本發(fā)明屬于生物技術及飼料加工領域，具體涉及一種魚蛋白小肽螯合鋅的制備方法。技術背景鋅是動物必須的微量元素之一，以骨骼、肝臟、毛皮等組織器官含量最高。鋅與體內的300多種酶和功能蛋白組成有關。鋅的種類有無機鋅、有機鋅、螯合鋅，第一代補鋅劑，硫酸鋅等無機試劑，對胃腸有刺激作用，生物學效價較低。第二代補鋅劑，葡萄糖酸鋅、乳酸鋅等，其性能優(yōu)于第一代鋅補劑，而第三次補鋅劑是氨基酸螯合鋅和多肽螯合鋅，研究表明，所有螯合鋅能以肽/氨基酸的形式被吸收，其結構中的金屬離子能直接通過腸絨毛，以胞飲形式被吸收。螯合物還能直接通過細胞膜，以載體的形式促進微量元素的吸收和利用，其生物利用率高于無機鋅和有機鋅，并能有效促進動物生長。添加到飼料中適口性好，還具有抗應激和抗病能力，還能減少環(huán)境污染。小肽的轉運系統(tǒng)和氨基酸相比，具有耗能低、轉運速度快和不易被飽和的特點，可提高氨基酸的利用率，促進蛋白質的合成和礦物質元素的吸收等。因此，鋅與小肽螯合物是一種補鋅的功能性營養(yǎng)強化劑。我國海水養(yǎng)殖產(chǎn)量居世界前列，產(chǎn)生大量的魚皮，魚骨，魚內臟等下腳料，含有較高的蛋白質，直接丟棄不僅污染環(huán)境，而且造成資源嚴重浪費；通過資源合理化高值利用，利用酶解技術將得到的魚蛋白小肽與鋅在一定條件下進行螯合，制備出的魚蛋白小肽螯合鋅可以不僅可以補充動物需要的氨基酸和鋅，還可以大大提高魚下腳料的附加值。技術實現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有工藝制備螯合鋅，螯合過程不易控制，螯合時間長，螯合率低的問題。本發(fā)明提供了一種魚蛋白小肽螯合鋅的制備方法，采用超聲處理，制備工藝步驟簡單，能有效控制螯合過程，螯合時間短，操作簡便，螯合率高。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術手段：一種魚蛋白小肽螯合鋅的制備方法，包括如下步驟：（1）將魚蛋白小肽溶于水中后，將pH調節(jié)至5.0~5.5，得小肽溶液；在pH5.0~5.5時，魚蛋白小肽螯合鋅螯合率較高；（2）在小肽溶液中加入鋅鹽，充分溶解，升溫至30~40°C，超聲反應15-20min得反應液，其中鋅鹽中的Zn2+與魚蛋白小肽的質量比為1:2~1:3;（3）將反應液過濾后濃縮至原體積的30%~50%，噴霧干燥后得魚蛋白小肽螯合鋅；（4）小肽鋅螯合率的計算：準確移取螯合鋅濃縮液10ml于100ml容量瓶中，定容，搖勻。用EDTA絡合滴定法測定微量元素的總量。另移取螯合鋅濃縮液10ml于100ml燒杯中，加熱濃縮至干。加入50ml無水乙醇，充分攪拌后離心分離，將沉淀用水溶解后定容，搖勻。采用EDTA滴定法測定螯合態(tài)微量元素的含量。EDTA滴定法：準確移取25ml試液于250ml錐形瓶中，加入50ml水，滴加2~3滴二甲酚橙作指示劑，用0.02mol/lEDTA標準溶液滴定，溶液顏色由紫紅變?yōu)榱咙S色即為滴定終點。螯合率/%=×100=（CV1/CV0）×100=（CV1/CV0）×100C-EDTA溶液的濃度，mol/l；V1-滴定螯合鋅所消耗的EDTA溶液體積，ml；V0-滴定鋅的總量所消耗的EDTA溶液體積，ml；進一步地，本發(fā)明還提供了上述制備方法的優(yōu)選條件，如優(yōu)選步驟（1）小肽溶液中魚蛋白小肽的質量百分含量為20%~30%。所述的優(yōu)選步驟（2）鋅鹽為氯化鋅或硫酸鋅。所述的優(yōu)選步驟（2）超聲條件為超聲時間5-10秒，間隙時間2-5秒，超聲功率100~400W，利用超聲處理有利于螯合液中魚蛋白小肽與Zn2+的充分接觸，均勻混合，大大提高螯合速率與螯合物的得率。本發(fā)明的第一目的在于保護上述制備方法得到的魚蛋白小肽螯合鋅，可借助小肽的吸收特點和機制以螯合物整體的形式通過小腸被主動吸收，可促進鋅的吸收，并增強體內酶的活性，增強抗病免疫力等。本發(fā)明的第二目的在于保護上述魚蛋白小肽螯合鋅作為飼料添加劑的應用，由于采用小肽螯合技術，對胃腸無刺激，能夠有利于動物吸收，可作為動物功能營養(yǎng)補鋅劑應用于動物飼料中。本發(fā)明的優(yōu)點在于：制備工藝步驟簡單，能有效控制螯合過程，螯合時間短，操作簡便，螯合率高。具體實施方式實施例1（1）將魚蛋白小肽溶解后，調節(jié)pH至5.0~5.5，得小肽溶液，小肽溶液的質量百分含量為20%。（2）在小肽溶液中加入氯化鋅，氯化鋅與小肽溶液的質量比為1:2，充分溶解，升溫至35°C，超聲反應15min，超聲條件超聲時間為5秒，間隙時間2秒，超聲功率70%。（3）將反應液過濾后濃縮至原體積的40%，噴霧干燥后得魚蛋白小肽螯合鋅。經(jīng)檢測，本實施例中魚蛋白小肽螯合鋅的螯合率為98.2%，鋅含量為15.7%。按照楊會成《一種魚皮膠原蛋白多肽螯合鋅的制備工藝》中的制備方法測得的魚皮膠原蛋白多肽與鋅的螯合率為85.4%。采用本專利方法比文獻報道的螯合鋅得率高。實施例2小肽螯合鋅補鋅效果研究做小鼠缺鋅模型，硫酸鋅組、葡萄糖酸鋅、小肽螯合鋅每天給藥量為7.00mgZn/kg.bw，連續(xù)灌胃14天。與缺鋅組相比，小肽鋅組具有顯著差異，在補鋅劑量相同條件下，小鼠血清鋅含量，小肽鋅組>葡萄糖酸鋅組>硫酸鋅組。表1小肽螯合鋅補鋅效果研究組別缺鋅組小肽鋅組葡萄糖酸鋅組硫酸鋅組鋅含量（μg/g）28.92±1.3737.09±0.52**34.30±1.2232.51±1.53注：與缺鋅組相比，*p<0.05，**p<0.01。實施例3小肽螯合鋅抗氧化效果研究做小鼠缺鋅模型，硫酸鋅組、葡萄糖酸鋅、小肽螯合鋅每天給藥量為7.00mgZn/kg.bw，連續(xù)灌胃14天。測定小鼠肝組織中總抗氧化能力。與缺鋅組相比，小肽鋅組具有顯著差異，在補鋅劑量相同條件下，小鼠肝臟總抗氧化能力的大小順序為，小肽鋅組>葡萄糖酸鋅組>硫酸鋅組。說明在補鋅劑量相同的條件下，小肽鋅優(yōu)于葡萄糖酸鋅和硫酸鋅。表2小肽螯合鋅抗氧化效果研究總抗氧化能力缺鋅組小肽鋅組葡萄糖酸鋅組硫酸鋅組U/mg0.438±0.0450.951±0.042**0.496±0.0520.485±0.054注：與缺鋅組相比，*p<0.05，**p<0.01。當前第1頁1 2 3