本發(fā)明屬于食品加工技術領域，具體涉及一種提取魚蛋白的方法。

背景技術：

小雜魚和低價值海水魚的產(chǎn)量占浙江海洋漁獲量的50～60%，其中相當大的部分用于加工成飼料魚粉或?qū)櫸锸称?，利用價值不高而且因為不能充分利用造成物質(zhì)浪費。如何實現(xiàn)小雜魚、低價值海水魚高值化、資源化和生態(tài)化利用是當今水產(chǎn)品加工應用領域的重要課題。

魚蛋白是高經(jīng)濟價值的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，其所含氨基酸組成與人體所需的氨基酸成分接近，同時魚蛋白中還含有的豐富的鈣、磷、鐵、硒等元素。因此利用小雜魚、低價值海水魚制備魚蛋白可以提高其經(jīng)濟效益?，F(xiàn)有制備魚蛋白的有堿提取法、酶法等，其中堿提取法容易使氨基酸受損、水解程度不易控制且產(chǎn)品的感官質(zhì)量和營養(yǎng)效果不理想。酶法主要是利用蛋白質(zhì)水解酶處理原料水解，條件溫和且水解程度易控制，氨基酸不易受損，生產(chǎn)的魚蛋白質(zhì)量好。但是酶法現(xiàn)有以下不足：（1）魚腥味去除不完全；（2）魚蛋白中含有微弱苦味影響魚蛋白的口感；（3）酶法中一般采取活性炭吸附等手段進行脫色處理，脫色效果不好；（4）單一酶水解的魚蛋白收率低，脂肪含量高，魚蛋白品質(zhì)不高。

中國專利CN105925649A，專利名稱一種低分子量脫脂魷魚蛋白功能性活性肽的制備方法，公布日期2016年9月7日，公開了一種利用酶法制備魷魚蛋白功能性活性肽的方法，包括以下步驟：破碎處理、超聲脫色、超聲固色、提取處理、酶解、加壓、超濾，并得到活性肽。該方法在超聲脫色和固色中采用氫氧化鈉溶液和氫氧化鈣溶液作為超聲溶劑以強化 脫色、固色效果，但是強堿環(huán)境造成氨基酸受損而使活性肽的質(zhì)量受到影響，且脫腥、除苦味效果不明顯。

技術實現(xiàn)要素：

針對小雜魚和低價值海水魚等以酶法制備魚蛋白存在脫腥不完全、魚蛋白中存在微弱苦味等問題，本發(fā)明的目的在于提供一種以小雜魚和低價值海水魚為原料，利用酶法提取魚蛋白的方法，可以完全脫除魚腥味、苦味，操作條件溫和，而且魚蛋白收率高，脂肪含量低，魚蛋白的品質(zhì)好。

本發(fā)明的技術方案如下：

一種提取魚蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）準備：將小雜魚、低價值海魚去除內(nèi)臟后洗凈，經(jīng)勻漿器攪碎制成魚糜；

（2）脫腥：將魚糜置于10～20 ℃的脫腥溶液中漂洗4～6次，然后經(jīng)0～4 ℃冷水漂洗2～3次后過濾，保留魚糜；

（3）制備原混料：向重量份的100份魚糜中加入800～1200份的水，并調(diào)節(jié)pH值至5.5～7.5，制得原混料；

（4）提取：保持原混料溫度45～60 ℃，添加復合分解酶進行超聲分解處理3～5 h，攪拌速度100～120 r/min，超聲功率35～45 W，作用時間30～60 s，間隔15～20 min，得到酶解料；

（5）脫脂脫苦：繼續(xù)加入甘油酯水解酶、復合風味酶對酶解料進行脫腥、脫苦味、脫脂處理，處理時間2～4 h；

（6）滅活：將步驟（5）所得酶解料溫度升高至80～90 ℃并保持45～60 min以殺滅酶活性，過濾酶解料，保留濾液；

（7）脫色：將濾液通過離子交換樹脂進行脫色處理；

（8）濃縮：脫色后的溶液通過篩網(wǎng)過濾，然后真空濃縮至原體積的30～40%；

（9）制粉：將濃縮后的溶液送至噴霧干燥設備噴霧干燥得魚蛋白粉。

作為本發(fā)明的一種改進，所述脫腥溶液由以下重量份組份組成：水100～120份、食用醋50～80份、黃酒50～80份、脂肪氧化抑制物3～5份。

作為本發(fā)明的一種改進，所述脂肪氧化抑制物為兒茶素、單寧或黃酮中的一種或兩種以上的混合物。

作為本發(fā)明的一種改進，所述復合分解酶的質(zhì)量百分比為4‰～8‰，酶活力為5萬～7萬U/g，所述復合分解酶由菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成，其質(zhì)量比為1:08～1.2:1.5～2.0:1.5～1.8:0.6～0.8。

作為本發(fā)明的一種改進，所述甘油酯水解酶的質(zhì)量百分比為6‰～9‰，酶活力為2萬～3萬 U/g，所述甘油酯水解酶由磷酸酯酶和羧酸酯酶組成，其質(zhì)量比為1:0.7～1。

作為本發(fā)明的一種改進，所述復合風味酶的質(zhì)量百分比為6‰～9‰，酶活力為2萬～3萬 U/g，所述復合風味酶由氨肽酶和羧肽酶組成，質(zhì)量比為1:0.9～1.2。

作為本發(fā)明的一種改進，所述篩網(wǎng)的規(guī)格為200～300目。

作為本發(fā)明的一種改進，所述離子交換樹脂為大孔堿性陰離子樹脂，所述離子交換樹脂的處理能力為重量份濾液700～900份/100份離子交換樹脂，處理溫度為35～45 ℃，浸泡時間3～5 h。

作為本發(fā)明的一種改進，噴霧干燥設備的進口溫度為165～185 ℃，出口溫度為70～80 ℃，噴霧壓力0.3～0.5 MPa。

本發(fā)明的一種提取魚蛋白的方法，首先采用兩級脫腥味的方法，即脫腥和脫脂脫苦：（1）魚腥味來自魚肉蛋白質(zhì)的代謝和腐敗產(chǎn)生的三甲胺和哌啶，以及脂肪中的不飽和脂肪酸氧化所產(chǎn)生的腥味物質(zhì)，在步驟（2）的脫腥過程中使用食用醋和黃酒溶解魚肉中的三甲胺和哌啶，消除明顯存在的腥味，然后脂肪氧化抑制物質(zhì)抑制脂肪以及蛋白質(zhì)的腐敗氧化，杜絕后期酶解等過程中產(chǎn)生腥臭味的物質(zhì)以及細菌生長。另外脫腥溶液中黃酒富含的多種氨基酸可以補充魚蛋白所含氨基酸種類和含量，所含的、維生素和無機鹽可以提高魚蛋白收率和品質(zhì)，黃酒中含有的多酚類物質(zhì)、類黑精等可以抑制魚糜的氧化腐敗，協(xié)同脂肪氧化類物質(zhì)的效果；（2）在脫脂脫苦中采用甘油酯水解酶進行徹底的脫脂處理，一方面提高魚蛋白品質(zhì)，另一方面去除脂肪腥味。復合風味酶中的羧肽酶和氨肽酶分別剪切肽鏈C-端和N-端的疏水性氨基酸，完全去除魚蛋白中含有的苦味。其次采用復合分解酶提取魚蛋白，其中菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶為植物蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶為動物蛋白酶，枯草桿菌蛋白酶為細菌蛋白酶，通過使用復合分解酶進行酶解的效率高，分解較為完全，且可抑制細菌生長，提高魚蛋白的品質(zhì)，同時超聲破碎細胞促進魚蛋白的提?。辉俅尾捎秒x子交換樹脂尤其進行脫色處理相比現(xiàn)有的活性炭吸附等，脫色效果好，氨基酸損失小，而且采用的大孔堿性陰離子樹脂可以有效脫除色素分子，脫色效果好。

本發(fā)明的有益效果如下

本發(fā)明的一種提取魚蛋白的方法，具有如下優(yōu)點：（1）可以完全去除魚蛋白的魚腥味和苦味；（2）脫色效果好，魚蛋白粉的白度高；（3）魚蛋白的收率高，脂肪含量低，品質(zhì)好；（4）本發(fā)明的操作條件溫和、簡便，而且提取效果好。

具體實施方式

下面就本發(fā)明的具體實施方式作進一步說明。

如無特別說明，本發(fā)明中所采用的原料均可從市場上購得或是本領域常用的，如無特別說明，下述實施例中的方法均為本領域的常規(guī)方法。

本發(fā)明所用脫腥溶液由以下組份組成：水100～120 g、食用醋50～80 g、黃酒50～80 g、脂肪氧化抑制物3～5 g，其中黃酒為酒精濃度10%～13%的半干黃酒，脂肪氧化抑制物為兒茶素、單寧或黃酮中的一種或兩種以上的混合物。

實施例1

一種提取魚蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）準備：將小雜魚、低價值海魚去除內(nèi)臟后洗凈，經(jīng)勻漿器攪碎制成魚糜；（2）脫腥：將魚糜置于10 ℃的脫腥溶液中漂洗4次，然后經(jīng)0 ℃冷水漂洗2次后過濾，保留魚糜；（3）制備原混料：向100 g魚糜中加入800 g的水，并調(diào)節(jié)pH值至5.5，制得原混料；（4）提?。罕３衷炝蠝囟?5 ℃，添加復合分解酶進行超聲分解處理3 h，攪拌速度100 r/min，處理時間3 h，超聲功率35 W，作用時間30 s，間隔15 min，得到酶解料，其中復合分解酶由菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成，其質(zhì)量比為1:08:1.5:1.5:0.6，添加的復合分解酶與原混料的質(zhì)量百分比為4‰，酶活力為5萬U/g；（5）脫脂脫苦：繼續(xù)加入甘油酯水解酶、復合風味酶對酶解料進行脫腥、脫苦味、脫脂處理，處理時間2 h，其中甘油酯水解酶包括磷酸酯酶和羧酸酯酶，質(zhì)量比為1:0.7，添加的甘油酯水解酶與酶解料的質(zhì)量百分比為6‰，酶活力為2萬U/g，復合風味酶包括氨肽酶和羧肽酶，質(zhì)量比為1:0.9，添加的復合風味酶與酶解料的質(zhì)量百分比為6‰，酶活力為2萬U/g；（6）滅活：將步驟（5）所得酶解料溫度升高至80 ℃并保持45 min以殺滅酶活性，過濾酶解料，保留濾液；（7）脫色：將濾液通過離子交換樹脂進行脫色處理，其中離子交換樹脂優(yōu)選大孔堿性陰離子樹脂，離子交換樹脂的處理能力為濾液700 g/100 g離子交換樹脂，處理溫度為35 ℃，浸泡時間5 h；（8）濃縮：脫色后的溶液通過篩網(wǎng)過濾，然后真空濃縮至原體積的30%，篩網(wǎng)規(guī)格優(yōu)選為200目；（9）制粉：將濃縮后的溶液送至噴霧干燥設備噴霧干燥得魚蛋白粉，其中噴霧干燥設備的進口溫度為165 ℃，出口溫度為70 ℃，噴霧壓力0.3 M Pa。

經(jīng)本發(fā)明的提取魚蛋白的方法制備的魚蛋白中蛋白質(zhì)含量≥95％，脂肪含量≤0.095％。

實施例2

一種提取魚蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）準備：將小雜魚、低價值海魚去除內(nèi)臟后洗凈，經(jīng)勻漿器攪碎制成魚糜；（2）脫腥：將魚糜置于15 ℃的脫腥溶液中漂洗5次，然后經(jīng)2 ℃冷水漂洗2次后過濾，保留魚糜；（3）制備原混料：向100 g魚糜中加入1000 g的水，并調(diào)節(jié)pH值至6.5，制得原混料；（4）提取：保持原混料溫度52 ℃，添加復合分解酶進行超聲分解處理4 h，攪拌速度110 r/min，超聲功率40 W，作用時間45 s，間隔17.5 min，得到酶解料，其中復合分解酶由菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成，其質(zhì)量比為1:1.0:1.75:1.65:0.7，添加的復合分解酶與原混料的質(zhì)量百分比為6‰，酶活力為5萬～7萬U/g；（5）脫脂脫苦：繼續(xù)加入甘油酯水解酶、復合風味酶對酶解料進行脫腥、脫苦味、脫脂處理，處理時間3 h，其中甘油酯水解酶包括磷酸酯酶和羧酸酯酶，質(zhì)量比為1:0.85，添加的甘油酯水解酶與分解料的質(zhì)量百分比為7.5‰，酶活力為2.5萬U/g，復合風味酶包括氨肽酶和羧肽酶，質(zhì)量比為1:1.05，添加的復合風味酶與分解料的質(zhì)量百分比為7.5‰，酶活力為2.5萬U/g；（6）滅活：將步驟（5）所得酶解料溫度升高至85 ℃并保持52 min以殺滅酶活性，過濾酶解料，保留濾液；（7）脫色：將濾液通過離子交換樹脂進行脫色處理，其中離子交換樹脂優(yōu)選大孔堿性陰離子樹脂，離子交換樹脂的處理能力為濾液800 g/100 g離子交換樹脂，處理溫度為40 ℃，浸泡時間4 h；（8）濃縮：脫色后的溶液通過篩網(wǎng)過濾，然后真空濃縮至原體積的35%，篩網(wǎng)規(guī)格優(yōu)選為250目；（9）制粉：將濃縮后的溶液送至噴霧干燥設備噴霧干燥得魚蛋白粉，其中噴霧干燥設備的進口溫度為175 ℃，出口溫度為75 ℃，噴霧壓力0.4 MPa。

經(jīng)本發(fā)明的提取魚蛋白的方法制備的魚蛋白中蛋白質(zhì)含量≥95％，脂肪含量≤0.095％。

實施例3

一種提取魚蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）準備：將小雜魚、低價值海魚去除內(nèi)臟后洗凈，經(jīng)勻漿器攪碎制成魚糜；（2）脫腥：將魚糜置于20 ℃的脫腥溶液中漂洗6次，然后經(jīng)4 ℃冷水漂洗3次后過濾，保留魚糜；（3）制備原混料：向100 g魚糜中加入1200 g的水，并調(diào)節(jié)pH值至7.5，制得原混料；（4）提取：保持原混料溫度60℃，添加復合分解酶進行超聲分解處理5 h，攪拌速度120 r/min，超聲功率45 W，作用時間60 s，間隔20 min，得到酶解料，其中復合分解酶由菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶組成，其質(zhì)量比為1:1.2:2.0:1.8:0.8，添加的復合分解酶與原混料的質(zhì)量百分比為8‰，酶活力為7萬U/g；（5）脫脂脫苦：繼續(xù)加入甘油酯水解酶、復合風味酶對酶解料進行脫腥、脫苦味、脫脂處理，處理時間4 h，其中甘油酯水解酶包括磷酸酯酶和羧酸酯酶，質(zhì)量比為1:1，添加的甘油酯水解酶與分解的質(zhì)量百分比為9‰，酶活力為3萬U/g，復合風味酶包括氨肽酶和羧肽酶，質(zhì)量比為1:1.2，添加的復合風味酶與分解料的質(zhì)量百分比為9‰，酶活力為3萬U/g；（6）滅活：將步驟（5）所得酶解料溫度升高至90 ℃并保持60 min以殺滅酶活性，過濾酶解料，保留濾液；（7）脫色：將濾液通過離子交換樹脂進行脫色處理，其中離子交換樹脂優(yōu)選大孔堿性陰離子樹脂，離子交換樹脂的處理能力為濾液900 g/100 g離子交換樹脂，處理溫度為45 ℃，浸，泡時間為3 h；（8）濃縮：脫色后的溶液通過篩網(wǎng)過濾，然后真空濃縮至原體積的40%，篩網(wǎng)規(guī)格優(yōu)選為300目；（9）制粉：將濃縮后的溶液送至噴霧干燥設備噴霧干燥得魚蛋白粉，其中噴霧干燥設備的進口溫度為180 ℃，出口溫度為80 ℃，噴霧壓力0.5 MPa。

經(jīng)本發(fā)明的提取魚蛋白的方法制備的魚蛋白中蛋白質(zhì)含量≥95％，脂肪含量≤0.095％。