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抗體的包被工藝以及該工藝制成的肌紅蛋白測(cè)定試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):11946437閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種抗體的包被工藝,其特征在于,包括:

步驟一、將微球和活化劑分別溶于pH6.0的緩沖液中;

步驟二、利用活化劑對(duì)微球表面的羧基進(jìn)行活化得到活化微球;

步驟三、將抗體加入到活化微球中進(jìn)行偶聯(lián);

步驟四、再將pH8.0的緩沖液加入到抗體偶聯(lián)的活化微球中繼續(xù)反應(yīng);

步驟五、反應(yīng)完成后加入封閉劑完成封閉即可。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗體的包被工藝,其特征在于,所述緩沖液采用磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液,所述微球采用聚苯乙烯膠乳微球,所述活化劑為EDAC。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗體的包被工藝,其特征在于,所述步驟二中微球活化時(shí)間為15-45min,所述步驟三中抗體與微球的偶聯(lián)時(shí)間為0.5-1.5h,所述步驟四中反應(yīng)時(shí)間為0.5-1.5h。

4.如權(quán)利要求1所述的一種抗體的包被工藝,其特征在于,所述步驟五中封閉劑為酪蛋白或/和甘氨酸。

5.如權(quán)利要求1所述的一種抗體的包被工藝的配置方法,其特征在于,所述步驟五的封閉時(shí)間為30min,封閉完成后再加入pH8.0的緩沖液,調(diào)節(jié)pH后加入保護(hù)劑。

6.如權(quán)利要求5所述的一種抗體的包被工藝的配置方法,其特征在于,所述保護(hù)劑為海藻糖或/和木糖醇。

7.一種肌紅蛋白測(cè)定試劑盒,其特征在于,包括R1試劑和R2試劑,

所述R1試劑的配比為:

磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液 50-150mmol/L,酪蛋白 1-10g/L,Triton X-100 5-10g/L,氯化鉀 15-30g/L,聚乙二醇 5-30g/L,疊氮鈉 1g/L;

所述R2試劑的配比為:

磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液 50-150mmol/L,酪蛋白 1-10g/L,疊氮鈉 1g/L,海藻糖 20-50g/L,木糖醇 20-50g/L,甘氨酸 1-10g/L,采用權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)工藝制成的結(jié)合有肌紅蛋白抗體的聚苯乙烯膠乳微球,所述結(jié)合有肌紅蛋白抗體的聚苯乙烯膠乳微球占R2試劑總體積的3-5%。

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