本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種華蟾素提取物的提取工藝。
背景技術(shù)：
華蟾素(蟾皮)提取物來源于中華大蟾蜍的皮經(jīng)過提取分離得到。癌癥患者在我國乃至全世界發(fā)病率及死亡率均很高，我國癌癥患者按900萬人(發(fā)病率按7‰)計算，再加每年新增100萬人，癌癥患者人數(shù)已近1000萬人。癌癥患者一旦被發(fā)現(xiàn)，絕大多數(shù)為中晚期，從發(fā)現(xiàn)到死亡平均在12-18個月。目前，應(yīng)用較為廣泛的治療方法為化學(xué)藥物療法，這些方法均伴隨有嚴(yán)重地毒副反應(yīng)，甚至使患者免疫力嚴(yán)重下降，不能達(dá)到理想的治療效果。因此，從中藥中研究并尋找開發(fā)具有顯著抗腫瘤活性、毒副作用低的中藥產(chǎn)品，成為該領(lǐng)域中獨(dú)特的、具有創(chuàng)新意義的手段和發(fā)明，其應(yīng)用前景是十分廣闊的。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種華蟾素提取物的提取工藝。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種華蟾素提取物的提取工藝，包括以下步驟：
1)取1重量份洗凈后的蟾皮，加入3-10體積份的水，煎煮30-60分鐘后用濾網(wǎng)過濾，得到濾液1和濾渣1；
2)向所述濾渣1中加入2-6體積份的水，煎煮20-40分鐘后用濾網(wǎng)過濾，得到濾液2和濾渣2；
3)將所述濾液1和濾液2合并后置于濃縮罐中濃縮，濃縮后得到濃縮液1；
4)向所述濃縮液1中加入乙醇，調(diào)節(jié)濃縮液的含醇量至50-75％，攪拌均勻后靜置24-72小時，傾取其上清液得到上清液1；
5)取所述步驟4)得到的上清液1，濃縮回收乙醇至其無醇味后得到濃縮液2；
6)向所述步驟5制得的濃縮液2中再加入乙醇，調(diào)節(jié)其含醇量至70-95％，攪拌均勻后靜置36-48小時，傾取其上清液得到上清液2；
7)取所述步驟5)得到的上清液2，濃縮回收乙醇至其無醇味后進(jìn)行收膏，制得華蟾素提取物，并冷藏。
優(yōu)選的是，一種華蟾素提取物的提取工藝，包括以下步驟：
1)取1重量份洗凈后的蟾皮，加入8體積份的水，煎煮45分鐘后用60目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液1和濾渣1；
2)向所述濾渣1中加入4體積份的水，煎煮30分鐘后用60目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液2和濾渣2；
3)將所述濾液1和濾液2合并后置于濃縮罐中濃縮，濃縮后得到濃縮液；
4)向所述濃縮液中加入乙醇，調(diào)節(jié)濃縮液的含醇量至70％，攪拌均勻后靜置72小時，傾取其上清液得到上清液1；
5)取所述步驟4)得到的上清液1，濃縮回收乙醇至其無醇味后得到濃縮液2；
6)向所述步驟5制得的濃縮液2中再加入乙醇，調(diào)節(jié)其含醇量至90％，攪拌均勻后靜置48小時，傾取其上清液得到上清液2；
7)取所述步驟5)得到的上清液2，濃縮回收乙醇至其無醇味后進(jìn)行收膏，制得華蟾素提取物，并冷藏。
優(yōu)選的是，所述步驟1)和步驟2)中的濾網(wǎng)的濾孔尺寸為60目。
優(yōu)選的是，所述步驟3)中，控制濃縮過程中的溫度為60℃～85℃、真空度為-0.06Mpa～-0.09Mpa；所述步驟4)中，控制反應(yīng)過程中的溫度為0℃～10℃。
優(yōu)選的是，所述步驟5)中，控制濃縮過程中真空度為-0.06Mpa～-0.09Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為40℃～50℃梯度遞增至最終溫度為55℃～60℃。
優(yōu)選的是，所述步驟6)中，控制反應(yīng)過程中的溫度為0℃～10℃。
優(yōu)選的是，所述步驟7)中，控制濃縮過程中的真空度為-0.06Mpa～-0.09Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為40℃～50℃梯度遞增至最終溫度為55℃～60℃，控制冷藏的溫度為-2℃～4℃。。
本發(fā)明還提供一種由上述華蟾素提取物的提取工藝所制備的華蟾素提取物在注射液、片劑、口服液、顆粒劑、散劑、膠囊、丸劑、軟膠囊、軟膏劑、滴鼻劑和栓劑中的應(yīng)用。
本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的華蟾素提取物由蟾皮經(jīng)煎煮、過濾、濃縮、醇沉等工藝制得，制備工藝簡單，易于操作，所制得的提取物中雜質(zhì)含量少，提取物的純度高、提取率高、具有很高的應(yīng)用價值。
具體實施方式
下面對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術(shù)語并不配出一個或多個其它元件或其組合的存在或添加。
實施例1
一種華蟾素提取物的提取工藝，包括以下步驟：
1)取250kg洗凈后的蟾皮，加入2m3的水，煎煮45分鐘后用60目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液1和濾渣1；
2)向所述濾渣1中加入1m3的水，煎煮30分鐘后用60目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液2和濾渣2；
3)將所述濾液1和濾液2合并后置于濃縮罐中濃縮，控制濃縮過程中的溫度為80℃、真空度為-0.09Mpa，濃縮后得到濃縮液；
4)向所述濃縮液中加入乙醇，調(diào)節(jié)濃縮液的含醇量至70％，攪拌均勻后靜置72小時，傾取其上清液得到上清液1；
5)取所述步驟4)得到的上清液1，濃縮回收乙醇至其無醇味后得到濃縮液2；
6)向所述步驟5制得的濃縮液2中再加入乙醇，調(diào)節(jié)其含醇量至90％，攪拌均勻后靜置48小時，傾取其上清液得到上清液2；
7)取所述步驟5)得到的上清液2，濃縮回收乙醇至其無醇味后進(jìn)行收膏，制得華蟾素提取物，并冷藏。
其中，所述步驟4)中，控制醇沉過程中的溫度為10℃。
其中，所述步驟5)中，控制濃縮過程中真空度為-0.09Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為40℃梯度遞增至最終溫度為55℃。
其中，所述步驟6)中，控制醇沉過程中的溫度為10℃。
其中，所述步驟7)中，控制濃縮過程中的真空度為-0.09Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為40℃梯度遞增至最終溫度為60℃，控制冷藏的溫度為-2℃。
實施例2
一種華蟾素提取物的提取工藝，包括以下步驟：
1)取200kg洗凈后的蟾皮，加入1.6m3的水，煎煮40分鐘后用60目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液1和濾渣1；
2)向所述濾渣1中加入0.8m3的水，煎煮25分鐘后用60目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液2和濾渣2；
3)將所述濾液1和濾液2合并后置于濃縮罐中濃縮，控制濃縮過程中的溫度為75℃、真空度為-0.08Mpa，濃縮后得到濃縮液；
4)向所述濃縮液中加入乙醇，調(diào)節(jié)濃縮液的含醇量至65％，攪拌均勻后靜置72小時，傾取其上清液得到上清液1；
5)取所述步驟4)得到的上清液1，濃縮回收乙醇至其無醇味后得到濃縮液2；
6)向所述步驟5制得的濃縮液2中再加入乙醇，調(diào)節(jié)其含醇量至85％，攪拌均勻后靜置48小時，傾取其上清液得到上清液2；
7)取所述步驟5)得到的上清液2，濃縮回收乙醇至其無醇味后進(jìn)行收膏，制得華蟾素提取物，并冷藏。
其中，所述步驟4)中，控制醇沉過程中的溫度為5℃。
其中，所述步驟5)中，控制濃縮過程中真空度為-0.08Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為45℃梯度遞增至最終溫度為60℃。
其中，所述步驟6)中，控制醇沉過程中的溫度為5℃。
其中，所述步驟7)中，控制濃縮過程中的真空度為-0.08Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為45℃梯度遞增至最終溫度為60℃，，控制冷藏的溫度為-2℃。
實施例3
一種華蟾素提取物的提取工藝，包括以下步驟：
1)取300kg洗凈后的蟾皮，加入2.4m3的水，煎煮50分鐘后用80目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液1和濾渣1；
2)向所述濾渣1中加入1.2m3的水，煎煮35分鐘后用80目的濾網(wǎng)過濾，得到濾液2和濾渣2；
3)將所述濾液1和濾液2合并后置于濃縮罐中濃縮，控制濃縮過程中的溫度為85℃、真空度為-0.08Mpa，濃縮后得到濃縮液；
4)向所述濃縮液中加入乙醇，調(diào)節(jié)濃縮液的含醇量至75％，攪拌均勻后靜置72小時，傾取其上清液得到上清液1；
5)取所述步驟4)得到的上清液1，濃縮回收乙醇至其無醇味后得到濃縮液2；
6)向所述步驟5制得的濃縮液2中再加入乙醇，調(diào)節(jié)其含醇量至90％，攪拌均勻后靜置48小時，傾取其上清液得到上清液2；
7)取所述步驟5)得到的上清液2，濃縮回收乙醇至其無醇味后進(jìn)行收膏，制得華蟾素提取物，并冷藏。
其中，所述步驟4)中，控制醇沉過程中的溫度為8℃。
其中，所述步驟5)中，控制濃縮過程中真空度為-0.07Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為50℃梯度遞增至最終溫度為60℃。
其中，所述步驟6)中，控制醇沉過程中的溫度為8℃。。
其中，所述步驟7)中，控制濃縮過程中的真空度為-0.07Mpa，控制濃縮過程中的溫度由初始溫度為50℃梯度遞增至最終溫度為60℃，控制冷藏的溫度為-2℃。
實施例4
取適量由實施例1、2或3所制備的華蟾素提取物，制備華蟾素提取物的注射液、片劑、口服液、顆粒劑、散劑、膠囊、丸劑、軟膠囊、軟膏劑、滴鼻劑和栓劑。
盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運(yùn)用。它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域。對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改。因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)。