專利名稱：一種從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以植物為原料提取制備有效成分的方法，具體涉及從杜仲葉中分離純 化綠原酸的方法。背景技術(shù)：
杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)，古稱“曼榆”，又名“木棉”，屬杜仲科落葉喬 木，為我國(guó)特有的經(jīng)濟(jì)樹(shù)種，已有2000多年的栽培歷史，產(chǎn)地分布全國(guó)，總量占世界90% 以上。杜仲植物的干燥樹(shù)皮具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、降血壓、抗腫瘤、抗菌等諸多功效，但杜仲 皮一般需生長(zhǎng)15 20年，周期長(zhǎng)、資源相對(duì)緊缺且昂貴。杜仲葉的資源相對(duì)豐富、易得， 全國(guó)約有杜仲林觀萬(wàn)公頃，每年可產(chǎn)落葉達(dá)400萬(wàn)噸，而其利用率僅占可采集葉的10% 20%，這些豐富的杜仲葉資源一直被人們所忽視。近年來(lái)大量研究表明杜仲葉中綠原酸等 黃酮類物質(zhì)含量豐富，其主要化學(xué)成分與杜仲皮的化學(xué)成分基本一致，有一定的互補(bǔ)性，因 此利用杜仲葉提取具有多種藥理活性物質(zhì)，充分利用我國(guó)的植物資源具有重要的經(jīng)濟(jì)意義 和現(xiàn)實(shí)意義。
綠原酸為咖啡酸奎尼酸衍生物，具有利膽、抗菌、抗病毒、減壓、增高白血球及調(diào)節(jié) 中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多種藥理作用，作為重要原料廣泛用于保健品，藥品、化妝品等工業(yè)。綠原 酸多從植物中提取獲得，目前國(guó)內(nèi)外主要從生咖啡豆和金銀花中提取綠原酸。杜仲葉中綠 原酸含量為 5.5%，該含量在植物葉子中屬于較高者，因此從杜仲葉中分離提取綠原 酸具有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。
微波是利用分子極化或離子導(dǎo)電效應(yīng)而直接對(duì)物質(zhì)進(jìn)行加熱的一種處理技術(shù)，因 此微波輔助提取有效成分，能對(duì)不同組分進(jìn)行選擇性加熱，使目標(biāo)組分更容易從提取物中 分離出來(lái)，且熱效率高，能有效地提高提取效率。因此，微波輔助提取在原有單純?nèi)軇┨崛?的基礎(chǔ)上，可以有效地提高目標(biāo)物的分離提取率，是物質(zhì)分離提取中一種有效的輔助手段。
高速逆流色譜技術(shù)(High-Speed Counter-current Chroma-tography, HSCCC)是 當(dāng)前國(guó)際上較新型無(wú)固體載體的液-液分配技術(shù)。HSCCC依靠纏繞在自傳軸上的聚四氟乙 烯(PTFE)蛇形管在共轉(zhuǎn)軸上進(jìn)行特殊的同步行星式運(yùn)動(dòng)模式而產(chǎn)生的離心場(chǎng)作用，使互 不相溶的兩液體相的其中一相因離心力保留在柱中，另一相作為流動(dòng)相，并使流動(dòng)相單向、 低速通過(guò)固定相，在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)樣品在互不相溶的兩相溶劑系統(tǒng)中高速分配，繼而達(dá)到 連續(xù)逆流萃取分離目的，被分離的各組分依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的差異得到分離。HSCCC 因其無(wú)固體支持物作固定相，所以避免了固體支持物或載體帶來(lái)的樣品吸附、變性、損失、 污染、峰形拖尾等缺點(diǎn)，對(duì)顆?；虺恋砦镔|(zhì)進(jìn)行分離而不會(huì)造成色譜柱的堵塞；同時(shí)具有預(yù) 處理簡(jiǎn)單，可直接進(jìn)樣粗制樣品或合成混合物，且分離純化制備可同步完成，洗脫組分可達(dá) 到相當(dāng)高的純度，組分回收簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。
目前，專利CN1400199A公開(kāi)了一種從杜仲葉中連續(xù)提取活性物質(zhì)的方法，該法 以水、甲醇或乙醇為提取劑，通過(guò)大孔樹(shù)脂分離、乙酸乙酯萃取和混合溶劑重結(jié)晶等工序 提取綠原酸和杜仲總黃酮。該方法使用的是非極性樹(shù)脂，對(duì)綠原酸的吸附率不高；采取的乙酸乙酯萃取、乙酸乙酯-氯仿重結(jié)晶，操作麻煩、溶劑復(fù)雜、母液回收設(shè)備要求高。專利 CN1687435A公開(kāi)了一種高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，主要步驟為原料經(jīng)石油醚預(yù)處理、 生物復(fù)合酶提取、提取液調(diào)酸、乙酸乙酯萃取、堿中和萃取液后水相酸沉、沉淀重結(jié)晶。專利 CN1273964A公開(kāi)了一種杜仲葉制備綠原酸工藝，主要步驟如下超聲預(yù)處理、高溫提取、超 濾、乙酸乙酯萃取、D-140樹(shù)脂分離等。目前已公開(kāi)的相關(guān)杜仲葉中有效成分的分離制備專 禾IJ，幾乎都是涉及溶劑反復(fù)萃取、大孔樹(shù)脂或硅膠柱分離、重溶與結(jié)晶等，存在操作復(fù)雜繁 瑣、周期長(zhǎng)、所用溶劑復(fù)雜、組分的回收率不高等缺陷。隨著市場(chǎng)上對(duì)綠原酸的需求不斷上漲，如何利用簡(jiǎn)便、快速的先進(jìn)技術(shù)與設(shè)備從 杜仲葉中得到質(zhì)量穩(wěn)定、純度高、溶劑回收率較高的綠原酸將成為研究的熱點(diǎn)，針對(duì)該類提 取方法的研究十分必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從杜仲葉中分離提取綠原酸的方法，該方法克服了溶劑 提取杜仲葉中綠原酸的提取率低、分離純化效果差、目標(biāo)組分回收率低及純度不高等缺陷。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下一種從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，所述方法按照以下步驟進(jìn)行以杜仲 植物葉為原料，以體積分?jǐn)?shù)為20% 80%的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑水溶液為提取劑，在功率為 300 800W的微波輔助下，40 70°C浸提15 40min，將提取液過(guò)濾，干燥，制得杜仲葉黃 酮粗品，所述原料與提取劑的料液比為Ig 10 50mL;所述的杜仲葉黃酮粗品再以高速 逆流色譜分離純化以體積比為3 4 1 4 5的乙酸乙酯/正丁醇/水作為溶劑體 系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速為1 2mL/min，在800 900r/min的轉(zhuǎn)速下，25 350C，高速逆流色譜分離純化200min，紫外254nm檢測(cè)收集液的吸收峰，根據(jù)逆流色譜出峰 時(shí)間在86 142min之間的收集液作為目標(biāo)組分，再將目標(biāo)組分45 60°C真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干 燥，得綠原酸。所述的原料為落葉前采摘的杜仲葉陰干后，碾碎成杜仲葉粉末，通常碾成過(guò)80目 篩的粉末。所述強(qiáng)極性有機(jī)溶劑為乙醇、丙酮或甲醇，優(yōu)選為丙酮。所述有機(jī)溶劑水溶液中有機(jī)溶劑體積分?jǐn)?shù)為40% 60%，更優(yōu)選為50%。所述原料與提取劑的料液比優(yōu)選為Ig 16 40mL，更優(yōu)選為Ig 30mL。所述的微波輔助提取溫度優(yōu)選為45 60°C，更優(yōu)選為50 60°C。所述的微波功率優(yōu)選為400 700W，更優(yōu)選為600W。所述的微波輔助浸提時(shí)間優(yōu)選為20 35min，更優(yōu)選為25min。所述的高速逆流色譜分離純化流速優(yōu)選為1. 5 2. OmL/min,更優(yōu)選為1. 8 2. OmL/min。所述的高速逆流色譜分離純化轉(zhuǎn)速優(yōu)選為850 900r/min，更優(yōu)選為900r/min。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明采用微波輔助提取及高速逆流色譜分離純化相結(jié)合的方法從杜仲葉中分 離純化綠原酸，該方法具有操作步驟簡(jiǎn)單、設(shè)備種類單一、生產(chǎn)周期短、產(chǎn)物純度高等優(yōu)點(diǎn)， 克服了采用樹(shù)脂柱、硅膠柱等分離方法的分離效果不明顯、目標(biāo)組分難回收、提取率低等缺陷，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值及良好的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益。

圖1為實(shí)施例1所得杜仲葉黃酮粗品在254nm下的高速逆流色譜分離圖2、3分別為實(shí)施例1所得杜仲葉黃酮粗品在254nm、350nm下的HPLC譜圖4為對(duì)比例1中單純丙酮浸提所得杜仲葉黃酮粗品在350nm下的HPLC譜圖5為對(duì)比例1中單純甲醇浸提所得杜仲葉黃酮粗品在350nm處的HPLC譜圖6為對(duì)比例1中單純乙醇浸提所得杜仲葉黃酮粗品在350nm處的HPLC譜圖7、8分別為實(shí)施例10和實(shí)施例11高速逆流色譜分離所得綠原酸樣品在350nm 處的HPLC譜圖9為實(shí)施例10所得綠原酸樣品與綠原酸標(biāo)品的薄層色譜對(duì)照?qǐng)D，A點(diǎn)為綠原酸 樣品點(diǎn)，B點(diǎn)為綠原酸標(biāo)品點(diǎn)；
圖10為實(shí)施例11所得綠原酸樣品與綠原酸標(biāo)品的紫外光譜對(duì)照?qǐng)D11為實(shí)施例11所得綠原酸樣品的電噴霧電離源-質(zhì)譜圖；
圖12為實(shí)施例12所得綠原酸樣品的1HNMR譜圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于 此
實(shí)施例1
準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品30. Og,以900mL 50%的丙酮水溶液為提取 劑，按照料液比(g/mL)為1 30投料，50°C下提取25min，微波功率為600W。提取結(jié)束后 真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，得3. 8432g干燥物，即為杜仲葉黃酮粗品，得率為12. 81%。
實(shí)施例2
準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5. 0g，以80mL 50%的丙酮水溶液為提取 劑，按照料液比(g/mL)為1 16投料，微波功率400W，40°C下浸提20min，提取結(jié)束后真空 抽濾，濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，得5. 7452g干燥物，即為杜仲葉黃酮粗品，得率為11. 49%。
實(shí)施例3
準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5. Og,以IOOmL 50%的丙酮水溶液為提取 劑，按照料液比(g/mL)為1 20投料，50°C下提取30min，微波功率為500W。提取結(jié)束后 真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲葉黃酮粗品0. 6270g，得率為12. M%。
實(shí)施例4
準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5.0g，以200mL 50%的丙酮水溶液為提取 劑，按照料液比(g/mL)為1 40投料，60°C下提取35min，微波功率為700W。提取結(jié)束后 真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲葉黃酮粗品0. 6464g，得率為12. 93%。
實(shí)施例5
準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5. Og,以50mL 60 %的丙酮水溶液為提取 劑，按照料液比(g/mL)為1 10投料，70°C下提取35min，微波功率為300W。提取結(jié)束后 真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲葉黃酮粗品0. 4088g，得率為8. 19%。5
實(shí)施例6準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5.0g，以250mL 20%的丙酮水溶液為提取 齊U，按照料液比(g/mL)為1 50投料，70°C提取40min，微波功率為800W。提取結(jié)束后真 空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲葉黃酮粗品0. 6014g，得率為12. 03%。實(shí)施例7準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5. Og,以IOOmL 40%的丙酮水溶液為提取 齊U，按照料液比(g/mL)為1 20投料，45°C下提取25min，微波功率為700W。提取結(jié)束后 真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲葉黃酮粗品0. 5009g，得率為10. 02%。實(shí)施例8準(zhǔn)確稱取過(guò)80目篩的杜仲葉粉末樣品5. Og,以150mL 80%的丙酮水溶液為提取 齊U，按照料液比(g/mL)為1 30投料，40°C下提取15min，微波功率為600W。提取結(jié)束后 真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲葉黃酮粗品0. 6346g，得率為12. 69%。實(shí)施例9 =HPLC檢測(cè)HPLC 檢測(cè)的分離柱采用 Symmetry shield RP18 (4. 6 X 250mm, 5 μ m)；柱溫為 35°C ；流動(dòng)相A為甲醇，B為0. 5%的磷酸水溶液，線性梯度洗脫程序0-10min =A = 30%, 10-30min :A 30 % -50 %, 30-40min :A = 50 % -60 %, 40-50min :Α = 60 % -30 % ；流速 0. 6mL/min ；樣品均采用全自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10 μ L ；200nm-400nm紫外全波長(zhǎng)掃描檢測(cè)。準(zhǔn)確稱取1. 005g實(shí)施例1制得的杜仲葉黃酮粗品，用進(jìn)口色譜級(jí)甲醇溶解并定溶 至IOOmL,在254nm和350nm對(duì)其進(jìn)行HPLC分析，結(jié)果如圖2和圖3所示。從圖2、3中可以看出杜仲葉的丙酮水提物有3個(gè)主要組分，且組分1的含量較 大。實(shí)施例10 高速逆流色譜分離純化及純度檢測(cè)準(zhǔn)確稱取實(shí)施例1制得的杜仲葉黃酮粗品424. 7mg,溶于20mL上下相混合溶液 (上、下相溶液各IOmL)中，進(jìn)行高速逆流色譜分離純化(HSCCC)。高速逆流色譜條件為乙 酸乙酯-正丁醇-水(3 1 4)作為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相；轉(zhuǎn)速900r/ min ；溫度30°C ；流速2mL/min，分離時(shí)間為200min ；在254nm處紫外檢測(cè)，收集出峰時(shí)間在 98 104min的流出液，如圖1中黑色部分所示，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得綠原酸樣品28. 9mg。將 該樣品溶于進(jìn)口色譜級(jí)甲醇，在350nm處進(jìn)行HPLC分析，純度為98. 7%，結(jié)果如圖7所示。實(shí)施例11高速逆流色譜分離純化及純度檢測(cè)準(zhǔn)確稱取實(shí)施例1制得的杜仲葉黃酮粗品407. 3mg,溶于20mL上下相混合溶液 (上、下相溶液各IOmL)中，進(jìn)行高速逆流色譜分離純化。高速逆流色譜條件為乙酸乙 酯-正丁醇-水(4 1 5)作為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相；轉(zhuǎn)速850r/min; 溫度30°C ；流速1. 5mL/min，分離時(shí)間為200min ；紫外254nm檢測(cè)，收集出峰時(shí)間在101 107min的流出液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得綠原酸樣品27. 7mg，將該樣品溶于進(jìn)口色譜級(jí)甲醇，在 350nm處進(jìn)行HPLC分析，純度為98. 3%，結(jié)果如圖8所示。實(shí)施例12高速逆流色譜分離純化及純度檢測(cè) 準(zhǔn)確稱取實(shí)施例1制得的杜仲葉黃酮粗品453. 4mg,溶于20mL上下相混合溶液 (上、下相溶液各IOmL)中，進(jìn)行高速逆流色譜分離純化。高速逆流色譜條件為乙酸乙 酯-正丁醇-水(4 1 5)作為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相；轉(zhuǎn)速900r/min;溫度35°C ；流速1. 8mL/min,分離時(shí)間為200min ；紫外2Mnm檢測(cè)，收集出峰時(shí)間在86 97min的流出液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得綠原酸樣品29. %ig，將該樣品溶于進(jìn)口色譜級(jí)甲醇，在 350nm處進(jìn)行HPLC分析，純度為98. 0%。
實(shí)施例13高速逆流色譜分離純化及純度檢測(cè)
準(zhǔn)確稱取實(shí)施例1制得的杜仲葉黃酮粗品442. 8mg,溶于20mL上下相混合溶液 (上、下相溶液各IOmL)中，進(jìn)行高速逆流色譜分離純化。高速逆流色譜條件為乙酸乙 酯-正丁醇-水(3 1 4)作為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相；轉(zhuǎn)速800r/min; 溫度25V ；流速1. OmL/min,分離時(shí)間為200min ；紫外254nm檢測(cè)，收集出峰時(shí)間在128 142min的流出液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得綠原酸樣品28. ang，將該樣品溶于進(jìn)口色譜級(jí)甲醇，在 350nm處進(jìn)行HPLC分析，純度為97. 9%。
實(shí)施例14 綠原酸樣品的定性分析
將實(shí)施例10所得綠原酸樣品以三氯化鋁乙醇溶液為顯色劑，與綠原酸標(biāo)品進(jìn)行 薄層層析色譜分析，A點(diǎn)為綠原酸樣品點(diǎn)，B點(diǎn)為綠原酸標(biāo)品點(diǎn)，結(jié)果如圖9所示，綠原酸樣 品與綠原酸標(biāo)品的Rf值一致，為0. 263.
稱取實(shí)施例11制得的綠原酸樣品0. 0027g，溶于無(wú)水甲醇，定容至10mL，搖勻；以 無(wú)水甲醇為參比，在200 400nm進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果綠原酸樣品的紫外吸收峰與綠原酸標(biāo) 品基本一致，如圖10所示。
實(shí)施例15 電噴霧電離源-質(zhì)譜分析(ESI-MS)
將實(shí)施例11所得綠原酸樣品配成1. 7mg/mL樣品甲醇溶液，在電離源電噴霧 (ESI)；電離模式+ESI ；實(shí)驗(yàn)參數(shù)氣體溫度(Gas Temp) :300°C，裂解電壓(Fragmentor) 175V,干燥氣流速(Drying Gas) :10L/min，掃描電壓(Skimmer) :65V，霧化壓力 (Nebulizer) :50psig ；m/z為60 800全離子掃描的質(zhì)譜條件下進(jìn)行電噴霧電離源-質(zhì)譜 分析，結(jié)果與綠原酸的分子質(zhì)量一致，如圖11所示。
實(shí)施例16 核磁共振氫譜分析
精確稱取實(shí)施例12所得綠原酸樣品14. 7mg溶于氘代試劑(甲醇)，進(jìn)行氫譜分 析，結(jié)果如圖12所示。
對(duì)比例1單純?nèi)軇┨崛∨c微波輔助提取效果的比較
乙醇/丙酮/甲醇水溶液浸提準(zhǔn)確稱取杜仲葉樣品5. Og,以50%乙醇水溶液或 50%丙酮水溶液或50%甲醇水溶液為提取劑，按照料液比為1 30，提取時(shí)間為池，提取溫 度為50°C，置于恒溫水浴鍋中浸提，反應(yīng)結(jié)束后真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲黃 酮粗品。
微波輔助有機(jī)溶劑浸提準(zhǔn)確稱取杜仲葉樣品5. Og,以50%的丙酮水溶液為溶 劑，按照料液比為1 30，提取時(shí)間為25min，提取溫度為50°C，提取功率為600W，提取結(jié)束 后真空抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，即得杜仲黃酮粗品，與單純有機(jī)溶劑浸提效果比較，如表1 所示。
表1單純?nèi)軇┙崤c微波輔助浸提綠原酸效果的比較
提取方法 得率1 得率2 得率3 平均得率綠原酸比例
權(quán)利要求
1.一種從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述方法按照以下步驟進(jìn)行 以杜仲植物葉為原料，以體積分?jǐn)?shù)為20% 80%的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑水溶液為提取劑，在功 率為300 800W的微波輔助下，40 70°C浸提15 40min，將提取液過(guò)濾，干燥，制得杜仲 葉黃酮粗品，所述原料與提取劑的料液比為Ig 10 50mL;所述的杜仲葉黃酮粗品再以 高速逆流色譜分離純化以體積比為3 4 1 4 5的乙酸乙酯/正丁醇/水作為溶 劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速為1 2mL/min，在800 900r/min的轉(zhuǎn)速下， 25 35°C，高速逆流色譜分離純化200min，紫外254nm檢測(cè)收集液的吸收峰，根據(jù)逆流色譜 出峰時(shí)間在86 142min之間的收集液作為目標(biāo)組分，再將目標(biāo)組分45 60°C真空旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)干燥，得綠原酸。
2.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述的原料為 落葉前采摘的杜仲葉陰干后，碾碎成杜仲葉粉末。
3.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述強(qiáng)極性有 機(jī)溶劑為乙醇、丙酮或甲醇。
4.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑 水溶液中有機(jī)溶劑的體積分?jǐn)?shù)為40% 60%。
5.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述原料與提 取劑的料液比為Ig 16 40mL。
6.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述的微波輔 助提取溫度為45 60°C。
7.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述的微波功 率為400 700W。
8.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述的微波輔 助浸提時(shí)間為20 35min。
9.如權(quán)利要求1所述的從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，其特征在于所述的高速逆 流色譜分離純化流速為1. 5 2. OmL/min。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從杜仲葉中分離純化綠原酸的方法，所述方法為以杜仲植物葉為原料，以體積分?jǐn)?shù)為20％～80％的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑水溶液為提取劑，在功率為300～800W的微波輔助下，40～70℃浸提15～40min，將提取液過(guò)濾，干燥，制得杜仲葉黃酮粗品，所述原料與提取劑的料液比為1g∶10～50mL；所述杜仲葉黃酮粗品以體積比為3～4∶1∶4～5的乙酸乙酯/正丁醇/水作為溶劑體系進(jìn)行高速逆流色譜分離純化，制得綠原酸；本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明操作步驟簡(jiǎn)單、設(shè)備種類單一、生產(chǎn)周期短、產(chǎn)物純度高，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值及良好的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)C07D311/30GK102040520SQ201010542548
公開(kāi)日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2010年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月15日
發(fā)明者劉青梅, 孫培龍, 洪臺(tái), 邵平 申請(qǐng)人:浙江工業(yè)大學(xué)