本發(fā)明涉及一種從植酸粗提液中利用植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取分離植酸的方法，屬于天然產(chǎn)物固相萃取分離領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

植酸(英語(yǔ)：Phytic acid，又稱為肌醇六磷酸)易溶于水、乙醇和丙酮，幾乎不溶于乙醚、苯和氯仿。在多種植物組織(特別是米糠與種子)中作為磷的主要儲(chǔ)存形式，其結(jié)構(gòu)是肌醇的6個(gè)羥基均被磷酸酯化生成的肌醇衍生物。

植酸以植酸鈣鎂鉀鹽的形式廣泛存在于植物種子內(nèi)，也存在于動(dòng)物有核紅細(xì)胞內(nèi)，可促進(jìn)氧合血紅蛋白中氧的釋放，改善血紅細(xì)胞功能，延長(zhǎng)血紅細(xì)胞的生存期；植酸本身就是對(duì)人體有益的營(yíng)養(yǎng)品，植酸在人體內(nèi)水解產(chǎn)物為肌醇和磷脂，前者具有抗衰老作用，后者是人體細(xì)胞重要組成部分；植酸對(duì)絕大多數(shù)金屬離子有極強(qiáng)絡(luò)合能力，絡(luò)合力與EDTA相似，但比EDTA應(yīng)用范圍更廣，植酸二價(jià)以上金屬鹽均可定性沉淀；每個(gè)植酸分子可提供六對(duì)氫原子使自由基的電子形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，從而代替被保鮮物分子作為供氧分子，避免被保鮮物氧化變質(zhì)，植酸有良好導(dǎo)電性。

植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、水的軟化劑、發(fā)酵促進(jìn)劑、金屬防腐蝕劑等，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。目前植酸的制備方法主要有化學(xué)合成法、微生物發(fā)酵法和天然產(chǎn)物提取法。而對(duì)于植酸的分離提純，主要有物理絮凝法、金屬離子沉淀法、吸附法、離子交換法、電泳富集及溶劑抽提法等。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種通過(guò)向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集的方法。分子印跡聚合物具有構(gòu)效預(yù)定性、特異識(shí)別性和廣泛的實(shí)用性。本方法具有高特異選擇性，且有較大的吸附容量的特點(diǎn)，操作簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備要求低，經(jīng)濟(jì)效益顯著。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明上述目的所采用的技術(shù)方案為：

一種從植酸粗提液中固相萃取分離植酸的方法，包括以下步驟：(1)、制備吸附劑：以植酸分子印跡聚合物(MIPs)和載體作為吸附劑，其中載體為戊二醛交聯(lián)殼聚糖、硅膠、納米硅、碳納米管或硼酸化氧化石墨烯；

(2)、首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至2～9，在植酸粗提液中加入上步驟中所制得的吸附劑，吸附劑添加量為2～8g/L，控制植酸粗提液溫度為5～50℃，持續(xù)攪拌10～80min，植酸粗提液中的植酸被吸附于吸附劑中，吸附率為30％～95％，得到植酸懸濁液，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而分離得到植酸。

步驟(2)中所述的洗脫液為甲醇、乙酸、水、正戊烷、丙酮中的一種或兩種以上的混合溶液。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

(1)本發(fā)明利用分子識(shí)別和印跡技術(shù)的原理制備植酸分子印跡聚合物，實(shí)現(xiàn)對(duì)植酸分子基于化學(xué)作用力的高特異選擇性吸附，而原有的植酸吸附材料大多是物理的非特異性吸附；

(2)本發(fā)明制備的植酸分子印跡聚合物可作為植酸吸附材料實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜體系中植酸分子吸附、分離、提取，并且該材料可以重復(fù)使用，且生產(chǎn)成本低，洗脫液用量少；

(3)本發(fā)明制備的植酸分子印跡聚合物制備簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好，能穩(wěn)定應(yīng)用于苛刻環(huán)境如：高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等有機(jī)溶劑。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)具體的說(shuō)明，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于以下實(shí)施例。

實(shí)施例1

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至2.0，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為2:1，在5℃條件下將植酸懸濁液攪拌10min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用甲醇作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為30.52％。

實(shí)施例2

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至3.5，然后向粗提液中加入加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為3:1，在15℃條件下將植酸懸濁液攪拌20min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用甲醇：水＝2:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為43.25％。

實(shí)施例3

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至4.3，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為4:1，在20℃條件下將植酸懸濁液攪拌30min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸植酸分子印跡復(fù)合物，再用乙酸：水＝3:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為47.36％。

實(shí)施例4

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至5.2，向粗體液中加入固相萃取劑即植酸分子印跡聚合物，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗體液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為5:1，在25℃條件下將植酸懸濁液攪拌40min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用丙酮：水＝4:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為75.32％。

實(shí)施例5

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至6.4，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗體液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為6:1，在30℃條件下將植酸懸濁液攪拌50min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用正戊烷：水＝5:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為65.43％。

實(shí)施例6

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至7.6，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為7:1，在35℃條件下將植酸懸濁液攪拌60min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用甲醇：乙酸＝3:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為63.52％。

實(shí)施例7

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至8.3，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為8:1，在40℃條件下將植酸懸濁液攪拌70min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用甲醇：丙酮＝3:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為55.35％。

實(shí)施例8

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至9.0，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為3:1，在45℃條件下將植酸懸濁液攪拌80min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用丙酮：正戊烷＝3:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為42.32％。

實(shí)施例9

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至3.6，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為3:1，在50℃條件下將植酸懸濁液攪拌80min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用乙酸：丙酮＝3:1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為60.26％。

實(shí)施例10

首先將植酸粗提液的pH值調(diào)至3.5，向粗提液中加入植酸分子印跡聚合物(MIPs)固相萃取吸附劑，加入植酸分子印跡聚合物與植酸粗提液的固液比(質(zhì)量/體積，mg/mL)為3:1，在25℃條件下將植酸懸濁液攪拌80min，然后將懸濁液離心分離，收集沉淀物，沉淀物即為植酸分子印跡復(fù)合物，再用甲醇：乙酸：水＝7：2：1作為洗脫液對(duì)沉淀物進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)植酸的分離富集，測(cè)定植酸的吸附率為89.59％。