專利名稱：用于抑制細(xì)胞增殖的取代的雙吲哚基馬來(lái)酰亞胺的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及取代的吡咯。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及下式取代的吡咯
其中R為烷基、羥基、或烷硫基，以及式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的前藥或藥學(xué)上可接受的鹽。
式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽是抗增殖劑，可用于治療或控制癌癥，特別是用于治療或控制實(shí)體瘤。本發(fā)明化合物尤其可用于治療或控制乳房腫瘤和結(jié)腸腫瘤。
式Ⅰ化合物一般是公開在美國(guó)專利5057614中。
這里所用的“烷基”一詞，在單獨(dú)或結(jié)合使用時(shí)均指最多含有10個(gè)碳原子、優(yōu)選最多含有5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基等等，該烷基是未取代的，或者被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，取代基選自由羥基、烷氧基、氨基、鹵素、氰基、硫代烷基、羧基、羧酸衍生物或烷基亞磺酰組成的組。優(yōu)選地，烷基是未取代的烷基，更優(yōu)選為甲基。術(shù)語(yǔ)“羥基保護(hù)基團(tuán)”指任意常規(guī)的羥基保護(hù)基團(tuán)，例如甲基硫?；?、乙酰基、三烷基甲硅烷基、芐基。優(yōu)選地，羥基保護(hù)基團(tuán)是甲硫酰基。
術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的前藥”指一種在生理學(xué)條件下或通過溶劑分解作用可以轉(zhuǎn)化為式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的化合物。
在上式Ⅰ中，R優(yōu)選為CH3、OH或SCH3。
式Ⅰ化合物以及式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽是通過下述流程1和2來(lái)進(jìn)行制備的。
流程1
其中R如上所述，R’為烷基、烷硫基或OX，其中的X是一種羥基保護(hù)基團(tuán)。
如流程1所述，式Ⅱ化合物是一種已知化合物或者是通過已知方法制備的化合物，它是在0至25℃溫度下，在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或四氫呋喃(THF)等一種溶劑中，使式Ⅱ化合物與氫化鈉(NaH)等一種堿和甲基碘(CH3I)等一種烷基化試劑反應(yīng)，生成相應(yīng)的式Ⅲ化合物。
在-30℃與-60℃之間的溫度下，在乙二醇-二甲醚(DME)等一種溶劑中，使式Ⅲ化合物與甲苯-4-磺酰甲基異腈(TosMIC)和叔丁醇鉀的混合物反應(yīng)，然后在65℃溫度下用甲醇處理，生成相應(yīng)的式Ⅳ化合物。
在0℃溫度下，使式Ⅳ化合物與HCl氣在異丙醇中反應(yīng)，生成相應(yīng)的式Ⅴ化合物。
在0℃與25℃之間的溫度下，在二氯甲烷等一種溶劑中，使式Ⅴ化合物與(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-氧-乙酰氯和三乙胺(Et3N)反應(yīng)。然后在25℃溫度下，在甲苯等一種溶劑中，將所得產(chǎn)物用對(duì)甲苯磺酸(pTsOH)處理，生成相應(yīng)的式Ⅰa化合物。
用常規(guī)方法除去羥基保護(hù)基團(tuán)，例如在一種含水/醇溶液中用氫氧化鈉等一種堿進(jìn)行處理，使其中R’為OX的式Ⅰa化合物轉(zhuǎn)化為其中R為羥基的式Ⅰ化合物。
或者，式Ⅰ化合物也可按流程2所述來(lái)制備。
流程2
其中R和R’如上所述。
如流程2所述，式Ⅵ化合物是一種已知化合物或者是通過已知方法制備的化合物，它與NaH和CH3I在DMF或THF等一種溶劑中反應(yīng)，生成相應(yīng)的式Ⅶ化合物。
使式Ⅶ化合物與草酰氯在二乙醚(Et2O)或二氯甲烷(CH2Cl2)等一種溶劑中反應(yīng)，生成相應(yīng)的式Ⅷ化合物。
式Ⅷ化合物在0-25℃下在CH2Cl2中與式Ⅸ化合物和pTsOH反應(yīng)，然后在約25℃下，與Et3N在甲苯等一種溶劑中反應(yīng)，生成相應(yīng)的式Ⅰa化合物，其中式Ⅸ化合物是一種已知化合物或者是通過已知方法制備的化合物。用常規(guī)方法除去羥基保護(hù)基團(tuán)，例如在一種含水/醇溶劑的混合物中用NaOH進(jìn)行處理，使其中R’為OX的式Ⅰa化合物轉(zhuǎn)化為其中R為羥基的式Ⅰ化合物。
式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽能抑制細(xì)胞活動(dòng)，例如細(xì)胞增殖，因此可用于治療或控制癌癥、炎癥、免疫學(xué)疾病和支氣管肺與心血管疾病以及器官移植。
本發(fā)明化合物的抗增殖活性可從下面的分析得到證實(shí)。這些作用預(yù)示該化合物可用于治療癌癥。
從ATCC(美國(guó)典型培養(yǎng)物培養(yǎng)中心)購(gòu)得乳癌上皮細(xì)胞系MDA-MB435和結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480，在ATCC推薦的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。為了分析不同化合物對(duì)這些細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，將細(xì)胞置于96池組織培養(yǎng)皿(“供試皿”)中，濃度為1500個(gè)細(xì)胞/池。放置細(xì)胞后的第二天，將所要分析的化合物溶于100％DMSO(二甲基亞砜)，得到10mM儲(chǔ)備溶液。每種化合物在H2O中稀釋至1mM，加入到96池主皿第一排含有培養(yǎng)基的三重池中，得到最終濃度為40μM。然后將化合物連續(xù)稀釋在“主皿”培養(yǎng)基中。然后將稀釋了的化合物轉(zhuǎn)移至含有細(xì)胞的供試皿中。一排作為媒介物的“對(duì)照細(xì)胞”接受DMSO。每池中DMSO的最終濃度為0.1％。在藥物加入后第5天，對(duì)含有MDA-MB435細(xì)胞的培養(yǎng)皿進(jìn)行分析如下。在藥物加入后第7天，對(duì)含有SW480細(xì)胞的培養(yǎng)皿進(jìn)行分析如下。
向每池中加入MTT([溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基-2H-四唑鎓]；噻唑基藍(lán))，得到最終濃度為1mg/ml。然后在37℃下將培養(yǎng)皿培養(yǎng)2 1/2-3小時(shí)。然后除去含有MTT的培養(yǎng)基，向每池中加入50μl 100％乙醇，以溶解甲。然后用自動(dòng)培養(yǎng)皿讀數(shù)器(Bio-tek微量培養(yǎng)皿讀數(shù)器)讀取吸收率。用Reed與Munsch方程計(jì)算IC50，見《美國(guó)衛(wèi)生學(xué)雜志》27卷493-497頁(yè)，1938。
結(jié)果如下表Ⅰ所述。
表Ⅰ抗增殖活性細(xì)胞系
*兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值化合物A是3-(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮。
化合物B是3-(6-甲基硫酰基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮。
化合物C是3-(6-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮。
化合物D是3-(6-乙基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮。
化合物E是{1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基}-乙腈。
式Ⅰ的吡咯及其上述鹽可被用作藥物，例如以藥物制劑的形式，可以口服給藥，例如以片劑、包衣片、糖衣丸、硬膠囊或軟膠囊、溶液、乳液或混懸液的形式。它們也能通過直腸給藥，例如以栓劑的形式，或者通過胃腸外給藥，例如以注射溶液的形式。
在制備藥物制劑時(shí)，可以將這些化合物與治療學(xué)上惰性的無(wú)機(jī)或有機(jī)載體進(jìn)行配制。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽可被用作這樣的載體，用來(lái)制備片劑、包衣片、糖衣丸和硬膠囊。適用于制備軟膠囊的載體為植物油、蠟、脂、半固態(tài)或液態(tài)多元醇。不過根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，在制備軟膠囊時(shí)一般不需要載體。適用于制備溶液和糖漿的載體為水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。適用于制備注射溶液的載體為水、醇、多元醇、甘油和植物油、蠟、脂和半液態(tài)多元醇。
藥物制劑也可以含有防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、改變滲透壓的鹽、緩沖劑、包衣劑或抗氧化劑。它們也還可以含有其他有治療學(xué)價(jià)值的物質(zhì)。
如上所述，式Ⅰ的吡咯及其上述鹽可用于治療或控制腫瘤、炎癥、免疫學(xué)疾病、支氣管肺疾病和心血管疾病。劑量可以在較寬的限度內(nèi)變化，當(dāng)然在特定情況中要根據(jù)個(gè)體需要來(lái)進(jìn)行調(diào)整。一般來(lái)說(shuō)，在對(duì)成年人口服給藥的情況下，約5mg至5000mg的每日劑量應(yīng)當(dāng)是適當(dāng)?shù)?，不過在需要時(shí)可以超過該上限。每日劑量可以單劑量給藥，也可以分劑量給藥。
下列實(shí)施例舉例說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例13-(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮將已知的6-甲基-1H-吲哚-3-羧醛(5g,31mM)的DMF(100ml)溶液冷卻至0℃，用NaH(38mM)處理，在0℃下攪拌3小時(shí)。用CH3I(2.35ml，38mM)處理后，使混合物升溫至室溫過夜。將混合物傾入H2O(500ml)中，用乙酸乙酯萃取(EtOAc,200mlx3)。合并了的有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。閃蒸柱色譜法精制得到1,6-二甲基-1H-吲哚-3-羧醛(5.2g,97％)。
將叔丁醇鉀(KOtBu,2.21g,19.7mM)的DME(30ml)混懸液冷卻至-30℃，用TosMIC(1.97g,10.1mM)溶液處理。加料完全后，混合物進(jìn)一步冷卻至-60℃，用DME(20ml)中的1,6-二甲基-1H-吲哚-3-羧醛(5.8mM)處理，在該溫度下攪拌1.5小時(shí)。向該冷卻的溶液中加入甲醇(15ml)后，在回流溫度下加熱15分鐘，蒸發(fā)溶劑。殘余物用含有乙酸(HOAc,0.75ml)的H2O(20ml)處理，然后用CH2Cl2(50mlx3)萃取。合并了的有機(jī)部分用飽和NaHCO3溶液萃取，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。閃蒸柱色譜法精制得到(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-乙腈(0.86g,81％)。
向已冷卻至0℃的(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-乙腈(0.86g,4.7mM)的異丙醇(iPrOH)(20ml)混懸液中通入HCl(氣)氣泡3小時(shí)。蒸發(fā)溶劑后，殘余物從二乙醚中蒸發(fā)(Et2O,50ml×2)，進(jìn)一步在高真空下干燥，得到鹽酸2-(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯。
向已冷卻至0℃的已知的(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-氧-乙酰氯(183mg,0.83mM)和鹽酸2-(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯(233mg,0.83mM)的CH2Cl2(6ml)混懸液中加入Et3N(0.46ml,3.3mM)。使反應(yīng)混合物升溫至室溫過夜，然后用CH2Cl2(20ml)稀釋，用H2O(15ml)和0.5N HCl(15ml)萃取。有機(jī)部分經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，殘余物用甲苯(3ml)合并。冷卻至0℃后，加入對(duì)甲苯磺酸(pTsOH,174mg,0.91mM)，混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。收集沉淀出來(lái)的紅色固體，使其在CH2Cl2(50ml)和H2O(25ml)之間分配。有機(jī)部分用飽和NaHCO3溶液(25ml)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。殘余物用冷CH2Cl2洗滌，得到3-(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮；mp=264-266℃。
實(shí)施例23-(6-甲基硫酰基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮a)在0℃下歷時(shí)10分鐘，向NaH(55mMol)的DMF(10ml)漿液中加入6-甲基硫酰基-1H-吲哚(6.8g,42mMol)的DMF(50ml)溶液。在0℃下攪拌1小時(shí)后，加入CH3I(4.0ml,64mmol)，混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后在室溫下攪拌1小時(shí)，然后傾入冰/H2O中，用EtOAc萃取。有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，閃蒸柱色譜法后得到6.7g(91.0％)1-甲基-6-甲基硫?；?1H-吲哚，為一黃色油狀物。
b)在0℃下，向1-甲基-6-甲基硫?；?1H-吲哚(658mg,3.71mmol)的Et2O(7ml)溶液中加入草酰氯(0.55ml,6.31mmol)。攪拌3小時(shí)后，收集橙色固體，用Et2O洗滌，干燥，得到(1-甲基-6-甲基硫?；?1H-吲哚-3-基)-氧-乙酰氯(819mg,66％)。
c)在0℃下，向(1-甲基-6-甲基硫酰基-1H-吲哚-3-基)-氧-乙酰氯(816mg,3.05mmol)和鹽酸2-(1,6-二甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯(815mg,3.06mmol)的CH2Cl2(40ml)溶液中加入Et3N(1.75ml,12.56mmol)。在相同溫度下攪拌30分鐘后，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3.5小時(shí)，用CH2Cl2稀釋。有機(jī)相用H2O、0.5N HCl溶液、飽和NaCl溶液洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到一橙色泡沫。將該物料溶于甲苯(24ml)，在0℃下用p-TsOH(613mg,3.23mmol)處理。在室溫下攪拌3小時(shí)后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2萃取。有機(jī)相用飽和NaHCO3溶液、飽和NaCl溶液洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。經(jīng)過閃蒸柱色譜法精制得到3-(6-甲基硫酰基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮(435.8mg,35.5％)；mp 246-251℃。
6-甲基硫?；?1H-吲哚按如下方法制備在0-5℃下，向從金屬Na(8.65g,0.38M)制得的甲醇鈉的甲醇(200ml)溶液中加入4-(甲硫基)-苯甲醛(12.6ml,94.7mmol)和疊氮基乙酸甲酯(44g,0.382mol)的甲醇(30ml)溶液。在相同溫度下攪拌3小時(shí)后，混懸液用H2O(300ml)稀釋。過濾固體，用水洗滌并在真空下干燥，得到19.4g(82.0％)2-疊氮基-3-(4-甲硫基苯基)-丙烯酸甲酯，為一黃色固體。
歷時(shí)2小時(shí)，向沸騰的二甲苯(250ml)中滴加2-疊氮基-3-(4-甲硫基苯基)-丙烯酸甲酯(20.6g,83mmol)的二甲苯(200ml)溶液。反應(yīng)混合物在回流溫度下另外加熱2小時(shí)，然后緩慢冷卻，置于冷凍機(jī)中過夜。過濾固體，用少量CH2Cl2/己烷(1∶3)洗滌，干燥，得到11.2g(61.0％)6-甲基硫?；?1H-吲哚-2-羧酸甲酯。
將6-甲基硫?；?1H-吲哚-2-羧酸甲酯(11.2g,51mmol)和2NNaOH(125ml)的混合物在回流溫度下加熱30分鐘。所得澄清溶液冷卻，用EtOAc萃取。含水部分用濃HCl酸化至pH=1，所生成的沉淀過濾，干燥，得到6-甲基硫?；?1H-吲哚-2-羧酸(9.6g,91.0％)。
將6-甲基硫酰基-1H-吲哚-2-羧酸(9.6g,46mmol)、Cu粉(2.1g,33mmol)和喹啉(100ml)的混合物在215℃下加熱3小時(shí)?；旌衔锢鋮s至室溫，通過硅藻土過濾，濾液用H2O(500ml)稀釋。冷卻了的混合物用濃HCl酸化(pH=1)，用EtOAc萃取。有機(jī)部分用飽和NaCl溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，閃蒸柱色譜法精制后得到6-甲基硫酰基-1H-吲哚(6.8g,90％)。
實(shí)施例33-(6-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮按照上述從6-甲基硫酰基-1H-吲哚制備1-甲基-6-甲基硫?；?1H-吲哚的方法，從已知的苯磺酸1-H-吲哚-6-基酯制得苯磺酸1-甲基-1-H-吲哚-6-基酯。
按照上述(1-甲基-6-甲基硫?；?1H-吲哚-3-基)-氧-乙酰氯的制備方法，從苯磺酸1-甲基-1-H-吲哚-6-基酯制得苯磺酸3-氯碳羰基-1-甲基-1-H-吲哚-6-基酯。
按照上述3-(6-甲基硫?；?1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮的制備方法，從苯磺酸3-氯碳羰基-1-甲基-1-H-吲哚-6-基酯和鹽酸2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯制得苯磺酸1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基酯。
用4N NaOH(0.5ml,2mmol)和CH3OH(4ml)處理苯磺酸1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基酯(141mg,0.28mmol)，并在回流溫度下加熱6小時(shí)，藉此進(jìn)行3-(6-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮的制備。冷卻至室溫后，反應(yīng)混合物用H2O稀釋，用2N HCl酸化，用EtOAc萃取。有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，閃蒸柱色譜法精制后得到3-(6-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮(15mg)；mp279-282℃。
實(shí)施例4{1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基}-乙腈a)在室溫下，將3.7g(23.8mmol)1-甲基-6-氰基吲哚-一種已知化合物-的110ml亞甲基氯溶液用22.6ml 3M氫化二異丁基鋁(DIBAL)的己烷溶液處理?；旌衔镌?5℃下攪拌3h，加入120ml 2N氫氯酸和120ml亞甲基氯的混合物，在室溫下攪拌17h。分離有機(jī)層，用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，硅膠柱色譜分析得到2.26g(60％)1-甲基-1H-吲哚-6-羧醛，為一白色固體。
b)在-50℃下，一邊攪拌，一邊向2.0g(10.5mmol)甲苯-4-磺酰甲基異氰化物和20ml 1M叔丁醇鉀溶液的15ml四氫呋喃溶液中加入0.900g(5.65mmol)1-甲基-1H-吲哚-6-羧醛溶液。反應(yīng)混合物在-30℃下攪拌2h，用20ml甲醇處理，新混合物在45-50℃下另外攪拌1小時(shí)，傾入冰水中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，得到(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-乙腈。
c)按照類似于例2b和2c的方法，從(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-乙腈制得{1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基}-乙腈，mp225-226.5℃。
實(shí)施例53-(6-乙基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮a)將6.0g的6-氯乙酰-1-新戊酰吲哚(K.Teranishi等《合成》1994,1018)、5.75ml的58％氫碘酸在35ml乙酸中的混合物在室溫下攪拌2天。反應(yīng)混合物傾入水中，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，用5％碳酸氫鈉和水洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，得到一深色油狀物。該物料經(jīng)硅膠柱精制，得到3.9g的1-(6-乙酰-吲哚-1-基)-2,2-二甲基丙-1-酮。
b)將溶于50ml甲醇的3.9g的1-(6-乙酰-吲哚-1-基)-2,2-二甲基丙-1-酮用甲醇鈉溶液(0.84g金屬鈉在20ml甲醇中)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h，傾入2N氫氯酸/冰，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，色譜法精制后得到1.3g的6-乙酰吲哚。
c)在0-4℃下，向0.26g(6.55mmol)NaH(60％油分散系)的10ml無(wú)水N,N-二甲基甲酰胺漿液中加入6-乙酰吲哚(1.04g,6.55mmol)的5ml無(wú)水N,N-二甲基甲酰胺溶液。在相同溫度下攪拌15分鐘后，加入1.45g(10.1mmol)甲基碘。新混合物在相同溫度下攪拌1小時(shí)，傾入冰水中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，硅膠柱色譜法精制后得到1-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-乙酮。
d)將0.226g 1-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-乙酮、1.35ml 85％水合肼、0.88g氫氧化鉀在15ml二乙二醇中的混合物在62℃下攪拌過夜。反應(yīng)混合物冷卻，傾入水中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，硅膠柱色譜法精制后得到0.200g的6-乙基-1-甲基吲哚，為一無(wú)色油狀物。
e)按照類似于例2b和2c的方法，從6-乙基-1-甲基吲哚制得3-(6-乙基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2,5-二酮，mp 247-248℃。
實(shí)施例6片劑
>*化合物A代表一種本發(fā)明的化合物。
制備過程1．將第1、2和3項(xiàng)在一種適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?5分鐘。
2．將來(lái)自步驟1的粉末混合物與20％聚維酮K30溶液(第4項(xiàng))造粒。
3．在50℃下干燥來(lái)自步驟2的顆粒。
4．使來(lái)自步驟3的顆粒通過一種適當(dāng)?shù)难心ピO(shè)備。
5．向來(lái)自步驟4的研磨了的顆粒中加入第5項(xiàng)，混合3分鐘。
6．在一種適當(dāng)?shù)膲浩瑱C(jī)上壓制來(lái)自步驟5的顆粒。
實(shí)施例7膠囊劑
制備過程1．將第1、2和3項(xiàng)在一種適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?5分鐘。
2．加入第4和5項(xiàng)，混合3分鐘。
3．裝填在一種適當(dāng)?shù)哪z囊中。
實(shí)施例8注射溶液/乳液制劑項(xiàng)目 成分mg/ml1 化合物A1mg2PEG400 10-50mg3卵磷脂 20-50mg4大豆油 1-5mg5 甘油8-12mg6 水 適量，加至1ml制備過程1．將第1項(xiàng)溶于第2項(xiàng)。
2．向第6項(xiàng)中加入第3、4和5項(xiàng)，混合直至分散，然后使之均勻。
3．向來(lái)自步驟2的混合物中加入來(lái)自步驟1的溶液，并使之均勻，直至該分散系呈半透明。
4．通過0.2μm濾器進(jìn)行除菌過濾，灌裝在小瓶中。
實(shí)施例9注射溶液/乳液制劑項(xiàng)目 成分mg/ml1 化合物A1mg2 葡糖糠醛 10-50mg3卵磷脂 20-50mg4大豆油1-5mg5甘油 8-12mg6 水 適量，加至1ml制備過程1．將第1項(xiàng)溶于第2項(xiàng)。
2．向第6項(xiàng)中加入第3、4和5項(xiàng)，混合直至分散，然后使之均勻。
3．向來(lái)自步驟2的混合物中加入來(lái)自步驟1的溶液，并使之均勻，直至該分散系呈半透明。
4．通過0.2μm濾器進(jìn)行除菌過濾，灌裝在小瓶中。
權(quán)利要求
1．一種下式化合物
其中R為烷基、烷硫基或羥基，或式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的前藥或式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中R為烷基。
3．權(quán)利要求2的化合物，其中R為未取代的烷基。
4．權(quán)利要求3的化合物，其中R為甲基。
5．權(quán)利要求1的化合物，其中R為羥基。
6．權(quán)利要求1的化合物，其中R為烷硫基。
7．權(quán)利要求6的化合物，其中R為甲硫基。
8．權(quán)利要求2的化合物，其中R為被一個(gè)或多個(gè)羥基、烷氧基、氨基、鹵素、硫代烷基、羧基、羧酸衍生物、氰基或烷基亞磺酰取代的烷基。
9．權(quán)利要求8的化合物，其中R為被氰基取代的烷基。
10．一種藥物組合物，該組合物含有如權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所要求保護(hù)的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和一種惰性載體。
11．如權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所要求保護(hù)的式Ⅰ化合物的用途，用于抑制細(xì)胞增殖或用于制備相應(yīng)藥物。
12．如本說(shuō)明書所述的本發(fā)明。
全文摘要
式(Ⅰ)化合物,其中R為烷基、烷硫基或羥基,以及式(Ⅰ)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽是抗增殖劑,可用于癌癥的治療。
文檔編號(hào)C07D403/14GK1226249SQ97196784
公開日1999年8月18日 申請(qǐng)日期1997年7月19日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月29日
發(fā)明者厄瓦什·H·德欣格拉, 唐娜·M·赫因, 丹尼斯·D·基思, 朱塞普·F·韋伯 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司