羅漢果甜甙v的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于羅漢果加工領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種羅漢果甜甙V的制備方法。該制備方法利用成熟羅漢果鮮果為起始原料，經(jīng)破碎、提取、澄清除雜、過(guò)濾、大孔吸附樹(shù)脂吸附、洗脫、二次離子交換樹(shù)脂吸附、濃縮、干燥、乙醇精制得到羅漢果甜甙V，在提取中采用無(wú)毒乙醇代替?zhèn)鹘y(tǒng)甲醇，在提取過(guò)程中引入新型天然中藥澄清劑去除果膠、纖維、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，在洗脫過(guò)程中采用兩種不同的吸附樹(shù)脂吸附。本發(fā)明利用乙醇代替?zhèn)鹘y(tǒng)甲醇，減少了溶劑對(duì)人體健康的危害程度，經(jīng)過(guò)澄清劑除雜、兩次上柱吸附提純后產(chǎn)品純度提高至97%以上。
【專利說(shuō)明】羅漢果甜Wt V的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于羅漢果加工領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種羅漢果甜甙V的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]羅漢果為多年生蔓植物，主要栽培在中國(guó)的廣西北部。其干燥果實(shí)為橢圓或圓形，外殼棕褐色或煙熏色并有大量細(xì)小黑色細(xì)毛。在中國(guó)人們利用其甜味和作為中藥已有數(shù)世紀(jì)的歷史。在加工后，羅漢果可作為治療感冒和潤(rùn)肺的藥物。現(xiàn)代羅漢果一般被當(dāng)做果汁飲料或飲料中的低熱甜味劑使用或被制作成可口的飲料。目前對(duì)于羅漢果的研究與開(kāi)發(fā)主要集中在甜甙上，其中羅漢果甜甙V是甜甙中主要甜味成分。甜甙的甜度為糖的300倍且熱含量低。是糖尿病患者穩(wěn)定且無(wú)發(fā)酵性的理想添加劑。作為一種通用的天然甜味劑是代替人工甜味劑如阿斯巴甜等得理想代替品。在飲料，烘烤食品，營(yíng)養(yǎng)食品，低熱食品或其它需要低或無(wú)碳水化合物味甜或需要低或無(wú)熱量食用食品中可充分發(fā)揮其作用。烹飪或烘烤并不會(huì)影響其風(fēng)味或甜度。
[0003]目前，提取羅漢果甜甙V的方法及報(bào)道很多，但都是以新鮮羅漢果為原料，通過(guò)水提酶解上柱純化、水提薄膜濃縮提取等工藝來(lái)生產(chǎn)。羅漢果甜甙V的制備方法研究，如專利CN200710050255.9，公開(kāi)一種高純度羅漢果甜甙V的制備方法，其步驟如下:1)取羅漢果甜甙溶于甲醇中，過(guò)濾，得濾液；2)在所得濾液中加入丙酮使其產(chǎn)生沉淀，過(guò)濾，得沉淀物；3)取沉淀物用正相硅膠柱進(jìn)行吸附；4)吸附好的正相硅膠柱，用低碳鏈酯與乙醇的混合溶液為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液；5)回收洗脫液中的洗脫劑，結(jié)晶，得到高純度羅漢果甜甙V，該發(fā)明需要采用價(jià)格 昂貴的正相硅膠柱，并且甜甙V的洗脫需要依托低碳鏈酯，使得該工藝生產(chǎn)成本高。如專利CN201010223923.5，公開(kāi)了一種從干羅漢果中提取高含量羅漢果甜甙V的方法，提取工藝包括如下步驟:提取、濃縮、過(guò)濾、吸附、脫色、濃縮干燥得含羅漢果甜甙V產(chǎn)品，其在提取步驟中采用乙醇為溶劑，但該發(fā)明并未對(duì)提取過(guò)程中進(jìn)行除雜，得到的產(chǎn)品中存在纖維、蛋白、果膠一類的雜質(zhì)，產(chǎn)品純度不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有羅漢果甜甙V提取工藝存在提取除雜難、浸取有機(jī)溶液甲醇有毒，設(shè)備利用率低、產(chǎn)品純度低、生產(chǎn)成本高等問(wèn)題，提供一種羅漢果甜甙V的制備方法。
[0005]本發(fā)明的方案是通過(guò)這樣實(shí)現(xiàn)的:一種羅漢果甜甙V的制備方法，選取新鮮無(wú)霉?fàn)€的成熟羅漢果，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑逆流提取或回流提取破碎后的羅漢果，提取劑與羅漢果的比例=2~8L:1kg，提取時(shí)間為31小時(shí)，得到提取液。
[0006]步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05、.1kg:1L，攪拌均勻后，靜置25~40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液。
[0007]步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度1.5^2米，提取溶液吸附流速l-4BV/hr，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.3^0.6L: 1L，收集洗脫液I。
[0008]步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.1~0.4L: 1L，收集洗脫液II。
[0009]步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為30(T800rpm、溫度為3(T37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%，再經(jīng)過(guò)乙醇精制，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0010]作為本發(fā)明的進(jìn)一步限定，所述的提取步驟中采用回流提取時(shí)，回流提取分2~3次進(jìn)行，每次2小時(shí)；所述的提取劑為40-80%的乙醇水溶液、純水中任一種。
[0011]作為本發(fā)明的進(jìn)一步限定，所述的澄清除雜步驟中的澄清劑為天然中藥澄清劑KBT-ZTC ;所述步驟3)和4)中用到的洗脫劑為乙醇或水溶液中的任一種。
[0012]作為本發(fā)明的進(jìn)一步限定，所述的步驟5)中的乙醇精制為利用乙醇完全溶解干燥后得到的甜甙V，過(guò)濾除去沉淀物，再次濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%。
[0013]作為本發(fā)明的完整方案，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑60%乙醇水溶液回流提取破碎后的羅漢果3次，提取劑與羅漢果的比例=6L:1kg，每次提取時(shí)間為2.5小時(shí)，得到提取液。
[0014]步驟2)澄清 除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05、.1kg:1L，攪拌均勻后，靜置25~40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液。
[0015]步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度2米，提取溶液吸附流速2.5BV/hr,吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.5L:1L，收集洗脫液I。
[0016]步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.2L: 1L，收集洗脫液II。
[0017]步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為500rpm、溫度為37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量(10%,再用60%乙醇水溶液完全溶解甜甙V后過(guò)濾除去沉淀，再濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0018]本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)原理是:利用成熟羅漢果鮮果為起始原料，經(jīng)破碎、提取、澄清除雜、過(guò)濾、大孔吸附樹(shù)脂吸附、洗脫、二次離子交換樹(shù)脂吸附、濃縮、干燥、乙醇精制得到羅漢果甜甙V，在提取中采用無(wú)毒乙醇代替?zhèn)鹘y(tǒng)甲醇，減少有機(jī)溶劑對(duì)工人的傷害，并在提取過(guò)程中引入新型天然中藥澄清劑，有效去除果膠、纖維、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，在洗脫過(guò)程中采用兩種不同的吸附樹(shù)脂吸附，提高了產(chǎn)品的純度。
[0019]本發(fā)明具備以下良好效果:
(I)本發(fā)明在提取液中加入新型天然中藥澄清劑，絮凝沉淀除去了提取液中的果膠、纖維、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，使提取純化得到了純化，解決了該產(chǎn)品提取液過(guò)濾技術(shù)的難題，提高了設(shè)備使用率，降低了設(shè)備使用成本、縮短了過(guò)濾時(shí)間同時(shí)使提取液中的大部分雜質(zhì)得到有效去除。
[0020](2)通過(guò)不同吸附樹(shù)脂的吸附及不同洗脫液的兩次不同吸附柱層析洗脫，使產(chǎn)品的純度得到大幅度提高，純度達(dá)到97%以上。[0021](3)本發(fā)明采用乙醇代替甲醇進(jìn)行精制，減少了有機(jī)溶劑對(duì)人體健康的危害程度。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
圖1是本發(fā)明制備方法流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]以下結(jié)合實(shí)施例和附圖描述本發(fā)明一種羅漢果甜甙V的制備方法，這些描述并不是對(duì)本
【發(fā)明內(nèi)容】
作進(jìn)一步的限定。
[0023]實(shí)施例1
一種羅漢果甜甙V的制備方法，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑逆流提取或回流提取破碎后的羅漢果，提取劑與羅漢果的比例=8L:1kg，提取時(shí)間為5小時(shí)，得到提取液；
步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.1kg:1L，攪拌均勻后，靜置40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液；
步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度1.8米，提取溶液吸附流速4BV/hr，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.5L:1L，收集洗 脫液I ；
步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.3L:1L，收集洗脫液II ；
步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為600rpm、溫度為37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量≤10%,再經(jīng)過(guò)乙醇精制，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0024]提取步驟中采用回流提取時(shí)，回流提取分3次進(jìn)行，每次2小時(shí)；所述的提取劑為80%的乙醇水溶液。
[0025]澄清除雜步驟中的澄清劑為天然中藥澄清劑KBT-ZTC ;所述步驟3)和4)中用到的洗脫劑為乙醇。
[0026]步驟5)中的乙醇精制為利用乙醇完全溶解干燥后得到的甜甙V，過(guò)濾除去沉淀物，再次濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%。
[0027]本實(shí)施例得到產(chǎn)品純度達(dá)97.5%。
[0028]實(shí)施例2
一種羅漢果甜甙V的制備方法，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑逆流提取或回流提取破碎后的羅漢果，提取劑與羅漢果的比例=2L:1kg，提取時(shí)間為8小時(shí)，得到提取液；
步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05kg:1L，攪拌均勻后，靜置25min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液；
步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度2米，提取溶液吸附流速3BV/hr，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.3L:1L，收集洗脫液I ;
步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.1L:1L，收集洗脫液II ；
步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為300rpm、溫度為30°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%，再經(jīng)過(guò)乙醇精制，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0029]提取步驟中采用回流提取時(shí)，回流提取分2次進(jìn)行，每次2小時(shí)；所述的提取劑為40%的乙醇水溶液。
[0030]澄清除雜步驟中的澄清劑為天然中藥澄清劑KBT-ZTC ;所述步驟3)和4)中用到的洗脫劑為乙醇。
[0031]步驟5)中的乙醇精制為利用乙醇完全溶解干燥后得到的甜甙V，過(guò)濾除去沉淀物，再次濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%。
[0032]本實(shí)施例得到產(chǎn)品純度達(dá)98.5%。
[0033]實(shí)施例3 一種羅漢果甜甙V的制備方法，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑逆流提取或回流提取破碎后的羅漢果，提取劑與羅漢果的比例=6L:1kg，提取時(shí)間為3小時(shí)，得到提取液；
步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.08kg:1L，攪拌均勻后，靜置25min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液；
步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度1.5米，提取溶液吸附流速lBV/hr，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.3L:1L，收集洗脫液I ;
步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.1L:1L，收集洗脫液II ；
步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為300rpm、溫度為35°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%，再經(jīng)過(guò)乙醇精制，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0034]提取步驟中采用回流提取時(shí)，回流提取分3次進(jìn)行，每次2小時(shí)；所述的提取劑為60%的乙醇水溶液。
[0035]澄清除雜步驟中的澄清劑為天然中藥澄清劑KBT-ZTC ;所述步驟3)和4)中用到的洗脫劑為水溶液。
[0036]步驟5)中的乙醇精制為利用乙醇完全溶解干燥后得到的甜甙V，過(guò)濾除去沉淀物，再次濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%。
[0037]本實(shí)施例得到產(chǎn)品純度達(dá)98.2%。
[0038]實(shí)施例4
一種羅漢果甜甙V的制備方法，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑逆流提取或回流提取破碎后的羅漢果，提取劑與羅漢果的比例=4L:1kg，提取時(shí)間為5小時(shí)，得到提取液；
步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05kg:1L，攪拌均勻后，靜置25~40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液；
步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度1.6米，提取溶液吸附流速2.5BV/hr,吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.45L:1L，收集洗脫液I ；
步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.25L:1L，收集洗脫液II ；
步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為600rpm、溫度為30°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量≤10%,再經(jīng)過(guò)乙醇精制，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0039]提取步驟中采用回流提取時(shí)，回流提取分3次進(jìn)行，每次2小時(shí)；所述的提取劑為純水。
[0040]澄清除雜步驟中的澄清劑為天然中藥澄清劑KBT-ZTC ;所述步驟3)和4)中用到的洗脫劑為乙醇。
[0041]步驟5)中的乙醇精制為利用乙醇完全溶解干燥后得到的甜甙V，過(guò)濾除去沉淀物，再次濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%。
[0042]本實(shí)施例得到 產(chǎn)品純度達(dá)97.8%。
[0043]實(shí)施例5
一種羅漢果甜甙V的制備方法，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑60%乙醇水溶液回流提取破碎后的羅漢果3次，提取劑與羅漢果的比例=6L:1kg，每次提取時(shí)間為2.5小時(shí)，得到提取液；步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05kg:1L，攪拌均勻后，靜置25min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液；
步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度2米，提取溶液吸附流速2.5BV/hr,吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.5L:1L，收集洗脫液I ；
步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.2L:1L，收集洗脫液II ；
步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為500rpm、溫度為37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%，再用60%乙醇水溶液完全溶解甜甙V后過(guò)濾除去沉淀，再濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量(10%，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0044]本實(shí)施例得到產(chǎn)品純度達(dá)98.9%。
[0045]實(shí)施例6
一種羅漢果甜甙V的制備方法，該方法步驟包括:
步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑60%乙醇水溶液回流提取破碎后的羅漢果3次，提取劑與羅漢果的比例=6L:1kg，每次提取時(shí)間為2.5小時(shí)，得到提取液；步驟2)澄清除雜:在步驟I)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.1kg:1L，攪拌均勻后，靜置40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液；
步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度2米，提取溶液吸附流速2.5BV/hr,吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.5L:1L，收集洗脫液I ；步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.2L:1L，收集洗脫液II ；
步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為500rpm、溫度為37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量< 10%，再用60%乙醇水溶液完全溶解甜甙V后過(guò)濾除去沉淀，再濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量(10%，得到甜甙V產(chǎn)品。
[0046]本發(fā)明上述實(shí)施例方案僅是對(duì)本發(fā)明的說(shuō)明而不能限制本發(fā)明，權(quán)利要求中指出了本發(fā)明產(chǎn)品組成成分、成分比例、制備方法參數(shù)的范圍，而上述的說(shuō)明并未指出本發(fā)明參數(shù)的范圍，因此，在與本發(fā)明的權(quán)利要求書相當(dāng)?shù)暮x和范圍內(nèi)的任何改變，都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是包括在權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
[0047]本發(fā)明是經(jīng)過(guò)多位羅漢果甜甙V的制備方法的研究人員長(zhǎng)期工作經(jīng)驗(yàn)積累，并通過(guò)創(chuàng)造性勞動(dòng)創(chuàng)作而出 ，產(chǎn)品純度達(dá)97%以上。
【權(quán)利要求】
1.一種羅漢果甜甙V的制備方法，其特征在于，該方法步驟包括: 步驟1)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑逆流提取或回流提取破碎后的羅漢果，提取劑與羅漢果的比例=2~8L:1kg，提取時(shí)間為31小時(shí)，得到提取液； 步驟2)澄清除雜:在步驟1)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05、.1kg:1L，攪拌均勻后，靜置25~40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液； 步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度1.5^2米，提取溶液吸附流速l_4BV/hr，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.3^0.6L: 1L，收集洗脫液I ; 步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.f0.4L:lL，收集洗脫液II ； 步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為30(T800rpm、溫度為3(T37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量≤10%，再經(jīng)過(guò)乙醇精制，得到甜甙V產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果甜甙V的制備方法，其特征在于，所述的提取步驟中采用回流提取時(shí)，回流提取分2~3次進(jìn)行，每次2小時(shí)；所述的提取劑為40-80%的乙醇水溶液、純水中任一種。
3.根據(jù)權(quán)利1~2任一項(xiàng)所述的羅漢果甜甙V的制備方法，其特征在于，所述的澄清除雜步驟中的澄清劑為天然中藥澄清劑KBT-ZTC ;所述步驟3)和4)中用到的洗脫劑為乙醇或水溶液中的任一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的羅漢果甜甙V的制備方法，其特征在于，所述的步驟5)中的乙醇精制為利用乙醇完全溶解干燥后得到的甜甙V，過(guò)濾除去沉淀物，再次濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量≤10%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果甜甙V的制備方法，其特征在于，該方法步驟包括: 步驟I)提取:取成熟羅漢鮮果進(jìn)行破碎，用提取溶劑60%乙醇水溶液回流提取破碎后的羅漢果3次，提取劑與羅漢果的比例=6L:1kg，每次提取時(shí)間為2.5小時(shí)，得到提取液；步驟2)澄清除雜:在步驟1)得到的提取液中加入澄清劑，澄清劑與提取液的比例=0.05、.1kg:1L，攪拌均勻后，靜置25~40min，過(guò)濾除去沉淀，得到除雜后的溶液； 步驟3)上柱吸附:將步驟2)得到除雜后的溶液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂吸附，樹(shù)脂裝填高度2米，提取溶液吸附流速2.5BV/hr,吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.5L:1L，收集洗脫液I ； 步驟4) 二次上柱吸附:將步驟3)得到的洗脫液I通過(guò)離子交換樹(shù)脂吸附，吸附完成后用洗脫溶劑洗脫，洗脫劑與提取溶液比例=0.2L:1L，收集洗脫液II ； 步驟5)濃縮干燥精制:將步驟4)得到的洗脫液II采用真空離心濃縮干燥，在抽真空的情況下，離心速度為500rpm、溫度為37°C的條件下，濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量≤10%，再用60%乙醇水溶液完全溶解甜甙V后過(guò)濾除去沉淀，再濃縮干燥至甜甙V產(chǎn)品含水量≤10%，得到甜甙V產(chǎn)品。
【文檔編號(hào)】C07J17/00GK103980335SQ201410192274
【公開(kāi)日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年5月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月8日
【發(fā)明者】徐大鵬 申請(qǐng)人:徐大鵬