本發(fā)明涉及化學制藥領(lǐng)域，尤其涉及一種抗腫瘤藥物palbociclib的晶型及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：輝瑞公司研發(fā)，目前用于治療乳腺癌的palbociclib的化學名為6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-{[5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基]胺基}吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(即式Ⅰ所示的化合物)。II期臨床研究表明，palbociclib與乳腺癌的金標準治療藥物來曲唑相比，其治療活性提高3倍以上，無進展生存期(PFS)達26.1個月。palbociclib把以前對乳腺癌以“月”為標準的臨床治療效果提高到“年”的水平，取得了突破性的進展。正因為其良好的治療活性，F(xiàn)DA僅僅基于II期臨床數(shù)據(jù)，于2015年2月4日批準其在美國上市。目前報道的palbociclib晶型有WO2014128588A1公開的晶A和晶B,其中晶B不穩(wěn)定，晶A為輝瑞的藥用晶型。但晶A易存在較嚴重的有機溶劑殘留，如苯甲醚和正丁醇這兩高沸點溶劑的殘留可達0.5wt％(WO2014128588A1，P17)；在生產(chǎn)中我們也常發(fā)現(xiàn)苯甲醚和正丁醇殘留超過0.5wt％的情況，甚至可達1.0％左右。同時，晶A的制備需要異常嚴格的控溫條件，如需程序性降溫(WO2014128588A1，P43,P44)，這非常不利于工業(yè)化大生產(chǎn)。此外，晶A結(jié)晶溶劑苯甲醚的生產(chǎn)中，必須使用劇毒性的硫酸二甲酯(孫寶國，香料與香精，中國石化出版社，2000：24)，因而晶A的制備勢必導致嚴重的次級污染問題。因此，本領(lǐng)域迫切需要提供一種理化性質(zhì)穩(wěn)定、有機溶劑殘留少、利于工業(yè)化生產(chǎn)、且制備過程無次級污染問題的palbociclib新晶型。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明旨在提供一種化合物Ⅰ的穩(wěn)定的新晶型。本發(fā)明的另一個目的是提供所述化合物Ⅰ的新晶型的制備方法。本發(fā)明的再一個目的是提供所述化合物Ⅰ的新晶型的用途。本發(fā)明的第四個目的是提供一種含有所述化合物Ⅰ的新晶型的藥物組合物。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種化合物的晶型C，所述化合物結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示，所述晶型C的X-射線粉末衍射(XRPD)有下述2θ角特征峰：5.56±0.2°、7.68±0.2°和8.67±0.2°；；較佳地，所述晶型C的X-射線粉末衍射(XRPD)還有下述2θ角特征峰：12.79±0.2°和16.36±0.2°；更佳地，所述晶型C的X-射線粉末衍射(XRPD)還有下述2θ角特征峰：11.21±0.2°、18.14±0.2°、19.86±0.2°、21.24±0.2°、23.92±0.2°和26.58±0.2°；最佳地，所述晶型C有如圖1所示的X-射線粉末衍射(XRPD)圖。在另一優(yōu)選例中，所述晶型C的差示掃描量熱法圖譜(DSC)上在25～300℃的溫度范圍內(nèi)有一特征峰，熔點為272.6℃；更佳地，所述晶型C有如圖2所示的差示掃描量熱法圖譜(DSC)。在另一優(yōu)選例中，所述晶型C的紅外吸收圖譜在2949±2cm-1、1694±2cm-1、1654±2cm-1、1583±2cm-1和1400±2cm-1處有特征峰；更佳地，所述晶型C有如圖4所示的紅外光譜。在另一優(yōu)選例中，所述晶型C有一分子結(jié)晶水；較佳地，所述晶型C的TGA圖在50～275℃失重約3.88％；更佳地，所述晶型C有如圖3所示的TGA圖。在本發(fā)明的第二方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶 型C的制備方法，所述的方法包括步驟：(1)將4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯與醇和水混合，得到溶液1，所述醇選自下述的一種或一種以上：正丁醇、甲醇、乙醇、異丙醇；(2)將溶液1和選自下述的一種或一種以上的酸混合，得到反應(yīng)物2：鹽酸、硫酸、甲磺酸、羥乙基磺酸、三氟醋酸；(3)將反應(yīng)物2冷卻至出現(xiàn)固體，過濾得到固體3；(4)將固體3與弱堿水溶液混合，得到溶液4，所述弱堿水溶液選自下述的一種或一種以上混合：飽和碳酸氫鈉、飽和碳酸氫鉀、飽和碳酸鈉、飽和碳酸鉀；和(5)將溶液4過濾，得到如上所述的本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C。在另一優(yōu)選例中，在步驟(2)中使用鹽酸。在另一優(yōu)選例中，步驟(2)中混合時間為4～24小時；更佳地，混合時間為4～8小時。在另一優(yōu)選例中，步驟(3)中在0～4℃冷卻。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C的用途，用于制備預(yù)防或治療乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌、甲狀腺癌、結(jié)腸直腸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、卵巢癌的藥物。在本發(fā)明的第四方面，提供了一種藥物組合物，所述的藥物組合物中含有如上所述的本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C和藥學上可接受的載體。據(jù)此，本發(fā)明提供了一種理化性質(zhì)穩(wěn)定、有機溶劑殘留少、利于工業(yè)化生產(chǎn)、且制備過程無次級污染問題的palbociclib新晶型。附圖說明圖1顯示了本發(fā)明實施例4制備得到的化合物Ⅰ晶型C的X－射線粉末衍射圖；其中有關(guān)各個峰的2θ角如下表所示：#2-ThetaI％(相對峰強度)15.56544.227.678100.038.66639.5411.21111.1512.79140.5616.36358.6718.1414.9819.8577.4921.23917.81023.92416.21126.5878.8。圖2顯示了本發(fā)明實施例4制備得到的化合物I晶型C的差示掃描量熱法圖(DSC)。圖3顯示了本發(fā)明實施例4制備得到的化合物I晶型C的TGA圖譜。圖4顯示了本發(fā)明實施例4制備得到的化合物I晶型C的紅外光譜(IR)。圖5顯示了本發(fā)明實施例6制備得到的化合物Ⅰ晶型A和晶型C混晶的X－射線粉末衍射圖。圖6顯示了依據(jù)WO2014128588A1制備得到的化合物Ⅰ晶型A的X－射線粉末衍射圖。圖7顯示了依據(jù)WO2014128588A1制備得到的化合物Ⅰ晶型B的X－射線粉末衍射圖。具體實施方式發(fā)明人通過深入研究，發(fā)現(xiàn)化合物Ⅰ在醇和水中溶解后，通過酸水解獲得的固體通過弱堿的水溶液處理，但無需使用苯甲醚等溶劑，便能獲得一種新的晶型，即單一晶型C，是一種穩(wěn)定的晶型，且這種方法無需控溫，所得晶體沒有有機溶劑殘留。如本文所用，化學式或名稱應(yīng)當包括所有的光學和立體異構(gòu)體，以及存 在這些異構(gòu)體和混合物的消旋混合物?；衔铫窬虲本發(fā)明提供了一種如式Ⅰ所示化合物的晶型C，并采用多種方式和儀器對其性質(zhì)進行了研究?！癤射線粉末衍射”，又稱“X射線多晶衍射(XRPD)”是目前用于測定晶型構(gòu)造(即晶型)的常用試驗方法。采用X射線粉末衍射儀，在X射線透過晶型時產(chǎn)生一系列衍射圖譜，該圖譜中不同的衍射線及其強度由一定結(jié)構(gòu)的原子團所決定，由此確定晶型的具體晶型結(jié)構(gòu)。測定晶型的X射線粉末衍射的方法在本領(lǐng)域中是已知的。例如使用BrukerD8Advanced型號的X射線粉末衍射儀，以2°每分鐘的掃描速度，采用銅輻射靶獲取圖譜。本發(fā)明的化合物Ⅰ晶型C具有特定的晶型形態(tài)，在X-射線粉末衍射(XRPD)圖中具有特定的特征峰。具體而言，本發(fā)明的化合物Ⅰ晶型C的X-射線粉末衍射(XRPD)圖上在下述2θ角有特征峰：5.56±0.2°，7.68±0.2°和8.67±0.2°；較佳地，在下述2θ角還有特征峰：12.79±0.2°和16.36±0.2°；更佳地，在下述2θ角還有特征峰：11.21±0.2°、18.14±0.2°、19.86±0.2°、21.24±0.2°、23.92±0.2°和26.58±0.2°。最佳地，所述具有與圖1基本一致的X-射線粉末衍射(XRPD)圖?！笆静顠呙枇繜岱治觥?，又稱“差示量熱掃描分析”(DSC)是在加熱過程中，測量被測物質(zhì)與參比物之間的能量差與溫度之間關(guān)系的一種技術(shù)。DSC圖譜上的峰位置、形狀和峰數(shù)目與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)，故可以定性地用來鑒定物質(zhì)。本領(lǐng)域常用該方法來檢測物質(zhì)的相變溫度、玻璃化轉(zhuǎn)變溫度、反應(yīng)熱等多種參 數(shù)。DSC測定方法在本領(lǐng)域中是已知的。例如可使用DSCQ20示差掃描量熱分析儀，以10℃每分鐘的升溫速率，從25℃升溫至300℃，獲得晶型的DSC掃描圖譜。在本發(fā)明的一個實施方式中，采用DSC測得用本發(fā)明方法獲得的化合物Ⅰ晶型C在25～300℃范圍內(nèi)有一特征峰，熔點為272.6℃；更優(yōu)選本發(fā)明的化合物I晶型C具有與圖2基本一致的DSC圖譜。熱重分析(ThermogravimetricAnalysis，TG或TGA)在本領(lǐng)域中是已知的。在程序控制溫度下測量樣品的質(zhì)量與溫度變化關(guān)系。在本發(fā)明的一個實施方式中，采用TGA測得用本發(fā)明方法獲得的化合物Ⅰ晶型C有一分子結(jié)晶水；優(yōu)選在50～275℃失重約3.88％；更優(yōu)選本發(fā)明的化合物I晶型C具有與圖3基本一致的TGA圖譜。也可采用紅外圖譜法(IR)來確定晶型結(jié)構(gòu)，其測定方法在本領(lǐng)域中是已知的。例如可采用PESpectrumOneB，以KBr:樣品＝200:1壓片，并在400-4000cm-1范圍掃描。本發(fā)明化合物Ⅰ的晶型C的紅外圖譜顯示以下波數(shù)有特征峰：2949±2cm-1、1694±2cm-1、1654±2cm-1、1583cm±2-1和1400±2cm-1，優(yōu)選具有與圖4基本一致的紅外圖譜。化合物Ⅰ晶型C的制備方法本發(fā)明還提供了式Ⅰ所示化合物的晶型C的制備方法。在本發(fā)明提供的一種實施方式中，式Ⅰ化合物的晶型C的制備方法包括以下步驟：第一步，將4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(cas:866084-31-3)與醇和水混合，得到溶液1，所述醇選自下述的一種或一種以上：正丁醇、甲醇、乙醇、異丙醇；第二步，將溶液1和選自下述的一種或一種以上的酸混合，得到反應(yīng)物2：鹽酸、硫酸、甲磺酸、羥乙基磺酸、三氟醋酸；第三步，將反應(yīng)物2冷卻至出現(xiàn)固體，過濾得到固體3；第四步，將固體3與弱堿水溶液混合，得到溶液4，所述弱堿水溶液選自下述的一種或一種以上混合：飽和碳酸氫鈉、飽和碳酸氫鉀、飽和碳酸鈉、飽和碳酸鉀；第五步，將溶液4過濾，得到本發(fā)明提供的化合物Ⅰ的晶型C。在上述第一步中，所述混合在加熱條件下進行，例如但不限于，在60-80℃下加熱20-40分鐘。在上述第二步中使用的酸優(yōu)選鹽酸。在上述第二步中，所述混合是水解反應(yīng)，優(yōu)選在加熱條件下進行，例如但不限于，在60～80℃下反應(yīng)4-24小時；優(yōu)選4～8小時。在上述第三步中，可以使用本領(lǐng)域常規(guī)的方法對反應(yīng)物2進行冷卻，例如但不限于，在0～4℃冰箱過夜，使大量固體出現(xiàn)。在上述第三步中，過濾后用醇洗滌固體，所使用的醇一般與第一步中的相同；在本發(fā)明的一個具體實施例中，洗滌后置于45～55℃空氣浴中干燥，得到固體3，所述固體3是palbociclib的鹽酸鹽、羥乙基磺酸鹽等固體。在上述第四步中，所述混合在攪拌下進行，在本發(fā)明的一個具體實施例中，在15～30℃攪拌2～12小時。在上述第五步中，在本發(fā)明的一個具體實施例中，過濾后得到的固體用蒸餾水洗滌，洗滌后置于45～55℃空氣浴中干燥，得到本發(fā)明提供的化合物Ⅰ的晶型C。化合物Ⅰ晶型C的用途本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C穩(wěn)定性好，可以作為原料藥，例如用于制備預(yù)防或治療乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌、甲狀腺癌、結(jié)腸直腸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、卵巢癌的藥物。所述的藥物包括式Ⅰ化合物的晶型C和藥學上可接受的載體。所述藥物可以根據(jù)不同給藥途徑而制備成各種劑型。這些劑型以下面方式之一施用：膠囊、片劑、口崩片、含片、緩控釋制劑等。另外需要指出，本發(fā)明式Ⅰ化合物的晶型C的使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養(yǎng)狀況、化合物活性強度、服用、代謝速率、病癥的嚴重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。定義如本文所用，“如式Ⅰ所示的化合物”、“式Ⅰ化合物”或“化合物Ⅰ”可以互換使用，都是指無定形態(tài)的結(jié)構(gòu)式如Ⅰ所示的化合物；優(yōu)選使用WO2014128588A1公開的方法制備得到的4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基 -5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯。如本文所用，“本發(fā)明palbociclib的晶型C”、“晶型C”或“化合物Ⅰ的晶型C”可互換使用，都是指X-射線粉末衍射(XRPD)圖上在下述2θ角有特征峰：5.56±0.2°、7.68±0.2°和8.67±0.2°；優(yōu)選在下述2θ角還有特征峰：12.79±0.2°和16.36±0.2°；更優(yōu)選在下述2θ角還有特征峰：11.21±0.2°、18.14±0.2°、19.86±0.2°、21.24±0.2°、23.92±0.2°和26.58±0.2°。如本文所用，術(shù)語“藥學上可接受的載體”指用于治療劑給藥的載體，包括各種賦形劑和稀釋劑。該術(shù)語指這樣一些藥劑載體：它們本身并不是必要的活性成分，且施用后沒有過分的毒性。合適的載體是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。在Remington'sPharmaceuticalSciences(MackPub.Co.，N.J.1991)中可找到關(guān)于藥學上可接受的賦形劑的充分討論。在組合物中藥學上可接受的載體可包括液體，如水、鹽水、甘油和乙醇。另外，這些載體中還可能存在輔助性的物質(zhì)，如崩解劑、潤濕劑、乳化劑、pH緩沖物質(zhì)等。本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。本發(fā)明的主要優(yōu)點在于：1、本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C具有良好的化學穩(wěn)定性和晶型穩(wěn)定性。2、本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C沒有有機溶劑殘留，并且重金屬鈀的含量很低。3、本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C的藥代性質(zhì)與晶型A藥代性質(zhì)相當。4、本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C的制備方法操作簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。5、本發(fā)明提供的式Ⅰ化合物的晶型C的制備方法中無次級污染，綠色環(huán)保。下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數(shù)、比率、比例、或份數(shù)按重量計。本發(fā)明中的重量體積百分比中的單位是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶質(zhì)的重量。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。原料和通用測試方法實施例中所用4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(cas:866084-31-3)為參考WO2014128588A1所制備。核磁共振波譜儀：VarianMercury400NMRspectrometerX-射線粉末衍射儀器：BruckerD8advanceX-射線粉末衍射儀；輻射源：銅靶在室溫條件下掃描；電壓：40kv；電流：40mA；起始的2θ：2.000°，掃描范圍:2.0000-50.000°；步長：0.020°；測量時間：12.6秒/步。差示掃描量熱法分析(DSC)儀器：美國TA公司的Q2000型，20-200℃范圍內(nèi)，加熱速率10℃/min，氮氣流速50ml/min。熱重分析(TGA)儀器：美國TA公司的SDTQ600型，20-300℃范圍內(nèi)，加熱速率10℃/min，氮氣流速60ml/min。紅外分光光度法(FTIR)分析儀器：Nicolet380傅立葉變換紅外光譜儀；溴化鉀壓片法；分辨率：4.0cm-1。電感耦合等離子光譜儀：Optima5300DV。實施例1palbociclib鹽酸鹽的制備將4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(31.5g,52.2mmoL)加入到正丁醇(548.0mL)和蒸餾水(315.0mL)的混合溶液中，于油浴70℃加熱30分鐘。加入濃鹽酸(22.0mL)，在油浴70℃反應(yīng)過夜。冷卻，反應(yīng)體系放置0℃冰箱過夜，出現(xiàn)大量固體。過濾，固體用正丁醇(5.0mL)洗滌，于50℃空氣浴中干燥至恒重，得純黃色固體25.0g。1HNMR(400MHz,D2O):δ＝8.94(s,1H),8.00(dd,J1＝2.1Hz,J2＝9.6Hz,1H),7.76(d,J1＝2.0Hz,1H),7.41(d,J1＝2.1Hz,J2＝9.2Hz,1H),5.72(m,1H),3.48(dd,J1＝4.0Hz,J2＝7.2Hz,4H),3.41(dd,J1＝2.4Hz,J2＝6.0Hz,4H),2.43(s,3H),2.31(s,3H),2.08(m,2H),1.93(m,4H),1.64(m,2H).實施例2palbociclib甲磺酸鹽的制備將4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.15g,5.22mmoL)加入到正丁醇(55.0mL)和蒸餾水(31.50mL)的混合溶液中，于油浴70℃加熱30分鐘。加入甲磺酸(2.0mL)，在油浴70℃反應(yīng)過夜。冷卻，反應(yīng)體系放置0℃冰箱過夜，出現(xiàn)大量固體。過濾，固體用正丁醇(5.0mL)洗滌，于50℃空氣浴中干燥至恒重，得純黃色固體3.0g。實施例3palbociclib羥乙基磺酸鹽的制備將4-{6-[(6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氫吡啶[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.25g,12.0mmoL)加入到甲醇(140mL)中,再緩慢滴加羥乙基磺酸(5.3g,42.0mmoL)、甲醇(15.0mL)和水(0.70mL,38.9mmoL)的混合溶液。滴加完畢后，體系加熱至55℃，且在此溫度下攪拌30分鐘。滴加三乙胺(1.8g,13.0mmoL)的甲醇(3.0mL)溶液，在此過程中反應(yīng)體系溫度降至30℃。在30℃下滴加三乙胺(1.3g,12.6mmoL)的甲醇(20.0mL)，6.0小時滴加完畢。攪拌過夜。于4℃下放置1.0小時，過濾，固體用并甲醇(2.0mL)洗滌，于55℃真空干燥1.0小時，得純黃色固體6.8g，收率為87％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6:δ＝10.23(s,1H),8.98(s,1H),8.69(brs,1H),8.12(d,J＝3.2Hz,1H),7.92(d,J＝9.2Hz,1H),7.55(dd,J1＝2.8Hz,J2＝8.8Hz,1H),5.84(m,1H),4.46(brs1H),3.62(t,J＝6.8Hz,2H),3.37(m,4H),3.27(m,4H),2.60(t,J＝6.8Hz,2H),2.43(s,3H),2.32(s,3H),2.23(m,2H),1.93(m,2H),1.88(m,2H),1.63(m,2H).實施例4palbociclib晶型C的制備將實施例1所得產(chǎn)物(1.0g)緩慢加入到碳酸氫鈉飽和水溶液(12.0mL)和蒸餾水(15.0mL)中，于室溫攪拌4.0小時。過濾，固體用蒸餾水(3×5.0mL)洗滌，于50℃空氣浴中干燥至恒重，得0.72g晶型C。1HNMR(400MHz, DMSO-d6+TFA):δ＝11.18(brs,1H),9.01(s,3H),8.07(d,J＝2.8Hz,1H),7.95(dd,J1＝2.8Hz,J2＝9.6Hz,1H),7.81(d,J＝9.2Hz,1H),5.85(m,1H),3.43(t,J＝4.8Hz,4H),3.30(s,4H),2.44(s,3H),2.35(s,3H),2.22(m,2H),1.94(m,2H),1.93(m,2H),1.60(m,2H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6+TFA):δ＝202.1,160.51,158.97,158.60,158.23,157.86,157.32,157.02,154.97,143.36,142.14,141.51,130.92,130.85,119.73,116.85,116.36,113.96,111.08,53.11,45.19,42.39,31.16,27.61,25.19,13.67.HRMS(ESI+,m/z):448.2453[M+H]+.結(jié)果對所得晶型C進行XRPD測試、DSC測試、TGA測試、FTIR測試：從圖1中可以看出，在2θ值為5.56±0.2°、7.68±0.2°、8.67±0.2°、12.79±0.2°、16.36±0.2°處具有強峰；在11.21±0.2°、18.14±0.2°、19.86±0.2°、21.24±0.2°、23.92±0.2°、26.58±0.2°處具有次強峰。從圖2中可以看出，在25-200℃范圍內(nèi)有單一吸熱峰，onset約272.6℃。從圖3中可以看出，在50～275℃范圍內(nèi)失重約3.88％，表示含有1分子結(jié)晶水。圖4是本實施例制備的晶型C的FTIR圖譜，從圖4中可以看出，在2949±2cm-1、1694±2cm-1、1654±2cm-1、1583±2cm-1、1400±2cm-1等處有特征峰。實施例5palbociclib晶型C的制備將實施例1所得產(chǎn)物(1.0g)緩慢加入到碳酸氫鉀飽和溶液(12.0mL)和蒸餾水(15.0mL)中，于室溫攪拌4.0小時。過濾，固體用蒸餾水(3×5.0mL)洗滌，于50℃空氣浴中干燥至恒重，得0.73g晶型C。結(jié)果所得晶型C的XRPD圖譜、DSC圖譜、TGA圖譜、FTIR圖譜基本同實施例4一致。實施例6palbociclib晶型A和晶型C混晶的制備將實施例3所得產(chǎn)物(0.72g)緩慢加入到碳酸氫鈉飽和溶液(13.0mL)和蒸餾水(15.0mL)中，于室溫攪拌4.0小時。過濾，固體用蒸餾水(3×5.0mL)洗滌，于50℃空氣浴中干燥至恒重，得0.68g純黃色固體。結(jié)果所得固體的XRPD圖譜表明，此黃色固體為晶A和晶C的混晶。此混晶的XRPD如圖5所示。實施例7palbociclib晶型C的溶劑殘留研究依次采用HPLC法和GC法測量了晶型C的可能溶劑苯甲醚、正丁醇和正庚烷的殘留，結(jié)果如表1所示。晶型C中未檢出有苯甲醚、正丁醇和正庚烷。表1晶型C的可能溶劑苯甲醚、正丁醇和正庚烷的殘留研究溶劑檢測方法檢測結(jié)果苯甲醚HPLC未檢出正丁醇GC未檢出正庚烷GC未檢出實施例8palbociclib晶型C的重金屬元素鈀的含量研究采用EPA6010C電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法檢測了晶型C中的重金屬元素鈀的含量，結(jié)果如表2所示。晶型C中的重金屬鈀含量很低，小于1.0ppm。表2晶型C的的重金屬元素鈀的含量研究樣品編號檢測項目檢測結(jié)果(mg/kg)2015042801Pd<1實施例9palbociclib晶型C的藥代研究在大鼠體內(nèi)研究了晶型C和晶型A的藥代性質(zhì)。藥代試驗方法SD大鼠，180～220g。靜脈注射給藥溶液的配制：先將palbociclib晶型C和晶型A分別配成100mM的DMSO溶液；再分別取palbociclib晶型C和晶型A的100mM母液各為19.0μL，稀釋至1.7mL(N.S：PEG400＝7：3，含20μLTween80)，超聲3min，配制為0.5mg/mL的溶液。灌胃給藥混懸液配制：分別稱取palbociclib晶型C和晶型A化合物各2.72mg，加入7.30mL的CMC-Na(0.5％),配制為0.375mg/mL的混懸液體(不溶)。palbociclib晶型C給操作：SD大鼠5只，2只靜脈注射給予5.0mg/kg的晶型C，分別于給藥前和給藥后2、5、15、30、60、90、120、240、360min于大鼠眼底靜脈叢取血0.4mL。3只灌胃給予5.0mg/kg的晶型C，分別于給藥前和給藥后5、15、30、60、90、120、240、360min于大鼠眼底靜脈叢取血0.4mL。血樣于8000rpm離心5min，取血漿于離心管中4℃保存?zhèn)溆?。血漿樣品50μL，加入200μL含內(nèi)標的乙腈(R822.5uM)沉淀蛋白，渦旋10min，6000g離心10min，取200μL上清6000g再次離心10min，取上清70μL于96孔板中進樣，進樣量5μL。靜脈注射前4個時間點，用空白血漿稀釋10倍后測定。palbociclib晶型A給藥操作：操作同晶型C。試驗結(jié)果如表3所示。表3Palbociclib晶型C和晶型A的藥代研究此研究表明，palbociclib晶型C和晶型A的藥代性質(zhì)相當，二者無顯著性差異。實施例10palbociclib晶型C的穩(wěn)定性研究取實施例4所制備得到晶型C分別放置在不同溫度、濕度條件下，考察其化學穩(wěn)定性和晶型穩(wěn)定性，結(jié)果如表4所示。表4Palbociclib晶型C的穩(wěn)定性研究由上述實驗可以看出，本發(fā)明制備得到的晶型C具有良好的化學穩(wěn)定性和晶型穩(wěn)定性，在室溫及較高溫度下如60℃下均能夠長時間穩(wěn)定保存。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并非用以限定本發(fā)明的實質(zhì)技術(shù)內(nèi)容范圍，本發(fā)明的實質(zhì)技術(shù)內(nèi)容是廣義地定義于申請的權(quán)利要求范圍中，任何他人完成的技術(shù)實體或方法，若是與申請的權(quán)利要求范圍所定義的完全相 同，也或是一種等效的變更，均將被視為涵蓋于該權(quán)利要求范圍之中。當前第1頁1 2 3