技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于分子生物學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域,特別是涉及一種基于高通量測(cè)序構(gòu)建T細(xì)胞白血病微小殘留病T細(xì)胞受體(TCR)高通量測(cè)序文庫(kù)的RNA接頭和單對(duì)引物,以及DNA文庫(kù)制備方法,包括獲取人血液樣本10mL于EDTA抗凝管、利用淋巴細(xì)胞分離液Ficoll?1077進(jìn)行外周血單核細(xì)胞(PBMC)的分離、利用Trizol的方法提取PBMC的總RNA,所用試劑為RNAzol?RT、RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,并同時(shí)在cDNA?5’端添加接頭、PCR1、PCR2和純化和進(jìn)行高通量測(cè)序等步驟,通過從接頭的上游引物到C區(qū)的下游引物,獲得TCR基因序列的全長(zhǎng)信息。
技術(shù)研發(fā)人員:孫濤;劉瀟
受保護(hù)的技術(shù)使用者:孫濤
技術(shù)研發(fā)日:2016.12.23
技術(shù)公布日:2017.07.25