專利名稱：一種用于微生物現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的pdms多通道免疫分析芯片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種多通道PDMS芯片、其制作方法，以及用于微生物快速檢測(cè)的分析方法。
背景技術(shù)：
致病菌的檢測(cè)一直以來(lái)是水質(zhì)監(jiān)測(cè)，食品衛(wèi)生與食品安全檢測(cè)的重點(diǎn)內(nèi)容，隨著人類社會(huì)的不斷向前發(fā)展和人們生活質(zhì)量的不斷提高，對(duì)致病菌檢測(cè)方法的研究也不斷提出新要求新標(biāo)準(zhǔn)。目前，微生物檢測(cè)技術(shù)根據(jù)其原理的不同，主要分為三大類(1)基于平板培養(yǎng)的檢測(cè)方法。目前我國(guó)對(duì)于病原菌的檢測(cè)、鑒定大多仍停留在分離培養(yǎng)、形態(tài)觀察、 生化鑒定和血清學(xué)分型水平。盡管這些傳統(tǒng)的致病菌檢驗(yàn)方法靈敏度高，費(fèi)用低，能夠得到水樣或食品樣品中細(xì)菌數(shù)量和特性等方面的定性及定量結(jié)果，但是傳統(tǒng)檢測(cè)方法操作復(fù)雜、周期較長(zhǎng)，獲得結(jié)果通常需要幾天的時(shí)間；并且要求所要檢測(cè)的細(xì)菌增殖為可見菌落， 無(wú)法對(duì)難以培養(yǎng)的病原菌進(jìn)行檢測(cè)。此外傳統(tǒng)方法在培養(yǎng)基制備、細(xì)菌培養(yǎng)、菌落計(jì)數(shù)和生化指標(biāo)的檢測(cè)等各方面都增加了實(shí)驗(yàn)室的工作量。因此，傳統(tǒng)方法無(wú)論是在環(huán)境檢測(cè)或食品工業(yè)生產(chǎn)流程的監(jiān)測(cè)，還是在終產(chǎn)品的質(zhì)量控制是，都越來(lái)越顯現(xiàn)出不足之處。(2)基于微生物專用酶反應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)。細(xì)菌在其生長(zhǎng)繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶， 按酶的特性，選用相應(yīng)的底物和指示劑，將他們配制在相關(guān)的培養(yǎng)基中。根據(jù)細(xì)菌反應(yīng)后出現(xiàn)的顏色變化，確定待分離的可疑菌株.反應(yīng)的定性結(jié)果有助于細(xì)菌的快速診斷。例如 .沙門氏菌中存在活性C8酯酶。在培養(yǎng)基中加入顯色底物，通過檢測(cè)C8酯酶來(lái)檢測(cè)沙門氏菌。在這種顯色鑒別培養(yǎng)基中，沙門氏菌菌落呈現(xiàn)為粉紅色到紫色，不僅可分離所有血清型的沙門氏菌，還可以通過該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)菌落的顏色不同，鑒別出沙雷氏菌、克雷勃氏菌和大腸桿菌、霉菌等不同酶特性的細(xì)菌。顯色培養(yǎng)基雖然具有較高的特異性和靈敏度，但在檢測(cè)工作中也有些不足，如檢測(cè)混合感染的微生物時(shí)，會(huì)出現(xiàn)一定比例的假陽(yáng)性或假陰性；某些顯色培養(yǎng)基上可能出現(xiàn)不同菌種呈現(xiàn)相似的顏色，或同一微生物呈現(xiàn)不同顏色等， 這些都有待進(jìn)一步的改進(jìn)。(3)以核酸為基礎(chǔ)的檢查技術(shù)。其中包括依賴PCR的DNA指紋圖譜技術(shù)、多重PCR檢測(cè)技術(shù)(m-PCR)、熒光定量PCR、基因芯片技術(shù)、定量PCR檢測(cè)技術(shù)等。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是近十多年來(lái)應(yīng)用最廣的分子生物學(xué)方法，在食源性致病菌的檢測(cè)中均是以其遺傳物質(zhì)高度保守的核酸序列設(shè)計(jì)特異引物進(jìn)行擴(kuò)增，進(jìn)而用凝膠電泳和紫外核酸檢測(cè)儀觀察擴(kuò)增結(jié)果。其他新型的PCR技術(shù)都是在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。目前為止，對(duì)多種微生物特異基因的發(fā)現(xiàn)及相應(yīng)探針的合成已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展，F(xiàn)ilial等人分離到適用于沙門氏菌檢測(cè)的探針，該探針能識(shí)別350株不同的沙門氏菌，最小檢出量為1 cfu/25 g樣品。AOAC最近認(rèn)可GENE-TARK沙門氏菌探針分析法，利用該法對(duì)239 株沙門氏菌檢出率為100%，假陽(yáng)性率為0.8%。FDA于1987年最先研制出針對(duì)李斯特氏菌β-溶血素致病基因的探針，隨后GENE-TARK研制出商品化檢測(cè)李斯特氏菌的DNA探針，它能特異性識(shí)別細(xì)菌的16S rRNA,假陰性率為0. 89Γ4. 7%。Bessesen等利用探針檢
3測(cè)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，DNA檢測(cè)量低于25 ng (少于1000個(gè)菌體)，方法特異性強(qiáng)。但以核酸為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法對(duì)設(shè)備的要求普遍較高(如PCR儀、指紋圖譜技術(shù)等)，同時(shí)，操作人員的技術(shù)水平有較高要求，不適用于現(xiàn)場(chǎng)的快速檢測(cè)。(4)以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)的檢測(cè)技術(shù)，其中包括酶聯(lián)免疫分析(ELISA)技術(shù)，免疫磁性微球分離技術(shù)，及納米金標(biāo)記免疫分析技術(shù)。該技術(shù)通過抗原和抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，再輔以免疫放大技術(shù)來(lái)鑒別細(xì)菌。Kryinskiand Heimsch等在1977年首次將ELISA用于食品沙門氏菌(Salmonella spp .)的檢測(cè)，并在應(yīng)用中不斷得以發(fā)展，80年代I^adhye和Park分別用單克隆或多克隆抗體的ELISA檢測(cè)大腸桿菌0157 和H7 (Escherichia coli 0157 :H7)。文其乙等應(yīng)用沙門氏菌屬特異性單克隆抗體CB8DE建立了檢測(cè)沙門氏菌的直接ELISA方法，張艷紅等應(yīng)用抗腸炎沙門氏菌09抗原的酶標(biāo)單抗和腸炎沙門氏菌脂多糖(LPS)建立了快速檢測(cè)腸炎沙門氏菌的競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法。免疫學(xué)方法具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，反應(yīng)時(shí)間短等諸多優(yōu)點(diǎn)，利于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的開展，但傳統(tǒng)的免疫學(xué)技術(shù)由于其標(biāo)記物(熒光探針/化學(xué)發(fā)光標(biāo)記/酶標(biāo)) 等方法需要特定的高端設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)，使檢測(cè)設(shè)備復(fù)雜化。此外，基于多孔板的ELISA技術(shù)允許的試樣量受限，對(duì)于單位體積細(xì)菌數(shù)量較少的試樣并不合適，而且由于細(xì)菌的體積較大，與多孔板底部的抗體之間結(jié)合的動(dòng)力學(xué)過程較慢，因而延長(zhǎng)了 ELISA分析的時(shí)間，降低了靈敏度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種飲用水或食品中特定微生物含量分析的多通道流通式免疫分析芯片。該芯片中試樣的引入量可以隨意控制，利用微通道內(nèi)的擴(kuò)散距離短的特點(diǎn)，使微生物與抗體的免疫反應(yīng)速度明顯加快；同時(shí)在一塊芯片上實(shí)現(xiàn)多個(gè)試樣， 多種微生物的平行分析；該芯片還能用便攜式的光學(xué)檢測(cè)儀器現(xiàn)場(chǎng)獲取分析信號(hào)，實(shí)現(xiàn)微生物的快速檢測(cè)。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
本發(fā)明是一種用于微生物現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的PDMS多通道免疫分析芯片，以玻璃作為基底，將包含多個(gè)微流通道的PDMS芯片與玻璃封合，將并行的多個(gè)通道匯聚于一個(gè)出入口，并行通道的數(shù)量取決于一個(gè)芯片所需分析的試樣數(shù)量以及微生物的種類數(shù)。本發(fā)明通過共價(jià)偶聯(lián)的方法將微生物特異性抗體偶聯(lián)在氨基化處理的PDMS通道中，形成流通式的免疫分析芯片，在各通道的匯聚口處施加負(fù)壓，可在各通道中引入不同種類或含不同數(shù)量微生物的試樣溶液，使抗體特異性地捕獲目標(biāo)微生物，洗去未結(jié)合的微生物后，通過匯聚入口注入納米金屬顆粒散射標(biāo)記的抗體探針，對(duì)微生物進(jìn)行標(biāo)記，洗去未反應(yīng)的探針后，對(duì)納米金屬顆粒進(jìn)行銀染產(chǎn)生可視化的信號(hào)。本發(fā)明采用權(quán)利要求(2)所述的方法獲得可視化信號(hào)后，其檢測(cè)方式在于用鹵鎢燈、激光或LED作為檢測(cè)光源，將檢測(cè)光源聚焦后照射在通道中沉積有金屬顆粒的區(qū)域， CMOS, CXD攝像設(shè)備拍攝各通道的成像信號(hào)，并用圖像處理軟件獲取各通道的散射光強(qiáng)度， 也可用光纖光譜儀，或光電轉(zhuǎn)換裝置測(cè)量散射光的強(qiáng)度，得到散射光強(qiáng)度與試樣中細(xì)菌數(shù)量的的工作曲線，檢測(cè)實(shí)際樣品的散射光強(qiáng)度后，可根據(jù)工作曲線獲得試樣中微生物數(shù)量的信號(hào)。本發(fā)明多條通道之間通過統(tǒng)一的進(jìn)樣或出樣口相連接，改變了以往的微流控芯片每條分析通道需要單獨(dú)進(jìn)樣的復(fù)雜裝置，通過正壓和負(fù)壓的轉(zhuǎn)換，既可實(shí)現(xiàn)對(duì)多條通道內(nèi)同種溶液的一次性引入，也可實(shí)現(xiàn)對(duì)多條通道不同溶液的一次性引入，減少了泵的使用，同時(shí)大大節(jié)約了試樣引入的時(shí)間，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。本發(fā)明的有益效果如下
1、可實(shí)現(xiàn)不同種類或濃度樣品的多組分分析。2、利用負(fù)壓進(jìn)樣方法引入待測(cè)樣品，可實(shí)現(xiàn)不同通道內(nèi)不同溶液的同時(shí)引入，節(jié)約進(jìn)樣時(shí)間，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。3、各組分同時(shí)進(jìn)樣， 簡(jiǎn)化設(shè)備。4、在微流控免疫芯片中引入散射標(biāo)記的方法，提高了微生物檢測(cè)的靈敏度，最低可檢測(cè)到2cfu/mL的微生物。5、裝置體積小，利于芯片的微型化。6、通道設(shè)計(jì)的靈活性強(qiáng)， 可實(shí)現(xiàn)高通量檢測(cè)。


附圖1為芯片側(cè)向結(jié)構(gòu)示意1是玻璃基片；2是PDMS蓋片；3是進(jìn)樣口 ；4a-4d是微通道；5是進(jìn)樣管；6a_6d是儲(chǔ)液池。附圖2為芯片通道設(shè)計(jì)平面示意圖； 3是進(jìn)樣口 ；4a_4d是微通道；
附圖3為芯片通道散射光檢測(cè)設(shè)備的示意圖； 7是光源；8是芯片；9是檢測(cè)器。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖對(duì)本法的技術(shù)方案作進(jìn)一步說(shuō)明
(I)PDMS芯片的設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)一種多通道的PDMS芯片，其通道數(shù)量由芯片每次所需分析的試樣數(shù)量及微生物種類決定。PDMS芯片的制作采用常規(guī)方法，不屬于本發(fā)明的范疇。將 PDMS芯片與尺寸相同的玻璃片經(jīng)過氧等離子體處理后互相封和成為一種多通道的芯片。芯片的結(jié)構(gòu)如圖1，圖2所示。它包括玻璃基片1，封接在玻璃基片上的PDMS蓋片2，PDMS蓋片2中包含進(jìn)樣口 3、多條微通道^-4d，進(jìn)樣管5，儲(chǔ)液池6a-6d。多條微通道4a_4d之間通過統(tǒng)一的進(jìn)樣口 3或出樣口相連接。當(dāng)需要同種溶液進(jìn)樣時(shí)，由注射泵注射模式通過進(jìn)樣口 3注入樣品溶液，當(dāng)需要不同種溶液分別進(jìn)樣時(shí)，由注射泵抽取模式通過進(jìn)樣口 3抽取以提供負(fù)壓，使儲(chǔ)液池6a-6d中的溶液分別進(jìn)入各條微通道如-4(1中。這種芯片的設(shè)計(jì)，改變了以往的微流控芯片每條分析通道需要單獨(dú)進(jìn)樣的復(fù)雜裝置，通過正壓和負(fù)壓的轉(zhuǎn)換， 既可實(shí)現(xiàn)對(duì)多條通道內(nèi)同種溶液的一次性引入，也可實(shí)現(xiàn)對(duì)多條通道不同溶液的一次性引入，減少了泵的使用，同時(shí)大大節(jié)約了試樣引入的時(shí)間，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。(2)通道中微生物抗體的偶聯(lián)玻璃表經(jīng)過堿處理后，用蒸餾水洗凈，并用氨基化硅烷試劑處理通道內(nèi)的玻璃表面，使得玻璃表面帶上氨基化基團(tuán)，用雙官能團(tuán)偶聯(lián)試劑(如戊二醛等)活化玻璃表面，在通道匯聚進(jìn)樣口 3處施負(fù)壓將微生物特異性抗體的溶液吸入各個(gè)通道，使抗體偶聯(lián)于玻璃通道表面。上述方式可以實(shí)現(xiàn)各通道內(nèi)偶聯(lián)不同的微生物抗體， 進(jìn)行多種致病菌的同時(shí)檢測(cè)。也可在各通道中偶聯(lián)相同的微生物抗體，進(jìn)行多試樣的平行檢測(cè)。(3)利用多通道免疫分析芯片檢測(cè)微生物在進(jìn)樣口 3處施負(fù)壓在各通道中引入不同種類或不同濃度含微生物的試樣溶液，使抗體特異性捕獲微生物，洗去未反應(yīng)的微生物后，在進(jìn)樣口 3處施加正壓注入納米金屬顆粒標(biāo)記的抗體探針，使之與被捕獲的微生物形成夾心復(fù)合物，洗去未反應(yīng)的探針后，同樣在進(jìn)樣口 3處注入銀染試劑，在納米金屬顆粒催化下，銀離子還原沉積形成免疫結(jié)合的可視化信號(hào)。(4)各通道內(nèi)免疫結(jié)合信號(hào)的觀察通道內(nèi)沉積的銀顆粒對(duì)入射光具有極強(qiáng)的散射作用，通過肉眼能觀察到相應(yīng)免疫結(jié)合信號(hào)。但肉眼觀察只能對(duì)微生物數(shù)量進(jìn)行半定量分析。如果要進(jìn)行定量分析需要采用本發(fā)明描述的光學(xué)設(shè)備(如圖3所示)對(duì)多通道芯片的光散射信號(hào)進(jìn)行分析。本發(fā)明可采用的光源7包括鹵鎢燈，激光，或LED，將檢測(cè)光源聚焦后照射在通道8沉積有金屬顆粒的區(qū)域，散射光檢測(cè)器9包括CM0S，CXD攝像設(shè)備等，拍攝各通道的光散射信號(hào)可產(chǎn)生多通道成像信號(hào)，并用圖像處理軟件獲取各通道的散射光強(qiáng)度。散射光檢測(cè)器9也可用光纖光譜儀，或光電轉(zhuǎn)換元件測(cè)量散射光的強(qiáng)度。得到散射光強(qiáng)度與試樣中細(xì)菌數(shù)量的工作曲線后，可檢測(cè)實(shí)際樣品的散射光強(qiáng)度，根據(jù)工作曲線即可測(cè)得試樣中微生物數(shù)量。下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明如下
實(shí)施例1，運(yùn)用該芯片對(duì)不同濃度大腸桿菌樣品進(jìn)行分析并得到散射光數(shù)據(jù)與細(xì)菌濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。通道內(nèi)芯片表面修飾特異性大腸桿菌抗體。將37°c培養(yǎng)48小時(shí)的大腸桿菌培養(yǎng)液離心后取沉淀菌體，加去離子水10倍比稀釋為1、10-1、10-2、…、10-8濃度，在儲(chǔ)液池6a-6d中分別加入空白溶液(去離子水)、10-2、10-5、10-8三個(gè)濃度的稀釋液。檢測(cè)時(shí)，將微通道4a-4d的進(jìn)樣管依次對(duì)應(yīng)插入儲(chǔ)液池6a-6d中，在進(jìn)樣口 3施負(fù)壓以抽取儲(chǔ)液池中的溶液，反應(yīng)結(jié)束后在進(jìn)樣口 3施正壓依次注入金標(biāo)抗體和銀染試劑。芯片的清洗同樣在進(jìn)樣口 3施正壓注入PBS緩沖溶液沖洗通道。銀染后用去離子水徹底清洗芯片2 3分鐘，吹干后在金相顯微鏡暗場(chǎng)模式下通過20X物鏡拍攝芯片通道內(nèi)的圖像，通過肉眼即可判斷圖像的亮度隨細(xì)菌濃度增大而增大，可做定量分析。實(shí)施例2 通道內(nèi)芯片表面修飾特異性大腸桿菌抗體。將37°C培養(yǎng)48小時(shí)的大腸桿菌培養(yǎng)液離心后取沉淀菌體，加去離子水10倍比稀釋為1、10-1、10-2、…、10-8濃度，在儲(chǔ)液池6a-6d中分別加入空白溶液(去離子水)、10-2、10-5、10-8三個(gè)濃度的稀釋液。檢測(cè)時(shí)，將微通道4a-4d的進(jìn)樣管依次對(duì)應(yīng)插入儲(chǔ)液池6a-6d中，在進(jìn)樣口 3施負(fù)壓以抽取儲(chǔ)液池中的溶液，反應(yīng)結(jié)束后在進(jìn)樣口 3施正壓依次注入金標(biāo)抗體和銀染試劑。芯片的清洗同樣在進(jìn)樣口 3施正壓注入PBS緩沖溶液沖洗通道。銀染后用去離子水徹底清洗芯片2 3分鐘，吹干后在金相顯微鏡暗場(chǎng)模式下通過20X物鏡記錄通道內(nèi)散射光譜。散射光譜峰值強(qiáng)度可與細(xì)菌濃度建立線性關(guān)系，并可利用該線性關(guān)系進(jìn)行定量。實(shí)施例3 運(yùn)用該芯片對(duì)不同種類的微生物進(jìn)行檢測(cè)。通道內(nèi)芯片表面修飾特異性大腸桿菌抗體。分別將37°C培養(yǎng)48小時(shí)的大腸桿菌和22°C培養(yǎng)48小時(shí)后的P17細(xì)菌和螺旋菌培養(yǎng)液離心后取沉淀菌體，加去離子水稀釋至10-4濃度。在儲(chǔ)液池6a-6d中分別加入空白溶液(去離子水)、P17菌稀釋液、螺旋菌稀釋液、大腸桿菌稀釋液。檢測(cè)時(shí)，將微通道的進(jìn)樣管依次對(duì)應(yīng)插入儲(chǔ)液池6a-6d中，在進(jìn)樣口 3施負(fù)壓以抽取儲(chǔ)液池中的溶液，反應(yīng)結(jié)束后在進(jìn)樣口 3施正壓依次注入金標(biāo)抗體和銀染試劑。芯片的清洗同樣在進(jìn)樣口 3施正壓注入PBS緩沖溶液沖洗通道。銀染后用去離子水徹底清洗芯片2 3分鐘，吹干后在金相顯微鏡暗場(chǎng)模式下用放大20倍鏡頭觀察芯片通道圖片并用CCD記錄散射光譜數(shù)據(jù)。
權(quán)利要求
1.一種用于微生物現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的PDMS多通道免疫分析芯片，其特征在于以玻璃作為基底，將包含多個(gè)微流通道的PDMS芯片與玻璃封合，將并行的多個(gè)通道匯聚于一個(gè)出入口，并行通道的數(shù)量取決于一個(gè)芯片所需分析的試樣數(shù)量以及微生物的種類數(shù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多通道免疫分析芯片，其特征在于，通過共價(jià)偶聯(lián)的方法將微生物特異性抗體偶聯(lián)在氨基化處理的PDMS通道中，形成流通式的免疫分析芯片，在各通道的匯聚口處施加負(fù)壓，可在各通道中引入不同種類或含不同數(shù)量微生物的試樣溶液，使抗體特異性地捕獲目標(biāo)微生物，洗去未結(jié)合的微生物后，通過匯聚入口注入納米金屬顆粒散射標(biāo)記的抗體探針，對(duì)微生物進(jìn)行標(biāo)記，洗去未反應(yīng)的探針后，對(duì)納米金屬顆粒進(jìn)行銀染產(chǎn)生可視化的信號(hào)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多通道免疫分析芯片，其特征在于，采用權(quán)利要求(2)所述的方法獲得可視化信號(hào)后，其檢測(cè)方式在于用鹵鎢燈、激光或LED作為檢測(cè)光源，將檢測(cè)光源聚焦后照射在通道中沉積有金屬顆粒的區(qū)域，CMOS，CXD攝像設(shè)備拍攝各通道的成像信號(hào)，并用圖像處理軟件獲取各通道的散射光強(qiáng)度，也可用光纖光譜儀，或光電轉(zhuǎn)換裝置測(cè)量散射光的強(qiáng)度，得到散射光強(qiáng)度與試樣中細(xì)菌數(shù)量的的工作曲線，檢測(cè)實(shí)際樣品的散射光強(qiáng)度后，可根據(jù)工作曲線獲得試樣中微生物數(shù)量的信號(hào)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的多通道免疫分析芯片，其特征在于多條通道之間通過統(tǒng)一的進(jìn)樣或出樣口相連接，改變了以往的微流控芯片每條分析通道需要單獨(dú)進(jìn)樣的復(fù)雜裝置，通過正壓和負(fù)壓的轉(zhuǎn)換，既可實(shí)現(xiàn)對(duì)多條通道內(nèi)同種溶液的一次性引入，也可實(shí)現(xiàn)對(duì)多條通道不同溶液的一次性引入，減少了泵的使用，同時(shí)大大節(jié)約了試樣引入的時(shí)間，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。
全文摘要
本發(fā)明是一種用于食品或飲用水樣中多種微生物的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的PDMS微陣列免疫分析芯片，以玻璃作為基底，將包含多個(gè)微流通道的PDMS芯片與玻璃封合，將并行的多個(gè)通道匯聚于一個(gè)出入口，并行通道的數(shù)量取決于一個(gè)芯片所需分析的試樣數(shù)量以及微生物的種類數(shù)。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)不同種類或濃度樣品的多組分分析，利用負(fù)壓進(jìn)樣方法引入待測(cè)樣品，可實(shí)現(xiàn)不同通道內(nèi)不同溶液的同時(shí)引入，節(jié)約進(jìn)樣時(shí)間，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)，各組分同時(shí)進(jìn)樣，簡(jiǎn)化設(shè)備，在微流控免疫芯片中引入散射標(biāo)記的方法，提高了微生物檢測(cè)的靈敏度，最低可檢測(cè)到2cfu/mL的微生物，裝置體積小，利于芯片的微型化，通道設(shè)計(jì)的靈活性強(qiáng)，可實(shí)現(xiàn)高通量檢測(cè)。
文檔編號(hào)G01N21/47GK102288755SQ20111020140
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月19日
發(fā)明者唐艷艷, 李臻, 柳景青, 趙偉潔, 鄔建敏 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)