本發(fā)明涉及一種微生物油脂。

背景技術(shù)：

目前微生物油脂的獲得方式是將微生物菌種通過發(fā)酵得到獲得大量微生物，然后進(jìn)行預(yù)處理，通過有機(jī)溶劑提取、脫溶得到微生物毛油。該微生物毛油中已經(jīng)含有特定的微生物油脂成分，因此已經(jīng)可以在市面上作為產(chǎn)品進(jìn)行銷售。但是，該微生物毛油的雜質(zhì)較多，感官也不好，因此，常常需要進(jìn)一步將其精煉，制得品質(zhì)更好的微生物油脂。油脂精煉通常分為脫膠、堿煉、脫色、脫臭等工序，其中脫膠是整個油脂精煉工藝的基礎(chǔ)，主要作用是去除油脂中的磷脂(水化磷脂和非水化磷脂)類物質(zhì)。傳統(tǒng)脫膠方法分為物理法和化學(xué)法，主要是通過消耗大量的水、酸、堿等化學(xué)物質(zhì)，來去除油脂中的磷脂等膠質(zhì)。其工藝相對簡單，但易造成磷脂脫除效果差、油脂損耗過多、 產(chǎn)生廢水多、 油脂品質(zhì)不穩(wěn)定等不良影響。酶法脫膠是一種高效、經(jīng)濟(jì)、無污染的脫膠方法，它是利用微生物發(fā)酵提取的磷脂酶，催化磷脂水解。與傳統(tǒng)脫膠工藝相比，酶法脫膠工藝具有脫磷效果好、煉耗小、能耗低、產(chǎn)生污水少、收率高等優(yōu)點。早在20世紀(jì)中葉Rohm等人就開發(fā)了利用磷脂酶A的酶法脫膠工藝，當(dāng)時采用一種從豬胰臟提取的磷脂酶A2，此方法稱為“Enzymax”工藝。但由于磷脂酶A2的來源有限、價格昂貴以及性能上的缺陷，酶法脫膠一直沒有得到大規(guī)模的應(yīng)用。近年來，隨著酶制劑技術(shù)的創(chuàng)新，磷脂酶A活性提升的同時成本也得到大幅降低，使用磷脂酶A脫膠的工藝逐漸受到重視，涌現(xiàn)出大量專利和研究論文。

專利CN102936533A公開了一種酶法脫膠精制水飛薊籽油的方法，包括以下步驟：水飛薊籽經(jīng)壓榨或浸出方法制得水飛薊毛油，利用懸浮雜質(zhì)與油脂的密度不同，在自然靜置狀態(tài)下，或?qū)⑺w薊毛油于50℃干燥箱內(nèi)保持1h，使雜質(zhì)與油脂分離，過濾，制得毛油。采用磷脂酶對水飛薊毛油進(jìn)行脫膠處理，然后進(jìn)行脫酸、脫色、脫臭，得到精制水飛薊籽油。該發(fā)明還使用硅膠作為吸附劑進(jìn)行脫色脫臭處理，避免了傳統(tǒng)工藝中的高溫真空脫色和高溫真空脫臭處理，減少了水飛薊籽油中有效成分的損失，縮短了工藝流程。

專利CN101323815在進(jìn)行酶法脫膠反應(yīng)時添加0.01%～0.02%的混合酶制劑制備得到含磷量小于5ppm的菜籽油，其中混合酶制劑是由磷脂酶A2和Lecitase Ultra按照1：1的體積比配制而成。該方法比使用單一酶進(jìn)行酶法脫膠的工藝簡單，并降低了多次分離帶來的油脂損失，減少的設(shè)備的投資費用和后期能源消耗。

但是，現(xiàn)有的酶法脫膠工藝都是在制得毛油后進(jìn)行的。結(jié)合微生物發(fā)酵過程中酶解破壁與酶法脫膠工藝的特點，本發(fā)明考慮將脫膠工序與微生物破壁工序相結(jié)合，一方面減少油脂的制備工序，另一方面提高了油脂的得率和品質(zhì)。更進(jìn)一步的，使用磷脂酶C可有效提高油脂中甘油二酯的含量，提升油脂的乳化性能，有利于包埋。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種品質(zhì)和乳化性能優(yōu)良的微生物油脂。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種微生物油脂，甘油三酯的含量不高于95%，甘油二酯含量不低于3%，且磷含量低于5ppm。

本發(fā)明的微生物油脂具有以下有益效果：油脂中的磷含量低，油脂的品質(zhì)更好。另一方面，油脂中含有適量的甘油二酯，因此具有較好的乳化性能，可以提高微生物油脂的包埋率，降低微膠囊的表面油含量，提高微膠囊的抗氧化能力。

進(jìn)一步的，本發(fā)明的微生物油脂由以下方式制得：發(fā)酵獲得產(chǎn)油微生發(fā)酵液；將發(fā)酵液進(jìn)行濃縮，獲得固含量高于10%的濃縮發(fā)酵液；將濃縮發(fā)酵液的PH值調(diào)節(jié)在5～8.1之間，然后向發(fā)酵液中加入磷脂酶C，將溫度控制在38℃～51℃之間進(jìn)行攪拌、剪切2～6h；分離油相和水相，獲得磷含量低于5ppm的微生物油脂。

進(jìn)一步的，步驟（1）中，所述產(chǎn)油微生物包括酵母、裂殖壺菌、、雙鞭甲藻、微球藻、破囊壺菌，這體現(xiàn)了本發(fā)明的制備方法應(yīng)用范圍比較廣泛。

進(jìn)一步的，步驟（3）中，進(jìn)一步加入堿性蛋白酶、幾丁質(zhì)酶、蝸牛酶中的一種或多種。這一類酶的作用主要是促進(jìn)細(xì)胞壁的破碎，從而提高油脂的產(chǎn)率。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實例，對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。

實施例1

以雙鞭甲藻作為發(fā)酵菌種，依次按下列步驟操作：

(1)發(fā)酵獲得富含二十二碳六烯酸的微生物發(fā)酵液;

(2)將上述發(fā)酵液經(jīng)離心機(jī)處理后，得到固形物含量為25.1%濃縮發(fā)酵液；

(3)取500g該濃縮發(fā)酵液投入到1L的玻璃反應(yīng)瓶中，調(diào)節(jié)pH值至8.01，加入1.01g堿性蛋白酶，控溫45℃，剪切2h，再加入2.5g磷脂酶C，進(jìn)一步攪拌反應(yīng)2h，得到酶解液。

(4)將上述酶解液升溫至97℃，然后用10000rpm的高速離心機(jī)離心，分離出上層油相進(jìn)行真空脫水，得到41.3g富含二十二碳六烯酸的微生物油脂。

(5)經(jīng)檢測，該微生物油脂中磷含量為1.9ppm,甘油三酯的含量為90.9%，甘油二酯的含量為6.3%。

實施例2

以微球藻作為發(fā)酵菌種，依次按下列步驟操作：

(1)發(fā)酵獲得富含二十碳五烯酸的微生物發(fā)酵液;

(2)將上述發(fā)酵液經(jīng)膜分離后，得到固形物含量為17.1%濃縮發(fā)酵液；

(3)取5kg該濃縮發(fā)酵液投入到25L的玻璃反應(yīng)釜中，調(diào)節(jié)pH值至7.01，加入5.1g堿性蛋白酶、5.1g蝸牛酶，控溫51℃， 10g磷脂酶C，攪拌、剪切反應(yīng)4h，得到酶解液。

(4)向酶解液中加入10L正己烷和5L乙醇提取1h，沉降得分離得到萃取液，將萃取液進(jìn)行真空脫溶，得到377.3g富含二十碳五烯酸的微生物油脂。

(5)經(jīng)檢測，該微生物油脂中磷含量為1.7ppm,甘油三酯的含量為92.7%，甘油二酯的含量為5.1%。

實施例3

以酵母作為發(fā)酵菌種，依次按下列步驟操作：

(1)發(fā)酵獲得富含亞麻酸的微生物發(fā)酵液;

(2)將上述發(fā)酵液經(jīng)離心后，得到固形物含量為29.7%濃縮發(fā)酵液；

(3)取51kg該濃縮發(fā)酵液投入到300L反應(yīng)釜中，調(diào)節(jié)pH值至5，控溫48℃，加入100.5g蝸牛酶，127.5g磷脂酶C，攪拌、剪切2h，得到酶解液。

(4)向上述酶解液中加入100L正己烷和50L乙醇提取1.5h，沉降分離得到萃取液，將萃取液進(jìn)行真空脫溶， 得到4179.1g富含亞麻酸的微生物油脂。

(5)經(jīng)檢測，該微生物油脂中磷含量為2.9ppm,甘油三酯的含量為94.1%，甘油二酯的含量為3.9%。

實施例4

以金黃色破囊壺菌為發(fā)酵菌種，依次按下列步驟操作：

(1)發(fā)酵獲得富含二十二碳六烯酸的微生物發(fā)酵液;

(2)將上述發(fā)酵液經(jīng)離心分離處理后，得到固形物含量為10%濃縮發(fā)酵液；

(3)取150kg該濃縮發(fā)酵液投入到500L的反應(yīng)釜中，調(diào)節(jié)pH值至7.1，加入300g堿性蛋白酶、225.1g幾丁質(zhì)酶，控溫45℃，150g磷脂酶C，攪拌反應(yīng)5h，得到酶解液。

(4)向上述酶解液中加入150L己烷和100L乙醇，攪拌反應(yīng)1.5h，經(jīng)蝶式離心機(jī)離心，將得到的油相進(jìn)行真空脫溶，得到6973.9g富含二十二碳六烯酸的微生物油脂。

(5)經(jīng)檢測，該微生物油脂中磷含量為4.9ppm,甘油三酯的含量為94.7%，甘油二酯的含量為3.1%。

實施例5

以裂殖壺菌為發(fā)酵菌種，依次按下列步驟操作：

（1）發(fā)酵獲得富含二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸的微生物發(fā)酵液;

（2）將上述發(fā)酵液經(jīng)離心處理后，得到固形物含量為25.9%濃縮發(fā)酵液；

（3）取500kg該濃縮發(fā)酵液投入到1000L反應(yīng)釜中，調(diào)節(jié)pH值至8.1，加入1000.5 g堿性蛋白酶，，750.3g磷脂酶C，控溫45℃，攪拌反應(yīng)6h，得到酶解液。

（4）將上述酶解液升溫至95℃，然后經(jīng)12000rpm蝶式離心機(jī)離心，將得到的油相進(jìn)行真空脫水，得到45.9kg富含二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸的微生物油脂。

（5）經(jīng)檢測，該微生物油脂中磷含量為2.1ppm,甘油三酯的含量為92.9%，甘油二酯的含量為5.1%。

以上實施例中，磷脂酶C的用量越多，脫磷效果越好，但是生產(chǎn)成本也越高。發(fā)明人多次試驗后發(fā)現(xiàn)，磷脂酶C與濃縮發(fā)酵液的質(zhì)量比小于0.5%的條件下，特別是在0.1%至0.5%之間時，能同時兼顧生產(chǎn)效率和生產(chǎn)成本。另一方面，當(dāng)磷脂酶C與濃縮發(fā)酵液的質(zhì)量比在小于0.1%時，也能制備出磷含量低于5ppm的微生物油脂，但此時生產(chǎn)的效率為受到較大影響。本說明書實施例中，磷脂酶C與濃縮發(fā)酵液的質(zhì)量比，是結(jié)合了生產(chǎn)效率和生產(chǎn)成本等多方面因素后，列舉的較佳比例。