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一種長(zhǎng)效重組人促卵泡激素的純化方法與流程

文檔序號(hào):40817723發(fā)布日期:2025-01-29 02:36閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種長(zhǎng)效重組人促卵泡激素純化方法,所述純化方法包括以下步驟:

2.如權(quán)利要求1所述的純化方法,所述染料親和層析是將細(xì)胞培養(yǎng)液上樣于diamondblue為填料的層析柱,用含鹽的tris鹽溶液進(jìn)行洗脫;所述含鹽的tris溶液的中所含鹽為nacl、kcl或mgcl2,優(yōu)選為nacl;所含鹽的濃度為1.0m~3.0m,優(yōu)選為2.0m;所述tris溶液中tris濃度為10mm~50mm,通過(guò)加入酸成分形成ph緩沖體系,所述酸成分選自hac或hcl。

3.如權(quán)利要求1或2中任一項(xiàng)所述的純化方法,所述染料親和層析洗脫液還包含異丙醇,所述異丙醇的體積濃度為5%~30%,優(yōu)選為5%~20%,更優(yōu)選為10%。

4.如權(quán)利要求3所述的純化方法,所述染料親和層析洗脫液的ph為6~8。

5.如權(quán)利要求4所述的純化方法,所述染料親和層析洗脫條件為:使用含nacl的tris-hac鹽溶液進(jìn)行洗脫,所述nacl的濃度為2.0m,所述tris-hac溶液中tris濃度為10mm~50mm;所述染料親和層析洗脫液還包含10%異丙醇;所述染料親和層析洗脫液的ph為7.2±0.2。

6.如權(quán)利要求5所述的純化方法,所述病毒滅活使用的去污劑選自吐溫80或triton?x-100。

7.如權(quán)利要求6所述的純化方法,所述病毒滅活為使用1%吐溫80進(jìn)行孵育;所述孵育的時(shí)間為4~8h,優(yōu)選為6h。

8.如權(quán)利要求7所述的純化方法,所述疏水層析是將病毒滅活液上樣于generik?mc60-hic?phenyl為填料的層析柱,用tris溶液進(jìn)行洗脫;所述tris溶液濃度中tris濃度為5mm~20mm,通過(guò)加入酸成分形成ph緩沖體系,所述酸成分選自hac或hcl。

9.如權(quán)利要求8所述的純化方法,所述疏水層析洗脫液的ph為6~8。

10.如權(quán)利要求9所述的純化方法,所述疏水層析洗脫條件為:使用tris-hac溶液進(jìn)行洗脫,所述tris-hac溶液中tris濃度為5mm~20mm,優(yōu)選為tris濃度為5mm;所述疏水親和層析洗脫液的ph為7.2±0.2。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種長(zhǎng)效重組人促卵泡激素(FSH?CTP)的純化方法,屬于蛋白分離純化領(lǐng)域。具體而言,本發(fā)明涉及一種通過(guò)染料親和層析和疏水層析2步實(shí)現(xiàn)FSH?CTP純化的方法,并在2步層析步驟之間特定搭配去污劑病毒滅活工藝,F(xiàn)SH?CTP純化收率97%左右,純度達(dá)到99.9%,純化液幾乎不含有解離亞基、工藝雜質(zhì)含量低,解決了現(xiàn)有FSH?CTP純化工藝中存在的不能同時(shí)兼具質(zhì)量控制需求和成本控制需求的技術(shù)問(wèn)題。

技術(shù)研發(fā)人員:嚴(yán)代才,李寧,陳云波
受保護(hù)的技術(shù)使用者:景澤生物醫(yī)藥(合肥)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/28
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