專利名稱：貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及手性藥物對(duì)映異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法，具體涉及貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法，屬于分析化學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
貝西沙星(besifloxacin)是一種新的用于治療結(jié)膜炎的第四代喹諾酮類抗菌齊Li，其化學(xué)名為(+) -7-[ (3R) -3-aminohexahydro-lH-azepin-l-yl] -8-chloro-l-cyclopropyl-6-fluoro-4-oxo-l,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid,其結(jié)構(gòu)式如下所不:
權(quán)利要求
1.一種分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，其特征在于:在有機(jī)溶劑中，在一定的溫度下，使用2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖異硫氰酸酯(GITC)和貝西沙星進(jìn)行衍生化反應(yīng)，制備得到衍生化產(chǎn)品，衍生化反應(yīng)可保證貝西沙星及其異構(gòu)體均得到完全的衍生化，衍生化后的貝西沙星及其異構(gòu)體可使用常規(guī)的反相高效液相色譜法得到分離和檢測(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述衍生化反應(yīng)的有機(jī)溶劑可選擇二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1，2-二氯乙烷、1，1，2，2-四氯乙烷、四氫呋喃，優(yōu)選氯仿。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述衍生化反應(yīng)溫度可選擇從-15°C到所使用溶劑的常壓沸點(diǎn)溫度，優(yōu)選室溫。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述衍生化反應(yīng)使用的貝西沙星可以是貝西沙星游離堿，也可以是由貝西沙星的無(wú)機(jī)酸鹽或有機(jī)酸鹽，通過(guò)無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿游離后得到的貝西沙星。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述衍生化反應(yīng)中，貝西沙星與衍生化試劑GITC用量的摩爾比為1:1 1: 10，優(yōu)選1: 2 1: 5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述衍生化反應(yīng)可按照以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)室溫下，在反 應(yīng)器中加入一定量稀氨水和一定量的貝西沙星無(wú)機(jī)酸鹽或有機(jī)酸鹽的水溶液(氨與貝西沙星鹽的摩爾比為5:1 7:1)，攪拌或放置到振蕩器上振蕩數(shù)分鐘； (2)混勻后，加入一定量的氯仿(控制貝西沙星在氯仿中的濃度約0.1 0.2mg/mL)，再放置到振蕩器上振蕩數(shù)分鐘，靜置； (3)吸取氯仿層，放入衍生化反應(yīng)器中，加入一定量的GITC溶液(濃度為2mg/mL)，再攪拌或放置振蕩器上振蕩，反應(yīng)完全后，室溫下?lián)]發(fā)除去溶劑，即得到貝西沙星的衍生化產(chǎn)品O
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述衍生化反應(yīng)也可按照以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)室溫下，在衍生化反應(yīng)器中加入氯仿和貝西沙星游離堿，攪拌或放置到振蕩器上振蕩使之完全溶解后得到貝西沙星溶液，濃度約0.1 0.2mg/mL, (2)控制反應(yīng)體系在一定的溫度或室溫下，加入一定量的GITC溶液(濃度為2mg/mL)，攪拌或放置振蕩器上振蕩，反應(yīng)完全后，室溫下?lián)]發(fā)除去溶劑，即得到貝西沙星的衍生化產(chǎn)品O
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述分離檢測(cè)方法為高效液相色譜法或高效液相色譜與質(zhì)譜法聯(lián)合使用，高效液相色譜的色譜條件為以反相色譜柱為分離柱，以有機(jī)改性劑-緩沖液(pH為2 5)組成反相流動(dòng)相系統(tǒng)，流速為1.0mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為293nm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述反相色譜柱可選擇十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱、辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱或者苯基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，優(yōu)選十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱。
10.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)中有機(jī)改性劑可選擇乙腈、甲醇、乙醇，優(yōu)選甲醇。
11.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)中緩沖鹽可選擇磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、醋酸鈉、醋酸鉀、檸檬酸鈉、檸檬酸鉀，優(yōu)選磷酸二氫鈉或磷酸二氫鉀。
12.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)中緩沖鹽的濃度為10 50mM，優(yōu)選20 30mM。
13.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)中緩沖鹽溶液的PH值為2 5，優(yōu)選2.5 3.5，最優(yōu)選3.0。
14.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)中有機(jī)改性劑所占混合流動(dòng)相溶液的體積百分比為55 % 85 %，優(yōu)選65 % 75 %。
15.根據(jù)權(quán)利要求1和8所述的分離檢測(cè)貝西沙星對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述分離檢測(cè)方法，可按照以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)取貝西沙星衍生化產(chǎn)品適量，用流動(dòng)相溶解，配制成每ImL含貝西沙星0.1 ·0.2mg的樣品溶液； (2)設(shè)置流動(dòng)相流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為293nm，色譜柱柱溫為30°C ； (3)?、诺臉悠啡芤?00μ L注入色譜儀，記錄色譜圖。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種實(shí)用方便、穩(wěn)定可靠的手性衍生化高效液相色譜法來(lái)分離和檢測(cè)貝西沙星及其對(duì)映異構(gòu)體，屬于分析化學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明使用2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖異硫氰酸酯(GITC)和貝西沙星在一定條件下進(jìn)行衍生化反應(yīng)，制備得到衍生化產(chǎn)品，衍生化反應(yīng)可保證貝西沙星及其異構(gòu)體均得到完全的衍生化，衍生化后的貝西沙星及其異構(gòu)體可使用常規(guī)的反相高效液相色譜法得到分離和檢測(cè)。本發(fā)明可用于貝西沙星原料藥及其藥物制劑產(chǎn)品中對(duì)映異構(gòu)體的分離檢測(cè)和質(zhì)量控制。
文檔編號(hào)G01N30/89GK103076423SQ20111032675
公開(kāi)日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2011年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月25日
發(fā)明者陳再新, 朱峰, 夏正君, 王勇軍, 林送, 王明林, 蔣龍, 張明光 申請(qǐng)人:常州亞邦制藥有限公司, 江蘇亞邦愛(ài)普森藥業(yè)有限公司, 江蘇亞邦強(qiáng)生藥業(yè)有限公司