本申請(qǐng)涉及一種從含有肉蓯蓉的原料中浸取多糖和苯乙醇苷的方法，屬于天然產(chǎn)物有效成分的分離提取領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：肉蓯蓉屬列當(dāng)科，別名大蕓、寸蕓、蓯蓉、查干告亞(蒙語(yǔ))。肉蓯蓉是一種寄生在沙漠樹(shù)木梭梭根部的寄生植物，具有極高的藥用價(jià)值。肉蓯蓉中含有補(bǔ)腎陽(yáng)的苯乙醇苷類、滋腎陰的環(huán)稀醚萜類化合物，能夠既補(bǔ)腎陰，又補(bǔ)腎陽(yáng)，陰陽(yáng)平補(bǔ)，補(bǔ)而不峻、溫而不燥，不會(huì)上火。據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，肉蓯蓉屬于一種能興奮垂體、腎上腺皮質(zhì)或有類似腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的名貴藥材，多糖在其提取物中含量較高，多糖成分的免疫增強(qiáng)作用在肉蓯蓉的強(qiáng)壯和補(bǔ)益效用中發(fā)揮著主要的影響。目前生物物質(zhì)的提取和分離經(jīng)常采用雙水相萃取方法，該方法雖然具有條件溫和、容易放大和可連續(xù)操作的優(yōu)點(diǎn)，但是由于采用與水互溶的有機(jī)溶劑和鹽構(gòu)成的雙水相萃取體系，存在溶劑易揮發(fā)、環(huán)境污染大、以及選擇性低的缺點(diǎn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：根據(jù)本申請(qǐng)的一個(gè)方面，提供一種浸取多糖和苯乙醇苷的方法或者一種多糖和苯乙醇苷的制備方法，以肉蓯蓉等為原料，先用冷水對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理，再用熱水提取多糖和苯乙醇苷。該方法具有簡(jiǎn)單、易操作、提取分離速度快、不需要揮發(fā)性有機(jī)溶劑、環(huán)境污染小的優(yōu)點(diǎn)。所述浸取多糖和苯乙醇苷的方法，其特征在于，先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中預(yù)處理后，再用80～100℃的熱水進(jìn)行浸取。優(yōu)選地，所述冷水中預(yù)處理和熱水浸取過(guò)程在超聲下和/或微波下進(jìn)行。所述冷水中預(yù)處理和熱水浸取過(guò)程，在采用配備有微波裝置和超聲探頭的容器中進(jìn)行。冷水中預(yù)處理和熱水浸取過(guò)程中，微波裝置和超聲探頭可同時(shí)打開(kāi)、同時(shí)關(guān)閉或者僅打開(kāi)其中的一個(gè)。作為一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中用超聲波預(yù)處理后，再用80～100℃的熱水進(jìn)行浸取。作為一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中預(yù)處理后，再用80～100℃的熱水中在超聲波下進(jìn)行浸取。作為一個(gè)進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中用超聲波預(yù)處理后，用80～100℃的熱水中在超聲波下進(jìn)行浸取。作為一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中用微波預(yù)處理后，再用80～100℃的熱水進(jìn)行浸取。作為一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中預(yù)處理后，再用80～100℃的熱水中在微波下進(jìn)行浸取。作為一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將含有肉蓯蓉的原料置于0℃～30℃的冷水中用微波預(yù)處理后，用80～100℃的熱水中在微波下進(jìn)行浸取。作為一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述方法為先將鎖陽(yáng)片置于0℃～30℃的冷水中用超聲預(yù)處理后，用80～100℃的熱水中在微波下和超聲下進(jìn)行浸取。優(yōu)選地，所述超聲波頻率范圍為20kHz～50kHz。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述超聲波頻率范圍為22kHz～30kHz。優(yōu)選地，所述超聲功率密度為5W/L～100W/L。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述超聲功率密度為20W/L～40W/L。優(yōu)選地，所述微波頻率范圍為2GHz～3GHz。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述微波頻率范圍為2.4GHz～2.5GHz。優(yōu)選地，所述微波功率密度為100W/L～500W/L。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述微波功率密度為200W/L～300W/L。本申請(qǐng)中，所述功率密度為單位重量處理物料(液固相總重量)上施加的超聲或微波的功率，單位為W/kg。優(yōu)選地，所述原料中含有枸杞子和/或大棗；原料中肉蓯蓉、枸杞、大棗的質(zhì)量比例為：肉蓯蓉：枸杞：大棗＝40～100:10～70:60～120。優(yōu)選地，對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理的冷水的溫度為0～25℃。進(jìn)一步優(yōu)選地，對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理的冷水的溫度為0～10℃。優(yōu)選地，對(duì)原料進(jìn)行浸取的熱水的溫度為80～95℃。進(jìn)一步優(yōu)選地，對(duì)原料進(jìn)行浸取的熱水的溫度為80～90℃。作為一種實(shí)施方式，所述浸取多糖和苯乙醇苷的方法，其特征在于，至少包括以下步驟：(a)將原料置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超聲中浸泡不少于30min，得到體系I；(b)加熱步驟(a)所得體系I至80℃～100℃，并于超聲和/或微波下保持體系溫度80℃～100℃不少于30min，得到體系II；(c)分離體系II中的固相和液相，液相記為提取液I，固相記為固體I；將提取液I置于0～10℃不少于24h后，經(jīng)濾渣、真空濃縮后，即得多糖和苯乙醇苷提取物的粗品。上述實(shí)施方式中，優(yōu)選地，步驟(a)中原料與水的質(zhì)量比例＝1:5～9。進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟(a)中原料與水的質(zhì)量比例＝1:6～8。作為一種實(shí)施方式，所述浸取多糖和苯乙醇苷的方法，至少包括以下步驟：(a)將原料置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超聲中浸泡不少于30min，得到體系I；(b)加熱步驟(a)所得體系I至80℃～100℃，并于超聲和/或微波下保持體系溫度80℃～100℃不少于30min，得到體系II；(c)分離體系II中的固相和液相，液相記為提取液I，固相記為固體I；(d)將固體I置于80～100℃的水中，并于超聲和/或微波下保持體系溫度80℃～100℃不少于20min，得到體系III；(e)分離體系III中的固相和液相，液相記為提取液II，固相記為固體II；將提取液II與步驟(c)所得的提取液I混合并置于2～8℃不少于24h后，經(jīng)濾渣、真空濃縮后，即得多糖和苯乙醇苷類化合物的粗品。作為一種實(shí)施方式，所述浸取多糖和苯乙醇苷的方法，至少包括以下步驟：(a)將原料置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超聲中浸泡不少于30min，得到體系I；(b)加熱步驟(a)所得體系I至80℃～100℃，并于超聲和/或微波下保持體系溫度80℃～100℃不少于30min，得到體系II；(c)分離體系II中的固相和液相，液相記為提取液I，固相記為固體I；(d)將固體I置于80～100℃的水中，并于超聲和/或微波下保持體系溫度80℃～100℃不少于20min，得到體系III；(e)分離體系III中的固相和液相，液相記為提取液II，固相記為固體II；(f)將固體II置于80～100℃的水中，并于超聲和/或微波下保持體系溫度80℃～100℃不少于10min，得到體系IV；(g)分離體系IV中的固相和液相，液相記為提取液III，固相記為固體III；將提取液III與步驟(c)所得的提取液I、步驟(e)所得提取液II混合并置于2～8℃不少于24h后，經(jīng)濾渣、真空濃縮后真空濃縮后，即得多糖與苯乙醇苷的粗品。上述實(shí)施方式中，優(yōu)選地，步驟(a)中原料與水的質(zhì)量比例＝1:5～7。進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟(a)中原料與水的質(zhì)量比例＝1:6。優(yōu)選地，步驟(d)中固體I與水的質(zhì)量比例＝1:4～6。進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟(d)中固體I與水的質(zhì)量比例＝1:5。優(yōu)選地，步驟(f)中固體II與水的質(zhì)量比例＝1:3～5。進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟(f)中固體II與水的質(zhì)量比例＝1:4。優(yōu)選地，步驟(b)、步驟(d)和步驟(f)中水的溫度為80～95℃。步驟(b)、步驟(d)和步驟(f)中水的溫度為80～90℃。優(yōu)選地，步驟(a)中浸泡時(shí)間為30min～2h。作為一種具體的實(shí)施方式，步驟(a)中的浸泡時(shí)間為1小時(shí)。優(yōu)選地，步驟(b)中的保持時(shí)間為30min～2h。作為一種具體的實(shí)施方式，步驟(b)中的保持時(shí)間為60min。優(yōu)選地，步驟(d)中的保持時(shí)間為20min～1h。作為一種具體的實(shí)施方式，步驟(b)中的保持時(shí)間為40min。優(yōu)選地，步驟(f)中的保持時(shí)間為10min～1h。作為一種具體的實(shí)施方式，步驟(b)中的保持時(shí)間為30min。作為一種實(shí)施方式，所述浸取肉蓯蓉等原料中多糖和苯乙醇苷的方法，其特征在于，采用多級(jí)錯(cuò)流浸取，至少包括以下步驟：(a)將原料置于0℃～30℃的水中，浸泡不少于30min，得到體系I；(b)加熱步驟(a)所得體系I在80℃～100℃，并于超聲和/或微波下進(jìn)行多級(jí)錯(cuò)流浸取，每級(jí)浸取時(shí)間不少于30min；(c)收集并混合步驟(b)中多級(jí)浸取后的各級(jí)液相，并置于0～10℃不少于24h后，經(jīng)濾渣、真空濃縮后，即得多糖和苯乙醇苷的粗品。優(yōu)選地，所述多級(jí)錯(cuò)流浸取為三級(jí)錯(cuò)流浸取，其中：第一級(jí)浸取中原料與水的質(zhì)量比例＝1:5～9；第二級(jí)浸取中原料與水的質(zhì)量比例＝1:4～7；第三級(jí)浸取中原料與水的質(zhì)量比例＝1:4～7。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述多級(jí)錯(cuò)流浸取為三級(jí)錯(cuò)流浸取，其中：第一級(jí)浸取中原料與水的質(zhì)量比例＝1:6～8；第二級(jí)浸取中原料與水的質(zhì)量比例＝1:5～6；第三級(jí)浸取中原料與水的質(zhì)量比例＝1:5～6。作為一種實(shí)施方式，所述浸取肉蓯蓉等原料中多糖和苯乙醇苷的方法，其特征在于，采用連續(xù)浸取，至少包括以下步驟：(a)將原料置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超聲中浸泡不少于30min，得到體系I；(b)加熱步驟(a)所得體系I在80℃～100℃，并于超聲和/或微波下中進(jìn)行連續(xù)浸取，原料和水的加料質(zhì)量比為1:3～7；(c)步驟(b)得到的液相提取液置于0～10℃不少于24h后，經(jīng)濾渣、真空濃縮后，即得多糖和苯乙醇苷的粗品。優(yōu)選地，連續(xù)浸取中固相和液相的加料質(zhì)量比為1:4～8。優(yōu)選地，所述連續(xù)浸取為連續(xù)逆流浸取，在逆流移動(dòng)床浸取器中進(jìn)行。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述連續(xù)浸取為連續(xù)逆流浸取，在肯尼迪式浸取器中進(jìn)行。優(yōu)選地，原料中的肉蓯蓉為厚度2～8mm的片狀。進(jìn)一步優(yōu)選地，原料中的肉蓯蓉為厚度3～6mm的片狀。優(yōu)選地，原料中的肉蓯蓉的含水量為1～15wt％。進(jìn)一步優(yōu)選地，原料中的肉蓯蓉的含水量為5～10wt％。優(yōu)選地，步驟(a)中原料與水的質(zhì)量比例＝1:5～8；優(yōu)選地，步驟(a)中原料與水的質(zhì)量比例＝1:6。優(yōu)選地，所述置于真空濃縮罐中濃縮是在溫度70～90℃、壓力0.05～0.07MPa的條件下進(jìn)行真空濃縮。作為一種具體的實(shí)施方式，具體步驟如下：稱取原料：肉蓯蓉40-100重量份、枸杞子10～70重量份、大棗60～120重量份，原料清洗后于超聲中浸泡2～4h后進(jìn)行提取，第一次加冷水(重量是原料6倍)，加熱煮沸后并于微波中保持微沸提取60分鐘，將提取液過(guò)濾取出；第二次加水(重量是原料5倍)，加熱煮沸后并于微波中保持微沸提取40分鐘，將提取液過(guò)濾取出；第三次加水(重量是原料5倍)，加熱煮沸后并于微波中保持微沸提取40分鐘，將提取液過(guò)濾取出。合并三次提取液，將其放置在溫度為0～10℃的環(huán)境中靜置24小時(shí)以上，抽取上清液，過(guò)100目篩進(jìn)行過(guò)濾除去沉淀，將濾液加入真空濃縮罐中，在溫度為70～90℃,真空度為0.05～0.07MPa下進(jìn)行減壓濃縮，至相對(duì)密度為1.30～1.40(60～65℃)，呈粘稠狀時(shí)停止加熱，進(jìn)行無(wú)菌灌裝。根據(jù)本申請(qǐng)的又一方面，提供一種含多糖和苯乙醇苷的組合物，該組合物易溶于熱水，不需另加膠質(zhì)、糖類等材料，高血脂、糖尿病人也可直接食用，能夠?qū)崿F(xiàn)提高免疫力、改善疲勞狀態(tài)的目的。所述含多糖和苯乙醇苷的組合物，是根據(jù)上述任意一項(xiàng)方法制備得到的多糖和苯乙醇苷的粗品；所述多糖和苯乙醇苷的粗品在60～65℃下與水的相對(duì)密度是1.3～1.4。本申請(qǐng)的有益效果包括但不限于：本申請(qǐng)所提供的浸取多糖和苯乙醇苷的方法，具有簡(jiǎn)單、易操作、提取分離速度快、不需要揮發(fā)性有機(jī)溶劑、環(huán)境污染小、對(duì)多糖和苯乙醇苷選擇性高的優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)本申請(qǐng)所述方法制備得到的多糖和苯乙醇苷的組合物，易溶于熱水，不需另加膠質(zhì)、糖類等材料，高血脂、糖尿病人也可直接食用，能夠?qū)崿F(xiàn)提高免疫力、改善疲勞狀態(tài)的目的。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例詳述本申請(qǐng)，但本申請(qǐng)并不局限于這些實(shí)施例。實(shí)施例中，采用的原料肉蓯蓉為阿拉善荒漠肉蓯蓉，枸杞子為寧夏中寧枸杞。實(shí)施例中，多糖和苯乙醇苷粗品中的總多糖含量，采用硫酸-苯酚比色法測(cè)定。實(shí)施例中，多糖和苯乙醇苷粗品中的苯乙醇苷含量，采用《中國(guó)藥典》一部中肉蓯蓉含量測(cè)定方法高效液相色譜法測(cè)定。實(shí)施例中，樣品中的微生物指標(biāo)采用GB4789《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》測(cè)定實(shí)施例1稱取含有肉蓯蓉、枸杞子和大棗的原料加冷水，于超聲波或微波下(具體見(jiàn)表1)浸泡一段時(shí)間后，加熱體系至某一溫度并于超聲波或微波下(具體見(jiàn)表1)保持一段時(shí)間(第一次熱水提取)，離心分離得到固體I和提取液I；向固體I中加入一定量的水，加熱至某一溫度并保持一段時(shí)間(第二次熱水提取)，離心分離得到固體II和提取液II；向固體II中加入一定量的水，加熱至某一溫度并保持一段時(shí)間(第三次熱水提取)，離心分離得到固體III和提取液III。合并提取液I、提取液II和提取液III，將其放置在溫度為0～10℃的環(huán)境中靜置24小時(shí)，過(guò)100目篩過(guò)濾除去沉淀，將濾液加入真空濃縮罐中，在某一溫度和壓力下，將所有濾液濃縮至粘稠狀倒出，得到所述多糖和苯乙醇苷的粗品。所得多糖和苯乙醇苷粗品的樣品編號(hào)與具體超聲波、微波處理的條件見(jiàn)表1所示，其中，樣品編號(hào)G2的第二次熱水提取采用同第一次熱水提取相同的微波處理?xiàng)l件，樣品編號(hào)G3的第二次和第三次熱水提取采用同第一次熱水提取相同的微波處理?xiàng)l件。表1樣品編號(hào)預(yù)處理方式熱水處理方式G1超聲波(20kHz，100W/kg)微波(2.4GHz，300W/kg)G2超聲波(25kHz，40W/kg)微波(2.5GHz，200W/kg)G3超聲波(30kHz，30W/kg)微波(2.45GHz，250W/kg)所得多糖和苯乙醇苷的粗品的樣品編號(hào)與具體反應(yīng)條件的關(guān)系詳見(jiàn)表2。表2實(shí)施例2按照實(shí)施例1中G1的原料配比稱取肉蓯蓉、枸杞子和大棗，加冷水于10℃于超聲波(22kHz，40W/kg)中浸泡1h后，加熱至85℃開(kāi)始在肯尼迪式浸取器中進(jìn)行連續(xù)逆流浸取，固相和液相的加料質(zhì)量比為1:5，所得樣品記為G2。實(shí)施例3對(duì)樣品G1～G3中的不溶物和菌落總數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，所得產(chǎn)品的參數(shù)如表3所示，G1的出膏率為46％，總固體為70.3wt％。表3對(duì)樣品G1～G3中的苯乙醇苷和總多糖含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果如表4所示。表4樣品編號(hào)多糖含量苯乙醇苷含量G140.80％21.6mg/mlG237.23％25.4mg/mlG335.60％23.8mg/ml由表4數(shù)據(jù)可以看出，根據(jù)本申請(qǐng)所述方法對(duì)多糖和苯乙醇苷有很好的選擇性。以上所述，僅是本申請(qǐng)的幾個(gè)實(shí)施例，并非對(duì)本申請(qǐng)做任何形式的限制，雖然本申請(qǐng)以較佳實(shí)施例揭示如上，然而并非用以限制本申請(qǐng)，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員，在不脫離本申請(qǐng)技術(shù)方案的范圍內(nèi)，利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容做出些許的變動(dòng)或修飾均等同于等效實(shí)施案例，均屬于技術(shù)方案范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3