專利名稱：三七多糖的提取分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體地說，屬于藥用植物三七多糖的提取分離方法。
三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)，又名田七，為五加科(Araliaceae)人參屬(Panax Linn.)植物，主要栽培于云南文山和廣西百色地區(qū)，是我國著名的珍貴藥材，具有止血、散淤、消腫、止痛等功效近年，三七的研究與開發(fā)日益受到重視。三七化學(xué)成分復(fù)雜，從30年代就進行了研究，但直到70年代以后隨著植物配糖體的分離和化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)的發(fā)展，才有了顯著的進展。研究結(jié)果表明，三七中含有皂甙、黃酮、氨基酸、多糖、脂肪酸、脂肪族炔烴類及肽類化合物等，在醫(yī)藥品和天然保健品方面均有重要的開發(fā)價值。其中，達(dá)瑪烷型四環(huán)三萜類皂甙被認(rèn)為是三七的主要生理活性成分之一。所以，以往的研究主要集中于三七皂甙方面，對三七的多糖成分研究很少，本發(fā)明的三七多糖的提取分離方法在現(xiàn)有技術(shù)中未見有報道。
本發(fā)明的目的在于提供一種三七多糖的提取分離方法，該方法以中藥三七為原料生產(chǎn)三七多糖，增加了三七原料的綜合利用，降低多糖的雜質(zhì)，減少了溶劑用量，降低了成本，同時提高了生產(chǎn)效率，適合于大規(guī)模生產(chǎn)。同時，本發(fā)明還提供了上述方法得到的三七多糖在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用；三七多糖在制備增強免疫活性藥物中的應(yīng)用以及三七多糖在制備抗肝炎藥物中的應(yīng)用。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案三七多糖的提取分離方法，取三七根，經(jīng)粉碎后用沸水提取，提取液離心或過濾，清液濃縮后加二倍體積乙醇沉淀，收集離心或過濾后的沉淀，干燥后得三七多糖。
上述方法中，三七根粉碎后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液薄膜濃縮至小體積，加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖。
上述方法中，三七根粉碎后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液噴霧干燥得干粉，干粉溶于沸水，離心去沉淀，清液加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，干燥得三七多糖。
同時提供了三七多糖的另一種提取分離方法，取三七根，經(jīng)粉碎后用乙醇提取，乙醇提取液用于制備三七皂甙，殘渣再用沸水提取，水提液離心或過濾，清液濃縮后加二倍體積乙醇沉淀，收集離心或過濾后的沉淀，干燥后得三七多糖。
上述方法中，三七根粉碎后以70％乙醇回流提取，殘渣干燥后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液薄膜濃縮至小體積，加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖。
上述方法中，三七根粉碎后以70％乙醇回流提取，殘渣干燥后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液噴霧干燥得干粉，取干粉溶于沸水，離心去沉淀，清液加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，干燥得三七多糖。
同時，本發(fā)明還提供了用上述方法得到的三七多糖在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用；三七多糖在制備增強免疫活性藥物中的應(yīng)用以及三七多糖在制備抗肝炎藥物中的應(yīng)用。
為了體現(xiàn)本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比所存在的優(yōu)異性，下面將用本發(fā)明的原理以及本發(fā)明提取分離出的產(chǎn)品的藥理學(xué)試驗結(jié)果來說明其優(yōu)異性和用途1、本發(fā)明的原理本發(fā)明技術(shù)方案的提出是根據(jù)多糖可溶于水而不能溶于醇的原理利用乙醇沉淀的方法來提取三七多糖的。
2、三七多糖的藥理學(xué)試驗結(jié)果用本發(fā)明的提取分離方法得到的三七多糖進行藥理學(xué)試驗，初步研究結(jié)果表明三七多糖對CCl4所致的昆明小鼠肝損傷具有明顯的保護作用，對動物移植性腫瘤S180實體型生長具有明顯的抑制作用，對動物移植性腫瘤肝癌(H22)實體型生長具有明顯的抑制作用，還具有顯著的增強免疫活性及抑制肝炎病毒的活性，其毒理學(xué)試驗也證明了其安全性，具有很好的應(yīng)用前景。
2-1.三七多糖對四氯化碳肝損傷的保護作用經(jīng)初步實驗結(jié)果表明給動物腹腔注射，三七多糖劑量分別為75mg/kg及150mg/kg，每日一次，連用三天，對四氯化碳(0.1％，10mg/kg)所致的昆明小鼠肝損傷具有一定的保護作用。以測定血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)為評價指標(biāo)。模型組ALT136.7±15.6u；多糖劑量大小分別依次為58.0±22.3u及80.2±19.7u，與模型組(CCl4)相比，差異有顯著性(p＜0.05)。
2-2.三七多糖對動物移植性腫瘤生長的影響(1)對動物移植性腫瘤S180實體型生長的影響經(jīng)初步實驗結(jié)果表明三七多糖在劑量為100mg/kg及200mg/kg，每日一次，連用8天，瘤重抑制率分別依次為23.8％及37.3％，大劑量組與對照組相比具有明顯差異(p＜0.05)。
(2)對動物移植性腫瘤肝癌(H22)實體型生長的影響經(jīng)初步實驗結(jié)果表明三七多糖在劑量為100mg/kg及200mg/kg，每日一次，連用8天，瘤重抑制率分別依次為34.6％及46.5％，與對照組相比均具有明顯差異(p＜0.05)。
綜上，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)異性在于1、現(xiàn)有技術(shù)主要集中于三七皂甙研究和提取，對三七的多糖成分研究很少，以中藥三七為原料生產(chǎn)三七多糖未見報道；2、本發(fā)明首先用70％乙醇提取三七皂甙，再進行多糖的提取，可加強對三七原料的綜合利用，提高效益，同時可降低多糖的雜質(zhì)；3、現(xiàn)有技術(shù)利用三倍體積乙醇沉淀多糖，而本發(fā)明利用二倍體積乙醇沉淀多糖，亦可達(dá)到目的，并可減少乙醇用量，降低成本；4、本發(fā)明利用噴霧干燥方法濃縮三七水提液，提高了生產(chǎn)效率，適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)；5、現(xiàn)有技術(shù)中未見有三七多糖在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，三七多糖在制備增強免疫活性藥物中的應(yīng)用以及三七多糖在制備抗肝炎藥物中的應(yīng)用的報道。
下面用本發(fā)明實施例來進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
實施例1材料三七根為干燥藥材，產(chǎn)自云南文山；乙醇為天津化學(xué)試劑一廠出品，離心機為Beckman產(chǎn)品。
實驗方法取三七根3kg，粉碎后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液薄膜濃縮至小體積，加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖41g。
實施例2材料選擇同實施例1。取三七根3kg粉碎后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液噴霧干燥得干粉約100g，干粉溶于沸水，過濾去沉淀，清液加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，干燥得三七多糖33g。
實施例3材料選擇同實施例1。取三七根3kg，粉碎后以70％乙醇回流提取，殘渣干燥后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液薄膜濃縮至小體積，加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖35g。
實施例4材料選擇同實施例1。取三七根100kg，粉碎后以70％乙醇回流提取，殘渣干燥后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液噴霧干燥得干粉約3.5kg，取干粉1kg溶于沸水，離心(或過濾)去沉淀，清夜加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，干燥得三七多糖390g。
權(quán)利要求
1.三七多糖的提取分離方法，其特征是取三七根，經(jīng)粉碎后用沸水提取，提取液離心或過濾，清液濃縮后加二倍體積乙醇沉淀，收集離心或過濾后的沉淀，干燥后得三七多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所說的方法，其特征是三七根粉碎后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液薄膜濃縮至小體積，加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所說的方法，其特征是三七根粉碎后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液噴霧干燥得干粉，干粉溶于沸水，離心去沉淀，清液加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，干燥得三七多糖。
4.三七多糖的提取分離方法，其特征是取三七根，經(jīng)粉碎后用乙醇提取，乙醇提取液用于制備三七皂甙，殘渣再用沸水提取，水提液離心或過濾，清液濃縮后加二倍體積乙醇沉淀，收集離心或過濾后的沉淀，干燥后得三七多糖。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所說的方法，其特征是三七根粉碎后以70％乙醇回流提取，殘渣干燥后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液薄膜濃縮至小體積，加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所說的方法，其特征是三七根粉碎后以70％乙醇回流提取，殘渣干燥后用沸水提取三次，冷卻后過濾去除沉淀，清液噴霧干燥得干粉，取干粉溶于沸水，離心去沉淀，清液加二倍體積的乙醇混合，靜置一小時后9000rpm離心10分鐘，收集沉淀，干燥得三七多糖。
7.用權(quán)利要求1或4所說的方法得到的三七多糖在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
8.用權(quán)利要求1或4所說的方法得到的三七多糖在制備增強免疫活性藥物中的應(yīng)用。
9.用權(quán)利要求1或4所說的方法得到的三七多糖在制備抗肝炎藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
提供一種三七多糖的提取分離方法,該方法以中藥三七為原料生產(chǎn)三七多糖,增加了三七原料的綜合利用,降低多糖的雜質(zhì),減少了溶劑用量,降低了成本,同時提高了生產(chǎn)效率,適合于大規(guī)模生產(chǎn)。同時,提供了用上述方法得到的三七多糖在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用;三七多糖在制備增強免疫活性藥物中的應(yīng)用以及三七多糖在制備抗肝炎藥物中的應(yīng)用。
文檔編號C08B37/00GK1329094SQ0110849
公開日2002年1月2日 申請日期2001年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月31日
發(fā)明者楊崇仁, 王東, 李海舟 申請人:中國科學(xué)院昆明植物研究所