專利名稱：一種利用動(dòng)物軟骨制備硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種動(dòng)物軟骨的加工技術(shù)，具體涉及一種酶解法提取和采用陰離子交換樹脂直接從軟骨酶解液中分離純化硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽的工藝。
背景技術(shù)：
我國是農(nóng)業(yè)大國，各類肉制品加工產(chǎn)生的下腳料——軟骨資源十分豐富，種類較多。動(dòng)物軟骨中富含硫酸軟骨素和膠原蛋白等活性成分，該類生物活性大分子被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化妝品等領(lǐng)域。硫酸軟骨素(Chondroitin Sulfate, CS)是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖構(gòu)成的重復(fù)二糖單位組成的酸性黏多糖，臨床上主要用于防治關(guān)節(jié)炎、治療神經(jīng)痛、關(guān)節(jié)痛、動(dòng)脈硬化癥、聽覺障礙及肝炎等疾病，對冠心病、風(fēng)濕性炎癥及傷口愈合等也具有良好的療效。膠原蛋白是動(dòng)物體內(nèi)含量最多、分布最廣的蛋白質(zhì)，廣泛存在于動(dòng)物的皮膚、骨、牙齒、肌腱韌帶和血管中。國內(nèi)外研究表明，膠原蛋白及水解所得的膠原蛋白多肽在促進(jìn)身體健康、提高免疫力及延緩衰老等方面具有重要作用。國內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)大都以軟骨為原料提取和分離硫酸軟骨素，而軟骨中占總蛋白90% 的膠原蛋白則被酶解和變性，只能用作蛋白飼料或隨廢水排放，產(chǎn)品附加值較低；而提取膠原蛋白及膠原蛋白多肽的原料仍以硬骨、動(dòng)物皮和魚鱗為主，未能實(shí)現(xiàn)軟骨資源的高值化利用。近年來，軟骨資源的綜合利用研究得到了廣泛重視。專利CN 1896262XN 101913583 通過酶解、醇沉，分別回收醇沉物得硫酸軟骨素，回收骨渣得高鈣粉，上清液濃縮干燥得膠原蛋白多肽。專利CN 101063161通過酶解、醇沉，得到硫酸軟骨素，骨渣經(jīng)二次酶解后，干燥得膠原蛋白多肽。專利CN 101041842通過在酶解液中加入復(fù)合蛋白阻沉劑，依次得到硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽。此外，專利CN 1721546AXN101492491AXN 101986859A等將酶解液進(jìn)行濃縮干燥，得到硫酸軟骨素與膠原蛋白多肽的復(fù)合物。上述工藝均在一定程度上實(shí)現(xiàn)了軟骨的綜合利用，但亦存在一些不足之處(1)復(fù)合物成分復(fù)雜，產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域受局限；( 利用軟骨酶解后的骨渣提取膠原蛋白多肽，工藝繁瑣，并且骨渣中膠原蛋白多肽含量少；C3)通過將酶解液醇沉得到硫酸軟骨素，雜蛋白含量較高。離子交換法依據(jù)流動(dòng)相中化合物酸堿性、極性和對離子交換劑親和力的差異，通過改變洗脫液的離子強(qiáng)度和PH值，依次分離物質(zhì)。在中性或酸性條件下，陰離子樹脂吸附結(jié)合硫酸軟骨素聚陰離子，而蛋白多肽則不被吸附。離子交換樹脂具有選擇性好、設(shè)備簡單、操作方便等優(yōu)點(diǎn)。將陰離子交換技術(shù)應(yīng)用于從軟骨酶解液中分離純化硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽，可實(shí)現(xiàn)軟骨的高值化利用，該方法未見報(bào)道。該法解決了傳統(tǒng)工藝中存在的原料利用不充分、產(chǎn)品單一或膠原蛋白含量較低等問題，并可顯著減少乙醇用量，具有廣闊的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明以各類肉制品加工產(chǎn)生的軟骨為原料，采用酶解-陰離子交換技術(shù)，從動(dòng)物軟骨中同時(shí)提取分離硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽生物活性大分子，實(shí)現(xiàn)了軟骨的高值化利用。同時(shí)，簡化生產(chǎn)工藝，降低生產(chǎn)成本，減少環(huán)境污染。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下—種利用動(dòng)物軟骨制備硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽的方法，所述方法為將動(dòng)物軟骨原料粉碎得軟骨粉末，軟骨粉末用蛋白酶水解后超濾濃縮得到濃縮液，將濃縮液過陰離子交換樹脂，收集流出液A，再用純水洗脫，收集水洗液B，流出液A與水洗液B合并后超濾濃縮，再噴霧干燥制得膠原蛋白多肽；再將陰離子交換樹脂柱用NaCl溶液洗脫，洗脫液超濾濃縮后經(jīng)醇沉、脫水、干燥制得硫酸軟骨素。進(jìn)一步，所述方法包括以下步驟(1)將動(dòng)物軟骨原料粉碎至平均粒徑為0. 1-lOmm，得軟骨粉末；軟骨粉末加蛋白酶和水，調(diào)節(jié)pH值至所述蛋白酶的最適pH值，進(jìn)行酶解反應(yīng)，控制酶解溫度在30-55°C之間，攪拌反應(yīng)2-12h ；然后加熱滅酶，冷卻后過濾取濾液，調(diào)pH值為中性，采用截留分子量為 1000-8000道爾頓的超濾膜超濾濃縮得到濃縮液，所述濃縮液中硫酸軟骨素的質(zhì)量百分濃度為1 20%;所述蛋白酶為下列之一中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶或酸性蛋白酶；所述蛋白酶的用量為軟骨粉末質(zhì)量的0. 1-1. 5%;水的用量為軟骨粉末質(zhì)量 5-30 倍；(2)步驟(1)所得濃縮液調(diào)pH值至2. 0-7. 0，過陰離子交換樹脂柱，收集流出液A ； 用純水洗脫，收集水洗液B，流出液A與水洗液B合并，調(diào)節(jié)pH值為中性，采用截留分子量為 1000-8000道爾頓的超濾膜超濾濃縮至蛋白的質(zhì)量濃度為5-30%，再噴霧干燥得膠原蛋白多肽；(3)步驟(2)的陰離子交換樹脂柱再用l-6mol/L NaCl溶液為洗脫劑，對硫酸軟骨素進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，調(diào)節(jié)PH值為中性，采用截留分子量為1000-8000道爾頓的超濾膜超濾濃縮至硫酸軟骨素的質(zhì)量濃度為1-30%，經(jīng)醇沉，脫水，干燥，制得硫酸軟骨素。所述動(dòng)物軟骨原料是經(jīng)曬干或烘干后含水量低于15wt%的動(dòng)物軟骨，所述動(dòng)物軟骨可以為鯊魚軟骨、豬鼻骨、豬喉骨、牛鼻骨或雞胸骨等。所述步驟(1)中，所述調(diào)節(jié)pH值至所述蛋白酶的最適pH值，是指根據(jù)反應(yīng)中具體使用的蛋白酶，選擇其反應(yīng)活性最高的PH范圍。本發(fā)明所用的蛋白酶都是已知的商用酶， 本領(lǐng)域技術(shù)人員公知其最佳反應(yīng)PH值，應(yīng)當(dāng)能夠根據(jù)實(shí)際反應(yīng)情況作出合適的選擇。更具體的，中性蛋白酶的最適PH值為6. 0 8. 0，堿性蛋白酶的最適pH值為8. 5 10. 5，木瓜蛋白酶的最適pH值為6. 0 7. 0，菠蘿蛋白酶的最適pH值為6. 0 6. 8，酸性蛋白酶的最適pH值為2. 5 6.0。進(jìn)一步，本發(fā)明實(shí)施例中所使用的蛋白酶的活力分別為堿性蛋白酶為20萬U/g， 菠蘿蛋白酶為MOO GDU/g，酸性蛋白酶為5萬U/g，中性蛋白酶為20萬U/g，木瓜蛋白酶為 65 萬 U/g。所述步驟(1)中，所述加熱滅酶通常是在70-100°C，保溫10-60min，進(jìn)行滅酶。所述蛋白酶優(yōu)選為酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶或中性蛋白酶，最優(yōu)選中性蛋白酶。本發(fā)明所述的調(diào)節(jié)PH值采用的試劑通常為NaOH溶液或HCl溶液，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)實(shí)際PH值和所需PH值選擇合適的試劑進(jìn)行調(diào)節(jié)。所述步驟⑵中，步驟⑴所得濃縮液調(diào)PH值至2. 0-7.0，優(yōu)選調(diào)pH值為 3. 0-5. O0
所述的陰離子交換樹脂為下列之一 D315、D202、D307、D208、D215、D218、D301或 D354 ；優(yōu)選為下列之一 D218、D202、D307、D215 或 D3540所述的陰離子交換樹脂的濕樹脂體積以濃縮液中硫酸軟骨素的質(zhì)量計(jì)為10-30L/ kg，優(yōu)選為 15-20L/kg。所述步驟⑴中濃縮液中硫酸軟骨素的質(zhì)量百分濃度為1 20%以及步驟(3)中超濾濃縮至硫酸軟骨素的質(zhì)量濃度為1_30%，這里硫酸軟骨素的質(zhì)量百分濃度可采用電位滴定法跟蹤實(shí)時(shí)檢測，濃縮至所需濃度即可。所述步驟O)中，所述濃縮液調(diào)pH值至2. 0-7.0，過陰離子交換樹脂柱，所述過陰離子交換樹脂的流速為0. l-10VB/h，優(yōu)選為l-5VB/h。所述步驟⑵中，用純水洗脫，所述的純水通過陰離子交換樹脂的流速為 0. l_15VB/h，優(yōu)選為 l-10VB/ho所述純水通常是指去離子水、蒸餾水或醫(yī)用純水，是本領(lǐng)域技術(shù)人員常用的。所述純水的用量為0. 1-10倍柱體積，優(yōu)選為2-5倍柱體積。所述步驟(3)中，洗脫劑為l-6mol/L NaCl溶液，優(yōu)選使用2-3mol/L NaCl溶液。 NaCl溶液的用量為1-20倍柱體積，優(yōu)選為5-15倍柱體積。NaCl溶液通過陰離子交換樹脂的流速為0. l_15VB/h，優(yōu)選為l-10VB/h。所述步驟(3)中，超濾濃縮至硫酸軟骨素的質(zhì)量濃度為1_30%，優(yōu)選濃縮至硫酸軟骨素的質(zhì)量濃度為2-10%。所述步驟(3)中，所述醇沉、脫水、干燥通?？砂匆韵路椒ú僮鬟厰嚢柽吋尤塍w積為超濾濃縮后的濃縮液體積的3 4倍的體積百分濃度95%乙醇水溶液，取沉淀，再加入體積百分濃度95%乙醇水溶液脫水，最后，真空干燥得到硫酸軟骨素。這是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的醇沉、脫水技術(shù)。所述脫水用的95%乙醇水溶液的體積用量通常以硫酸軟骨素質(zhì)量計(jì)為6 10L/kg。本發(fā)明所述的超濾濃縮可采用截留分子量為1000-8000道爾頓的超濾膜，優(yōu)選為 3000-6000道爾頓的超濾膜。本發(fā)明采用酶解提取、陰離子交換技術(shù)和超濾技術(shù)聯(lián)產(chǎn)高純度硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽，與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果體現(xiàn)在(1)實(shí)現(xiàn)軟骨資源的高值化利用，可同時(shí)高效提取分離硫酸軟骨素與膠原蛋白多肽，提高產(chǎn)品附加值。(2)提高硫酸軟骨素產(chǎn)品的質(zhì)量。陰離子交換樹脂對硫酸軟骨素有吸附選擇性，可顯著降低硫酸軟骨素產(chǎn)品中雜蛋白的含量。(3)提高膠原蛋白多肽產(chǎn)品的質(zhì)量。本工藝聯(lián)產(chǎn)的膠原蛋白多肽色澤較白、無異味、灰分低、分子量范圍較均一，集中分布在4000道爾頓以下。該分子量范圍的膠原蛋白多肽穩(wěn)定性和生物活性好，易被吸收，可有效補(bǔ)充人體無法自主合成的羥脯氨酸。(4)通過蛋白回收，減少環(huán)境污染，經(jīng)濟(jì)效益及環(huán)境效益明顯。(5)降低了能耗和生產(chǎn)成本，工藝路線短，操作簡單。綜上，本發(fā)明方法實(shí)現(xiàn)了軟骨資源的綜合利用，具有提取率高、吸附選擇性好、產(chǎn)品純度高、乙醇消耗量較低、工藝簡單、污染小等優(yōu)點(diǎn)，有利于節(jié)約資源和降低能耗，推動(dòng)動(dòng)物提取物行業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展。

圖1是根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例1得到的膠原蛋白多肽樣品的高效液相色譜圖。圖2是分子量標(biāo)準(zhǔn)品艾塞那肽(分子量為4186.6，純度彡98%，吉爾生化(上海) 有限公司)的高效液相色譜圖。
具體實(shí)施例方式以下以具體實(shí)施例說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于此。以下實(shí)施例中所述硫酸軟骨素及膠原蛋白多肽的檢測條件及計(jì)算方法為硫酸軟骨素產(chǎn)品的定性和定量分析以市售的硫酸軟骨素標(biāo)準(zhǔn)品為對照，進(jìn)行高效液相色譜分析，出峰時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品基本一致。所述硫酸軟骨素產(chǎn)品中硫酸軟骨素的含量 (%)=產(chǎn)品中硫酸軟骨素的質(zhì)量/產(chǎn)品質(zhì)量(干品)X100;所述產(chǎn)品中硫酸軟骨素的收率(％)=產(chǎn)品中硫酸軟骨素的質(zhì)量/軟骨原料質(zhì)量(1-含水量)X100;產(chǎn)品中硫酸軟骨素的質(zhì)量以硫酸軟骨素標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線(峰面積與濃度之間的關(guān)系)計(jì)算。所述硫酸軟骨素產(chǎn)品中的雜蛋白含量采用Lowry法檢測，以市售的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品為對照。膠原蛋白多肽產(chǎn)品的定性和定量分析羥脯氨酸是膠原蛋白的特征氨基酸，以市售的羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)品為對照，采用Woessner比色法檢測羥脯氨酸的含量。含氮量采用凱氏定氮法檢測。所述膠原蛋白多肽產(chǎn)品中總蛋白的含量(％)=產(chǎn)品含氮量X6. 25/產(chǎn)品質(zhì)量(干品)X 100 ；所述產(chǎn)品中總蛋白的收率(％ )=產(chǎn)品含氮量X6. 25/軟骨原料質(zhì)量 (1-含水量)X 100。產(chǎn)品的分子量分布采用高效凝膠排阻色譜法測定，檢測條件如下柱子為TSK-GEL G2000SWXL色譜柱(300mm X 7. 8讓，5 μ m)，室溫，流動(dòng)相為45%乙腈(含0. 1 % 三氟乙酸溶液)，流速0. SmL · mirT1，檢測波長214nm。所述膠原蛋白多肽產(chǎn)品中灰分含量的分析方法參照GB/T 5009. 4-2003 (食品中灰分的測定)。軟骨原料和膠原蛋白多肽中氨基酸成分的分析由中國林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所采用氨基酸自動(dòng)分析儀(HITACHI，L-8900)完成。本發(fā)明中所用的陰離子交換樹脂D315，D202，D307，D208，D215，D218，D301和D!354 可分別購自上海華震科技有限公司、浙江爭光實(shí)業(yè)股份有限公司。本發(fā)明中所用的中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、酸性蛋白酶均購自廣西南寧龐博生物工程有限公司。實(shí)施例1將曬干的鯊魚軟骨(含水量8% )粉碎至平均粒徑約為0. I-Imm,準(zhǔn)確稱取10kg， 分別加入0. Ikg堿性蛋白酶OO萬U/g)和100L水，用質(zhì)量濃度為40% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH 至9.0，55°C下攪拌12h。酶解結(jié)束后，升溫至70°C，保溫30min，滅酶。待酶解液冷卻后， 過濾，取濾液，用6mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH值7，超濾濃縮(超濾膜截留分子量為3000)，得硫酸軟骨素濃度20%的濃縮液9. 8L(電位滴定法檢測濃縮液中硫酸軟骨素的含量)。用 6mol/L HCl溶液將濃縮液pH調(diào)至2. 0，以2VB/h的流速過濕樹脂體積為39L的D202型陰離子交換樹脂柱，收集流出液A ；接著，用78L純水以lVB/h的流速洗脫，收集水洗液B，合并流出液A及水洗液B，用質(zhì)量濃度為40% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值7，超濾濃縮(超濾膜截留分子量為3000)至10L，噴霧干燥，得膠原蛋白多肽產(chǎn)品2. 35kg，產(chǎn)品中總蛋白含量92%，收率23. 5 %，羥脯氨酸含量7. 8%，灰分2. 3 %，分子量小于4000道爾頓。然后，陰離子交換樹脂柱再用390L 1. 5mol/L NaCl溶液以5VB/h的流速洗脫，收集洗脫液，用質(zhì)量濃度為40% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值7，超濾濃縮(超濾膜截留分子量為3000) 至20L，加60L體積百分濃度95%乙醇醇沉，取沉淀，再加16L體積百分濃度95%乙醇脫水， 取固體真空干燥，得硫酸軟骨素產(chǎn)品1. 96kg，產(chǎn)品中硫酸軟骨素含量97 %，收率20. 7 %，雜蛋白含量1.6%。對鯊魚軟骨原料和制得的膠原蛋白多肽產(chǎn)品進(jìn)行氨基酸成分的分析，所得結(jié)果如下表1。表1.鯊魚軟骨原料與膠原蛋白多肽中氨基酸的成分分析結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種利用動(dòng)物軟骨制備硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽的方法，其特征在于所述方法為將動(dòng)物軟骨原料粉碎得軟骨粉末，軟骨粉末用蛋白酶水解后超濾濃縮得到濃縮液，將濃縮液過陰離子交換樹脂柱，收集流出液A，再用純水洗脫，收集水洗液B，流出液A與水洗液 B合并后超濾濃縮，再噴霧干燥制得膠原蛋白多肽；再將陰離子交換樹脂柱用NaCl溶液洗脫，洗脫液超濾濃縮后經(jīng)醇沉、脫水、干燥制得硫酸軟骨素。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟(1)將動(dòng)物軟骨原料粉碎至平均粒徑為0.1-lOmm，得軟骨粉末；軟骨粉末加蛋白酶和水，調(diào)節(jié)PH值至所述蛋白酶的最適pH值，進(jìn)行酶解反應(yīng)，控制酶解溫度在30-55°C之間， 攪拌反應(yīng)2-12h ；然后加熱滅酶，冷卻后過濾取濾液，調(diào)pH值為中性，采用截留分子量為 1000-8000道爾頓的超濾膜超濾濃縮得到濃縮液，所述濃縮液中硫酸軟骨素的質(zhì)量百分濃度為1 20%;所述蛋白酶為下列之一中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶或酸性蛋白酶；所述蛋白酶的用量為軟骨粉末質(zhì)量的0. 1-1. 5%;水的用量為軟骨粉末質(zhì)量 5-30 倍；(2)步驟(1)所得濃縮液調(diào)pH值至2.0-7.0，過陰離子交換樹脂柱，收集流出液A ；用純水洗脫，收集水洗液B，流出液A與水洗液B合并，調(diào)節(jié)pH值為中性，采用截留分子量為 1000-8000道爾頓的超濾膜超濾濃縮至蛋白的質(zhì)量濃度為5-30%，再噴霧干燥得膠原蛋白多肽；(3)步驟( 的陰離子交換樹脂柱再用l-6mol/LNaCl溶液為洗脫劑，對硫酸軟骨素進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，調(diào)節(jié)PH值為中性，采用截留分子量為1000-8000道爾頓的超濾膜超濾濃縮至硫酸軟骨素的質(zhì)量濃度為1-30%，經(jīng)醇沉，脫水，干燥，制得硫酸軟骨素。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述動(dòng)物軟骨原料是經(jīng)曬干或烘干后含水量低于15wt%的動(dòng)物軟骨。
4.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述陰離子交換樹脂為下列之一D315、 D202、D307、D208、D215、D218、D301 或 D354。
5.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(2)中，所述陰離子交換樹脂的濕樹脂體積以濃縮液中硫酸軟骨素的質(zhì)量計(jì)為10-30L/kg。
6.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟O)中，所述濃縮液調(diào)pH值至 2. 0-7. 0，過陰離子交換樹脂柱，所述過陰離子交換樹脂的流速為0. l-10VB/h。
7.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟O)中，用純水洗脫，所述的純水通過陰離子交換樹脂的流速為0. l_15VB/h，所述純水的用量為0. 1-10倍柱體積。
8.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中，NaCl溶液的用量為1_20倍柱體積，通過陰離子交換樹脂的流速為0. l-15VB/h。
9.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述加熱滅酶是在 70-100°C，保溫10-60min的條件下，進(jìn)行滅酶。
10.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中，所述醇沉、脫水、干燥按以下方法操作邊攪拌邊加入體積為超濾濃縮后的濃縮液體積的3 4倍的體積百分濃度 95%乙醇水溶液，取沉淀，再加入體積百分濃度95%乙醇水溶液脫水，最后，真空干燥得到硫酸軟骨素。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用動(dòng)物軟骨制備硫酸軟骨素和膠原蛋白多肽的方法將動(dòng)物軟骨原料粉碎得軟骨粉末，軟骨粉末用蛋白酶水解后超濾濃縮得到濃縮液，將濃縮液過陰離子交換樹脂柱，收集流出液A，再用純水洗脫，收集水洗液B，流出液A與水洗液B合并后超濾濃縮，再噴霧干燥制得膠原蛋白多肽；再將陰離子交換樹脂柱用NaCl溶液洗脫，洗脫液超濾濃縮后經(jīng)醇沉、脫水、干燥制得硫酸軟骨素。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)軟骨資源的高值化利用，可同時(shí)高效提取分離硫酸軟骨素與膠原蛋白多肽，提高產(chǎn)品附加值，減少環(huán)境污染。
文檔編號C07K1/34GK102533915SQ201110459348
公開日2012年7月4日 申請日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者朱興一, 楊明富, 王平, 王清榮, 蘇為科, 謝捷 申請人:嘉興恒杰生物制藥有限公司, 浙江工業(yè)大學(xué)