專利名稱：用依帕珠單抗治療自體免疫和炎性疾病的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用抗CD22抗體(特別是依帕珠單抗)治療自體免疫和炎性疾病，特別是全身性紅斑狼瘡。
背景技術(shù)：
自體免疫疾病包括超過(guò)80種慢性疾病，其影響約5 % -8 %的一般性群體。近幾十年中，在了解免疫系統(tǒng)方面取得了重要進(jìn)展，這使得更好地領(lǐng)會(huì)到B細(xì)胞在下列中的作用 先天性免疫和適應(yīng)性免疫之間的相互作用，淋巴細(xì)胞活化和抗原加工，免疫耐受的原理，B 細(xì)胞和T細(xì)胞串?dāng)_(crosstalk)，細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)和通過(guò)耗竭或調(diào)節(jié)B細(xì)胞來(lái)治療自體免疫疾病的新方法(包括阻斷共刺激)。B細(xì)胞被認(rèn)為在自體免疫疾病(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病、原發(fā)性干燥綜合征、血管炎和全身性紅斑狼瘡(SLE))的免疫病原性中有中心的重要性。B細(xì)胞代表用于治療自體免疫病癥的靶標(biāo)。迄今為止，有若干靶向 B細(xì)胞特異性抗原以耗竭或調(diào)節(jié)B細(xì)胞的治療性抗體，利妥昔單抗(抗CD20嵌合抗體)，奧瑞珠單抗(人源化的抗CD20抗體)，奧法木單抗(人抗CD20抗體)和貝利單抗(抗BlyS 或BAFF人抗體)。用利妥昔單抗進(jìn)行的臨床研究顯示出，在利妥昔單抗的簡(jiǎn)短給藥方案之后，不可檢測(cè)到循環(huán)的B細(xì)胞。用抗CD20抗體耗竭B細(xì)胞是治療自體免疫疾病的新方法。 然而，與B細(xì)胞耗竭相關(guān)的持續(xù)免疫抑制關(guān)于傳染性和腫瘤疾病的出現(xiàn)增加給患者造成了風(fēng)險(xiǎn)。迄今為止，可獲得有限的長(zhǎng)期安全性數(shù)據(jù)。因此，本領(lǐng)域中需要開(kāi)發(fā)對(duì)于涉及B細(xì)胞的自體免疫病癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、SLE、干燥綜合征或血管炎)的治療，這涉及調(diào)節(jié)B 細(xì)胞活性而沒(méi)有嚴(yán)重的B細(xì)胞耗竭，從而增加治療的安全性。全身性紅斑狼瘡(SLE)被歸類為可涉及許多器官系統(tǒng)的自體免疫疾病、炎性多系統(tǒng)風(fēng)濕病或膠原血管病。在一些研究中，對(duì)于歐洲和美國(guó)被影響的個(gè)體數(shù)目的估算在M 至6 5例/100，000人口的范圍內(nèi)。狼瘡的促發(fā)因素包括亞洲或非洲人種和女性性別。90% 患有狼瘡的患者是女性，并且癥狀的出現(xiàn)通常發(fā)生在15至50歲之間。全身性紅斑狼瘡似乎不是均一性的疾病而是一組相關(guān)的綜合征，其具有廣泛變化的呈現(xiàn)、身體系統(tǒng)參與的程度和臨床病程。在SLE中常見(jiàn)的臨床特征為血液和淋巴病癥(淋巴結(jié)病)，心臟病癥(例如心肌病、心包積液、心包炎)，眼睛病癥(例如干燥性角結(jié)膜炎)，胃腸病癥(例如口腔潰瘍，胰腺炎，腹膜炎，咽炎)，一般性病癥(例如不適、疲勞、發(fā)熱、重量減少)，神經(jīng)系統(tǒng)病癥 (例如腦血管意外、認(rèn)知障礙、偏頭痛、頭痛、外周性神經(jīng)疾患)，肌肉骨骼及結(jié)締組織病癥 (例如關(guān)節(jié)痛、關(guān)節(jié)炎(不是腐蝕性或破壞性的)、纖維肌痛、破裂、肌炎、骨壞死、骨質(zhì)疏松、 骨質(zhì)減少)，精神病學(xué)病癥(例如情緒障礙、焦慮、抑郁、神經(jīng)癥、由一般性的醫(yī)療狀況引起的精神障礙、精神病病癥)，腎和泌尿系統(tǒng)病癥(例如狼瘡性腎炎、腎病綜合征)，呼吸系統(tǒng)、 胸及縱隔病癥(例如胸膜炎、肺炎、肺動(dòng)脈高壓)，皮膚和皮下組織病癥(例如脫發(fā)、皮膚紅斑狼瘡、皮炎、全身紅斑、網(wǎng)狀青斑、脂膜炎、丘斑疹、全身性紅斑狼瘡疹、蕁麻疹)和血管病癥(例如高血壓、雷諾現(xiàn)象、毛細(xì)血管擴(kuò)張、血小板減少癥、血栓性靜脈炎、血管炎)。此外， 大多數(shù)SLE患者呈現(xiàn)出異常的抗體樣式，這包括存在抗核(ANA)和抗雙鏈DNA(抗dsDNA) 抗體。
SLE的臨床病程是階段性的，其緊接著增加潛在的障礙和器官損傷而復(fù)發(fā)爆發(fā)。皮質(zhì)類固醇是治療的基石，但是其與大量的副作用相關(guān)，所述副作用最常見(jiàn)于長(zhǎng)期使用的過(guò)程中。較低水平活性的設(shè)置中所使用的其它藥物包括鎮(zhèn)痛藥、非類固醇類抗炎藥(NSAIDs)、 局部類固醇類藥和抗瘧藥(例如氯喹或羥基氯喹)，而常見(jiàn)的支持性藥物包括用于腎性高血壓或雷諾綜合征的血管擴(kuò)張劑(鈣通道阻斷劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶[ACE]抑制劑)，局部治療疹或干燥綜合征(sicca syndrome)，輸注，用于血細(xì)胞減少的靜脈內(nèi)(i. v.)球蛋白， 抗驚厥藥，抗偏頭痛藥物，用于復(fù)發(fā)性血栓形成的抗凝藥，以及抗抑郁藥。高劑量的皮質(zhì)類固醇(例如0.5至1.0 mg/kg/天口服潑尼松(或等同物)或500mg至Ig每日脈沖(pulse) i.v.甲潑尼松)被用于處理急性SLE爆發(fā)，而免疫抑制劑(例如硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、麥考酚酸酯、來(lái)氟米特)一般被用于中度和嚴(yán)重的情形中(當(dāng)其它的治療無(wú)效時(shí))或者用于限制或預(yù)防由疾病或皮質(zhì)類固醇應(yīng)用(“類固醇節(jié)制”)引起的長(zhǎng)期主要器官損傷。 這種現(xiàn)存的治療性醫(yī)療設(shè)備是不足的，因?yàn)槠溆邢薜男Я秃?或不良反應(yīng)特征。盡管對(duì)于具有良好安全性特征的新的有效的SLE療法有高的醫(yī)療需求，已證實(shí)此類療法的開(kāi)發(fā)是特別困難的，并且許多候選的療法都失敗了(Eisenberg，2009)。唾液酸粘附素CD22是免疫球蛋白超家族中細(xì)胞粘附分子組的成員，其顯示出以末端唾液酸殘基結(jié)合聚糖。CD22是130-kDa的蛋白，其含有七個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域、短的跨膜序列和78個(gè)氨基酸的胞質(zhì)尾部。CD22是細(xì)胞表面糖蛋白，其獨(dú)特地位于B細(xì)胞和源自B細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞上。緊接著B(niǎo)細(xì)胞的活化，細(xì)胞表面CD22的表達(dá)水平起初增加，但是隨后在被分化為產(chǎn)生抗體的細(xì)胞后被下調(diào)。CD22在B細(xì)胞活化中的關(guān)鍵性作用為開(kāi)發(fā)干擾B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的試劑提供了非常好的可能性。鼠單克隆抗體LL2(原始命名為EPB-2)是B細(xì)胞(⑶22)特異性Ig^a單克隆抗體，其為針對(duì)Raji Burkitt淋巴瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，并被發(fā)現(xiàn)對(duì)于正常B細(xì)胞和B細(xì)胞腫瘤有高選擇性，但是與霍奇金氏病、實(shí)體腫瘤或非淋巴組織不反應(yīng)(Pawlak-Byczkowska et al., 1989)。在LL2的嵌合之后(Leung et al.，1994)，開(kāi)發(fā)了鼠LL2的人源化IgG1 (κ)形式用于臨床應(yīng)用，并將其命名為依帕珠單抗0iLL2) (Leung et al.，1995)。通過(guò)將鼠親本源抗體的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)嫁接到人1 遺傳骨架中而制造了編碼依帕珠單抗的構(gòu)建體。所產(chǎn)生的依帕珠單抗僅在抗原結(jié)合位點(diǎn)處含有原始的鼠序列，其構(gòu)成分子的大約10%，其余的部分是人框架序列。在原發(fā)性斯耶格倫綜合征(Steinfeldet al.，2006)和 SLE(Steinfeld and Youinou,2006)中進(jìn)行了使用依帕珠單抗進(jìn)行的有限非盲I期臨床研究。在兩個(gè)研究中，都應(yīng)用了下列給藥方案隔周一次、連續(xù)4次施用劑量為360mg/m2身體表面的依帕珠單抗。結(jié)果顯示依帕珠單抗在治療上述自體免疫病癥中的臨床效果，如由數(shù)個(gè)用于SLE的參數(shù)(包括英倫三島狼瘡評(píng)測(cè)小組(BILAG)評(píng)分)所確定的。由于所參與的患者數(shù)目有限，并且這些初步研究缺少安慰劑對(duì)照或活性對(duì)照臂，保證了進(jìn)行進(jìn)一步的研究來(lái)證實(shí)依帕珠單抗的效力，特別是來(lái)確定使用依帕珠單抗來(lái)治療自體免疫和炎性疾病(特別是SLE)的優(yōu)選劑量和給藥方案。發(fā)明概述在患有活躍疾病的血清學(xué)-陽(yáng)性SLE患者中，對(duì)依帕珠單抗的安全性和效力進(jìn)行了臨床nb期的隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照的、劑量以及劑量方案變化的研究。此研究被確定為 UCB 研究 SL0007。有趣地，試驗(yàn)顯示出，在用依帕珠單抗治療炎癥或自體免疫疾病(例如SLE)時(shí)，所施用的劑量與所觀察到的效力之間有非線性的關(guān)系，因此，所施用的最高水平的劑量不是最有效的。事實(shí)上，劑量和效力之間的關(guān)系被更好地表征為鐘型分布。令人驚訝地，所提供的最高劑量處的效力低于中等劑量時(shí)所觀察到的效力，并且總體而言，在這種高劑量時(shí)患者的應(yīng)答僅略高于對(duì)于安慰劑所觀察到的應(yīng)答。此外，查看8周和12周的BILAG改進(jìn)評(píng)分， 發(fā)現(xiàn)最高的劑量比安慰劑差。作為此研究的結(jié)果，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了依帕珠單抗在治療自體免疫和炎性疾病(特別是 SLE)中的新給藥方案。令人驚訝地，給出最佳結(jié)果的所述新給藥方案不要求向需要治療的患者施用最高的劑量，而是中等的劑量。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性疾病的方法， 所述方法包括向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗或包含其的組合物，施用的量為400 至SOOmg (優(yōu)選600mg)，給藥方案包括在4至20周(優(yōu)選8至16周，更優(yōu)選12周)的治療周期中每周一次地施用依帕珠單抗或包含其的組合物4次。此外，所述研究確立了用于隔周進(jìn)行一次的治療方案中的最有效的劑量。有趣地， 甚至當(dāng)隔周施用一次時(shí)(作為1200mg/施用)，此劑量相對(duì)于安慰劑顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著效力。因此，在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗或包含其的組合物，施用的量為1000至1400mg (優(yōu)選1200mg)，給藥方案包括在4至20周(優(yōu)選8至16周，更優(yōu)選12 周)的治療周期中隔周一次地施用依帕珠單抗或包含其的組合物2次。在其它的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性病癥(特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、血管炎或斯耶格倫綜合征)的方法，所述方法包括向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗或包含其的組合物，施用的量為400至SOOmg(優(yōu)選 600mg)，給藥方案包括每周一次地施用所述組合物4次，進(jìn)行至少一個(gè)12周的治療周期。在其它的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性病癥(特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、血管炎或斯耶格倫綜合征)的方法，所述方法包括向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗或包含其的組合物，施用的量為1000至1400mg (優(yōu)選 1200mg)，給藥方案包括在12周的治療周期中，隔周一次地施用所述組合物2次。在其它的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性疾病(特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、血管炎或斯耶格倫綜合征)的方法，所述方法包括施用依帕珠單抗或包含其的組合物，其中以MOOmg依帕珠單抗的累計(jì)劑量每周一次或隔周一次地施用依帕珠單抗或包含其的組合物，優(yōu)選以600mg依帕珠單抗的劑量每周一次地施用4次，或以1200mg依帕珠單抗的劑量隔周一次地施用2次。在其它的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及試劑盒，其包括(a)含量如本發(fā)明的任意實(shí)施方案中所述的依帕珠單抗；以及用于分別按照本發(fā)明的任意實(shí)施方案定量施用(a)的組合物的說(shuō)明書(shū)。


圖1顯示了研究設(shè)計(jì)。在雙盲、安慰劑對(duì)照的、隨機(jī)、輔助性治療設(shè)計(jì)中治療具有高中度至嚴(yán)重疾病活躍性的患者(如通過(guò)BILAG 2004工具所證實(shí)的)，每周一次定量給藥總共進(jìn)行4次盲輸注，篩選期為2周或更短。要求通過(guò)美國(guó)學(xué)院風(fēng)濕病學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和SLE的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志物(例如對(duì)于抗核抗體為陽(yáng)性)均將患者確診為SLE。每4周進(jìn)行追蹤的安全性和效力評(píng)估。在第12周時(shí)測(cè)量主要終點(diǎn)(組合指數(shù)應(yīng)答)。不需要皮質(zhì)類固醇劑量漸減 (taper) 0本研究不提供在治療臂之間進(jìn)行單獨(dú)的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。本研究的目的是通過(guò)從許多不同的劑量水平收集數(shù)據(jù)來(lái)尋找總體的劑量應(yīng)答，從而使得能夠鑒別出最佳的依帕珠單抗劑量和給藥方案。圖2顯示了第1 2周時(shí)，意向治療(ITT)群體中基于主要效力終點(diǎn)的組合指數(shù)應(yīng)答。在隔周一次(EOW)接受1200 mg依帕珠單抗的臂中，37名患者中的兩名被隨機(jī)化但從未被給藥。在初步分析中，過(guò)早終止治療階段的受試者被歸類為非應(yīng)答者。提供了 95%的置信區(qū)間(Cl)。圖3顯示了第12周時(shí)ITT群體中的應(yīng)答者百分比，如由組合指數(shù)應(yīng)答率(主要效力變量)所確定的。在隔周一次(EOW)接受1200mg依帕珠單抗的臂中，37名患者中的兩名被隨機(jī)化但從未被給藥。在初步分析中，過(guò)早終止治療階段的受試者被歸類為非應(yīng)答者。 在初步分析中，對(duì)于總體治療效果所評(píng)估的所有6個(gè)治療臂的P值為P = O. 148。沒(méi)有針對(duì)多重比較調(diào)節(jié)P值。圖4顯示了第12周時(shí)，通過(guò)羅吉斯回歸分析的、意向治療(ITT)組中的組合指數(shù)應(yīng)答。過(guò)早終止治療階段的受試者被歸類為非應(yīng)答者。應(yīng)用了具有下列因子的羅吉斯模型 治療組、基線處的疾病嚴(yán)重性和基線處的相伴的免疫抑制性應(yīng)用。為了測(cè)定劑量效應(yīng)的比值比，將每周一次600mg的依帕珠單抗作為1200mg的劑量進(jìn)行分析。提供了 95%的置信區(qū)間(Cl)。圖5顯示了第8周和第12周時(shí)應(yīng)答者的百分比，如由組合指數(shù)應(yīng)答率所確定的。 在第8周時(shí)，每周一次(QW)施用600mg Emab和隔周一次(EOW)施用1200 mg Emab的治療臂中的應(yīng)答已經(jīng)比其它治療臂中的應(yīng)答更好。圖6顯示了第12周時(shí)，通過(guò)羅吉斯回歸分析的、意向治療(ITT)組中的組合指數(shù)應(yīng)答。通過(guò)末次觀察轉(zhuǎn)入(LOCF)輸入了第12周時(shí)數(shù)據(jù)缺失的受試者。應(yīng)用了具有下列因子的羅吉斯模型治療組、基線處的疾病嚴(yán)重性和基線處的相伴的免疫抑制性應(yīng)用。提供了 95%的置信區(qū)間(Cl)。圖7顯示了通過(guò)探訪的BILAG改進(jìn)。BILAG改進(jìn)被定義為研究開(kāi)始時(shí)的BILAG“A” 評(píng)分改進(jìn)至評(píng)分“B”，“C”，“D”，而研究開(kāi)始時(shí)的BILAG “B”評(píng)分改進(jìn)至評(píng)分“C”或“D”。 此外，患者在其它BILAG器官系統(tǒng)中必須“沒(méi)有BILAG惡化’，從而沒(méi)有新的BILAG “A”評(píng)分或兩個(gè)新的BILAG “B”評(píng)分。圖8顯示了 BILAG總評(píng)分-自基線的最小二乘方平均變化-第1 2周。還顯示了 ANCOVA模型，具有對(duì)于治療組的效果、基線總BILAG評(píng)分、基線處的疾病嚴(yán)重性以及基線處的相伴的免疫抑制性應(yīng)用。圖9顯示了 ITT組中的BILAG總評(píng)分-隨時(shí)間的平均評(píng)分。圖10顯示了 6個(gè)治療臂與安慰劑之間的比值比，以及95%的置信區(qū)間(Cl)。相比于其它治療臂，每周一次(QW)施用600mg Emab和隔周一次(EOW)施用1200 mg Emab的治療臂的比值比以及95% CI顯著更高。圖11顯示了第12周時(shí)，治療臂中的BILAG改進(jìn)和增強(qiáng)的BILAG改進(jìn)。BILAG改進(jìn)被定義為研究開(kāi)始時(shí)的BILAG A改進(jìn)至B/C/D，而研究開(kāi)始時(shí)的BILAG B改進(jìn)至C/D。此夕卜，患者在其它BILAG器官系統(tǒng)中必須“沒(méi)有BILAG惡化，，，從而沒(méi)有新的BILAG A或兩個(gè)新的BILAG B。增強(qiáng)的BILAG應(yīng)答被定義為研究開(kāi)始時(shí)的BILAG A改進(jìn)至C/D，而研究開(kāi)始時(shí)的BILAG B改進(jìn)至C/D。此外，對(duì)于增強(qiáng)的BILAG應(yīng)答，患者在其它BILAG器官系統(tǒng)中必須“沒(méi)有BILAG惡化”，從而沒(méi)有新的BILAGA或兩個(gè)新的BILAG B。在第12周時(shí)，每周一次 (QW)施用600 mg Emab和隔周一次(EOW)施用1200 mg Emab的治療臂顯示出顯著的BILAG 應(yīng)答以及增強(qiáng)的BILAG應(yīng)答。圖12顯示了依帕珠單抗的輕鏈的氨基酸序列(SEQ ID NO :1)。圖1 3顯示了依帕珠單抗的重鏈的氨基酸序列(SEQ ID NO 2)。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及治療其中施用依帕珠單抗為有益的自體免疫或炎性疾病的方法。本發(fā)明的各種實(shí)施方案涉及用依帕珠單抗治療自體免疫或炎性疾病。在患有活躍疾病的血清學(xué)-陽(yáng)性SLE患者中，對(duì)依帕珠單抗的安全性和效力進(jìn)行了臨床nb期的隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照的、劑量以及劑量方案變化的研究。在一個(gè)治療周期后第12周時(shí)，在主要終點(diǎn)測(cè)量的所有依帕珠單抗治療臂與安慰劑相比都具有優(yōu)越的應(yīng)答率。令人驚訝地，對(duì)于用依帕珠單抗進(jìn)行的治療的最佳應(yīng)答是使用特定的劑量和給藥方案而實(shí)現(xiàn)的。最有效的劑量和給藥方案不要求所測(cè)試的最高累計(jì)劑量(3600 mg)而僅要求MOO mg的累計(jì)劑量。與其它的研究臂相比，4次每周一次600 mg 和2次隔周一次1200 mg的給藥方案都顯示出顯著更高的效力。然而，低為200 mg的累計(jì)劑量在試驗(yàn)中顯示出了效力。在患有活躍SLE的患者的應(yīng)答方面，最佳的效果是在12周的治療周期中進(jìn)行4 次、每周一次600 mg依帕珠單抗的給藥而實(shí)現(xiàn)的。為了使本發(fā)明可能更易理解，首先定義某些術(shù)語(yǔ)。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“給藥”是指施用物質(zhì)(例如依帕珠單抗)、或包含其的藥物組合物，以達(dá)到治療目的(例如，治療自體免疫或炎性疾病)。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“累計(jì)劑量”是指在一定的時(shí)間段中(例如一個(gè)12周的治療周期中)所施用的依帕珠單抗的總量。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“每周一次”當(dāng)與用依帕珠單抗或包含其的組合物治療、 依帕珠單抗或包含其的組合物的施用或給藥相聯(lián)系時(shí)，是指每5、6或優(yōu)選7天施用依帕珠單抗或所述組合物。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“隔周一次”當(dāng)與用依帕珠單抗或包含其的組合物治療、 依帕珠單抗或包含其的組合物的施用或給藥相聯(lián)系時(shí)，是指每9-19天(更優(yōu)選每11-17 天、甚至更優(yōu)選每13-15天、最優(yōu)選每14天)施用依帕珠單抗或所述組合物。隔周一次施用的給藥方案不意在包括每周一次施用的給藥方案。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“治療周期”是指這樣的時(shí)間段其中在施用了依帕珠單抗之后是沒(méi)有施用依帕珠單抗的時(shí)間段。通常，在12周的治療周期中，在12周治療周期的開(kāi)始4周中向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗[例如每周一次施用4次(即在開(kāi)始4周中每周一次、施用4次)或者隔周一次(即在開(kāi)始4周中隔周一次、施用2次)]，隨后在治療周期的最后8周中不施用依帕珠單抗。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“依帕珠單抗”是指人源化的抗體，其在本領(lǐng)域中作為國(guó)際非專利藥品名稱(INN)已知為依帕珠單抗并且作為人源化LL2被描述于美國(guó)專利號(hào) 5，789,5 中。依帕珠單抗具有的輕鏈具有SEQ ID NO :1中所示的氨基酸序列，其具有的重鏈具有SEQ ID NO 2中所示的氨基酸序列。術(shù)語(yǔ)“BILAG評(píng)分”或“BILAG”指數(shù)分別指英倫三島狼瘡評(píng)測(cè)小組評(píng)分和指數(shù)。在研究SL0007中，BILAG指數(shù)被用于評(píng)估在患有SLE的患者中的治療效力。其為用于測(cè)量SLE 疾病活躍性的綜合指數(shù)。BILAG指數(shù)的2004版本被用于研究中(Eisenberg，2009 ；Isenberg et al.，200幻。此版本由8個(gè)身體系統(tǒng)(一般的，粘膜皮膚的，神經(jīng)學(xué)的，肌肉骨骼的，心血管的和呼吸系統(tǒng)的，血管炎的，腎臟的和血液學(xué)的)中的86個(gè)問(wèn)題組成。這些問(wèn)題中有一些是基于患者的歷史，一些是基于檢查的發(fā)現(xiàn)，其它的是基于實(shí)驗(yàn)室結(jié)果。每個(gè)身體系統(tǒng)評(píng)分的范圍為E至A，其中A是最嚴(yán)重的疾病活躍性。對(duì)身體系統(tǒng)評(píng)分的解釋如下M “活躍”)=嚴(yán)重活躍的疾病(足以要求疾病調(diào)整治療，例如超過(guò)20 mg/天的潑尼松，免疫抑制齊U，細(xì)胞毒性劑)；B(“小心”)=中度活躍的疾病(僅要求癥狀性治療，例如少于或等于20 mg/天的潑尼松或抗瘧藥；C (“滿意”)=溫和穩(wěn)定的疾病(對(duì)于治療中的改變沒(méi)有指示)； D =以前活躍的疾病-但現(xiàn)在沒(méi)有；E =沒(méi)有之前的疾病活躍性。當(dāng)BILAG字母順序器官身體系統(tǒng)評(píng)分被轉(zhuǎn)換為數(shù)值并匯總時(shí)(使用這樣的規(guī)則，其中每個(gè)BILAGA = 9，每個(gè)BILAG B =3，每個(gè)BILAG C = 1且每個(gè)BILAG D或E價(jià)值為0)，這被稱作總BILAG評(píng)分。術(shù)語(yǔ)“SLEDAI評(píng)分”或“SLEDAI”指數(shù)分別是指全身性紅斑狼瘡疾病活躍性評(píng)分/ 指數(shù)(Hawker et al.，199 3)。如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)“自體免疫疾病”或“炎性疾病”是指其中病理生理學(xué)和/ 或疾病癥狀中牽涉B細(xì)胞的自體免疫疾病或炎性疾病。此類自體免疫疾病和炎性疾病也可被稱為B細(xì)胞介導(dǎo)的自體免疫疾病或炎性疾病B細(xì)胞被顯示在各種自體免疫或炎性疾病的病理生理學(xué)中起作用(Browning，2006 drowning，2006)。例如，自體免疫疾病和炎性疾病包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，斯耶格倫綜合征，ANCA相關(guān)血管炎，抗磷脂綜合征，特發(fā)性血小板減少，自體免疫溶血性貧血，格林巴利綜合征，慢性免疫多神經(jīng)病，自體免疫甲狀腺炎，I型糖尿病，愛(ài)迪生氏病，膜性腎小球腎病，古德帕斯徹氏病，自體免疫胃炎，惡性貧血，pemiphigus vulgarus,原發(fā)性膽汁性肝硬化，皮肌炎_多發(fā)性肌炎，重癥肌無(wú)力，乳糜瀉，免疫球蛋白A腎病，Henoch- Schonlein purpura,慢性移植物排斥，特應(yīng)性皮炎，哮喘，過(guò)敏，系統(tǒng)性硬化，多發(fā)性硬化，神經(jīng)萊姆病，潰瘍性結(jié)腸炎，間質(zhì)性肺疾病。在第一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗用于在4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13， 14或15周，更優(yōu)選12周)的治療周期中每周一次以400至800 mg的量施用4次。在第二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以 500至700 mg的量施用。在第三個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以550至650 mg的量施用。在第四個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第三個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以 600 mg的量施用。在第五個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于在4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15周，更優(yōu)選12周)的治療周期中隔周一次以1000至1400 mg 的量施用2次。在第六個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第五個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以 1100至1300 mg的量施用。在第七個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第六個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以 1150至1250 mg的量施用。在第八個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第七個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以 1200 mg的量施用。治療慢性病癥(例如炎性和自體免疫疾病，包括SLE)，可涉及治療周期的重復(fù)。治療周期可在例如數(shù)年中重復(fù)；例如可重復(fù)如本文中所公開(kāi)的12周治療周期從而治療炎性和自體免疫疾病。因此，在第九個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案1-8中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于在多于一個(gè)4-20周(優(yōu)選8至16周，更優(yōu)選1 2周)的治療周期中施用。在第十個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案1-9中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于靜脈內(nèi)施用。在第十一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第十個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以8至12 mg/ml (優(yōu)選9至llmg/ml，且優(yōu)選10 mg/ml)依帕珠單抗的濃度施用。在第十二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案1-9中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于皮下施用。在第十三個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案1-9中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于肌內(nèi)施用。在第十四個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第十三個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中所述疾病為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，斯耶格倫綜合征或血管炎。在第十五個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案1-14中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于在至少2個(gè)10至14周(優(yōu)選12周)的治療周期中施用。在其它的實(shí)施方案中，依帕珠單抗或包含其的組合物用于根據(jù)本發(fā)明在3，4，5，6，7，8，10，12，15，20，30，40，50 或更多的治療周期中施用，包括治療周期的終生重復(fù)。在第十六個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于治療自體免疫或炎性疾病，包括施用依帕珠單抗或包含其的組合物，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于在4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15周，更優(yōu)選12周) 的治療周期中以MOO mg依帕珠單抗的累計(jì)劑量每周一次或隔周一次施用。在第十七個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第十六個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物用于以600 mg依帕珠單抗的劑量每周一次施用或以1200 mg依帕珠單抗的劑量隔周一次施用。在第十八個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第十七個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病，其中所述自體免疫或炎性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，SLE，斯耶格倫綜合征或血管炎。在第十九個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，用于根據(jù)本發(fā)明的第十七個(gè)或第十八個(gè)實(shí)施方案中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病，其中依帕珠單抗或包含其的組合物在多于一個(gè)4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15 周，更優(yōu)選12周)的治療周期中施用。在第二十個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及試劑盒，其包括(a)含量如第一至第十九個(gè)實(shí)施方案中的任一個(gè)所述的依帕珠單抗或包含其的組合物，以及用于分別根據(jù)本發(fā)明的第一至第十九個(gè)實(shí)施方案中的任一個(gè)定量施用(a)的依帕珠單抗的說(shuō)明書(shū)。在第二十一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及依帕珠單抗或包含其的組合物，其用于與其它活性化合物相結(jié)合而治療自體免疫或炎性疾病，特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，SLE，斯耶格倫綜合征，血管炎。在第二十二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗或包含其的組合物，施用的量為400至800 mg，給藥方案包括在4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13，14或 15周，更優(yōu)選12周)的治療周期中每周一次施用依帕珠單抗4次。在第二十三個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第二十二個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以500至700 mg的量施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第二十四個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第二十三個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以550至650 mg的量施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第二十五個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第二十四個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以600 mg的量施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第二十六個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療人受試者中的自體免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括向需要治療的人受試者施用依帕珠單抗或包含其的組合物，施用的量為1000至1400 mg，給藥方案包括在4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13，14 或15周，更優(yōu)選12周)的治療周期中隔周一次施用依帕珠單抗或包含其的組合物2次。
在第二十七個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第二十六個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以1100至1300 mg的量施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第二十八個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第二十七個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以1150至1250 mg的量施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第二十九個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第二十八個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以1200 mg的量施用依帕珠單抗或包含其的組合物。對(duì)于慢性病癥(例如炎性和自體免疫疾病，包括SLE)的治療，可涉及治療周期的重復(fù)。治療周期可在例如數(shù)年中重復(fù)；例如可重復(fù)如本文中所公開(kāi)的1 2周治療周期從而治療炎性和自體免疫疾病。因此，在第三十個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案22-29中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中所述治療方法包括多于一個(gè)4至20周(優(yōu)選8 至16周，更優(yōu)選12周)的治療周期。在第三十一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案22-30中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中靜脈內(nèi)施用依帕珠單抗或包含其的組合物。 在第三十二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第三十一個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中組合物中的依帕珠單抗的濃度為8至12 mg/ml，優(yōu)選9至 11 mg/ml，且優(yōu)選10 mg/ml依帕珠單抗。在第三十三個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案22-30中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中依帕珠單抗或包含其的組合物是皮下施用的。在第三十四個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案22-30中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中依帕珠單抗或包含其的組合物是肌內(nèi)施用的。在第三十五個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案22-34中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中所述疾病為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，全身性紅斑狼瘡，斯耶格倫綜合征或血管炎。在第三十六個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案22-35中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中給藥方案包括至少2個(gè)10至14周(優(yōu)選12周)的治療周期。在其它實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明，治療包括3，4，5，6，7，8，10，12，15，20，30，40，50 或更多個(gè)治療周期，包括治療周期的終生重復(fù)。在第三十七個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療自體免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括施用依帕珠單抗或包含其的組合物，其中在4至20周(優(yōu)選8至16周，例如9，10， 11，12，13，14或15周，更優(yōu)選12周)的治療周期中以MOO mg依帕珠單抗的累計(jì)劑量每周一次或隔周一次施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第三十八個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第三十七個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中以600 mg依帕珠單抗的劑量每周一次或以1200 mg依帕珠單抗的劑量隔周一次施用依帕珠單抗或包含其的組合物。在第三十九個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第三十八個(gè)實(shí)施方案治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中所述自體免疫或炎性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，SLE，斯耶格倫綜合征或血管炎。在第四十個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第三十八或三十九個(gè)實(shí)施方案中的任一個(gè)治療自體免疫或炎性疾病的方法，其中所述治療方法包括多于一個(gè)4至20周 (優(yōu)選8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15周，且更優(yōu)選12周)的治療周期。在第四十一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及試劑盒，其包括(a)含量如本發(fā)明的實(shí)施方案22-40中的任一個(gè)所述的依帕珠單抗或包含其的組合物，以及用于分別按照本發(fā)明的實(shí)施方案1-19中的任一個(gè)定量施用(a)的依帕珠單抗的說(shuō)明書(shū)。在第四十二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于與其它活性化合物相組合而治療自體免疫或炎性疾病的方法，特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，SLE，斯耶格倫綜合征，血管炎。在其它的實(shí)施方案中，將其它活性化合物摻入根據(jù)本發(fā)明的包含依帕珠單抗的組合物中。在某些實(shí)施方案中，依帕珠單抗與一種或多種其它治療劑共配制和/或共施用。例如，依帕珠單抗可與下列共配制和/或共施用皮質(zhì)類固醇，非類固醇類抗炎藥(NSAIDs)， 氯喹，羥基氯喹，甲氨蝶呤，來(lái)氟米特，硫唑嘌呤，麥考酚酸酯，環(huán)磷酰胺，苯丁酸氮芥和環(huán)孢菌素，麥考酚酸酯，CD20拮抗劑，例如利妥昔單抗、奧瑞珠單抗、維妥珠單抗或奧法木單抗、 阿巴他塞，TNF拮抗劑，例如依那西普、他羅利姆、去氫表雄酮、來(lái)那度胺，CD40拮抗劑，例如抗CD40L抗體、阿貝莫司鈉和/或貝利木單抗。在其它實(shí)施方案中，可根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案將依帕珠單抗或包含其的組合物與一種或多種前述治療劑組合使用。此類組合療法可有利地利用所施用治療劑的更低的劑量，從而避免與各種單一療法相關(guān)的可能的毒性或并發(fā)癥。用于根據(jù)本發(fā)明的方法使用的依帕珠單抗可被衍生化或與另一種功能性分子 (例如毒素或放射性核素)相連。因此，本發(fā)明的抗體和抗體部分意在包括衍生的和經(jīng)其它修飾的形式的、本文所描述的依帕珠單抗。例如，依帕珠單抗可被功能性連接至(通過(guò)化學(xué)偶聯(lián)、遺傳融合、非公價(jià)締合或其它方式)一種或多種其它分子實(shí)體，例如可檢測(cè)的試劑、 細(xì)胞毒性試劑、藥物試劑和/或可介導(dǎo)依帕珠單抗與另一種分子(例如抗生蛋白鏈菌素核心區(qū)域或多組氨酸標(biāo)簽)的締合的蛋白或肽。用于根據(jù)本發(fā)明的方法使用的依帕珠單抗任選地與另一種試劑相綴合，所述另一種試劑為例如細(xì)胞毒性試劑(例如毒素，例如白喉毒素、美坦辛、美坦生類化合物、多柔比星、卡奇霉素、奧佐米星、auristatin、auristatin的衍生物(例如一甲基auristatin)、假單胞菌外毒素、蓖麻毒素、蓖麻毒素A鏈、液絲(brin)、相思豆毒素、槲寄生植物凝集素、蒴蓮根毒素、商陸抗病毒蛋白、PAP、皂草素、欖香膠素Kbryodinl)、稷木毒素(bouganin)、白樹(shù)毒素或α -八疊球菌)；放射性核素(例如鈧-47，銅-64，銅-67，鎵-67，釔-90，釔-91， 鈀-103，銠-105，銦-111，錫-117，碘-125，碘-131，釤-153，鏑-166，鈥-166，鐿-175， 錸-186，錸-188，镥-177，釔-192，鋨-194，金-198或鉍-213)；或者細(xì)胞因子(例如IL-2 或TNF)。用于根據(jù)本發(fā)明的方法的依帕珠單抗也可與治療劑綴合，所述治療劑為例如化學(xué)治療劑、治療性多肽、納米顆粒、脂質(zhì)體或治療性核酸，或與顯像劑(例如酶、放射性核素或熒光團(tuán))綴合?？赏ㄟ^(guò)在宿主細(xì)胞中重組表達(dá)免疫球蛋白輕鏈和重鏈基因來(lái)制備依帕珠單抗。為了重組地表達(dá)抗體，用一種或多種攜帶編碼抗體的免疫球蛋白輕鏈和重鏈DNA的片段的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，從而使得所述輕鏈和重鏈在所述宿主細(xì)胞中表達(dá)，并且優(yōu)選地被分泌到培養(yǎng)宿主細(xì)胞的培養(yǎng)基中，所述抗體可從所述培養(yǎng)基中回收。使用標(biāo)準(zhǔn)的重組DNA 方法來(lái)獲得抗體重鏈和輕鏈基因，將這些基因并入重組表達(dá)載體中并將所述載體弓I入宿主細(xì)胞中，例如在 Sambrook, Fritsch 禾口 Maniatis (eds), Molecular Cloning ；A Laboratory Manual,第二版，Cold Spring Harbor, N. Y. , (1989) > Ausubel, F. M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989)禾口美國(guó)專利號(hào)4，816，39 7中所描述的。為了表達(dá)依帕珠單抗，將通過(guò)本領(lǐng)域中已知的重組DNA技術(shù)獲得的編碼輕鏈和重鏈的DNA插入表達(dá)載體中，從而使所述基因可操作地連接至轉(zhuǎn)錄和翻譯控制序列。在此情境中，術(shù)語(yǔ)“可操作地連接”意在指將抗體基因連接到載體中，從而使得載體中的轉(zhuǎn)錄和翻譯控制序列發(fā)揮其調(diào)節(jié)依帕珠單抗基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯的預(yù)期功能。選擇表達(dá)載體和表達(dá)控制序列，而使其與所使用的表達(dá)宿主細(xì)胞相容。依帕珠單抗輕鏈基因和依帕珠單抗重鏈基因可被插入單獨(dú)的載體中，或者更通常地，將兩個(gè)基因都插入相同的表達(dá)載體中。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的方法(例如，連接依帕珠單抗基因片段和載體上的互補(bǔ)性限制位點(diǎn)，或者在不存在限制位點(diǎn)時(shí)進(jìn)行平末端連接)將抗體基因插入表達(dá)載體中。重組表達(dá)載體可編碼促進(jìn)抗體鏈從宿主細(xì)胞分泌的信號(hào)肽?？蓪⒖贵w鏈基因克隆到載體中，從而使得信號(hào)肽與依帕珠單抗鏈基因的氨基末端符合閱讀框地連接。信號(hào)肽可以是免疫球蛋白信號(hào)肽或異源信號(hào)肽(即來(lái)自非免疫球蛋白的信號(hào)肽)。除了依帕珠單抗的抗體鏈基因之外，本發(fā)明的重組表達(dá)載體攜帶控制抗體鏈基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)的調(diào)控序列。術(shù)語(yǔ)“調(diào)控序列”意在包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和控制抗體鏈基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯的其它表達(dá)控制元件(例如，多腺苷酸化信號(hào))。此類調(diào)控序列被描述于，例如 Goeddel ；Gene Expression Technology :Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. (1990)中。本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)，表達(dá)載體的設(shè)計(jì)(包括調(diào)控序列的選擇)可取決于例如下列因素待轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞的選擇、所需蛋白的表達(dá)水平等。 用于哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞表達(dá)的優(yōu)選調(diào)控序列包括指導(dǎo)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高水平蛋白表達(dá)的病毒元件，例如源自下列的啟動(dòng)子和/或增強(qiáng)子巨細(xì)胞病毒(CMV)(例如CMV啟動(dòng)子/ 增強(qiáng)子)，猿猴病毒40 (SV40)(例如SV40啟動(dòng)子/增強(qiáng)子)，腺病毒[例如，腺病毒主要晚期啟動(dòng)子(AdMLP)]和多瘤病毒。除了抗體鏈基因和調(diào)控序列外，重組表達(dá)載體可攜帶其它的序列，例如調(diào)控載體在宿主細(xì)胞中的復(fù)制的序列(例如，復(fù)制的起始)和選擇性標(biāo)記基因。選擇性標(biāo)記基因促進(jìn)選擇在其中引入了載體的宿主細(xì)胞(見(jiàn)例如美國(guó)專利號(hào)5，179，017)。為了表達(dá)輕鏈和重鏈，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)將編碼重鏈和輕鏈的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞中。術(shù)語(yǔ)“轉(zhuǎn)染”的各種形式意在包括通常用于將外源性DNA引入原核或真核宿主細(xì)胞中的各種技術(shù)，例如電穿孔、磷酸鈣沉淀、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染等。雖然理論上可能在原核或真核宿主細(xì)胞中表達(dá)本發(fā)明的抗體，在真核細(xì)胞(最優(yōu)選在哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞中)表達(dá)抗體是最優(yōu)選的，因?yàn)榕c原核細(xì)胞相比，此類真核細(xì)胞(特別是哺乳動(dòng)物細(xì)胞)更有可能組裝并分泌恰當(dāng)折疊且有免疫活性的抗體。用于表達(dá)用于根據(jù)本發(fā)明的方法的重組依帕珠單抗的優(yōu)選哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞包括中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CH0細(xì)胞)、NS0骨髓瘤細(xì)胞、COS細(xì)胞和SP2細(xì)胞。當(dāng)將編碼抗體基因的重組表達(dá)載體引入哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞中時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)宿主細(xì)胞一定的時(shí)間段而產(chǎn)生抗體，所述時(shí)間段足以允許所述抗體在宿主細(xì)胞中表達(dá)，或更優(yōu)選地，足以允許抗體分泌到宿主細(xì)胞所生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中。可使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白純化方法從培養(yǎng)基中回收抗體。在用于重組表達(dá)依帕珠單抗的優(yōu)選系統(tǒng)中，通過(guò)磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將編碼抗體重鏈和抗體輕鏈二者的重組表達(dá)載體引入dhfr-CHO細(xì)胞中。在重組表達(dá)載體中，抗體重鏈和輕鏈基因各自與CMV增強(qiáng)子/AdMLP啟動(dòng)子調(diào)控元件可操作地連接，以驅(qū)動(dòng)基因的高水平轉(zhuǎn)錄。重組表達(dá)載體還攜帶DHFR基因，其允許使用甲氨蝶呤選擇/擴(kuò)增來(lái)選擇經(jīng)載體轉(zhuǎn)染的 CHO細(xì)胞。培養(yǎng)所選擇的轉(zhuǎn)化體宿主細(xì)胞以允許抗體重鏈和輕鏈的表達(dá)，并且從培養(yǎng)基中回收完整的抗體。使用標(biāo)準(zhǔn)的分子生物學(xué)技術(shù)來(lái)制備重組表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，選擇轉(zhuǎn)化體，培養(yǎng)宿主細(xì)胞并從培養(yǎng)基中回收抗體。適于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的方法向人受試者施用的優(yōu)選組合物包含依帕珠單抗和藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或穩(wěn)定劑。如本文中所使用的，“藥學(xué)上可接受的載體” 包括生理學(xué)上相容且適于向受試者施用而用于本文所描述的方法的任何及所有的溶劑、分散介質(zhì)、涂層、抗細(xì)菌和抗真菌試劑、等張劑和吸收延遲劑等?？山邮艿妮d體、賦形劑或穩(wěn)定劑以所采用的劑量和濃度對(duì)于接受者是非毒性的，并且包括緩沖劑(例如磷酸、檸檬酸和其它有機(jī)酸)；抗氧化劑(包括抗壞血酸和甲硫氨酸)；防腐劑(例如十八烷基二甲基芐基氯化銨；氯化六烴季銨；苯扎氯銨，芐索氯銨；苯酚，丁醇或芐醇；烷基-苯甲酸酯，例如甲基-或丙基-苯甲酸酯；兒茶酚；間苯二酚；環(huán)己醇；3-戊醇；和間甲酚)；低分子量 (不超過(guò)大約1 0個(gè)氨基酸殘基)的肽；蛋白質(zhì)，例如血清白蛋白，明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、組氨酸、精氨酸或賴氨酸；單糖類、二糖類及其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精類；螯合劑，例如 EDTA ；糖，例如蔗糖、甘露糖、海藻糖或山梨醇；形成鹽的抗衡離子，例如鈉；金屬絡(luò)合物(例如Si-蛋白質(zhì)絡(luò)合物)；和/或非離子性表面活性劑，例如TWEEN，PLUR0NICS或聚乙二醇。治療性組合物通常在制造和儲(chǔ)存的條件下必須是無(wú)菌且穩(wěn)定的?？梢匀芤夯騼龈傻男问脚渲扑鼋M合物?？捎帽景l(fā)明的劑量和根據(jù)本發(fā)明的給藥方案將依帕珠單抗用于治療自體免疫或炎性疾病，特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊柱炎、血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病、銀屑病、銀屑病性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、斯耶格倫綜合征、血管炎、過(guò)敏、多發(fā)性硬化癥、I型糖尿病、自體免疫葡萄膜炎和腎病綜合征。在本說(shuō)明書(shū)的情境中，包含意指包括。在技術(shù)上適當(dāng)?shù)臅r(shí)候，可將本發(fā)明的實(shí)施方案相組合。現(xiàn)在將參考下列實(shí)施例來(lái)描述本發(fā)明，所述實(shí)施例僅僅是示例性的而不應(yīng)以任何方式被解釋為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1在IIb期的隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照的、劑量和劑量方案變化的關(guān)于依帕珠單抗的安全性和效力的研究中，對(duì)患有活躍疾病的SLE患者進(jìn)行治療。在此研究中，根據(jù)下列方案，用依帕珠單抗治療患有活躍SLE的189名患者。用安慰劑處理38名患者。
權(quán)利要求
1.依帕珠單抗，用于治療自體免疫或炎性疾病，其中在12周的治療周期中以400至800 mg的量每周一次施用依帕珠單抗4次。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的依帕珠單抗，其中以500至700mg的量施用依帕珠單抗。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的依帕珠單抗，其中以550至650mg的量施用依帕珠單抗。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的依帕珠單抗，其中以600mg的量施用依帕珠單抗。
5.依帕珠單抗，用于治療自體免疫或炎性疾病，其中在12周的治療周期中以1000至 1400 mg的量隔周一次施用2次依帕珠單抗。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于以1100至1300mg的量施用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中依帕珠單抗用于以1150至1250mg的量施用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于以1200mg的量施用。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于靜脈內(nèi)施用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于在組合物中以10mg/ml的濃度施用。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于皮下施用。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于肌內(nèi)施用。
13.依帕珠單抗，用于治療自體免疫或炎性疾病，其中所述依帕珠單抗用于在12周的治療周期中以MOO mg依帕珠單抗的累計(jì)劑量每周一次或隔周一次施用。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于以600mg依帕珠單抗的劑量每周一次施用，或用于以1200 mg依帕珠單抗的劑量隔周一次施用。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的依帕珠單抗，其中所述自體免疫或炎性疾病為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、斯耶格倫綜合征或血管炎。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的依帕珠單抗，其中依帕珠單抗用于在多于一個(gè)12周的治療周期中施用。
17.試劑盒，其包括a)含量如權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的依帕珠單抗，和b)用于分別根據(jù)權(quán)利要求1-16中的任一項(xiàng)定量施用a)的依帕珠單抗的說(shuō)明書(shū)。
全文摘要
本發(fā)明涉及用針對(duì)CD22的抗體治療自體免疫或炎性病癥。特別地，本發(fā)明涉及以新的給藥方案用依帕珠單抗治療自體免疫或炎性病癥。更特別地，本發(fā)明涉及治療SLE。
文檔編號(hào)C07K16/28GK102574920SQ201080041215
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月18日
發(fā)明者A-M·諾沃特尼-巴里, G·L·帕克, R·赫爾赫文, V·A·霍斯金 申請(qǐng)人:Ucb醫(yī)藥有限公司