專利名稱：從油松的松針中提取的三種黃酮苷及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種從油松的松針中提取的三種黃酮苷及其制備方法。
背景技術：
油松別名紅皮松、短葉松，東北黑松，原產(chǎn)中國，自然分布范圍廣泛，主要 分布于遼寧、吉林、內(nèi)蒙古、河北、河南、山西、陜西、山東、甘肅、寧夏、青海、四 川北部等地。朝鮮亦有分布。其松香、松針、松枝、松節(jié)、松油、松根、松花粉歷代 均入藥用。而松針采集方便，可用于治療風濕痿痹、跌打損傷、失眠、浮腫、濕瘡、疥 癬，并能治療流腦、流感、鉤蟲病等。近年來，廣泛用于治療風濕病，心腦血管病、糖 尿病、肥胖病、肝病、胃病、淋病、慢性支氣管炎、癌癥等，其價值日益受到重視。油 松松針是一種具有潛在應用前景的天然藥物，但目前對其化學成分的研究鮮有報道，為 了闡明其藥效物質(zhì)基礎，從油松的松針中分離出化學成分三種黃酮苷是完全有必要的。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種從油松的松 針中提取的三種黃酮苷及其制備方法，可有效解決從油松的松針中提取的三種黃酮苷的 問題。本發(fā)明解決的技術方案是，該三種黃酮苷為7，8，4'-三羥基-3，5-二甲氧 基-6-甲基黃酮-8-0-0-D-葡萄糖苷，分子式C24H26012，結構式是
OH5，7，4' _三羥基-3-甲氧基-6-甲基黃酮-7-0-3-D-葡萄糖苷，分子式 C23H24On,結構式是 3，5，7，4 ‘ _四羥基-6-甲基黃酮-7-0-0-D-葡萄糖苷，分子式 C22H22On,結構式是
權利要求
1. 一種從油松的松針中提取的三種黃酮苷，其特征在于，該三種黃酮苷為7，8， 4'-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃酮-8-0-β-D-葡萄糖苷，分子式C24H26O12, 結構式是
2.權利要求1所述的從油松的松針中提取的三種黃酮苷的制備方法，其特征在于， 取剛摘下的新鮮油松的松針，每次用油松的松針重量的8-10倍量的體積濃度為80%的 乙醇，70-90°C下，連續(xù)回流提取兩次，每次2.5小時，合并提取液，過濾，40-50°C減壓 回收溶劑，得稠膏，加適量水分散溶解，先用石油醚萃取至無色，再用乙酸乙酯萃取至 無色，得乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯稠膏，乙酸乙酯稠膏經(jīng)硅膠柱色譜， 依次用二氯甲烷和甲醇以體積比100 1、50 1、40 1和30 1組成的混合液進 行梯度洗脫，將用二氯甲烷和甲醇以體積比40 1組成的混合液進行洗脫所得的組分A 上硅膠柱，用三氯甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液進行洗脫，洗脫液在薄 層板上展開，用三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化 鐵_鐵氰化鉀噴霧顯現(xiàn)藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱、 凝膠Sephadex LH-20柱進一步分離純化，用體積濃度為70%甲醇洗脫得到黃色粉末化合 物7，8，4'-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃酮-8-0-β-D-葡萄糖苷；將上述用 二氯甲烷和甲醇以體積比30 1組成的混合液進行洗脫所得的組分B上硅膠柱，用三氯 甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開，用三 氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯現(xiàn)藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠ToyopearlHW-40柱、凝膠Sephadex LH-20 柱進一步分離純化，用體積濃度為40%的甲醇洗脫，明顯有兩條分開的黃色色帶，收集 含兩條色帶的洗脫液，先流出柱體的色帶成分是5，7，4'-三羥基-3-甲氧基-6-甲基 黃酮-7-0-β-D-葡萄糖苷，隨后流下的色帶成分是3，5，7，4'-四羥基-6-甲基黃 酮-7-0-β-D-葡萄糖苷。
3.根據(jù)權利要求2所述的從油松的松針中提取的三種黃酮苷的制備方法，其特征在 于，將河南產(chǎn)剛摘下的新鮮油松的松針7.8kg，先用油松的松針重量的10倍量的體積濃度 為80%的乙醇，再用油松的松針重量的8倍量的體積濃度為80%的乙醇，75°C下，連續(xù) 回流提取兩次，每次2.5小時，合并提取液，過濾，42°C減壓回收溶劑，得稠膏2022g， 加適量水分散溶解，先用石油醚萃取至無色，再用乙酸乙酯萃取至無色，得乙酸乙酯萃 取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯稠膏250g，乙酸乙酯稠膏經(jīng)硅膠柱色譜，依次用二氯甲烷 和甲醇以體積比100 1、50 1、40 1和30 1組成的混合液進行梯度洗脫，將用 二氯甲烷和甲醇以體積比40 1組成的混合液進行洗脫所得的組分A上硅膠柱，用三氯 甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開，用三氯 化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯 現(xiàn)藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱、凝膠Sephadex LH-20 柱進一步分離純化，用體積濃度為70%的甲醇洗脫得到，得到黃色粉末化合物7，8， 4'-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃酮-8-0-β-D-葡萄糖苷15mg;將上述用二氯 甲烷和甲醇以體積比30 1組成的混合液進行洗脫所得的組分B上硅膠柱，用三氯甲烷 和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開，用三氯化 鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯現(xiàn) 藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱、凝膠Sephadex LH-20柱 進一步分離純化，用體積濃度為40%的甲醇洗脫，明顯有兩條分開的黃色色帶，收集含 兩條色帶的洗脫液，先流出柱體的色帶成分是5，7，4'-三羥基-3-甲氧基-6-甲基黃 酮-7-0-β-D-葡萄糖苷10mg，隨后流下的色帶成分是3，5，7，4'-四羥基_6_甲基 黃酮-7-0- β -D-葡萄糖苷20mg。
4.根據(jù)權利要求2所述的從油松的松針中提取的三種黃酮苷的制備方法，其特征在 于，將遼寧或吉林產(chǎn)的剛摘下的新鮮油松的松針9kg，先用油松的松針重量的8倍量的體 積濃度為80%的乙醇，再用油松的松針重量的10倍量的體積濃度為80%的乙醇，80°C 下，連續(xù)回流提取兩次，每次2.5小時，合并提取液，過濾，45°C減壓回收溶劑，得稠膏 2068g,加適量水分散溶解，先用石油醚萃取至無色，再用乙酸乙酯萃取至無色，得乙酸 乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯稠膏264g，乙酸乙酯稠膏經(jīng)硅膠柱色譜，依次用二 氯甲烷和甲醇以體積比100 1、50 1、40 1和30 1組成的混合液進行梯度洗脫， 將用二氯甲烷和甲醇以體積比40 1組成的混合液進行洗脫所得的組分A上硅膠柱，用 三氯甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開， 用三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀 噴霧顯現(xiàn)藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱、凝膠Sephadex L H-20柱進一步分離純化，用體積濃度為70%的甲醇洗脫得到，得到黃色粉末化合物7， 8，4'-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃酮-8-0-β-D-葡萄糖苷16mg ；將上述用二氯甲烷和甲醇以體積比30 1組成的混合液進行洗脫所得的組分B上硅膠柱，用三氯 甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開，用三氯 化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯現(xiàn) 藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱、凝膠Sephadex LH-20柱 進一步分離純化，用體積濃度為40%的甲醇洗脫，明顯有兩條分開的黃色色帶，收集含 兩條色帶的洗脫液，先流出柱體的色帶成分是5，7，4'-三羥基-3-甲氧基-6-甲基黃 酮-7-0-β-D-葡萄糖苷12mg，隨后流下的色帶成分是3，5，7，4'-四羥基-6-甲基 黃酮-7-0- β -D-葡萄糖苷21mg。
5.根據(jù)權利要求2所述的從油松的松針中提取的三種黃酮苷的制備方法，其特征在 于，將甘肅或青海產(chǎn)的剛摘下的新鮮油松的松針12kg，每次油松的松針重量的9倍量的 體積濃度為80%的乙醇，85°C下，連續(xù)回流提取兩次，每次2.5小時，合并提取液，過 濾，48°C減壓回收溶劑，得稠膏2223g，加適量水分散溶解，先用石油醚萃取至無色， 再用乙酸乙酯萃取至無色，得乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯稠膏322g，乙酸 乙酯稠膏經(jīng)硅膠柱色譜，依次用二氯甲烷和甲醇以體積比100 1、50 1、40 1和 30 1組成的混合液進行梯度洗脫，將用二氯甲烷和甲醇以體積比40 1組成的混合 液進行洗脫所得的組分A上硅膠柱，用三氯甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合 液進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開，用三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄 層板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯現(xiàn)藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝 膠Toyopearl HW-40柱、凝膠Sephadex LH-20柱進一步分離純化，用體積濃度為70% 的甲醇洗脫得到，得到黃色粉末化合物7，8，4'-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃 酮-8-0-β-D-葡萄糖苷18mg;將上述用二氯甲烷和甲醇以體積比30 1組成的混合液 進行洗脫所得的組分B上硅膠柱，用三氯甲烷和乙酸乙酯以體積比1 1組成的混合液 進行洗脫，洗脫液在薄層板上展開，用三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯色檢識，得到在薄層 板上顯現(xiàn)黃色，三氯化鐵-鐵氰化鉀噴霧顯現(xiàn)藍色的組分，將藍色的組分依次通過凝膠 Toyopearl HW-40柱、凝膠Sephadex LH-20柱進一步分離純化，用體積濃度為40%的甲 醇洗脫，明顯有兩條分開的黃色色帶，收集含兩條色帶的洗脫液，先流出柱體的色帶成 分是5，7，4'-三羥基-3-甲氧基-6-甲基黃酮-7-0-β-D-葡萄糖苷14mg，隨后流下 的色帶成分是3，5，7，4'-四羥基-6-甲基黃酮-7-0-β-D-葡萄糖苷32mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及從油松的松針中提取的三種黃酮苷及其制備方法，有效解決從油松的松針中提取的三種黃酮苷的問題，該三種黃酮苷為7，8，4′-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃酮-8-O-β-D-葡萄糖苷；5，7，4′-三羥基-3-甲氧基-6-甲基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷；3，5，7，4′-四羥基-6-甲基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷；制備時，松針用乙醇連續(xù)回流提取兩次，減壓回收溶劑，得稠膏，加水溶解，用石油醚、乙酸乙酯分別萃取至無色，濃縮得乙酸乙酯稠膏，經(jīng)硅膠柱色譜，進行梯度洗脫，再上硅膠柱洗脫，先后得7，8，4′-三羥基-3，5-二甲氧基-6-甲基黃酮-8-O-β-D-葡萄糖苷、5，7，4′-三羥基-3-甲氧基-6-甲基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、3，5，7，4′-四羥基-6-甲基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷，本發(fā)明方法先進可靠，容易操作，穩(wěn)定可靠。
文檔編號C07H1/08GK102010452SQ20101051614
公開日2011年4月13日 申請日期2010年10月22日 優(yōu)先權日2010年10月22日
發(fā)明者馮衛(wèi)生, 張春磊, 鄭曉珂 申請人:河南中醫(yī)學院