專利名稱：6-環(huán)己甲基取代s-dabo類化合物、其合成方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及6-環(huán)己甲基取代S-DABO類化合物，其合成方法和用途。

背景技術(shù)：
在抗HIV藥物研究中，非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTIs)由于作用靶點明確、作用機制清楚，具有結(jié)構(gòu)多樣、高效低毒、與其他種類抗HIV藥物有協(xié)同作用的特點，在抗病毒藥物的研究開發(fā)中具有重要意義(E.De Clercq.Chemistry Biodiversity，2004，1，44-64)。但NNRTIs容易使HIV-1RT產(chǎn)生突變，形成耐藥性，從而限制了NNRTIs抗病毒潛力的發(fā)揮。因此，不斷尋找結(jié)構(gòu)新穎、高效低毒的NNRTIs，以克服或改善現(xiàn)有藥物耐藥性成為NNRTIs新藥研發(fā)的主要方向。
前人通過對多種NNRTIs/HIV RT復(fù)合物晶體的結(jié)構(gòu)分析對NNRTIs的耐藥機制作了大量研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這些結(jié)構(gòu)各異的活性小分子化合物都作用于距RT酶催化活性位點僅1nm的一個強疏水性“口袋”處。小分子抑制劑與“口袋”內(nèi)表面的芳香性氨基酸殘基(Y181、Y188、F227、W229、Y318)和疏水性氨基酸殘基(L100、K101、K103、V106、V108、V179、L234、P236、E138)的側(cè)鏈通過氫鍵、鍵疊合、范德華引力以及極性基團間靜電力等非共價鍵力的相互作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物，從而改變RT酶催化活性區(qū)的有效構(gòu)象，抑制RT酶催化活性(Esnouf R.M.et.al.Struct.Biol.1995，2，303-309)。該“口袋”是動態(tài)塑性的，“口袋”的形狀取決于所結(jié)合分子的大小、空間構(gòu)象和相互作用力。NNRTIs類藥物在與HIV-1RT作用后會在很短時間內(nèi)引發(fā)RT表面氨基酸突變，使酶與小分子間的親和力降低、立體阻礙增大、靜電引力或氫鍵發(fā)生改變，導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生(Robert AD，et.al.Int.J.Biochem Cell Biol.2004，36(9)1735-1751.)。與耐藥性相關(guān)的突變有L100I、K101E、K103N、V106A、V108I、V179D、Y188C/H/L、G190E、P225H、F225L、P236L等，臨床上最常見的病毒耐藥病毒株突變是Y181C和K103N(Conzales M J，et.al.AIDS，2003，17(6)，791-799)。
基于以上耐藥機制的分析，可通過加強抑制劑分子與NNIBP周圍氨基酸之間形成較低穩(wěn)定的氫鍵力、加強抑制劑分子與W229、L234、H235等保守殘基間的相互作用力及增加分子結(jié)構(gòu)的柔韌性使它可與多變異RT酶產(chǎn)生較強的親和力等方面增加抑制劑分子的抗耐藥性。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于設(shè)計并合成一系列6-環(huán)己基取代S-DABO類化合物，獲得上述化合物的制備方法，以及獲得上述化合物的用途。
基于我們多年來對S-DABO類(Marino Artico，Drugs of the Future，2002，27(2)，159-175)NNRTIs的研究，結(jié)合上述抗HIV藥物抗耐藥性研究的進展和應(yīng)對策略，本發(fā)明對S-DABOs類似物作進一步的結(jié)構(gòu)修飾，以柔性較大的環(huán)己基取代6-位剛性芳香環(huán)，并采用分子對接的方法模擬了抑制劑與酶的結(jié)合方式。結(jié)果表明由于環(huán)己基具有較大的分子柔性，使整個抑制劑分子深入到結(jié)合“口袋”內(nèi)部，6-環(huán)己基采用低能的“椅式”構(gòu)象，位于“口袋”上方，與Tyr181、Tyr188、Phe227、Trp229相接近，6-環(huán)己基與保守性氨基酸殘基Trp229間的疏水作用和范德華力是抑制劑分子與酶主要結(jié)合力之一。由于環(huán)己基是非芳香體系，它與Tyr181、Tyr188間無π-π相互作用，當(dāng)Tyr181，Tyr188發(fā)生突變時，對抑制劑分子與酶的結(jié)合力影響不大，因此設(shè)想可改進分子的抗耐藥性?；谝陨戏治觯Y(jié)合C-2及C-5位的構(gòu)結(jié)構(gòu)修飾，我們設(shè)計并合成一系列6-環(huán)己基取代S-DABO類化合物，經(jīng)細胞水平抗HIV活性研究表明，該類化合物具有十分顯著的抗HIV活性，治療指數(shù)比現(xiàn)已上市的抗HIV藥物AZT及NVP高1-2個數(shù)量級，該類化合物對一些臨床變異病毒株顯示了較好的的抑制活性。
本發(fā)明產(chǎn)品為6-環(huán)己甲基取代S-DABO類衍生物，是一類具有如下通式的化合物
其中 R1為C1-3的烷基； R2為C1-8的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基甲基，

(其中，X＝OCH3，H，OH，鹵素)。
本發(fā)明優(yōu)選化合物為 (1)通式中R1為(CH3)2CH-，R2為(4’-OCH3)PhCOCH2-； (2)通式中R1為(CH3)2CH-，R2為PhCOCH2-； (3)通式中R1為(CH3)2CH-，R2為PhCH2-； (4)通式中R1為CH3CH2-，R2為PhCOCH2-。
本發(fā)明化合物的合成方法如下 以α-烷基取代的環(huán)己基乙酰乙酸乙酯(簡稱β-酮酯)(3)為原料，與硫脲在醇鈉催化下縮合關(guān)環(huán)制得關(guān)鍵中間體5-烷基-6-環(huán)己甲基硫尿嘧啶(2)，最后通過S-烷基化反應(yīng)引入C2-位側(cè)鏈制備目標(biāo)分子(1)，其反應(yīng)式如下所示
其中， 1、R1為C1-3的烷基；R2＝C1-8的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基甲基，

(其中，X＝OCH3，H，OH，鹵素)。
2、5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-硫尿嘧啶(2)與各種α-溴代物反應(yīng)的摩爾比為1∶1～2，反應(yīng)溫度控制在為25～150℃之間，反應(yīng)時間為8-24小時。
3、所用的溶劑可以是甲苯、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺中的一種或它們的混合物。
4、β-酮酯(3)的制備可采用以下兩種方法 第一種方法以氯(溴)甲基環(huán)己烷(4)為原料與氰化鈉反應(yīng)制備環(huán)己基乙氰(5)，進而與各種α-溴代烷基酸乙酯(6)通過類似Reformarsky縮合反應(yīng)，制備β-酮酯(3)。其反應(yīng)式如下所示
其中，R1為C1-3的烷基；氰化反應(yīng)所用的溶劑可以是二氯甲烷、甲醇、乙醇、異丙醇、DMSO、DMF中的任何一種，反應(yīng)溫度為60-130℃之間，反應(yīng)時間為4-12小時。
第二種方法以環(huán)己基乙酸(7)為原料與N，N-羰基二咪唑(CDI)反應(yīng)制備1-環(huán)己基乙酰咪唑(8)，進而與各烷基丙二酸單鉀鹽(10)反應(yīng)制備β-酮酯(3)，其反應(yīng)式如下所示
其中，R1＝C1-3的烷基；1-環(huán)己基乙酰咪唑(8)制備中所用的溶劑1可以是二氯甲烷、乙腈、乙醇、異丙醇中的任何一種，反應(yīng)溫度為25-60℃之間，反應(yīng)時間為4-8小時。在β-酮酯(3)的制備中所用溶劑2可以是二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙腈、DMF中的任何一種，反應(yīng)溫度為25-120℃之間，反應(yīng)時間為12-24小時。
發(fā)明產(chǎn)品的用途是作為抗艾滋病藥物。
發(fā)明的有益效果本發(fā)明化合物合成便利，對HIV病毒具有極強的抑制作用，某些化合物治療指數(shù)高達106級，且對臨床病毒株顯示出有較好的耐受性，因此可作為抗AIDS藥物候選物。

具體實施例方式 通過下述實施例將有助于理解本發(fā)明，但是不能限制本發(fā)明的范圍。
實施例一β-酮酯(3)的制備 方法1以氯甲基環(huán)己烷為原料制備 環(huán)己基乙腈(5)的制備在圓底燒瓶中加入30ml干燥的乙醇，7.35g(0.15mol)NaCN，攪拌至NaCN完全溶解，加入0.1mol氯甲基環(huán)己烷，回流攪拌4個小時，減壓蒸去溶劑，加水溶解，用乙酸乙酯萃取，合并有機層，依次用飽和NaHCO3、食鹽水洗，無水CaCl2干燥后得黃色油狀物環(huán)己基乙腈。
β-酮酯(3)的制備將鋅粉依次用3M HCl、蒸餾水、無水乙醇、無水乙醚活化。將活化鋅粉(45g，0.68mol)于氮氣保護下懸浮于回流的THF(400mL)中，向其中加入幾滴6以引發(fā)反應(yīng)。大約60min出現(xiàn)綠色后，一次性加入5(0.14mol)，慢慢滴加6，滴加完畢，將混合物繼續(xù)回流20分鐘，停止加熱，用THF和50％K2CO3溶液猝滅反應(yīng)。反應(yīng)物靜置后分層，分離有機層，用THF萃取殘余物。合并有機層，用10％HCl水解后減壓縮，冷卻后加入CH2Cl2稀釋，用飽和NaHCO3溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，減壓濃縮得β-酮酯(3)粗品。該產(chǎn)品可不經(jīng)純化直接用于下一步合成。
方法2以氯甲基環(huán)己烷為原料制備 烷基丙二酸單鉀鹽(10)的制備在圓底燒瓶中加入100ml絕對甲醇和8.7g(0.15mol)KOH，攪拌溶解后，滴加入0.15mol的烷基丙二酸二乙酯(9)，然后在適宜溫度下攪拌反應(yīng)4小時，冷卻，過濾，減壓蒸餾，得到白色的烷基丙二酸單鉀鹽(10)，產(chǎn)率為93％。
β-酮酯(3)的制備把50ml無水乙腈加入盛有3.77g(26mmol)環(huán)己基乙酸(7)和4.2g(26mmol)的N，N-羰基二咪唑(CDI)100ml的燒杯中，邊加邊振蕩，直到完全溶解制得1-環(huán)己基乙酰咪唑(8)的乙腈溶液。
在溶有9.5g烷基丙二酸單鉀鹽(10)的100ml無水乙腈中，加入三乙胺(83.2mmol)和MgCl2(66.5mmol)，攪拌反應(yīng)約1小時后加入上述1-環(huán)己基乙酰咪唑乙腈溶液(50ml)，攪拌過夜，向體系中加入100ml稀鹽酸，攪拌一定時間后靜置分層，分取有機層減壓蒸干，用100ml乙酸乙酯溶解，依次用飽和NaHCO3溶液、食鹽水洗滌，無水NaSO4干燥，減壓濃縮得β-酮酯(3)粗品。該產(chǎn)品可不經(jīng)純化直接用于下一步合成。
實施例二5-烷基-6-環(huán)己甲基硫尿嘧啶(2)的合成 反應(yīng)的一般操作在圓底燒瓶中加入50ml絕對乙醇、0.6g金屬鈉(26.2mmol)，制成醇鈉溶液。加入硫脲(1.39g，18.2mmol)和化合物3(13.1mmol)，回流攪拌，TLC跟蹤原料點消失后冷卻，減壓蒸出乙醇，用20ml水溶解剩余物，HCl酸化后析出沉淀，抽濾，分別用水和乙醚洗滌沉淀物，真空干燥，用適當(dāng)溶劑重結(jié)晶得5-烷基-6-環(huán)己甲基硫尿嘧啶(2)。
實施例三5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-取代尿嘧啶(1)的合成 反應(yīng)的一般操作將5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-硫脲嘧啶(2)(3mmol)和K2CO3(3.3mmol)溶于10ml無水DMF，于室溫下攪拌30min后，加入溴化物(3.3mmol)，在70-80℃繼續(xù)攪拌反應(yīng)，TLC跟蹤，至原料點消失(12-24h)，停止反應(yīng)，過濾，減壓蒸去溶劑，殘余物用30ml二氯甲烷溶解，飽和食鹽水洗滌，無水Na2SO4干燥，減壓蒸去溶劑，得油狀或固體粗品，經(jīng)柱層析純化得各種5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-取代尿嘧啶(1)純品化合物。

操作如上，柱層析分離(P∶E＝2∶1)得白色粉末1a，產(chǎn)率54％；熔點190-192℃，1H NMR(DMSO，500MHz)δppm0.77-0.78(m，2H，cyclohexyl)，1.17-1.19(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.30(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.29(d，6H，2CH3)，1.16-1.48(m，3H，cyclohexyl)，1.58-1.60(m，3H，cyclohexyl)，2.26-2.28(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.89-3.29(m，1H CHMe2)，4.53(s，2H，CH2-S)，5.35(s，1H，OH)6.97-8.04(m，4H，Ar-H)，12.6(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝2.5∶1)得白色粉末1-2，產(chǎn)率42％；熔點180-181℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.77-0.78(m，2H，cyclohexyl)，1.17-1.19(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.30(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.29(d，6H，2CH3)，1.16-1.48(m，3H，cyclohexyl)，1.58-1.60(m，3H，cyclohexyl)，2.26-2.28(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.89-3.29(m，1H CHMe2)，3.88(s，3H，-OCH3)，4.53(s，2H，CH2-S)，6.97-8.04(d，4H，Ar-H)，12.6(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝3∶1)得白色粉末1-3，產(chǎn)率39％；熔點162-163℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.77-0.78(m，2H，cyclohexyl)，1.17-1.19(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.30(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.29(d，6H，2CH3)，1.16-1.48(m，3H，cyclohexyl)，1.58-1.60(m，3H，cyclohexyl)，2.26-2.28(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.89-3.29(m，1H CHMe2)，4.53(s，2H，CH2-S)，6.97-8.04(m，5H，Ar-H)，12.6(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝12∶1)得白色粉末1-4，產(chǎn)率42％；熔點132-133℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.93-0.99(m，5H，cyclohexyl)，1.16-1.24(m，6H，cyclohexyl)，1.32-1.33(d，6H，CHMe2)，1.58-1.7(m，11H，cyclohexyl)，2.44-2.46(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.97-3.00(m，1H，CH)，3.02-3.04(d，2H，S-CH2)，11.88(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝10∶1)得白色粉末1-5，產(chǎn)率53％；熔點156-157℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.89-1.25(m，9H，cyclohexyl)，1.31-1.33(d，6H，CHMe2)，1.41-1.77(m，13H，cyclohexyl)，2.45-2.46(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.45-3.02(m，1H，CHMe2)，3.84-3.88(d，1H，S-cyclohexyl)，12.18(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝12∶1)得白色粉末1-6，產(chǎn)率51％；熔點88-89℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.93-1.014(m，3H，cyclohexyl)，1.020-1.027(d，6H，CHMe2)，1.15-1.34(m，4H，cyclohexyl)，1.32-1.34(d，6H，CHMe2)，1.66-1.77(m，4H，cyclohexyl)，1.89-1.96(m，1H，CH)，2.44-2.46(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.96-3.02(m，1H，CHMe2)3.04-3.05(d，2H，S-CH2)，12.36(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝8∶1)得白色粉末1-7，產(chǎn)率47％；熔點110-111℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.938-1.00(m，3H，cyclohexyl)，1.15-1.25(m，3H，cyclohexyl)，1.32-1.33(d，6H，2CH3)，1.39-1.41(d，6H，S-CH(Me2)，1.66-1.77(m，5H，cyclohexyl)，2.45-2.46(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.96-3.00(m，1H CHMe2)，3.97-4.02(S-CH)，11.83(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝2.5∶1)得白色粉末1-8，產(chǎn)率49％；熔點90-91℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.94-1.03(m，3H，cyclohexyl)，1.18-1.22(m，3H，cyclohexyl)，1.26-1.27(d，6H，2CH3)，1.67-1.81(m，5H，cyclohexyl)，2.57-2.58(d，2H，-CH2cyclohexyl)，3.10-3.13(m，1HCHMe2)，3.26-3.29(t，2H，S-CH2)，4.38(t，1H，OH)，4.38-4.52(t，2H，0CH2)11.83(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝15∶2)得白色粉末1i產(chǎn)率27％；熔點195-196℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.89-1.04(m，3H，cyclohexyl)，1.05-1.23(m，3H，cyclohexyl)，1.32-1.33(d，6H，2CH3)，1.67-1.77(m，5H，cyclohexyl)，2.48-2.50(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.96-3.02(m，1H CHMe2)，3.97-4.02(S-CH2)，7.24-7.42(m，5H，Ar-H)，12.85(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝3∶1)得白色粉末1-10，產(chǎn)率56％；熔點127-128℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.93-1.014(m，3H，cyclohexyl)，1.32-1.34(d，6H，CHMe2)，1.37-1.38(d，3H，CHMe)，1.62-1.68(t，3H，CH2Me)，1.72-1.77(m，8H，cyclohexyl)，2.44-2.46(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.98-3.00(m，1H，CH)3.85-3.89(m，1H，S-CH)，12.75(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝3∶1)得白色粉末1-11，產(chǎn)率62％；熔點143-144℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.77-0.78(m，2H，cyclohexyl)，1.17-1.19(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.30(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.29(d，6H，2CH3)，1.16-1.48(m，3H，cyclohexyl)，1.58-1.60(m，3H，cyclohexyl)，2.26-2.28(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.89-3.29(m，1H CHMe2)，3.88(s，3H，-OCH3)，4.53(s，2H，CH2-S)，6.97-8.04(d，4H，Ar-H)，12.6(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝4∶1)得白色粉末1-12，產(chǎn)率44％；熔點132-133℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.76-0.79(m，3H，cyclohexyl)，1.02-1.08(t，3H，CH2CH3)，1.18-1.86(m，8H，cyclohexyl)，2.44-2.46(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.52-2.55(q，2H，CH2)3.85-3.89(s，2H，S-CH2)，7.26-7.61(m，5H，Ar-H)，12.75(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝10∶1)得白色粉末1-13，產(chǎn)率57％；熔點80-81℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.94-0.99(m，5H，cyclohexyl)，1.01-1.15(m，6H，cyclohexyl)，1.18-1.22(t，3H，CH2CH3)，1.58-1.85(m，11H，cyclohexyl)，2.40-2.41(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.47-2.52(m，2H，CH2)，3.03-3.05(d，2H，S-CH2)，12.45(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝15∶2)得白色粉末1-14，產(chǎn)率61％；熔點122-123℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.953-1.00(m，6H，cyclohexyl)，1.08-1.10(t，3H，CH2CH3)1.19-1.71(m，15H，cyclohexyl)，2.41-2.43(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.50-2.51(q，2H，CH2CH3)，3.85-3.88(m，1H，S-cyclohexyl)，12.29(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝8∶1)得白色粉末1-15，產(chǎn)率42％；熔點76-77℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.95-0.98(m，5H，cyclohexyl)，1.00-1.03(d，6H，CHMe2)，1.08-1.11(t，3H，CH2CH3)，1.69-1.85(m，6H，cyclohexyl)，2.41-2.43(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.41-2.53(m，1H，CHMe2)，2.53-2.55(m，2H，CH2CH33.87-3.90(d，2H，S-CH2)，12.49(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝9∶2)得白色粉末1-16，產(chǎn)率38％；熔點80-81℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.86-1.09(m，4H，cyclohexyl)，1.01-1.09(m，4H，cyclohexyl)，1.10-1.24(t，3H，CH3)，1.39-1.40(d，6H，S-CH(Me2)，1.67-1.69(m，3H，cyclohexyl)，2.41-2.42(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.48-2.52(q，2H CH2CH3)，3.96-4.01(m，1H，S-CH)，12.49(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝3∶1)得白色粉末1-17，產(chǎn)率∶41％；熔點mp78-79℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.94-1.03(m，3H，cyclohexyl)，1.18-1.22(m，3H，cyclohexyl)，1.26-1.27(t，3H，CH3)，1.67-1.81(m，5H，cyclohexyl)，2.57-2.58(d，2H，-CH2cyclohexyl)，3.10-3.13(q，2HCH2CH3)，3.26-3.29(t，2H，S-CH2)，4.38(t，1H，OH)，4.38-4.52(t，2H，0CH2)11.83(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝7∶3)得白色粉末1-18，產(chǎn)率39％；熔點145-146℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.89-1.04(m，3H，cyclohexyl)，1.05-1.23(m，3H，cyclohexyl)，1.32-1.33(t，3H，CH3)，1.67-1.77(m，5H，cyclohexyl)，2.48-2.50(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.96-3.02(q，2H CH2CH3)，3.97-4.02(S-CH2)，7.24-7.42(m，5H，Ar-H)，12.85(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝10∶3)得白色粉末1-19，產(chǎn)率36％；熔點88-89℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.95-0.98(m，5H，cyclohexyl)，1.00-1.03(t，3H，CH2CH3)，1.08-1.11(t，3H，CH2CH3)，1.38-1.39(d，3H，S-CHMe)，1.69-1.85(m，6H，cyclohexyl)，2.41-2.43(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.41-2.53(m，4H，2CH2CH3)3.87-3.90(m，1H，S-CH)，12.49(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝3∶1)得白色粉末1-20，產(chǎn)率62％；熔點190-192℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.77-0.78(m，2H，cyclohexyl)，1.17-1.19(m，1H，cyclohexyl)，1.26-1.30(m，1H，cyclohexyl)，1.16-1.48(m，3H，cyclohexyl)，1.58-1.60(m，3H，cyclohexyl)，2.26-2.28(d，2H，-CH2cyclohexyl)，2.41-2.43(s，3H，CH3)，3.88(s，3H，-OCH3)，4.53(s，2H，CH2-S)，6.97-8.04(d，4H，Ar-H)，12-6(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝2∶3)得白色粉末1-21，產(chǎn)率41％；熔點186-187℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.76-0.79(m，3H，cyclohexyl)，1.18-1.86(m，8H，cyclohexyl)，2.44-2.46(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.52-2.55(s，3H，CH3)3.85-3.89(s，2H，S-CH2)，7.26-7.61(m，5H，Ar-H)，12.75(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝1∶2.5)得白色粉末1-22，產(chǎn)率44％；熔點130-131℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.98-1.23(m，10H，cyclohexyl)，1.67-1.88(m，12H，cyclohexyl)，2.02-2.03(s，3H，CH3)，2.42-2.43(d，2H，CH2-cyclohexyl)，3.04-3.05(d，2H，S-CH2)，12.00(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝1∶1)得白色粉末1-23，產(chǎn)率48％；熔點112-114℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.98-1.21(m，1H，cyclohexyl)，1.25(d，3H，CH3)1.19-1.77(m，19H，cyclohexyl)，2.17-2.42(d，2H，CH2-cyclohexyl)，3.85-3.88(m，1H，S-cyclohexyl)，12.34(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝12∶5)得白色粉末1-24，產(chǎn)率54％；熔點88-90℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.95-0.98(m，5H，cyclohexyl)，1.69-1.85(m，6H，cyclohexyl)，2.41-2.43(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.41-2.53(s，3H，CH3)，3.07-3.10(d，2H，S-CH2)，12.49(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝9∶2)得白色粉末1-25，產(chǎn)率59％；熔點128-130℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝096-1.41(m，6H，cyclohexyl)，1.41-1.42(d，6H，s-CH(Me2)，1.54-1.89(m，5H，cyclohexyl)，2.03(s，3H，CH3)，2.42-2.43(d，2H CH2-cyclohexyl)，3.97-4.03(m，1H，S-CH)，12.52(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝2∶1)得白色粉末1-26，產(chǎn)率43％；熔點116-117℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.94-1.03(m，3H，cyclohexyl)，1.18-1.22(m，3H，cyclohexyl)，1.26-1.27(s，3H，CH3)，1.67-1.81(m，5H，cyclohexyl)，2.57-2.58(d，2H，-CH2cyclohexyl)，3.26-3.29(t，2H，S-CH2)，4.38(t，1H，OH)，4.38-4.52(t，2H，0CH2)11.83(s，brs，1H，NH)；
操作如上，柱層析分離(P∶E＝3∶1)得白色粉末1-27，產(chǎn)率41％；熔點122-123℃ 1HNMR，(CDCl3，500MHz)δ(ppm)＝0.95-0.98(m，5H，cyclohexyl)，1.00-1.03(t，3H，CH2CH3)，1.08-1.11(s，3H，CH3)，1.38-1.39(d，3H，S-CHMe)，1.69-1.85(m，6H，cyclohexyl)，2.41-2.43(d，2H，CH2-cyclohexyl)，2.41-2.53(m，2H，CH2CH3)3.87-3.90(m，1H，S-CH)，12.49(s，brs，1H，NH)； 實施例四 抗HIV活性測試 采用HIV-1感染的C8166細胞進行細胞水平抗HIV生物活性測試。方法描述如下。
細胞毒性實驗化合物對C8166細胞的毒性采用MTT法測定。在96孔細胞培養(yǎng)板中，將化合物進行5倍倍比稀釋，每孔加入4×105/ml C8166細胞懸液。每個濃度設(shè)置3個復(fù)孔。同時設(shè)置不含藥物的細胞對照及AZT藥物對照。37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，每孔加MTT溶液37℃孵育4小時。每孔再加入10％SDS-50％DMF，37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育過夜?；靹蚝笥肂IO-TEK ELx800ELISA儀測定OD值(測定波長595nm；參考波長630nm)，根據(jù)實驗結(jié)果繪制計量反應(yīng)曲線，計算CC50(50％細胞產(chǎn)生毒性時的化合物濃度)。
合胞體抑制實驗將4×105/ml C8166細胞懸液接種到含化合物5倍倍比稀釋的96孔細胞培養(yǎng)板中，加入HIV-1IIIB稀釋上清(MOI＝0.04)，每個濃度梯度設(shè)3個復(fù)孔。同時設(shè)置不含化合物的HIV-1IIIB感染的陰性對照孔和含AZT藥物的陽性對照孔。37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，倒置顯微鏡下(100×)，選取5個不重疊的視野，計數(shù)合胞體數(shù)目。根據(jù)實驗結(jié)果繪制計量反應(yīng)曲線，按Reed&Muench法計算出化合物抑制病毒的50％有效濃度(EC50，50％有效濃度)。計算公式致細胞病變抑制率(％)＝(1-實驗孔合胞體數(shù)/對照孔合胞體數(shù))×100％ 本發(fā)明用AZT及NVP作對照品，部分目標(biāo)化合物對HIV-1IIIB的抑制活性結(jié)果見表1 表1.抗HIV-1IIIB活性
aSI(選擇性指數(shù))＝CC50/EC50 抗HIV活性研究表明，在嘧啶環(huán)C-6位引入環(huán)己甲基后化合物抗HIV活性有了十分顯著的改進，其中一些化合物在細胞水平顯示出極強的抗HIV活性，化合物1-2、1-3、1-9、1-12治療指數(shù)比現(xiàn)已上市的藥物AZT及NVP還1-2個數(shù)量級，且對一些NNRTIs變異臨床變異病毒株顯示了較好的的抑制活性，進一步的試驗仍在進行之中。
權(quán)利要求
1.一種6-環(huán)己甲基取代S-DABO類衍生物，其特征在于為5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-(烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基甲基、取代苯乙酮)硫尿嘧啶，具有如下結(jié)構(gòu)通式
其中
R1為C1-3的烷基；
R2為C1-8的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基甲基，
(其中，X＝OCH3，H，OH)。
2.如權(quán)利要求1所述的6-環(huán)己甲基取代S-DABO類衍生物，其特征在于結(jié)構(gòu)通式中的R1為(CH3)2CH-，R2為(4’-OCH3)PhCOCH2-。
3.如權(quán)利要求1所述的6-環(huán)己甲基取代S-DABO類衍生物，其特征在于結(jié)構(gòu)通式中的R1為(CH3)2CH-，R2為PhCOCH2-。
4.如權(quán)利要求1所述的6-環(huán)己甲基取代S-DABO類衍生物，其特征在于結(jié)構(gòu)通式中的R1為(CH3)2CH-，R2為PhCH2-。
5.如權(quán)利要求1所述的6-環(huán)己甲基取代S-DABO類衍生物，其特征在于結(jié)構(gòu)通式中的R1為CH3CH2-，R2為PhCOCH2-。
6.如權(quán)利要求1所述的6-環(huán)己甲基取代S-DABO類化合物的制備方法，其特征在于以簡稱為β-酮酯的α-烷基取代的環(huán)己基乙酰乙酸乙酯(3)為原料，與硫脲在醇鈉催化下縮合關(guān)環(huán)制得關(guān)鍵中間體5-烷基-6-環(huán)己甲基硫尿嘧啶，最后通過S-烷基化反應(yīng)引入C2-位側(cè)鏈制備目標(biāo)分子，其反應(yīng)式如下所示
其中，
(a)R1為C1-3的烷基；R2＝C1-8的烷基、環(huán)烷基、
其中，X＝OCH3，H，OH，鹵素)，
(b)5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-硫尿嘧啶(2)與各種α-溴代酮反應(yīng)的摩爾比為1∶1～2，反應(yīng)溫度控制在為25～150℃之間，反應(yīng)時間為8-24小時，
(c)所用的溶劑為甲苯、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺中的一種或它們的混合物，
(d)β-酮酯(3)的制備采用以下兩種方法
第一種方法以氯(溴)甲基環(huán)己烷(4)為原料與氰化鈉反應(yīng)制備環(huán)己基乙氰(5)，進而與各種α-溴代烷基酸乙酯(6)通過類似Reformarsky縮合反應(yīng)，制備β-酮酯(3)，其反應(yīng)式如下所示
其中，R1為C1-3的烷基；氰化反應(yīng)所用的溶劑可以是二氯甲烷、甲醇、乙醇、異丙醇、DMSO、DMF中的任何一種，反應(yīng)溫度為60-130℃之間，反應(yīng)時間為4-12小時，
第二種方法以環(huán)己基乙酸(7)為原料與N，N-羰基二咪唑(CDI)反應(yīng)制備1-環(huán)己基乙酰咪唑(8)，進而與各烷基丙二酸單鉀鹽(10)反應(yīng)制備β-酮酯(3)，其反應(yīng)式如下所示
其中，R1＝C1-3的烷基；1-環(huán)己基乙酰咪唑(8)制備中所用的溶劑1為二氯甲烷、乙腈、乙醇、異丙醇中的任何一種，反應(yīng)溫度為25-60℃之間，反應(yīng)時間為4-8小時，在β-酮酯(3)的制備中所用溶劑2為二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙腈、DMF中的任何一種，反應(yīng)溫度為25-120℃之間，反應(yīng)時間為12-24小時。
7.如權(quán)利要求1至5所述的6-環(huán)己甲基取代S-DABO類化合物，其特征在于其用途是作為抗艾滋病藥物候選物。
全文摘要
6-環(huán)己甲基取代S-DABO類化合物、其合成方法和用途，屬藥物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種5-烷基-6-環(huán)己甲基-2-(烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基甲基、取代苯乙酮)硫尿嘧啶類化合物，該類化合物具有如(Ⅰ)通式其中R1為C1-3的烷基；R2＝C1-8的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基甲基，如(Ⅱ)式(其中，X＝OCH3，H，OH，鹵素)。分別以氯甲基環(huán)己烷或環(huán)己基乙酸為原料制備β-酮酯，再與硫脲在醇鈉催化下縮合關(guān)環(huán)制得關(guān)鍵中間體5-烷基-6-環(huán)己甲基硫尿嘧啶，最后通過S-烷基化反應(yīng)引入C2-位側(cè)鏈制備目標(biāo)分子，合成方法簡便易行，產(chǎn)物具有極其顯著的抗HIV病毒活性和抗耐藥性，可作為抗HIV藥物候選物。
文檔編號C07D239/00GK101177413SQ20071006643
公開日2008年5月14日 申請日期2007年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月11日
發(fā)明者何嚴萍, 鄭永唐, 聰 李, 張雖栓, 晶 龍, 歐靈澄 申請人:云南大學(xué), 中國科學(xué)院昆明動物研究所