人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置制造方法
【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型適用于生化分析【技術(shù)領(lǐng)域】，提供了一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，包括支撐件和對(duì)混合有磁性微珠體的待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)處理的微流控芯片，微流控芯片設(shè)于支撐件上，微流控芯片上設(shè)有用于對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件，支撐件上設(shè)有用于驅(qū)動(dòng)待檢測(cè)樣品移動(dòng)的步進(jìn)電機(jī)、用于調(diào)節(jié)待檢測(cè)樣品溫度的溫度調(diào)節(jié)裝置、用于對(duì)置于微流控芯片上的待檢測(cè)樣品進(jìn)行散熱處理的散熱裝置、用于控制步進(jìn)電機(jī)、溫度調(diào)節(jié)裝置、檢測(cè)元件、散熱裝置運(yùn)行的控制裝置，步進(jìn)電機(jī)的輸出軸上設(shè)有與所述磁性微珠體磁性相吸的磁性件，待樣品的處理過(guò)程實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作，減輕檢測(cè)人員的工作負(fù)擔(dān)，而且提高檢測(cè)靈敏度。
【專(zhuān)利說(shuō)明】人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于生化分析【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]獲得性免疫缺陷綜合征(AcquiredImmunodeficiency syndrome, AIDS)簡(jiǎn)稱(chēng)艾滋病，是由人類(lèi)免疫缺陷病毒(Human immuunodeficiency,HIV)感染引起的一種嚴(yán)重傳染病。自美國(guó)1981年診斷出首例艾滋病患者以來(lái)，根據(jù)最新的WHO數(shù)據(jù)評(píng)估，截止2013年年底，全球估計(jì)共有3530萬(wàn)艾滋病病毒感染者。
[0003]艾滋病病毒的傳播途徑主要包括血液傳播、性接觸、毒品注射和母嬰傳播，在人體內(nèi)的潛伏期平均為7?10年，HIV感染潛伏期病人沒(méi)有明顯的臨床癥狀，但具有高度的傳染性，對(duì)HIV進(jìn)行檢測(cè)以發(fā)現(xiàn)傳染源和切斷傳播途徑是防治AIDS最有效的手段，HIV免疫學(xué)檢測(cè)時(shí)最有效和最廣泛使用的方法，HIV抗體篩查是我國(guó)法定的四個(gè)血源性篩查項(xiàng)目之一。
[0004]目前，對(duì)HIV抗體檢測(cè)最常用的方法是使用檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)時(shí)將被檢樣品從加樣孔加在試紙條上樣墊上，使樣品溶解標(biāo)記磁珠并在NC膜上層析，然后在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)用磁力檢測(cè)儀檢測(cè)試紙條上數(shù)據(jù)，根據(jù)所讀取的數(shù)據(jù)判定結(jié)果，然而，這種檢測(cè)試劑盒存在檢測(cè)自動(dòng)化程度低，試劑消耗量大，檢測(cè)靈敏度低等問(wèn)題，不能滿足人們對(duì)人類(lèi)免疫缺陷病毒早期診斷中快速、準(zhǔn)確、高效檢測(cè)的要求。
實(shí)用新型內(nèi)容
[0005]本實(shí)用新型的目的在于提供一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)提供的檢測(cè)裝置存在檢測(cè)自動(dòng)化程度低，試劑消耗量大，檢測(cè)靈敏度低的問(wèn)題。
[0006]本實(shí)用新型是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，包括支撐件和對(duì)混合有磁性微珠體的所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)處理的微流控芯片，所述微流控芯片設(shè)于所述支撐件上，所述微流控芯片上設(shè)有用于對(duì)所述待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件，所述支撐件上設(shè)有用于驅(qū)動(dòng)所述待檢測(cè)樣品移動(dòng)的步進(jìn)電機(jī)、用于調(diào)節(jié)所述待檢測(cè)樣品溫度的溫度調(diào)節(jié)裝置、用于對(duì)置于所述微流控芯片上的所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行散熱處理的散熱裝置、用于控制所述步進(jìn)電機(jī)、所述溫度調(diào)節(jié)裝置、所述檢測(cè)元件、所述散熱裝置運(yùn)行的控制裝置，所述步進(jìn)電機(jī)的輸出軸上設(shè)有與所述磁性微珠體磁性相吸的磁性件，所述微流控芯片上設(shè)有用于放置所述待檢測(cè)樣品和所述磁性微珠體的進(jìn)樣池、對(duì)所述待檢測(cè)樣品依次進(jìn)行吸附、洗滌、聚集處理的樣品處理區(qū)、對(duì)經(jīng)所述樣品處理區(qū)處理過(guò)的所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行信號(hào)放大處理的樣品信號(hào)放大池、與所述樣品信號(hào)放大池連通的樣品檢測(cè)池，所述樣品信號(hào)放大池與所述樣品檢測(cè)池之間設(shè)有對(duì)經(jīng)所述樣品信號(hào)放大池處理過(guò)的所述待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件，所述進(jìn)樣池、所述樣品處理區(qū)以及所述樣品信號(hào)放大池通過(guò)一進(jìn)樣通道依次連通。
[0007]具體地，所述控制裝置包括設(shè)于所述支撐件上的線路板和設(shè)于所述電路板上的控制元件，所述線路板上設(shè)有與所述微流控芯片外形相適配的安裝槽，所述微流控芯片可拆卸安裝于所述安裝槽內(nèi)。
[0008]進(jìn)一步地，所述散熱裝置包括設(shè)置于所述電路板一側(cè)并用于輔助所述溫度調(diào)節(jié)裝置降溫的散熱風(fēng)扇，所述散熱風(fēng)扇與所述控制元件電連接，所述散熱風(fēng)扇的出風(fēng)口朝向所述微流控芯片。
[0009]具體地，所述支撐件上還設(shè)有提供所述控制元件所需電源的交流電轉(zhuǎn)換器，所述交流電轉(zhuǎn)換器與所述控制元件電連接。
[0010]具體地，所述樣品處理區(qū)包括對(duì)所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行吸附處理的樣品吸附區(qū)、對(duì)所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行洗滌處理的樣品洗滌區(qū)以及對(duì)所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行聚集處理的樣品聚集區(qū)，所述樣品吸附區(qū)、所述樣品洗滌區(qū)以及所述樣品聚集區(qū)依次設(shè)置于進(jìn)樣通道上并連通。
[0011]具體地，所述微流控芯片由基片和蓋設(shè)于所述基片上的蓋片組成，所述進(jìn)樣池、所述樣品吸附區(qū)、所述樣品洗滌區(qū)、所述樣品聚集區(qū)、所述樣品信號(hào)放大池、所述樣品檢測(cè)池以及所述進(jìn)樣通道分別刻蝕于所述基片上。
[0012]進(jìn)一步地，所述基片上還刻蝕有用于放置緩沖液的緩沖溶液池，所述緩沖溶液池與所述樣品檢測(cè)池分設(shè)所述樣品信號(hào)放大池的兩側(cè)，并與所述樣品信號(hào)放大池連通。
[0013]進(jìn)一步地，所述蓋片上設(shè)有與所述進(jìn)樣池相對(duì)應(yīng)的第一通孔、與所述緩沖液池相對(duì)應(yīng)的第二通孔，與所述樣品信號(hào)放大處理池相對(duì)應(yīng)的第三通孔以及與所述樣品檢測(cè)池相對(duì)應(yīng)的第四通孔。
[0014]優(yōu)選地，所述檢測(cè)元件為電泳檢測(cè)儀，所述電泳電測(cè)儀具有第一電極與第二電極，所述第一電極設(shè)置于所述第三通孔內(nèi)，所述第二電極設(shè)置于所述第四通孔內(nèi)，所述樣品信號(hào)放大池與所述樣品檢測(cè)池之間形成電泳檢測(cè)通道。
[0015]本實(shí)用新型提供的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置有益效果在于:將待檢測(cè)樣品的處理過(guò)程集成于微流控芯片上，檢測(cè)人員將待檢測(cè)樣品放置于微流控芯片上，并啟動(dòng)該檢測(cè)裝置，該檢測(cè)裝置對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行細(xì)胞裂解、吸附、洗滌、聚集、信號(hào)放大、檢測(cè)等自動(dòng)化操作，減輕檢測(cè)人員的工作負(fù)擔(dān)，而且提高檢測(cè)靈敏度。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1為本實(shí)用新型實(shí)施例提供的人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置的立體圖；
[0017]圖2為本實(shí)用新型實(shí)施例提供的人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置的主視圖；
[0018]圖3為本實(shí)用新型實(shí)施例提供的用于人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置的基片的結(jié)構(gòu)示意圖
[0019]圖4為本實(shí)用新型實(shí)施例提供的用于人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置的蓋片的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020]為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型。
[0021]以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)的描述。[0022]如圖1至圖3所示，本實(shí)用新型實(shí)施里提供一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，包括支撐件I和對(duì)混合有磁性微珠體的待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)處理的微流控芯片2，磁性微珠體的表面吸附有待檢測(cè)樣品，微流控芯片2設(shè)置于支撐件I上，微流控芯片2上設(shè)有用于對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件(圖中未示出)，支撐件I上設(shè)有用于驅(qū)動(dòng)待檢測(cè)樣品移動(dòng)的步進(jìn)電機(jī)、用于調(diào)節(jié)待檢測(cè)樣品溫度的溫度調(diào)節(jié)裝置4、用于對(duì)置于微流控芯片上的待檢測(cè)樣品進(jìn)行散熱的散熱裝置、用于控制步進(jìn)電機(jī)3、溫度調(diào)節(jié)裝置
4、檢測(cè)元件、散熱裝置運(yùn)行的控制裝置5，步進(jìn)電機(jī)3與控制裝置5電連接，步進(jìn)電機(jī)3的輸出軸上設(shè)有圓盤(pán)(圖中未示出)，圓盤(pán)的外徑尺寸與進(jìn)樣通道25的外徑尺寸相適配，圓盤(pán)上設(shè)有與磁性微珠體相對(duì)應(yīng)的磁性件(圖中未示出)，磁性件設(shè)置于進(jìn)樣池21的正下方，并與磁性微珠體相吸，步進(jìn)電機(jī)3的輸出軸旋轉(zhuǎn)時(shí)，圓盤(pán)發(fā)生相應(yīng)的轉(zhuǎn)動(dòng)，磁性件吸引磁性微珠體發(fā)生移動(dòng)，將磁性微珠體移動(dòng)至樣品處理區(qū)22內(nèi)，對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行處理，步進(jìn)電機(jī)3的運(yùn)行由控制裝置5控制，無(wú)需檢測(cè)人員手動(dòng)操作，自動(dòng)化程度高，空間緊湊，且磁性件與磁性微珠體無(wú)直接接觸，可避免污染樣品，保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。將待檢測(cè)樣品的處理過(guò)程集成于微流控芯片2上，檢測(cè)人員將待檢測(cè)樣品放置于微流控芯片上，并啟動(dòng)該檢測(cè)裝置，磁性件具有磁性，控制裝置驅(qū)動(dòng)步進(jìn)電機(jī)3運(yùn)行，無(wú)需檢測(cè)人員手動(dòng)操作，自動(dòng)化程度高，且空間緊湊，輸出軸上的磁性件發(fā)生旋轉(zhuǎn)并帶動(dòng)磁性微珠體移動(dòng)至檢測(cè)元件處，對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行處理，檢測(cè)元件對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，獲得檢測(cè)結(jié)果，在待檢測(cè)樣品的檢測(cè)過(guò)程中，采用自動(dòng)化操作，操作簡(jiǎn)單，減輕檢測(cè)人員的工作負(fù)擔(dān)，提高待檢測(cè)樣品的檢測(cè)靈敏度，且使用的試劑量少，降低試劑消耗量。
[0023]支架體I上設(shè)有溫度調(diào)節(jié)裝置4，待檢測(cè)樣品在溫度調(diào)節(jié)裝置4的作用下發(fā)生聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右)，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5’-3’)的方向合成互補(bǔ)鏈。本實(shí)施例提供的溫度調(diào)節(jié)裝置4能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。
[0024]具體地，支撐件I為步進(jìn)電機(jī)3、溫度調(diào)節(jié)裝置4、控制裝置提供支撐，支撐件I可以為工作臺(tái)、支撐架等。
[0025]如圖1與圖3所示，微流控芯片2上設(shè)有用于放置待檢測(cè)樣品和磁性微珠體(圖中未示出)的進(jìn)樣池21、對(duì)待檢測(cè)樣品依次進(jìn)行吸附、洗滌、聚集處理的樣品處理區(qū)22以及對(duì)經(jīng)樣品處理區(qū)22處理過(guò)的待檢測(cè)樣品進(jìn)行信號(hào)放大處理的樣品信號(hào)放大池23和樣品檢測(cè)池24，樣品信號(hào)放大池23與樣品檢測(cè)池24連通，樣品信號(hào)放大池23與樣品檢測(cè)池24之間設(shè)有對(duì)經(jīng)樣品信號(hào)放大池23處理過(guò)的待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件(圖中未示出)，進(jìn)樣池21、樣品處理區(qū)22、樣品信號(hào)放大池23通過(guò)進(jìn)樣通道25依次連通，支撐件I上還設(shè)有用于驅(qū)動(dòng)磁性微珠體沿進(jìn)樣通道25由進(jìn)樣池21進(jìn)入樣品信號(hào)放大池23內(nèi)的步進(jìn)電機(jī)3，支撐件I上還設(shè)有對(duì)置于樣品信號(hào)放大池23內(nèi)的待檢測(cè)樣品進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)的溫度調(diào)節(jié)裝置4，支撐件I上還設(shè)有用于控制步進(jìn)電機(jī)3、溫度調(diào)節(jié)裝置4、檢測(cè)元件的控制裝置(圖中未示出)，檢測(cè)人員將待檢測(cè)樣品放置于進(jìn)樣池21內(nèi)，向進(jìn)樣池21內(nèi)加入樣品裂解液，使待檢測(cè)樣品的細(xì)胞膜破裂，分解形成小分子蛋白片段，與磁性微珠體包被的特異包膜蛋白抗體抗結(jié)合，因此，當(dāng)磁性微珠體移動(dòng)時(shí)，帶動(dòng)小分子蛋白片段進(jìn)行樣品處理，靜置一段時(shí)間后，控制裝置控制步進(jìn)電機(jī)3運(yùn)行，步進(jìn)電機(jī)3驅(qū)動(dòng)吸附有待檢測(cè)樣品的磁性微珠體旋轉(zhuǎn)至樣品處理區(qū)22內(nèi)，待檢測(cè)樣品與樣品處理區(qū)22內(nèi)的樣品緩沖液進(jìn)行樣品吸附、洗滌、聚集等反應(yīng)，上述反應(yīng)完成后，步進(jìn)電機(jī)3再次運(yùn)行，將磁性微珠體移動(dòng)至樣品信號(hào)放大池23內(nèi)，待檢測(cè)樣品在樣品信號(hào)放大處理池23內(nèi)發(fā)生聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，生成足夠多的用于檢測(cè)的核酸分子，檢測(cè)元件對(duì)核酸分子進(jìn)行檢測(cè)，獲得檢測(cè)結(jié)果，在待檢測(cè)樣品的檢測(cè)過(guò)程中，采用自動(dòng)化操作，操作簡(jiǎn)單，減輕檢測(cè)人員的工作負(fù)擔(dān)，提高待檢測(cè)樣品的檢測(cè)靈敏度，且使用的試劑量少，降低試劑消耗量。
[0026]在本實(shí)施例中，樣品裂解液的成分為50mM Tris (pH7.4) U50mM NaIU % NP-40,
0.1% SDS、0.1% EDTA。下面對(duì)細(xì)胞裂解液的主要成分作進(jìn)一步詳述:
[0027]NP-40:其是一種去垢劑。在生物實(shí)驗(yàn)中，常用來(lái)加在細(xì)胞裂解液中間?？梢云茐募?xì)胞膜，但是保留核膜。NP-40是很溫和的去垢劑，1%濃度的基本可以破壞掉胞膜，而對(duì)核膜破壞的作用弱，結(jié)合特定的buffer可以獲得胞衆(zhòng)蛋白。
[0028]SDS:十二燒基磺酸鈉(Sodium dodecyl sulfate, SDS),是洗潔精的主要成分。常用于DNA提取過(guò)程中使蛋白質(zhì)變性后與DNA分開(kāi)。SDS是一種已知的能夠使蛋白質(zhì)變性的去污劑。它用于確定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝膠電泳。它也可以用于核酸抽提操作中破壞細(xì)胞壁及裂解核酸-蛋白復(fù)合物。在較高溫度下，破壞蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，使DNA釋放出來(lái)。
[0029]EDTA:其是化學(xué)中一種良好的配合劑，它有六個(gè)配位原子，形成的配合物叫做螯合物，EDTA在配位滴定中經(jīng)常用到，一般是測(cè)定金屬離子的含量，在生物應(yīng)用中，用于排除大部分過(guò)度金屬元素離子(如鐵(III)，鎳(II)，錳(II))的干擾。在蛋白質(zhì)工程及試驗(yàn)中可在不影響蛋白質(zhì)功能的情況下去除干擾離子。
[0030]樣品處理液的成分為:0.05M Na2CO3-NaHCO3 (PH9.6)
[0031]Na2CO3......8.586g/L
[0032]NaHCO3......5.88g/L
[0033]H20.........1L
[0034]樣品緩沖液的成分為:0.0lM PBS, PH7.4。
[0035]如圖1與圖3所示，控制裝置包括設(shè)于支撐件I上的電路板51和設(shè)于電路板51上的控制元件52，電路板51上設(shè)有與微流控芯片2外形相適配的安裝槽511，微流控芯片2可拆卸安裝于安裝槽511內(nèi)，由于微流控芯片屬于一次性用品，避免微流控芯片的交叉使用，因此，每做完一例人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)，將微流控芯片2由安裝槽511處取出，及時(shí)更換上新的微流控芯片，操作簡(jiǎn)單，且通用性好。
[0036]如圖1與圖2所示，散熱裝置包括設(shè)置于電路板51的一側(cè)并用于輔助溫度調(diào)節(jié)裝置4降溫的散熱風(fēng)扇6,散熱風(fēng)扇6與控制元件52電連接,散熱風(fēng)扇6的出風(fēng)口朝向微流控芯片2，由于溫度調(diào)節(jié)裝置4需要循環(huán)地對(duì)微流控芯片2進(jìn)行升溫與降溫操作，為更快地輔助和快速降溫，開(kāi)啟散熱風(fēng)扇6，當(dāng)溫度調(diào)節(jié)裝置4升溫時(shí)，控制元件52自動(dòng)關(guān)閉散熱風(fēng)扇6，無(wú)需檢測(cè)人員操作，實(shí)施方便快捷。
[0037]如圖1與圖2所示，支撐件I上還設(shè)有提供控制元件52所需電源的交流電轉(zhuǎn)換器7，交流電轉(zhuǎn)換器7與控制元件52電連接，由于控制元件52采用直流供電，交流電轉(zhuǎn)換器7可以將市電220v轉(zhuǎn)換成控制元件52所需的直流電，確保控制元件52獲得持續(xù)電源，人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置正常工作。[0038]如圖2與圖3所示，樣品處理區(qū)22包括對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行吸附處理的樣品吸附區(qū)221、對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行洗滌處理的樣品洗滌區(qū)222以及對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行聚集處理的樣品聚集區(qū)223，進(jìn)樣池21、樣品處理區(qū)22、樣品信號(hào)放大池23依次設(shè)置于進(jìn)樣通道25上，并彼此相通，步進(jìn)電機(jī)3驅(qū)動(dòng)磁性微珠體進(jìn)入樣品信號(hào)放大池23內(nèi)，待檢測(cè)樣品在溫度調(diào)節(jié)裝置4的作用下發(fā)生聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右)，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5’-3’)的方向合成互補(bǔ)鏈。本發(fā)明實(shí)施例提供的溫度調(diào)節(jié)裝置4能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。
[0039]進(jìn)樣通道25呈圓環(huán)形設(shè)置，進(jìn)樣池21、步進(jìn)電機(jī)3上的磁性件驅(qū)動(dòng)磁性微珠體進(jìn)入樣品吸附區(qū)22，磁性微珠體上吸附的待檢測(cè)樣品與樣品緩沖液發(fā)生反應(yīng)，并靜置5?8分鐘，然后，控制元件52再次控制步進(jìn)電機(jī)3運(yùn)行，將磁性微珠體移動(dòng)至樣品洗滌區(qū)222，在樣品洗滌區(qū)222內(nèi)設(shè)有樣品洗滌液，樣品洗滌液對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行洗滌，步進(jìn)電機(jī)3驅(qū)動(dòng)磁性微珠體進(jìn)入樣品聚集區(qū)223內(nèi)，靜置2?3分鐘，待檢測(cè)樣品聚集，并等待下一步的操作，待檢測(cè)樣品的吸附、洗滌、聚集等操作全部由控制元件52控制實(shí)現(xiàn)，試劑損耗量小，且操作自動(dòng)化程度高。
[0040]在本實(shí)施例中，樣品洗滌液成分為:磷酸鹽緩沖液0.01M, PH7.2
[0041]NaCl.....................100g/L
[0042]KCl.....................2.5g/L
[0043]Na2HPO4.12H20.........36.3g/L
[0044]KH2PO4..................2.5g/L
[0045]H20........................1L
[0046]如圖3與圖4所示，微流控芯片2由基片20和蓋設(shè)于基片20上的蓋片27組成，通過(guò)CO2激光光刻技術(shù)將進(jìn)樣池21、樣品吸附區(qū)221、樣品洗滌區(qū)222、樣品聚集區(qū)223、樣品信號(hào)放大池23、樣品檢測(cè)池24以及進(jìn)樣通道25分別刻蝕于基片21上，為了使到樣品進(jìn)樣池21、樣品吸附區(qū)221、樣品洗滌區(qū)222、樣品聚集區(qū)223及樣品信號(hào)放大池23合理布局在基板20上以及方便HIV病毒樣品在各功能單元之間的轉(zhuǎn)移，樣品進(jìn)樣池21、樣品吸附區(qū)221、樣品洗滌區(qū)222、樣品聚集區(qū)223及樣品放大池23沿同一圓周方向排列布置，待檢測(cè)樣品流動(dòng)性更好。
[0047]如圖3所示，基片20上還刻蝕有用于放置緩沖液的緩沖溶液池26，緩沖溶液池26與樣品檢測(cè)池24分設(shè)樣品信號(hào)放大池23的兩側(cè)，并與樣品信號(hào)放大池23連通，溶液緩沖池26內(nèi)放置有緩沖溶液，緩沖溶液將待檢測(cè)樣品稀釋?zhuān)阌谙乱徊降臋z測(cè)。
[0048]如圖4所示，蓋片27上設(shè)有與進(jìn)樣池21相對(duì)應(yīng)的第一通孔271、與緩沖液池26相對(duì)應(yīng)的第二通孔272、與樣品信號(hào)放大處理池23相對(duì)應(yīng)的第三通孔273，以及與樣品檢測(cè)池24相對(duì)應(yīng)的第四通孔274，檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)人員通過(guò)第一通孔271將待檢測(cè)樣品加入進(jìn)樣池21內(nèi)，通過(guò)第二通孔272向緩沖液池26內(nèi)加入緩沖液，檢測(cè)元件為電泳檢測(cè)儀，電泳電測(cè)儀具有第一電極與第二電極，檢測(cè)人員將電泳檢測(cè)儀的第一電極放置于第三通孔273內(nèi)，第二電極放置于第四通孔274內(nèi)，樣品信號(hào)放大池23與樣品檢測(cè)池24之間形成電泳檢測(cè)通道，電泳檢測(cè)通道的上方設(shè)有紫外光源，在紫外線的照射下，可以對(duì)相關(guān)聯(lián)的核酸分子進(jìn)行辨識(shí)，檢測(cè)人員根據(jù)顯示結(jié)果進(jìn)行診斷，電泳檢測(cè)儀通過(guò)控制交流信號(hào)的頻率、幅值等參數(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)待檢測(cè)樣品電泳富集，通過(guò)施加一定的激勵(lì)信號(hào)，監(jiān)測(cè)第一電極與第二電極的變化來(lái)獲得相應(yīng)的電學(xué)響應(yīng)信號(hào)，實(shí)現(xiàn)微流控芯片對(duì)待檢測(cè)樣品的定量檢測(cè)，建立快速、準(zhǔn)確的HIV定量檢測(cè)分析。
[0049]下面對(duì)本實(shí)用新型提供的檢測(cè)裝置對(duì)HIV滅活病毒進(jìn)行檢測(cè)的的工作過(guò)程作進(jìn)一步的描述，其中，在本實(shí)施例中以HIV滅活病毒P24包膜蛋白為檢測(cè)對(duì)象:
[0050]S1、將待檢測(cè)樣品放置于進(jìn)樣池21內(nèi)，向進(jìn)樣池21內(nèi)加入裂解液，以使待檢測(cè)樣品進(jìn)行細(xì)胞裂解，然后向進(jìn)樣池21內(nèi)加入表面包被有特異包膜蛋白抗體的磁性微珠體和樣品處理液，并靜置10?15分鐘；
[0051]S2、控制裝置啟動(dòng)步進(jìn)電機(jī)運(yùn)行，步進(jìn)電機(jī)驅(qū)動(dòng)磁性微珠體移動(dòng)樣品處理區(qū)22，待檢測(cè)樣品在樣品處理區(qū)22內(nèi)發(fā)生吸附、洗滌、與聚集反應(yīng)，具體地，待檢測(cè)樣品移動(dòng)至樣品吸附區(qū)221內(nèi)，然后靜置5?8分鐘，以使待檢測(cè)樣品和樣品吸附區(qū)221的樣品緩沖液發(fā)生作用，利用步進(jìn)電機(jī)3驅(qū)動(dòng)樣品吸附區(qū)221的帶有待檢測(cè)樣品的磁性微珠體移動(dòng)至樣品洗滌區(qū)222，并靜置數(shù)分鐘，以使待檢測(cè)樣品與樣品洗滌區(qū)232的樣品洗滌液發(fā)生作用，利用步進(jìn)電機(jī)3驅(qū)動(dòng)樣品洗滌區(qū)222的吸附有待檢測(cè)樣品磁性微珠體移動(dòng)至樣品聚集區(qū)223，并靜置2-3分鐘，待檢測(cè)樣品在樣品聚集區(qū)223發(fā)生聚集；
[0052]S3、待檢測(cè)樣品聚集后，步進(jìn)電機(jī)3驅(qū)動(dòng)磁性微珠體進(jìn)入樣品信號(hào)放大池23內(nèi)，待檢測(cè)樣品在樣品信號(hào)放大池23內(nèi)發(fā)生聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，生成核酸分子，具體地，通過(guò)溫度調(diào)節(jié)裝置4將帶有待檢測(cè)樣品進(jìn)行溫度循環(huán)操作，而該操作包括如下步驟:a、升溫至94°C保持 2min ;b、94°C保持 30sec ;c、降溫至 55°C保持 30sec ;d、升溫至 72°C保持 30sec ;e、72°C保持3min ;f、降溫至4°C保持5min。其中步驟b至步驟e循環(huán)20-25次，生成足夠多的核酸分子。
[0053]S4、檢測(cè)元件對(duì)核酸分子進(jìn)行檢測(cè)。
[0054]本實(shí)用新型提供用于檢測(cè)人類(lèi)缺陷免疫病毒的檢測(cè)方法，利用步進(jìn)電機(jī)3將帶有待檢測(cè)樣品的磁性微珠體依次進(jìn)入樣品吸附區(qū)221、樣品洗滌區(qū)222、樣品聚集區(qū)223以及樣品信號(hào)方法池23，電泳檢測(cè)儀對(duì)已完成信號(hào)放大處理的待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，采用自動(dòng)化操作，減輕檢測(cè)人員的工作負(fù)擔(dān)，且使用試劑量少，降低試劑消耗，同時(shí)，其檢測(cè)限可以達(dá)到Ifg的數(shù)量級(jí)，相較于現(xiàn)有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法Ing的檢測(cè)限，提高檢測(cè)靈敏度。
[0055]以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，其特征在于:包括支撐件和對(duì)混合有磁性微珠體的所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)處理的微流控芯片，所述微流控芯片設(shè)于所述支撐件上，所述微流控芯片上設(shè)有用于對(duì)所述待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件，所述支撐件上設(shè)有用于驅(qū)動(dòng)所述待檢測(cè)樣品移動(dòng)的步進(jìn)電機(jī)、用于調(diào)節(jié)所述待檢測(cè)樣品溫度的溫度調(diào)節(jié)裝置、用于對(duì)置于所述微流控芯片上的所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行散熱處理的散熱裝置、用于控制所述步進(jìn)電機(jī)、所述溫度調(diào)節(jié)裝置、所述檢測(cè)元件、所述散熱裝置運(yùn)行的控制裝置，所述步進(jìn)電機(jī)的輸出軸上設(shè)有與所述磁性微珠體磁性相吸的磁性件，所述微流控芯片上設(shè)有用于放置所述待檢測(cè)樣品和所述磁性微珠體的進(jìn)樣池、對(duì)所述待檢測(cè)樣品依次進(jìn)行吸附、洗滌、聚集處理的樣品處理區(qū)、對(duì)經(jīng)所述樣品處理區(qū)處理過(guò)的所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行信號(hào)放大處理的樣品信號(hào)放大池、與所述樣品信號(hào)放大池連通的樣品檢測(cè)池，所述樣品信號(hào)放大池與所述樣品檢測(cè)池之間設(shè)有對(duì)經(jīng)所述樣品信號(hào)放大池處理過(guò)的所述待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)元件，所述進(jìn)樣池、所述樣品處理區(qū)以及所述樣品信號(hào)放大池通過(guò)一進(jìn)樣通道依次連通。
2.如權(quán)利要求1所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述控制裝置包括設(shè)于所述支撐件上的線路板和設(shè)于所述電路板上的控制元件，所述線路板上設(shè)有與所述微流控芯片外形相適配的安裝槽，所述微流控芯片可拆卸安裝于所述安裝槽內(nèi)。
3.如權(quán)利要求2所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述散熱裝置包括設(shè)置于所述電路板一側(cè)并用于輔助所述溫度調(diào)節(jié)裝置降溫的散熱風(fēng)扇，所述散熱風(fēng)扇與所述控制元件電連接，所述散熱風(fēng)扇的出風(fēng)口朝向所述微流控芯片。
4.如權(quán)利要求2所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述支撐件上還設(shè)有提供所述控制元件所需電源的交流電轉(zhuǎn)換器，所述交流電轉(zhuǎn)換器與所述控制元件電連接。
5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述樣品處理區(qū)包括對(duì)所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行吸附處理的樣品吸附區(qū)、對(duì)所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行洗滌處理的樣品洗滌區(qū)以及對(duì)所述待檢測(cè)樣品進(jìn)行聚集處理的樣品聚集區(qū)，所述樣品吸附區(qū)、所述樣品洗滌區(qū)以及所述樣品聚集區(qū)依次設(shè)置于進(jìn)樣通道上并連通。
6.如權(quán)利要求5所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述微流控芯片由基片和蓋設(shè)于所述基片上的蓋片組成，所述進(jìn)樣池、所述樣品吸附區(qū)、所述樣品洗滌區(qū)、所述樣品聚集區(qū)、所述樣品信號(hào)放大池、所述樣品檢測(cè)池以及所述進(jìn)樣通道分別刻蝕于所述基片上。
7.如權(quán)利要求6所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述基片上還刻蝕有用于放置緩沖液的緩沖溶液池，所述緩沖溶液池與所述樣品檢測(cè)池分設(shè)所述樣品信號(hào)放大池的兩側(cè)，并與所述樣品信號(hào)放大池連通。
8.如權(quán)利要求6所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述蓋片上設(shè)有與所述進(jìn)樣池相對(duì)應(yīng)的第一通孔、與所述緩沖液池相對(duì)應(yīng)的第二通孔，與所述樣品信號(hào)放大處理池相對(duì)應(yīng)的第三通孔以及與所述樣品檢測(cè)池相對(duì)應(yīng)的第四通孔。
9.如權(quán)利要求8所述的一種人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測(cè)裝置，其特征在于:所述檢測(cè)元件為電泳檢測(cè)儀，所述電泳電測(cè)儀具有第一電極與第二電極，所述第一電極設(shè)置于所述第三通孔內(nèi)，所述第二電極設(shè)置于所述第四通孔內(nèi)，所述樣品信號(hào)放大池與所述樣品檢測(cè)池之間形成電 泳檢測(cè)通道。
【文檔編號(hào)】G01N35/00GK203825019SQ201420093130
【公開(kāi)日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年2月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月28日
【發(fā)明者】郭文鵬, 蔡志明 申請(qǐng)人:深圳市第二人民醫(yī)院