70重量份 黃 柏20重量份金櫻根180重量份 菝 葜70重量份或/和當(dāng)歸70重量份延胡索15重量份。
6.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的苦玄參60重量份三白草40重量份黃 柏40重量份金櫻根140重量份 菝 葜100重量份或/和當(dāng)歸40重量份延胡索27重量份。
7.權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為苦玄參加4-12倍量水煎煮2-3次，每次0.5～2小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.1-0.3體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用35～75％的0.1體積份乙醇和0.03-0.1體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，加75-99％乙醇使含醇量達(dá)50-70％，充分?jǐn)嚢瑁o置2-4小時(shí)，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加4～12倍量0.2-0.5％的硫酸溶液，煎煮2-3次，每次0.5-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.01～1.10的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量12-18％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加1-3倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為苦玄參加8倍量水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.2體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用50％0.2體積份乙醇和0.05體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16的清膏，加85％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢?，靜置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加8倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物制成、片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
9.權(quán)利要求3所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為苦玄參加4-12倍量水煎煮2-3次，每次0.5～2小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.1-0.3體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用35～75％的0.2體積份乙醇和0.03-0.1體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、菝葜或/和當(dāng)歸、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，加75-99％乙醇使含醇量達(dá)50-70％，充分?jǐn)嚢?，靜置2-4小時(shí)，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加4～12倍量0.2-0.5％的硫酸溶液，煎煮2-3次，每次0.5-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.01～1.10的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量12-18％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加1-3倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為苦玄參加8倍量水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用2體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用50％的0.2體積份乙醇和0.05體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、三白草、菝葜或/和當(dāng)歸、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16的清膏，加85％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢瑁o置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加8倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物制成臨床接受的片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
11.如權(quán)利要求4、5或6所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為苦玄參加4-12倍量水煎煮2-3次，每次0.5～2小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.1-0.3體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用35～75％的0.2體積份乙醇和0.03-0.1體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、菝葜、三白草、當(dāng)歸、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，加75-99％乙醇使含醇量達(dá)50-70％，充分?jǐn)嚢?，靜置2-4小時(shí)，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.40的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加4～12倍量0.2-0.5％的硫酸溶液，煎煮2-3次，每次0.5-2小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.01～1.10的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量12-18％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加1-3倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物制成臨床接受的片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
12.如權(quán)利要求11所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為苦玄參加8倍量水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，離心，濾液通過苯乙烯型大孔吸附樹脂，用0.2體積份水洗脫，棄去洗脫液，再依次用50％0.2體積份乙醇和0.05體積份水洗脫，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18的清膏，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取金櫻根、菝葜、三白草、當(dāng)歸、延胡索加4倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.16的清膏，加85％乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢?，靜置3小時(shí)以上，離心，上清液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.14～1.18的清膏，噴霧干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取黃柏，加8倍量0.3％的硫酸溶液，煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濃縮至相對(duì)密度為1.02～1.04的浸膏，加入相當(dāng)于浸膏量15％的氯化鈉，攪勻，靜置，離心，沉淀物加2倍量水洗，離心，沉淀物干燥，粉碎成細(xì)粉，得本藥物組合物，該藥物組合物制成臨床接受的片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑或滴丸。
13.如權(quán)利要求1、2、4、5或6所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下鑒別方法中的一種和/或幾種a.取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，加甲醇20ml超聲處理20-40分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10-15∶4-8∶2-4∶2-4∶1-2比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡12-18分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.取a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以8-12∶4-6∶1-2比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.取b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以15-18∶2-5比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
14.如權(quán)利要求13所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下鑒別方法中的一種或幾種a.取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡15分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.取a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10∶5∶1比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.取b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以17∶3比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
15.如權(quán)利要求1、2、4、5或6所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下含量測(cè)定方法用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；35-40∶60-65∶0.4-0.6比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理40-50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物日服用制劑量含苦玄參以苦玄參苷IA計(jì)，不得少于4.68mg。
16.如權(quán)利要求15所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下含量測(cè)定方法用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；38∶62∶0.5比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物日服用制劑量含苦玄參以苦玄參苷IA計(jì)，不得少于4.68mg。
17.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下鑒別方法中的一種或幾種a.取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，加甲醇20ml超聲處理20-40分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10-15∶4-8∶2-4∶2-4∶1-2比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡12-18分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.取a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以8-12∶4-6∶1-2比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.取b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以15-18∶2-5比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
18.如權(quán)利要求17所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下鑒別方法中的一種或幾種a.取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液1ml作為供試品溶液，其余濾液備用；另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，加甲醇5ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各2～4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，用展開劑與濃氨試液同時(shí)預(yù)平衡15分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.取a項(xiàng)下的濾液，蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液，碳酸鈉液備用；另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15～20μl，對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以含1％氫氧化鈉溶液的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10∶5∶1比例的正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏至斑點(diǎn)顯色清晰，在空氣中揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.取b項(xiàng)下的碳酸鈉液，揮去殘余的乙醚，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取金櫻根對(duì)照藥材2g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?％碳酸鈉溶液20ml，微熱使溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，分取碳酸鈉液，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以17∶3比例的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)。
19.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下含量測(cè)定方法用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；35-40∶60-65∶0.4-0.6比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理40-50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物日服用制劑量含苦玄參以苦玄參苷IA計(jì)，不得少于4.68mg。
20.如權(quán)利要求19所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下含量測(cè)定方法用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；38∶62∶0.5比例的乙腈-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm；理論板數(shù)按苦玄參苷IA峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；精密稱取苦玄參苷IA對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；取本藥物組合物日服用劑量2.22倍量，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，本藥物組合物日服用制劑量含苦玄參以苦玄參苷IA計(jì)，不得少于4.68mg。
21.如權(quán)利要求1、2、4、5或6所述的藥物組合物在制備治療婦科炎癥的藥物中的應(yīng)用。
22.如權(quán)利要求21所述的藥物組合物在制備具有抗炎作用、解熱作用、止癢作用、鎮(zhèn)痛作用、抗菌作用、擴(kuò)張微血管作用或改善微循環(huán)作用的藥物中的應(yīng)用。
23.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物在制備治療婦科炎癥的藥物中的應(yīng)用。
24.如權(quán)利要求23所述的藥物組合物在制備具有抗炎作用、解熱作用、止癢作用、鎮(zhèn)痛作用、抗菌作用、擴(kuò)張微血管作用或改善微循環(huán)作用的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種用于治療婦科炎癥的藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法。該藥物組合物含有苦玄參、三白草、黃柏、金櫻根、延胡索等；本發(fā)明藥物組合物有清熱燥濕、止帶止癢、散瘀止痛、解毒消腫的功效，用于婦科炎癥。所治療的疾病的癥見帶下量多，色黃質(zhì)稠，或色白豆渣樣，外陰瘙癢，小腹脹痛，小便短赤等及慢性盆腔炎見上述證候者。本發(fā)明制備方法實(shí)現(xiàn)的制劑療效確切，質(zhì)量可控。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1682969SQ20051005526
公開日2005年10月19日 申請(qǐng)日期2005年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月17日
發(fā)明者鄒節(jié)明 申請(qǐng)人:桂林三金藥業(yè)股份有限公司