表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用，本發(fā)明的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物具有抑制肝癌的作用，能增強(qiáng)蒽環(huán)類抗癌藥療效，并降低其毒性。
【專利說明】表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體而言，涉及一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物制備及其抗腫瘤應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]肝癌是廣西的區(qū)域性高發(fā)腫瘤，在我國廣西、廣東等肝癌高發(fā)區(qū)肝癌死亡率超過總癌癥死亡率50%以上，嚴(yán)重危害勞動(dòng)人民的健康與生命安全，因此如何提高肝癌的治療療效迫在眉睫。蒽環(huán)類藥物是最有效的抗腫瘤藥物之一，包括柔紅霉素(DNR)和阿霉素(D0X)，被廣泛應(yīng)用于腫瘤的臨床治療。但在人類肝臟中廣泛存在的羰基還原酶I(carbonylreductasel, CBRl)能將柔紅霉素(DNR)轉(zhuǎn)化成一種新的醇代謝物柔紅霉素醇(DNR0L)。該代謝物不僅抗腫瘤活性降低，還可產(chǎn)生心臟毒性。這一代謝特點(diǎn)大大限制了它的臨床應(yīng)用。尋找羰基還原酶I的抑制劑對(duì)于此類抗生素的增效減毒很有必要。
[0003]缺氧誘導(dǎo)因子(HIFs)所介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與腫瘤發(fā)生、發(fā)展和耐藥密切相關(guān)。缺氧條件下，細(xì)胞通過高表達(dá)HIF-1 α，促進(jìn)下游靶基因的轉(zhuǎn)錄，這些下游靶基因轉(zhuǎn)錄的蛋白在缺氧反應(yīng)中起關(guān)鍵作用，如血管生成、細(xì)胞增殖、糖代謝和細(xì)胞存活等。HIF-1 α介導(dǎo)腫瘤新生血管形成和多藥耐藥原因主要有:(1)缺氧情況下，過表達(dá)的HIF-Ια調(diào)控其下游多種與血管生成有關(guān)的因子及其受體，如血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，使VEGF高表達(dá)，促進(jìn)腫瘤組織中新生血管的形成。(2) HIF-Ια激活CBRl的表達(dá)，增加肝癌細(xì)胞對(duì)順鉬及阿霉素等蒽環(huán)類藥物的耐受性。(3)HIF-la通過誘導(dǎo)多藥耐藥基因I (MDRl)的表達(dá)，使糖蛋白(P-gp)表達(dá)增高從而實(shí) 現(xiàn)七對(duì)腫瘤耐藥的調(diào)控。因此，HIF-1 α可作為潛在的抗腫瘤藥物篩選的靶點(diǎn)。
[0004]表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)藥理作用廣泛，具有抗氧化、降血脂、抗紫外線輻射、抑菌等作用，也具有明顯的抗腫瘤作用。EGCG通過抑制HIF-1 α蛋白的增加和VEGF/VEGFR的活性而抑制肝癌細(xì)胞的生長和肝癌新生血管的生成。還可通過抑制CBRl活性，增強(qiáng)DNR的抗腫瘤效果，降低其心臟毒性。但由于EGCG結(jié)構(gòu)中含有大量酚羥基，性質(zhì)不穩(wěn)定，易氧化變性，脂溶性差，生物利用度低、體內(nèi)代謝快，維持時(shí)間短，作用強(qiáng)度有待提高。因此，對(duì)EGCG開展結(jié)構(gòu)修飾優(yōu)化研究是本領(lǐng)域的一個(gè)重要課題。
[0005]到目前為止，還沒有EGCG烷基化衍生物增強(qiáng)蒽環(huán)類抗癌藥療效，并降低其毒性的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用，為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，擬采用如下技術(shù)方案:
[0007]本發(fā)明一方面涉及一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物選自:
[0008]①5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八 _0_ 乙基—EGCG、[0009]②5，7，3' ,4' ，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基—EGCG、
[0010]③5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG、
[0011]④5，7，3' ,4'，3"，4"-六 _0_ 乙基-EGCG、
[0012]⑤5，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG、
[0013]⑥5，3' ,4'，3"，4"，5"-六 _0_ 乙基-EGCG、
[0014]⑦5，7，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-八 _0_ 丙基-EGCG、
[0015]⑧5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 丙基-EGCG ;
[0016]優(yōu)選的，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物為5,7,3' ,4'，3"，4"-六-0-乙基46〇6(74)或5，3/ ,4'，3"，4"，5"-六-O-乙基-EGCG (y6)
[0017]在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還涉及含有上述表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物的藥物組合物。
[0018]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物組合物中還包括藥學(xué)上可接受的輔料和/或賦形劑。
[0019]在本發(fā)明的另 一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物組合物中包括有效量的蒽環(huán)類抗腫瘤藥物，優(yōu)選的，表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物與蒽環(huán)類抗腫瘤藥物的重量比是 100:1-10:1。
[0020]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的蒽環(huán)類抗腫瘤藥物為柔紅霉素(DNR)和/或阿霉素(D0X)。
[0021 ] 本發(fā)明另一方面涉及上述表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物或藥物組合物在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用。
[0022]在本發(fā)明中，如果無特殊說明，在化學(xué)名與結(jié)構(gòu)式發(fā)生沖突時(shí)，以結(jié)構(gòu)式為準(zhǔn)， 申請(qǐng)人:保留基于結(jié)構(gòu)式修改化學(xué)名的權(quán)利。
[0023]本發(fā)明的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物具有抑制肝癌的作用，能增強(qiáng)蒽環(huán)類抗癌藥療效，并降低其毒性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0024]圖1.EGCG和其三種衍生物對(duì)班馬魚心臟搏出量(strokevolume)的影響
[0025]其中:AcEGCG為表沒食子兒茶素沒食子酸酯全乙?；苌铮珽GCG為表沒食子兒茶素沒食子酸酯；Y3為5，7，4'，5'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG ;Y6為5，3'，4'，3"，4"，5"-六-O-乙基-EGCG?！鯙榭瞻讓?duì)照組；.為阿霉素組；其余條圖紋為阿霉素加受試藥組。
【具體實(shí)施方式】:
[0026]一、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)烷基化衍生物合成
[0027]1.EGCG烷基化衍生物合成
[0028]1.1乙基化EGCG合成反應(yīng)
[0029]秤取5gEGCG為反應(yīng)底物，加入200-800ml丙酮做反應(yīng)介質(zhì)，加入2_8gK2C03做催化劑，水浴50-85°C攪拌回流，用恒壓滴液漏斗滴加20-80ml (CH3CH2O) 2S02做乙基供體，水浴攪拌回流反應(yīng)12-36h，薄層層析檢測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。反應(yīng)液用冰醋酸調(diào)節(jié)pH=4-7，轉(zhuǎn)移到燒瓶內(nèi)，減壓蒸餾除去溶劑得到殘留物，加入乙酸乙酯溶解殘留物，轉(zhuǎn)移到分液漏斗內(nèi)，并用純化水洗滌，直到下層流出液為中性為止。取乙酸乙酯層，減壓蒸餾除去溶劑，得到乙基化反應(yīng)的混合產(chǎn)物，有待于進(jìn)行分離純化。
[0030]1.2丙基化EGCG合成反應(yīng)
[0031]秤取5gEGCG為反應(yīng)底物，加入200_800ml丙酮做反應(yīng)介質(zhì)，加入2_8ggK2C03做催化劑，水浴50-85°C攪拌回流，用恒壓滴液漏斗滴加20-80mlCH3CH2CH2I做丙基供體，水浴攪拌回流反應(yīng)12-36h，薄層層析檢測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。反應(yīng)液用冰醋酸調(diào)節(jié)pH=4-7，轉(zhuǎn)移到燒瓶內(nèi)，減壓蒸餾除去溶劑得到殘留物，加入乙酸乙酯溶解殘留物，轉(zhuǎn)移到分液漏斗內(nèi)，并用純化水洗滌，直到下層流出液為中性為止。取乙酸乙酯層，減壓蒸餾除去溶劑，得到丙基化反應(yīng)的混合產(chǎn)物，有待于進(jìn)行分離純化。
[0032]2.采用中壓制備液相色譜法分離純化反應(yīng)產(chǎn)物。對(duì)純化得到的化合物，通過1H-NMR, 13C-NMR, 2DNMR、質(zhì)譜等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
[0033]結(jié)果:共分離得到8個(gè)烷基化程度較高的EGCG衍生物，結(jié)構(gòu)鑒定分別為:
[0034]①5,7,3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八 _0_ 乙基—EGCG (yl)、
[0035]②5,7,3' ,4'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG (y2)、
[0036]③5,7,4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG (y3)、
[0037]④5,7,3' ,4'，3"，4"-六 _0_ 乙基-EGCG (y4)、
[0038]⑤5，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG (y5)、
[0039]⑥5,3' ,4'，3"，4"，5"-六 _0_ 乙基-EGCG (y6)、
[0040]⑦5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八 _0_ 丙基-EGCG (bl)、
[0041](8)5, TA'，5'，3"，4"，5"-七 _0_ 丙基-EGCG (b2)
[0042]3.乙基化EGCG產(chǎn)物(yl, y2, y3, y4, y5, y6共6個(gè)化合物)結(jié)構(gòu)解析
[0043]3.1 化合物 yl 命名為:5，7，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-八 _0_ 乙基-EGCG，分子式為C38H5tlO11,結(jié)構(gòu)式如下:
[0044]
【權(quán)利要求】
1.一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用，所述的衍生物選自: ①5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八-O-乙基-EGCG、 ②5，7，3' ,4'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG、 ③5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG、 ④5，7，3' ,4'，3"，4"-六-O-乙基-EGCG、 ⑤5，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG、 ⑥5，3' ,4'，3"，4"，5"-六-O-乙基-EGCG、 ⑦5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八-O-丙基-EGCG、 ⑧5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七-O-丙基-EGCG ; 優(yōu)選的，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物及其抗腫瘤應(yīng)用為5,7,3' ，4 ' ，3 "，4 "-六-O-乙基-EGCG 或 5，3 ' ，4 ' ，3 "，4 "，5 "-六-O-乙基-EGCG。
2.含有權(quán)利要求1所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物的藥物組合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所 述的藥物組合物，所述的藥物組合物中還包括藥學(xué)上可接受的輔料和/或賦形劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，所述的藥物組合物中包括有效量的蒽環(huán)類抗腫瘤藥物，優(yōu)選的，表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物與蒽環(huán)類抗腫瘤藥物的重量比是 100:1-10:1 ;優(yōu)選是 40:1-60:1。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，所述的蒽環(huán)類抗腫瘤藥物為柔紅霉素(DNR)和/或阿霉素(DOX)。
6.權(quán)利要求1所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯烷基化衍生物制備及其抗腫瘤作用在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求2-5任意一項(xiàng)所述的組合物在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C07D311/62GK103833719SQ201410087455
【公開日】2014年6月4日 申請(qǐng)日期:2014年3月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月11日
【發(fā)明者】梁鋼, 李麗, 劉布鳴, 李銘源 申請(qǐng)人:廣西醫(yī)科大學(xué)