桂花苯乙醇苷提取物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種桂花苯乙醇苷提取物；該桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為30～90%（重量%），所述苯乙醇總苷包括毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25～80%（重量%），苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1～300:1。本發(fā)明還同時公開了上述桂花苯乙醇苷提取物的制備方法以及該桂花苯乙醇苷提取物的用途：用于制備防治糖尿病的食品、藥物或保健品。
【專利說明】桂花苯乙醇苷提取物及其制備方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)副產(chǎn)品精深加工及綜合利用領(lǐng)域。更具體地涉及一種從桂花中提取的苯乙醇苷提取物及其制法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002]桂花，又名木樨、巖桂，是中國傳統(tǒng)十大花卉之一，廣泛栽種于淮河流域及以南地區(qū)，目前我國已形成浙江杭州、安徽六安、湖北咸寧、湖南桃源、江蘇蘇州、廣西桂林、湖北武漢和四川成都等幾大桂花商品生產(chǎn)基地。桂花品種繁多，大約有152個品種，可分為四個品系，即四季桂、丹桂、銀桂、金桂。桂花除了觀賞美化以外，還具有較高的營養(yǎng)和藥用價值。中醫(yī)認(rèn)為桂花為百藥之長，用桂花釀制的酒開胃醒神、健胃補(bǔ)虛，能達(dá)到“飲之壽千歲”的功效，桂花茶具有美容養(yǎng)顏、舒緩喉嚨、改善多痰咳嗽等功效。桂花還被做成糯米桂花藕、桂花糕、桂花杏仁豆腐等美食，為廣大老百姓所喜歡。
[0003]然而，迄今為止人們對桂花中的許多功能成分的研究還非常少，主要集中在桂花賦香成分和少數(shù)幾個藥用成分，如芳樟醇、Y -癸內(nèi)酯、β -紫羅蘭酮、4-氫-β -紫羅蘭酮、棕櫚酸、α-亞麻酸。還有部分對桂花中的黃酮類組分和多酚類組分進(jìn)行分離提取純化的研究，但僅限于粗提物的研究，未見單體化合物的分析。
[0004]本發(fā)明人前期的發(fā)明專利201310169455.1公開了一種桂花多酚提取物，其酚酸的重量含量為0.5%~2% ，苯乙醇苷的重量含量為50%~80%，其中綠原酸的重量含量為40%~70%，綠原酸、咖啡酸及對香豆酸質(zhì)量比為25~50:5~15:6~10，苯乙醇苷中毛蕊花苷的重量含量為80%~95% ;同時該專利還公開了一種制備方法-高壓微波提取法。但是隨著研究的深入，我們發(fā)現(xiàn)桂花中還含有除了毛蕊花糖苷外的其他的苯乙醇苷類化合物。此外，傳統(tǒng)的桂花多酚提取中，沒有關(guān)注苯乙醇苷化合物的穩(wěn)定性，因此提取得率和提取物純度有所影響，因此，需要在提取過程中采取措施防止苯乙醇苷的氧化和分解。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種含有異毛蕊花糖苷的桂花苯乙醇苷提取物及其制備方法和用途。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種桂花苯乙醇苷提取物，桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為30~90% (重量％)，所述苯乙醇總苷包括毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。
[0007]作為本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物的改進(jìn):桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80% (重量％)，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~300:1。
[0008]備注說明:毛蕊花糖苷約占苯乙醇總苷含量的90%左右。
[0009]作為本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物的經(jīng)營改進(jìn):桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為40~80% ;[0010]所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為35~70%，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~150:1 (例如為48:1，77:1，80~150:1)。
[0011]本發(fā)明還同時提供了上述桂花苯乙醇苷提取物的制備方法，包括以下步驟:
[0012](a)、將桂花干花(水分含量< 10%)破碎(約20~40目的粉末)，加入至乙醇水溶液中，再加入抗氧化劑或抗氧化劑的水溶液，然后加入弱酸直至pH為4~6，得提取溶液；
[0013]所述乙醇水溶液中乙醇的體積濃度為30~99.9% (v/v);上述濃度較佳為50~90% ；
[0014]所述每IKG桂花干花配用10~15L的乙醇水溶液；
[0015]所述抗氧化劑與桂花干花的重量比為:0.05~10% ;上述重量比較佳為0.2% ；
[0016](b)、將提取溶液于50~80°C下進(jìn)行浸提1.5~3.0小時,冷卻至室溫后,過濾或離心，得到提取液；
[0017](C)、將提取液直接經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再將濃縮液用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為4-6 ；
[0018](d)、將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附，用體積濃度為20~50%的乙醇水溶液洗脫；
[0019](e)、洗脫液減壓濃縮后，干燥(噴霧干燥、低壓烘干或微波干燥)，得到桂花苯乙醇苷提取物。
[0020]作為本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法的改進(jìn):`[0021]所述抗氧化劑為抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉、維生素E、類胡蘿卜素、竹葉抗氧化劑或茶多酚；
[0022]所述弱酸為甲酸、乙酸、羥基乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、富馬酸、抗壞血酸、肉桂酸、苯甲酸、阿魏酸、咖啡酸、沒食子酸或磷酸。
[0023]作為本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法的進(jìn)一步改進(jìn):桂花為金桂、銀桂、四季桂或丹桂。
[0024]作為本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，為以下任意一種方法:
[0025]方法一、包括以下步驟:
[0026](a)、將Ikg丹桂干花(水分含量< 10%)破碎至能過20目的篩，加入至IOL體積濃度為90%的乙醇水溶液中，再加入竹葉抗氧化物溶液2L，利用lmol/L乙酸水溶液調(diào)整pH為5，得提取溶液；
[0027]每升竹葉抗氧化物溶液中含有Ig竹葉抗氧化物；
[0028](b)、將提取溶液于50~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾或離心，得到提取液；
[0029](C)、將提取液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的pH 為 4 ;
[0030](d)、將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫；
[0031](e)、洗脫液減壓濃縮后，經(jīng)噴霧干燥、低壓烘干或微波干燥，得到桂花苯乙醇苷提取物；
[0032]方法二、包括以下步驟:
[0033](a)、將Ikg金桂干花破碎(含水率< 10%)破碎至能過20目的篩，加入至15L體積濃度為80%乙醇水溶液中，再加入異抗壞血酸鈉水溶液2L，利用lmol/L甲酸水溶液調(diào)整提取溶液PH為5，得提取溶液；
[0034]每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有Ig異抗壞血酸鈉；
[0035](b)、將提取溶液于50~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾或離心，得到提取液；
[0036](C)、將提取液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的PH 為 5 ;
[0037](d)、將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫；
[0038](e)、洗脫液減壓濃縮后，經(jīng)噴霧干燥、低壓烘干或微波干燥，得到桂花苯乙醇苷提取物。
[0039]本發(fā)明還同時提供了利用上述桂花苯乙醇苷提取物制備而得的組合物:所述組合物種含有0.01~99.9被％的桂花苯乙醇苷提取物，余量為載體。
[0040]作為本發(fā)明的組合物的改進(jìn):組合物是藥物組合物、保健品組合物、食品組合物或化妝品組合物。
[0041]本發(fā)明還同時提供了上 述桂花苯乙醇苷提取物的用途:用于制備防治糖尿病的食品、藥物或保健品。
[0042]在本發(fā)明中，室溫一般是指10~25。°C
[0043]本發(fā)明人經(jīng)過多年深入研究，對桂花的各種成分進(jìn)行了提取分離，獲得了一種可有效防治糖尿病的提取物，對該提取物的研究表明，該提取物主要含毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷等成分。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0044]如本文所用，桂花(Osmanthus fragrans)指桂花樹的花朵。
[0045]本發(fā)明采用的原料可以進(jìn)行預(yù)處理，也可以不經(jīng)過預(yù)處理。一種優(yōu)選原料是粉末形式的桂花。例如，收集鮮桂花，打成漿壓榨或收集桂花干花，將其粉碎到約20~40目的粉末。
[0046]可用于本發(fā)明的桂花品種沒有特別限制，可以是不同品種的桂花，優(yōu)選金桂、銀桂、四季桂、丹桂。
[0047]如本文所用，“本發(fā)明的活性物質(zhì)”指桂花苯乙醇苷提取物。較佳地，該桂花苯乙醇苷提取物含有30~90%苯乙醇總苷；桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80%(重量％)，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~300:1。
[0048]如本文所用，“本發(fā)明的活性物質(zhì)制劑”或“本發(fā)明的活性組合物”指含有桂花苯乙醇苷提取物的組合物，包括藥物組合物和保健品組合物。
[0049]本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物是一種以毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷為主的混合物。用分光光度法檢測，以毛蕊花糖苷為標(biāo)準(zhǔn)品，測得提取物中苯乙醇總苷的含量為30~90%(較佳地為40~80% );用HPLC技術(shù)分析，提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80%(較佳地為35~70% )，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷含量之比為48:1~300:1 (較佳地為48:1~150:1)。
[0050]本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物具有防治糖尿病的有益功效，因此可用于制備相關(guān)的藥物、保健品。因此，本發(fā)明還提供了一種含有本發(fā)明的桂花苯乙醇苷提取物作為有效成份的組合物(包括藥物組合物、保健品組合物和食品組合物等)。這些組合物可用于預(yù)防、治療或輔助治療糖尿病。
[0051]在獲得桂花苯乙醇苷提取物后，可用常規(guī)方法將其與藥學(xué)上、食品學(xué)上或保健品或化妝品上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑相混合，形成本發(fā)明的藥物組合物、食品組合物或保健品組合物。這類載體包括(但并不限于):鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。
[0052]以藥物組合物或保健品組合物為例，它們可以為固態(tài)(如顆粒劑、片劑、凍干粉、栓劑、膠囊、舌下含片)或液態(tài)(如口服液)或其他合適的形狀。本發(fā)明的活性成分(桂花苯乙醇苷提取物)的含量通常為組合物重量的I~99%，較佳地為5~90%，更佳地為10~85%，最佳地20~80%。藥物組合物可以為單劑或多劑形式。按施用劑量計，通常含有10~2000mg/劑，較佳地約20~1000mg/劑，更佳地50~500mg/劑。
[0053]本發(fā)明的藥物組合物可以通過常規(guī)途徑進(jìn)行給藥，優(yōu)選方式是口服。藥物制劑應(yīng)與給藥方式相匹配。本發(fā)明藥物的施用量，按桂花苯乙醇苷提取物計算，通常為每天約
0.1~500mg/kg體重,較佳地約0.5~200mg/kg體重。此外,本發(fā)明的制劑還可與其他治療劑一起使用。
[0054]本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)是:
[0055](a)提供了一種來源廣闊、組成明晰、品質(zhì)優(yōu)良、質(zhì)量可控、用途廣泛并具有預(yù)防糖尿病的桂花苯乙醇苷提取物。
[0056](b)通過本發(fā)明技術(shù)實(shí)現(xiàn)了桂花中苯乙醇總苷的高效提取，并且工藝操作簡便，得到的桂花苯乙醇苷提取物質(zhì)量好，品質(zhì)穩(wěn)定。
【專利附圖】

【附圖說明】
`[0057]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0058]圖1是桂花苯乙醇苷提取物的液相色譜圖。
[0059]圖2是毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的液相色譜圖。
[0060]圖3是毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0061]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。
[0062]通用方法
[0063]I)苯乙醇總苷含量測定:
[0064]將50.0mg桂花苯乙醇苷提取物溶解于甲醇,定容至100ml,取3ml加入石英比色皿中用紫外分光光度計在338nm處檢測其吸光值，重復(fù)測定3次，以毛蕊花糖苷為標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到苯乙醇總苷含量。
[0065]2)桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷含量測定-高效液相色譜(HPLC):
[0066]桂花苯乙醇苷提取物加入2% (體積％)乙酸溶液溶解，制成500 μ g/mL溶液，過
0.45 μ m膜，進(jìn)樣。高效液相色譜儀器:島津LC-2010A高效液相，SPD-20A紫外檢測器，BDSC18柱(4.6mmX250mm,5ym 1.d.)，流動相:乙腈:2%醋酸溶液(20:80的體積比)，檢測波長:330nm,流速:0.8mL/min,柱溫:35°C,進(jìn)樣體積10 μ L。以毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷為標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積外標(biāo)法定量。
[0067]實(shí)施例1:
[0068]將Ikg金桂干花破碎(含水率≤10%,破碎至能過20目的篩)，加入15L的80% (體積％)乙醇水溶液中，再加入0.1%的異抗壞血酸鈉水溶液(即，所述每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有Ig異抗壞血酸鈉)2L，利用lmol/L甲酸水溶液調(diào)整提取溶液pH在5左右；在溫度50°C~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾得到提取液；將提取液直接經(jīng)減壓濃縮(于0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約4L)，再用水稀釋，直至稀釋液PH為5左右；將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附(吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30%(體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(于0.010~0.1OOMPa MPa，溫度為75~90°C)后，經(jīng)噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)溫度為180~200°C，出風(fēng)溫度為85~95°C)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末184g。
[0069]對提取物進(jìn)行成分分析，結(jié)果為:桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為75.3%，圖1-3表明，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(69.4%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=77:1 (重量比)。
[0070]對比例1-1 、將實(shí)施例1中的“15L的80% (體積％)乙醇水溶液”改成“12L的純乙
醇”，其余同實(shí)施例1。
[0071]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末171g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為70.5%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(65.6%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)。
[0072]對比例1-2、將實(shí)施例1中的“15L的80% (體積％)乙醇水溶液”改成“20L的60%(體積％)乙醇水溶液”，其余同實(shí)施例1。
[0073]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末187g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇苷含量為71.2%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(67.3%)和異毛蕊花糖苷(0.8%)。
[0074]對比例2-1、將“0.1%異抗壞血酸鈉水溶液2L”改成:0.04%異抗壞血酸鈉水溶液(即，所述每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有0.4g異抗壞血酸鈉)2L ;其余同實(shí)施例1。
[0075]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末123.Sg。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為25.2%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(23.4%)和異毛蕊花糖苷(0.2%)ο
[0076]對比例2-2、將“0.1% (質(zhì)量％)異抗壞血酸鈉水溶液2L”改成:1.0%異抗壞血酸鈉水溶液(即，所述每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有IOg異抗壞血酸鈉)2L ;其余同實(shí)施例1。
[0077]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末172.7g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為75.3%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(69.4%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)ο
[0078]對比例3-1，將調(diào)節(jié)pH至5改成調(diào)節(jié)3.5，其余同實(shí)施例1。
[0079]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末160.6g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為64.2%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(60.5%)和異毛蕊花糖苷(0.7%)ο
[0080]對比例3-2，將調(diào)節(jié)pH至5改成調(diào)節(jié)6.5，其余同實(shí)施例1。[0081]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末151.9g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為61.1%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(56.8%)和異毛蕊花糖苷(0.7%)ο
[0082]對比例4-1、將“ 50 V~80 V下進(jìn)行浸提2小時”改成“ 30 V~49 V下進(jìn)行浸提4小時”，其余同實(shí)施例1。
[0083]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末142.Sg。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為74%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(68.5%)和異毛蕊花糖苷(0.85%)。
[0084]對比例4-2、將“50°C~80°C下進(jìn)行浸提2小時”改成“90°C~100°C下進(jìn)行浸提2小時”，其余同實(shí)施例1。
[0085]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末194.6g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為70.5%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(66.8%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)ο
[0086]實(shí)施例2:
[0087]將Ikg四季桂干花破碎(含水率≤10%,破碎至能過20目的篩)，加入IOL的90%(體積％)乙醇水溶液中，再加入0.2%抗壞血酸水溶液(即，所述每升抗壞血酸水溶液中含有2g抗壞血酸)2L，利用0.5mol/L乙酸水溶液調(diào)整提取溶液pH在4左右；在溫度50°C~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾得到提取液；將提取液直接經(jīng)減壓濃縮(于0.010~
0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約1.5L)，再用水稀釋，直至稀釋液pH為4左右；將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附(所述吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30% (體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(于0.010~0.1OOMPa MPa，溫度為75~90°C )后，經(jīng)微波干燥(工藝參數(shù)為:微波功率500W，微波輻射時間60min)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末234g。
[0088]對提取物進(jìn)行成分分析，結(jié)果桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為47.3%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(40.5%)和異毛蕊花糖苷(0.2%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=203 (重量比)。
[0089]實(shí)施例3:
[0090]將Ikg丹桂干花破碎(含水率≤10%，破碎至能過20目的篩)，加入至IOL的90%(體積％)乙醇溶液中，再加入0.1%竹葉抗氧化物水溶液(即，所述每升竹葉抗氧化物水溶液中含有Ig竹葉抗氧化物)2L，利用lmol/L乙酸水溶液調(diào)整提取溶液pH在5左右；得提取溶液；將提取溶液在溫度50°C~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾得到提取液；將提取液直接經(jīng)減壓濃縮(于0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約2.5L)，再用水稀釋，直至稀釋液pH為4左右；將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附(所述吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30%(體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(于0.010~0.1OOMPa MPa，溫度為75~90°C )后，經(jīng)微波干燥(工藝參數(shù)為:微波功率500W，微波輻射時間60min)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末258g。
[0091]對提取物進(jìn)行成分分析，結(jié)果桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為74.5%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(68.9%)和異毛蕊花糖苷(1.4%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=48 (重量比)。[0092]實(shí)施例4:
[0093]將Ikg銀桂干花破碎(含水率≤10%，破碎至能過20目的篩)，加入15L的50% (體積％)乙醇溶液中，再加入0.1%抗壞血酸水溶液(即，所述每升抗壞血酸水溶液中含有Ig抗壞血酸)2L，利用lmol/L乙酸水溶液調(diào)整提取溶液pH在4左右，得提取溶液；將提取溶液在溫度50°C~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾，得到提取液；將提取液直接經(jīng)減壓濃縮(于0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約10L)，再用水稀釋，直至稀釋液PH為4左右；將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附(所述吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30% (體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(于0.010~0.1OOMPa MPa,溫度為75~90°C)后，經(jīng)微波干燥(工藝參數(shù)為:微波功率500W，微波輻射時間60min)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末107g。
[0094]對提取物進(jìn)行成分分析，結(jié)果桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為86.1%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(79.3%)和異毛蕊花糖苷(0.3%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=264 (重量比)。
[0095]活性測試?yán)?br> [0096]在以下測試?yán)袦y試實(shí)施例1、 實(shí)施例3、實(shí)施例4的桂花苯乙醇苷提取物防治糖尿病的作用。
[0097]實(shí)施例5:
[0098]正常Wistar大鼠> 100只，適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，隨機(jī)抽取8只作為正常對照組，普通維持飼料喂養(yǎng)，其余大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)4周后，禁食不禁水12小時后，腹腔注射30mg/kg鏈脲佐菌素造模，7天后，尾靜脈采血測血糖，其空腹血糖≥11.lmol/L為2型糖尿病造模成功。棄掉未成模大鼠，將成模大鼠隨機(jī)分為模型對照組(灌胃同體積生理鹽水)、鹽酸二甲雙胍組灌胃0.5g/kg、桂花苯乙醇苷提取物實(shí)施例1、實(shí)施例3、實(shí)施例4組(低、高劑量組以苯乙醇總苷計分別為0.2,0.5g/kg)、201310169455.1的桂花多酚提取物(以總酚+苯乙醇苷計0.5g/kg)、毛蕊花糖苷組灌胃0.5g/kg，每組8只。給藥4周后，腹主動脈取血測空腹血糖。采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，多組間比較以x±s表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，P < 0.05為差異顯著，組間比較采用t檢驗(yàn)，P < 0.05為差異顯著。表1的結(jié)果顯示，用藥前，與正常組相比，模型組大鼠的血糖值顯著升高，說明造模成功。桂花苯乙醇苷提取物實(shí)施例1、實(shí)施例3、實(shí)施例4組、201310169455.1的桂花多酚提取物組和毛蕊花糖苷組、鹽酸二甲雙胍組的各劑量組用藥8周后，均可使糖尿病大鼠的血糖明顯降低，并且用藥前后大鼠的血糖值有顯著性差異(P < 0.05)。高劑量桂花苯乙醇苷提取物能顯著降低大鼠空腹血糖，降低率為47.8%-56.7%，均優(yōu)于同劑量毛蕊花糖苷組和【201310169455.1】的桂花多酚提取物組的降糖功效(44.0%和34.6%)。
[0099]表1桂花苯乙醇苷提取物對糖尿病模型大鼠血糖的影響(0=8,x±s)
[0100]
【權(quán)利要求】
1.桂花苯乙醇苷提取物，其特征在于:桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為30~90% (重量％)，所述苯乙醇總苷包括毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桂花苯乙醇苷提取物，其特征在于:所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80% (重量％)，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~300:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的桂花苯乙醇苷提取物，其特征在于:所述桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為40~80% ； 所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為35~70%，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~150:1。
4.如權(quán)利要求1~3任一所述的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟: (a)、將桂花干花(水分含量<10%)破碎，加入至乙醇水溶液中，再加入抗氧化劑或抗氧化劑的水溶液，然后加入弱酸直至pH為4~6，得提取溶液； 所述乙醇水溶液中乙醇的體積濃度為30~99.9% ； 所述每IKG桂花干花配用10~15L的乙醇水溶液； 所述抗氧化劑與桂花干花的重量比為:0.05~10% ； (b)、將提取溶液于50~80°C下進(jìn)行浸提1.5~3.0小時，冷卻至室溫后，過濾或離心，得到提取液； (C)、將提取液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再將濃縮液用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為4-6 ； (d)、將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附，用體積濃度為20~50%的乙醇水溶液洗脫； Ce),洗脫液減壓濃縮后，干燥，得到桂花苯乙醇苷提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法，其特征在于: 所述抗氧化劑為抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉、維生素E、類胡蘿卜素、竹葉抗氧化劑或茶多酚； 所述弱酸為甲酸、乙酸、羥基乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、富馬酸、抗壞血酸、肉桂酸、苯甲酸、阿魏酸、咖啡酸、沒食子酸或磷酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法，其特征在于:所述桂花為金桂、銀桂、四季桂或丹桂。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的桂花苯乙醇苷提取物的制備方法，其特征在于為以下任意一種方法: 方法一、包括以下步驟: (a)、將Ikg丹桂干花(水分含量<10%)破碎至能過20目的篩，加入至IOL體積濃度為90%的乙醇水溶液中，再加入竹葉抗氧化物溶液2L，利用lmol/L乙酸水溶液調(diào)整pH為5，得提取溶液； 每升竹葉抗氧化物溶液中含有Ig竹葉抗氧化物； (b)、將提取溶液于50~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾或離心，得到提取液； (C)、將提取液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為4 ； (d)、將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫； (e)、洗脫液減壓濃縮后，經(jīng)噴霧干燥、低壓烘干或微波干燥，得到桂花苯乙醇苷提取物； 方法二、包括以下步驟: (a)、將Ikg金桂干花破碎(含水率<10%)破碎至能過20目的篩，加入至15L體積濃度為80%乙醇水溶液中，再加入異抗壞血酸鈉水溶液2L，利用lmol/L甲酸水溶液調(diào)整提取溶液PH為5，得提取溶液； 每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有Ig異抗壞血酸鈉； (b)、將提取溶液于50~80°C下進(jìn)行浸提2小時，冷卻至室溫后，過濾或離心，得到提取液； (C)、將提取液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為5 ； (d)、將稀釋液經(jīng)吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫； (e)、洗脫液減壓 濃縮后，經(jīng)噴霧干燥、低壓烘干或微波干燥，得到桂花苯乙醇苷提取物。
8.利用如權(quán)利要求1~3任一所述的桂花苯乙醇苷提取物制備而得的組合物，其特征在于:所述組合物種含有0.01~99.9被％的桂花苯乙醇苷提取物，余量為載體。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其特征在于:組合物是藥物組合物、保健品組合物、食品組合物或化妝品組合物。
10.如權(quán)利要求1~3任一所述的桂花苯乙醇苷提取物的用途，其特征在于:用于制備防治糖尿病的食品、藥物或保健品。
【文檔編號】A61P3/10GK103768152SQ201410043501
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年1月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月29日
【發(fā)明者】陸柏益, 熊麗娜, 毛淑琴, 周菲, 蔣易蓉, 孫啟鴻, 楊佳佳, 胡銀洲, 諶燦曦 申請人:浙江大學(xué)