1.一種隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶,其氨基酸序列為seq?id?no.1以及經(jīng)過(guò)取代、缺失或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸且具有1中酶活性的,由1所衍生的酶,以及與1同源性大于70%的seqid?no.2與seq?id?no.3等其他序列。
2.權(quán)利要求1所述的卡拉膠酶在酶解κ-卡拉膠和ι-卡拉膠中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于:對(duì)ι-卡拉膠的反應(yīng)溫度為45~60℃,最適反應(yīng)溫度為55℃;對(duì)κ-卡拉膠的反應(yīng)溫度為40~55℃,最適反應(yīng)溫度為50℃。
4.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于:對(duì)ι-卡拉膠和κ-卡拉膠的最適反應(yīng)ph為7.0。
5.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于:基于權(quán)利要求1所述的隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶建立ι-卡拉膠或κ-卡拉膠分子量可控酶解模型;控制酶解時(shí)間、加酶量得到不同分子量的ι-卡拉膠或κ-卡拉膠。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于:所述ι-卡拉膠分子量可控酶解模型的擬合方程為log10(y)=3.190863-0.0082655x1-0.1347936x2+0.0054209x22;其中,降解產(chǎn)物分子量y、加酶量x1、反應(yīng)時(shí)間x2。
7.編碼權(quán)利要求1中隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶對(duì)應(yīng)的基因,其所對(duì)應(yīng)的核苷酸序列如seqid?no.4所示及可翻譯出seq?id?no.1的所有序列。
8.權(quán)利要求7中隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶對(duì)應(yīng)基因的應(yīng)用,其特征在于:利用其表征的蛋白可降解ι-卡拉膠和κ-卡拉膠獲得多種不同聚合度的卡拉膠寡糖。
9.一種權(quán)利要求1所述隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶的制備方法,其特征在于:將酶異源表達(dá)在大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、畢赤酵母體系中,實(shí)現(xiàn)隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶的過(guò)表達(dá)及大量制備。
10.一種基于權(quán)利要求1所述隨機(jī)型雙功能卡拉膠酶的建立ι-卡拉膠或κ-卡拉膠的可控酶解技術(shù),其特征在于:根據(jù)目標(biāo)分子量,設(shè)計(jì)控制加酶量與反應(yīng)時(shí)間,實(shí)現(xiàn)特定分子量的ι-卡拉膠或κ-卡拉膠的精準(zhǔn)制備。