本發(fā)明屬于生物應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域：
。更具體地，本發(fā)明涉及一株青霉(Penicilliumsp.)LX-ZJ-2，還涉及青霉(Penicilliumsp.)LX-ZJ-2的用途。
背景技術(shù)：
：中國(guó)是世界鋼鐵第一生產(chǎn)大國(guó)，2012年中國(guó)粗鋼產(chǎn)量高達(dá)7億噸，占世界鋼鐵生產(chǎn)總量的46.3％。在煉鐵、煉鋼過(guò)程中排放的副產(chǎn)品，約占鋼鐵產(chǎn)量的15～20％。但是，我國(guó)鋼鐵工業(yè)廢渣的利用率僅有約10％，遠(yuǎn)低于歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家。大量無(wú)處理的廢渣任意堆積，不僅侵占大量土地，而且?guī)?lái)環(huán)境污染，更是一種資源浪費(fèi)。國(guó)家“十二五”發(fā)展要求煉鋼、煉鐵產(chǎn)出的硅酸鹽副產(chǎn)品循環(huán)利用率達(dá)到60％以上，工業(yè)廢渣的資源化再利用是鋼鐵行業(yè)面臨的緊迫任務(wù)。這些硅酸鹽副產(chǎn)品含有大量植物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)元素，如Ca(29％～36％)、Si(4％～12％)、Fe(6％～27％)、Mg(1.8％～10.2％)及少量的P、Mn、Cu、Zn等元素，同時(shí)這些硅酸鹽副產(chǎn)品還具有較大的比表面積和孔隙度，是優(yōu)良的硅鈣肥原料和酸性土壤改良劑。鋼渣硅鈣肥在日本、歐洲、美國(guó)以及中國(guó)等許多國(guó)家都有施用，研究表明這種工業(yè)廢渣制成硅鈣肥可以顯著促進(jìn)作物生長(zhǎng)，提高植物對(duì)生物和非生物脅迫的抵抗能力，繼而提高作物產(chǎn)量。因此這些煉鋼、煉鐵產(chǎn)生的廢渣做成農(nóng)用硅鈣肥不僅有利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，而且對(duì)鋼鐵行業(yè)都具有重要的經(jīng)濟(jì)效益和環(huán)境效益。這些鐵渣、鋼渣中含量較高的是硅元素，硅在國(guó)際土壤界被列為繼氮、磷、鉀之后的第四大元素肥料。它主要用于水稻、小麥、玉米等喜硅作物，尤其是水稻。水稻素有硅酸植物之稱(chēng)，在缺硅土壤上施用硅肥可以增加水稻分蘗數(shù)，提高有效收獲穗數(shù)，還可以提高結(jié)實(shí)率，促進(jìn)干物質(zhì)累積，進(jìn)而增加產(chǎn)量，并有改善米質(zhì)的作用；另外，硅肥抗稻瘟病的效果最顯著，主要表現(xiàn)為增加水稻自身抗病能力，即使水稻感染某些病害，也可以使病斑硅質(zhì)化，控制病斑發(fā)展；其次是抗褐變穗、紋枯病。目前，硅肥的品種主要有枸溶性硅肥、水溶性硅肥兩大類(lèi)，枸溶性硅肥是指不溶于水而溶于酸后可以被植物吸收的硅肥，田間施用的硅肥主要是含硅酸鹽的工業(yè)廢渣，如鋼渣、鐵渣、煉銅渣、煉鋁赤泥、粉煤灰硅鈣肥和黃磷渣以及水泥窯灰和硅鎂鉀肥等，這種肥料一般施用量較大，但吸收過(guò)于緩慢，主要是由于其中的硅酸鹽不容易被植物吸收，所以如何提高硅肥中有效元素利用率，使其更快更容易被植物吸收利用成為了迫切需要解決的問(wèn)題。通過(guò)生物方法使工業(yè)廢渣的農(nóng)業(yè)資源化利用更加高效，對(duì)發(fā)展生態(tài)文明農(nóng)業(yè)和鋼鐵行業(yè)環(huán)境友好型循環(huán)發(fā)展具有重要的意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：[要解決的技術(shù)問(wèn)題]本發(fā)明的目的是提供一株青霉(Penicilliumsp.)LX-ZJ-2。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供青霉LX-ZJ-2的用途。[技術(shù)方案]本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一株青霉(Penicilliumsp.)LX-ZJ-2，該菌株已于2016年6月23日在中國(guó)科學(xué)院微生物研究所中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，其保藏號(hào)為CGMCCNo.12628。本發(fā)明還涉及所述的青霉LX-ZJ-2菌株在活化水淬渣硅和鈣元素中的用途。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述活化方法的步驟如下：A、青霉LX-ZJ-2孢子粉制備①PDA培養(yǎng)基制備:配制含有20g/l蔗糖、200g/l土豆、20g/l瓊脂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度121℃下滅菌30min，得到PDA培養(yǎng)基；②青霉培養(yǎng)：挑取一環(huán)青霉LX-ZJ-2接種于步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中28℃下斜面培養(yǎng)3～4天，得到一種青霉培養(yǎng)物；③孢子粉制備：挑取一環(huán)步驟②得到的青霉培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種至步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下平板培養(yǎng)3～4天，得到青霉LX-ZJ-2孢子粉，它再與80～100目干稻草粉吸附載體混合均勻，讓青霉LX-ZJ-2孢子粉完全吸附在干稻草粉上；④孢子粉活菌計(jì)數(shù)：采用常規(guī)活菌計(jì)數(shù)方法對(duì)步驟③得到的孢子粉進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，該孢子粉活菌數(shù)是2～3×109個(gè)/克；B、水淬渣預(yù)處理使用粉碎設(shè)備將水淬渣粉碎至150～200目；C、活化處理按照孢子粉：水淬渣：土壤的重量比為1：0.8～1.2：450～550，先讓步驟A得到的活菌數(shù)為2～3×109個(gè)/克的青霉LX-ZJ-2孢子粉與步驟B得到的水淬渣粉混合均勻，再與農(nóng)用土壤混合均勻，以使所述土壤中青霉LX-ZJ-2活菌數(shù)達(dá)到106個(gè)/克；然后往該混合物中加水，使其濕潤(rùn)并放置，取樣，檢測(cè)水溶性硅和交換性鈣含量。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述的水淬渣是在煉鐵過(guò)程中產(chǎn)生的富含硅酸鹽的爐渣。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述農(nóng)用土壤是過(guò)2毫米篩的篩下土。下面將更詳細(xì)地描述本發(fā)明。本發(fā)明涉及一株青霉(Penicilliumsp.)LX-ZJ-2，該菌株已于2016年6月23日在中國(guó)科學(xué)院微生物研究所中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，其保藏號(hào)為CGMCCNo.12628。本發(fā)明的青霉株LX-ZJ-2屬真菌的青霉屬，是由河北省秦皇島市撫寧區(qū)農(nóng)作物耕作地區(qū)的植物根系周?chē)寥乐蟹蛛x得到的。具體分離方法如下：將10g上述土壤樣品與90g無(wú)菌水加到三角瓶中，震蕩搖勻，得到10-1稀釋度的土壤懸液，然后取10ml土壤懸液，往其中添加90ml無(wú)菌水，震蕩搖勻，得到10-2稀釋度的土壤懸液，按照同樣的方式相繼制備得到10-3、10-4、10-5稀釋度的土壤懸液。將不同稀釋度的土壤懸液分別涂布在含有溴麝香草酚藍(lán)(以重量計(jì)0.25％濃度，1～2ml/l)的常規(guī)PDA固體培養(yǎng)基上，在溫度28℃下培養(yǎng)4-6天。菌體在含有溴麝香草酚藍(lán)的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，如果產(chǎn)酸則平板變黃，如果產(chǎn)堿則平板變藍(lán)，挑取平板產(chǎn)酸面積最大的菌株進(jìn)行分離純化。其中菌株LX-ZJ-2在平板上產(chǎn)酸面積最大，所以選取該菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。菌落特征：該菌株在溫度28℃下恒溫培養(yǎng)4～6天后，菌落正面形成暗綠色孢子，菌落背面淡黃色，直徑30～50mm，分生孢子橢圓形，大小為4～6μm(長(zhǎng))×3～4μm(寬)，分生孢子呈鏈狀生于孢子梗上，分生孢子梗無(wú)色、有分隔，小梗叢生于分支頂端。菌種鑒定：該菌株進(jìn)行18SrDNA序列測(cè)定，按照本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員熟知的真菌DNA提取方法制備樣品總DNA。合成真菌DNA通用引物如下：ITS15’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’ITS45'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’PCR體系(25μL)：反應(yīng)程序：94℃4min；94℃1min，52℃1min，72℃1min，35個(gè)循環(huán)；72℃10min。瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)合格后送北京三博遠(yuǎn)志公司測(cè)序。將測(cè)到的DNA序列進(jìn)行人工矯正后，使用NCBI中的Blast程序中在線比對(duì)，經(jīng)過(guò)比對(duì)，該菌株與青霉的相似度為99％，所以斷定該菌株為青霉。本發(fā)明還涉及所述的青霉LX-ZJ-2菌株在活化水淬渣中硅和鈣元素的用途。青霉LX-ZJ-2菌株對(duì)水淬渣中硅和鈣活化作用試驗(yàn)如下：PDA培養(yǎng)基的制備:配制含有20g/l蔗糖、200g/l土豆、20g/l瓊脂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度121℃下滅菌30min，得到PDA培養(yǎng)基；馬丁氏液體培養(yǎng)基的制備：配制含有10g/l葡萄糖、5g/l蛋白胨、1g/l磷酸二氫鉀、0.5g/l七水硫酸鎂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度112℃下滅菌30min，得到馬丁氏液體培養(yǎng)基。青霉培養(yǎng)：挑取一環(huán)青霉LX-ZJ-2接種于PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下斜面培養(yǎng)3～4天，得到一種青霉培養(yǎng)物；水淬渣的制備：將水淬渣粉碎至150-200目。實(shí)驗(yàn)分兩組進(jìn)行，其中：第一組是往馬丁氏液體培養(yǎng)基中加入水淬渣(0.5g/100ml)；第二組是往馬丁氏液體培養(yǎng)基中加入水淬渣(0.5g/100ml)與一環(huán)青霉LX-ZJ-2；每組按照三個(gè)平行進(jìn)行；將兩組培養(yǎng)物均放到在恒溫?fù)u床中在溫度28℃下培養(yǎng)48h，然后用濾紙過(guò)濾，得到的上清液采用常規(guī)鉬藍(lán)比色法檢測(cè)發(fā)酵液中的水溶性硅含量。檢測(cè)結(jié)果表明，第一組無(wú)青霉LX-ZJ-2的水溶性硅含量為816.83mg/kg；第二組有青霉LX-ZJ-2的水溶性硅含量為2369.35mg/kg；第二組的水溶性硅含量比第一組高190％。這個(gè)實(shí)驗(yàn)充分證明了青霉LX-ZJ-2能夠非常明顯有效地促進(jìn)水淬渣釋放水溶性硅。根據(jù)本發(fā)明，青霉LX-ZJ-2在土壤環(huán)境中活化水淬渣中硅和鈣元素方法的步驟如下：A、青霉LX-ZJ-2孢子粉制備①PDA培養(yǎng)基制備:配制含有20g/l蔗糖、200g/l土豆、20g/l瓊脂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度121℃下滅菌30min，得到PDA培養(yǎng)基；②青霉培養(yǎng)：挑取一環(huán)青霉LX-ZJ-2接種于步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下斜面培養(yǎng)3～4天，得到一種青霉培養(yǎng)物；③孢子粉制備：挑取一環(huán)步驟②得到的青霉培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種至步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下平板培養(yǎng)3～4天，得到青霉LX-ZJ-2孢子粉，它再與80～100目干稻草粉吸附載體混合均勻，讓青霉LX-ZJ-2孢子粉完全吸附在干稻草粉上；④孢子粉活菌計(jì)數(shù)：采用常規(guī)活菌計(jì)數(shù)方法對(duì)步驟③得到的孢子粉進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，該孢子粉活菌數(shù)是2～3×109個(gè)/克；B、水淬渣預(yù)處理使用粉碎設(shè)備將水淬渣粉碎至150～200目；所述的水淬渣是在煉鐵過(guò)程中高爐熱熔礦渣用水急速冷卻后可變?yōu)槭杷傻母缓杷猁}的爐渣。C、活化處理按照孢子粉：水淬渣：土壤的重量比為1：0.8～1.2：450～550，先讓步驟A得到的活菌數(shù)為2～3×109個(gè)/克的青霉LX-ZJ-2孢子粉與步驟B得到的水淬渣粉混合均勻，再與過(guò)2毫米篩的農(nóng)用土壤(篩下部分)混合均勻，以使所述土壤中青霉LX-ZJ-2活菌數(shù)達(dá)到106個(gè)/克；然后往該混合物中加水，使其濕潤(rùn)并放置，取樣，檢測(cè)水溶性硅和交換性鈣含量。具體地，平行地進(jìn)行兩組水淬渣土壤實(shí)驗(yàn)：第一組，稱(chēng)取500g常規(guī)土，與1g水淬渣攪拌均勻，再加入100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；第二組，稱(chēng)取500g常規(guī)土，與1g水淬渣與1g青霉LX-ZJ-2孢子粉(孢子粉活菌數(shù)為2～3×109個(gè)/克)，攪拌均勻，加100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；上述兩組樣品放置12天，取土樣，自然陰干，采用常規(guī)鉬藍(lán)比色法和土壤交換性鈣鎂檢測(cè)方法，檢測(cè)這些土壤樣品中的水溶性硅和交換性鈣。檢測(cè)結(jié)果列于下表1中。表1：土壤樣品中水溶性硅和交換性鈣檢測(cè)結(jié)果第一組第二組提高％交換性鈣，g/kg7.167.819％水溶性硅，g/kg232.44276.5619％表1的結(jié)果表明，與沒(méi)有施用青霉LX-ZJ-2孢子粉相比，施用青霉LX-ZJ-2孢子粉的交換性鈣提高9％，水溶性硅提高19％，這個(gè)結(jié)果充分說(shuō)明青霉LX-ZJ-2孢子粉能夠非常明顯促進(jìn)水淬渣釋放硅和鈣，因此具有非常重要的意義。青霉LX-ZJ-2和水淬渣在水稻種植應(yīng)用試驗(yàn)如下：I、試驗(yàn)土壤：秦皇島撫寧水稻土，它含有59.7mg/kg堿解氮、18.6mg/kg有效磷、117.2mg/kg有效鉀、2.4％有機(jī)質(zhì)、110mg/kg有效硅、30.6mg/kg可溶性硅、pH5.8；陰干，選用通過(guò)2mm篩的篩下部分。II、土壤飽和含水量測(cè)定：取一定量試驗(yàn)土壤放入布什漏斗中，不斷加水至基本不再滴水，過(guò)夜。取試驗(yàn)土放入鋁盒中稱(chēng)重，用酒精灼燒至干，再稱(chēng)重。根據(jù)試驗(yàn)前后土壤重量計(jì)算含水量，測(cè)得該水稻土飽和含水量是以重量計(jì)37％。III、試驗(yàn)處理：CK：基肥，每kg土為0.15gN、0.1gP2O5與0.15gK2O。處理1：基肥+青霉LX-ZJ-2孢子粉(106個(gè)/kg土)處理2：基肥+水淬渣(2.3g/kg土)處理3：基肥+青霉LX-ZJ-2孢子粉(106個(gè)/kg土)+水淬渣(2.3g/kg土)青霉LX-ZJ-2孢子粉是載體吸附的青霉LX-ZJ-2孢子粉。IV、檢測(cè)項(xiàng)目：采用本
技術(shù)領(lǐng)域：
的常規(guī)方法檢測(cè)全氮、磷、鉀、硅含量。苗期：植株全氮、磷、鉀、硅含量；分蘗期：植株全氮、磷、鉀、硅含量；成熟期：植株全氮、磷、鉀、硅含量；分蘗數(shù)、根重、產(chǎn)量。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2-4。表2：水稻根、穗、分蘗數(shù)測(cè)定值表3：水稻植株全磷、全硅測(cè)定值表4：水稻植株全磷、全硅測(cè)定值由表2-4可以清楚地看出，當(dāng)青霉LX-ZJ-2與水淬渣同時(shí)施用時(shí)，可明顯促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，比單獨(dú)施用水淬渣提高了利用率，促進(jìn)根部發(fā)育，提高根系干重34.52％；提高水稻分蘗數(shù)36.35％；植株全鉀提高6.4％；植株全氮提高9.6％；植株全磷提高9.4％；植株全硅提高13.6％。因此，將青霉LX-ZJ-2與水淬渣同時(shí)施用效果是極其顯著的，也是人們未曾預(yù)料到的，它的推廣應(yīng)用具有十分重要的意義。[有益效果]本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供了一株青霉株LX-ZJ-2，經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，該菌株可以活化水淬渣中的硅和鈣，在液體環(huán)境下48h，水淬渣中水溶性硅釋放量比對(duì)照提高190％；在土壤環(huán)境中也可以活化提高水淬渣中硅和鈣的釋放率，將水淬渣和青霉株LX-ZJ-2孢子粉同時(shí)施入土壤中，12天后調(diào)查水淬渣在土壤中硅和鈣的釋放，結(jié)果添加孢子粉的水淬渣比不添加孢子粉的處理，交換性鈣釋放提高了8.6～10.3％，水溶性硅的釋放提高了17.7～20.9％；該菌株與水淬渣同時(shí)施用可明顯促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，提高了水淬渣利用率，在水稻上施用后，可以促進(jìn)根部發(fā)育，提高根系干重34.52％；提高水稻分蘗數(shù)36.35％；植株全鉀提高6.4％；植株全氮提高9.6％；植株全磷提高9.4％；植株全硅提高13.6％。因此，該菌株在與水淬渣同時(shí)施用時(shí)可以提高水淬渣中有效元素利用率，在煉鐵、煉鋼等工業(yè)廢渣農(nóng)業(yè)資源化利用方向具有極其好的應(yīng)用前景。青霉(Penicilliumsp.)LX-ZJ-2，該菌株已于2016年6月23日在中國(guó)科學(xué)院微生物研究所中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，其保藏號(hào)為CGMCCNo.12628?！揪唧w實(shí)施方式】通過(guò)下述實(shí)施例將能夠更好地理解本發(fā)明。實(shí)施例1：水淬渣中硅和鈣元素活化處理該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：A、青霉LX-ZJ-2孢子粉制備①PDA培養(yǎng)基制備:配制含有20g/l蔗糖、200g/l土豆、20g/l瓊脂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度121℃下滅菌30min，得到PDA培養(yǎng)基；②青霉培養(yǎng)：挑取一環(huán)青霉LX-ZJ-2接種于步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下斜面培養(yǎng)3天，得到一種青霉培養(yǎng)物；③孢子粉制備：挑取一環(huán)步驟②得到的青霉培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種至步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下平板培養(yǎng)4天，得到青霉LX-ZJ-2孢子粉，它再與80目干稻草粉吸附載體混合均勻，讓青霉LX-ZJ-2孢子粉完全吸附在干稻草粉上；④孢子粉活菌計(jì)數(shù)：采用常規(guī)活菌計(jì)數(shù)方法對(duì)步驟③得到的PDA平板培養(yǎng)物孢子粉進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，該孢子粉活菌數(shù)是2×109個(gè)/克；B、水淬渣預(yù)處理使用粉碎設(shè)備將水淬渣粉碎至180目；C、活化處理按照孢子粉：水淬渣：土壤的重量比為1：0.8：550，先讓步驟A得到的活菌數(shù)為2×109個(gè)/克的青霉LX-ZJ-2孢子粉與步驟B得到的水淬渣粉混合均勻，再與過(guò)2毫米篩的秦皇島撫寧水稻土混合均勻，以使所述土壤中青霉LX-ZJ-2活菌數(shù)達(dá)到106個(gè)/克；下面平行地進(jìn)行兩組水淬渣土壤實(shí)驗(yàn)：第一組，稱(chēng)取550g常規(guī)土，與0.8g水淬渣攪拌均勻，再加入100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；第二組，稱(chēng)取550g常規(guī)土，與0.8g水淬渣和1g青霉LX-ZJ-2孢子粉(孢子粉活菌數(shù)為2×109個(gè)/克)，攪拌均勻，加100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；上述兩組樣品放置12天，取土樣，自然陰干，采用常規(guī)鉬藍(lán)比色法和土壤交換性鈣鎂檢測(cè)方法，檢測(cè)這些土壤樣品中的水溶性硅和交換性鈣。其結(jié)果列于表5中。表5：土壤樣品中水溶性硅和交換性鈣檢測(cè)結(jié)果第一組第二組提高％交換性鈣，g/kg7.187.9210.3％水溶性硅，g/kg229.44277.6120.9％實(shí)施例2：水淬渣中硅和鈣元素活化處理該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：A、青霉LX-ZJ-2孢子粉制備①PDA培養(yǎng)基制備:配制含有20g/l蔗糖、200g/l土豆、20g/l瓊脂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度121℃下滅菌30min，得到PDA培養(yǎng)基；②青霉培養(yǎng)：挑取一環(huán)青霉LX-ZJ-2接種于步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下斜面培養(yǎng)4天，得到一種青霉培養(yǎng)物；③孢子粉制備：挑取一環(huán)步驟②得到的青霉培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種至步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下平板培養(yǎng)3天，得到青霉LX-ZJ-2孢子粉，它再與100目干稻草粉吸附載體混合均勻，讓青霉LX-ZJ-2孢子粉完全吸附在干稻草粉上；④孢子粉活菌計(jì)數(shù)：采用常規(guī)活菌計(jì)數(shù)方法對(duì)步驟③得到的PDA平板培養(yǎng)物孢子粉進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，該孢子粉活菌數(shù)是3×109個(gè)/克；B、水淬渣預(yù)處理使用粉碎設(shè)備將水淬渣粉碎至150目；C、活化處理按照孢子粉：水淬渣：土壤的重量比為1：1.0：450，先讓步驟A得到的活菌數(shù)為3×109個(gè)/克的青霉LX-ZJ-2孢子粉與步驟B得到的水淬渣粉混合均勻，再與過(guò)2毫米篩的秦皇島撫寧水稻土混合均勻，以使所述土壤中青霉LX-ZJ-2活菌數(shù)達(dá)到106個(gè)/克；下面平行地進(jìn)行兩組水淬渣土壤實(shí)驗(yàn)：第一組，稱(chēng)取450g常規(guī)土，與1g水淬渣攪拌均勻，再加入100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；第二組，稱(chēng)取450g常規(guī)土，與1g水淬渣與1g青霉LX-ZJ-2孢子粉(孢子粉活菌數(shù)為3×109個(gè)/克)，攪拌均勻，加100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；上述兩組樣品放置12天，取土樣，自然陰干，采用常規(guī)鉬藍(lán)比色法和土壤交換性鈣鎂檢測(cè)方法，檢測(cè)這些土壤樣品中的水溶性硅和交換性鈣。其結(jié)果列于表6中。表6：土壤樣品中水溶性硅和交換性鈣檢測(cè)結(jié)果第一組第二組提高％交換性鈣，g/kg6.997.598.6％水溶性硅，g/kg235.71283.0220.5％實(shí)施例3：水淬渣中硅和鈣元素活化處理該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：A、青霉LX-ZJ-2孢子粉制備①PDA培養(yǎng)基制備:配制含有20g/l蔗糖、200g/l土豆、20g/l瓊脂、自然pH的水溶液，讓該水溶液在溫度121℃下滅菌30min，得到PDA培養(yǎng)基；②青霉培養(yǎng)：挑取一環(huán)青霉LX-ZJ-2接種于步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下斜面培養(yǎng)3天，得到一種青霉培養(yǎng)物；③孢子粉制備：挑取一環(huán)步驟②得到的青霉培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種至步驟①制備的PDA培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中在溫度28℃下平板培養(yǎng)4天，得到青霉LX-ZJ-2孢子粉，它再與90目干稻草粉吸附載體混合均勻，讓青霉LX-ZJ-2孢子粉完全吸附在干稻草粉上；④孢子粉活菌計(jì)數(shù)：采用常規(guī)活菌計(jì)數(shù)方法對(duì)步驟③得到的PDA平板培養(yǎng)物孢子粉進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，該孢子粉活菌數(shù)是2.6×109個(gè)/克；B、水淬渣預(yù)處理使用粉碎設(shè)備將水淬渣粉碎至200目；C、活化處理按照孢子粉：水淬渣：土壤的重量比為1：1.2：550，先讓步驟A得到的活菌數(shù)為2.6×109個(gè)/克的青霉LX-ZJ-2孢子粉與步驟B得到的水淬渣粉混合均勻，再與過(guò)2毫米篩的秦皇島撫寧水稻土混合均勻，以使所述土壤中青霉LX-ZJ-2活菌數(shù)達(dá)到106個(gè)/克；下面平行地進(jìn)行兩組水淬渣土壤實(shí)驗(yàn)：第一組，稱(chēng)取500g常規(guī)土，與1.2g水淬渣攪拌均勻，再加入100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；第二組，稱(chēng)取500g常規(guī)土，與1.2g水淬渣與1g青霉LX-ZJ-2孢子粉(孢子粉活菌數(shù)為2.6×109個(gè)/克)，攪拌均勻，加100ml水，室溫放置，保持濕潤(rùn)；上述兩組樣品放置12天，取土樣，自然陰干，采用常規(guī)鉬藍(lán)比色法和土壤交換性鈣鎂檢測(cè)方法，檢測(cè)這些土壤樣品中的水溶性硅和交換性鈣。其結(jié)果列于表7中。表7：土壤樣品中水溶性硅和交換性鈣檢測(cè)結(jié)果第一組第二組提高％交換性鈣，g/kg6.887.498.9％水溶性硅，g/kg232.61273.6717.7％當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3