技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種對(duì)基因啟動(dòng)子進(jìn)行定向進(jìn)化的方法,該方法包括:用易錯(cuò)PCR技術(shù)擴(kuò)增啟動(dòng)子,獲得一組突變頻率較高的啟動(dòng)子序列;用DNA改組技術(shù)去除有害突變,集合有益突變,獲得改組的啟動(dòng)子;重組啟動(dòng)子和半乳糖苷酶基因組成表達(dá)盒轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞,通過(guò)藍(lán)白斑篩選和酶活測(cè)定獲得目標(biāo)突變啟動(dòng)子。本發(fā)明的方法不需要分析基因啟動(dòng)子的功能區(qū)域,成本低,高效快捷,操作簡(jiǎn)便,成功率高,適合于對(duì)大腸桿菌或其他細(xì)菌、真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的基因啟動(dòng)子定向進(jìn)化。
技術(shù)研發(fā)人員:萬(wàn)曉春;李俊鑫;劉綠艷;吳高慧
受保護(hù)的技術(shù)使用者:中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院;深圳先進(jìn)技術(shù)研究院;深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日:2016.05.03
技術(shù)公布日:2017.11.10