專(zhuān)利名稱(chēng)：新的姜黃素類(lèi)似物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及能起雄激素受體拮抗劑作用的化合物、含此類(lèi)化合物的藥物制劑及其使用方法。
背景技術(shù)：
雄激素受體(AR)是配體依賴(lài)性轉(zhuǎn)錄因子大家族中的一員，該家族稱(chēng)為類(lèi)固醇受體超家族。Chang等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，85，7211-7215(1988)。Beato，M.，Cell，56，335-344(1989)。雄激素和AR在正常前列腺和前列腺癌的生長(zhǎng)中起重要作用。在美國(guó)，前列腺癌代表最常見(jiàn)的男性惡性腫瘤。Landis等，Cancer J.Clin.，48，6-29(1998)。近來(lái)，抗雄激素類(lèi)藥物例如羥基氟他胺(HF)結(jié)合手術(shù)或醫(yī)療閹割被廣泛用于治療前列腺癌。Crawford等，New Engl.J.Med.，321，419-424(1989)。包括環(huán)丙孕酮(cyprosterone)、HF和比卡魯胺(下示)在內(nèi)的一些化合物已在臨床上用于治療前列腺癌。
環(huán)丙孕酮氟他胺，R＝H 比卡魯胺羥基氟他胺，R＝OH

圖1環(huán)丙孕酮、羥基氟他胺和比卡魯胺的結(jié)構(gòu)在歐洲，合成甾體類(lèi)抗雄激素藥物環(huán)丙孕酮是臨床上首次使用的抗雄激素藥物之一。McLeod，D.，G.，Cancer，71，1046-1049(1993)，但它存在很多副作用。Neumann等，J.Clin.Oncol，1，41-65(1982)。HF和比卡魯胺均為非甾體類(lèi)抗雄激素藥物。比卡魯胺是更新的非甾體類(lèi)抗雄激素藥物，起初認(rèn)為它僅具有抗雄激素活性而無(wú)激動(dòng)劑活性。它的半衰期較長(zhǎng)(6天)，它與AR的結(jié)合親合力比HF強(qiáng)。Verhelst等，Clin.Endocrinol，41，525-530(1994)。(a)Kelly等，J.Urol.(1993)，149，607-609；(b)Scher等，Prostate Cancer.J.Clin.Oncol，11，1566-1572(1993)。
盡管抗雄激素激素療法已廣泛用于治療前列腺癌，但有些抗雄激素藥物可產(chǎn)生AR激動(dòng)劑的作用，這可導(dǎo)致“抗雄激素撤除綜合征”。Miyamoto等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95，7379-7384(1998)。目前接受的假設(shè)是假定雄激素受體中的突變可解釋為什么氟他胺的活性代謝物HF可激活雄激素受體靶基因和刺激前列腺癌的生長(zhǎng)。Miyamoto等，Proc.Natl Acad.Sci.USA，95，7379-7384(1998)。用相同的機(jī)理解釋“氟他胺撤除綜合征”，其中當(dāng)患者服用氟他胺時(shí)，出現(xiàn)前列腺特異性抗原(PSA)增加，撤除治療后，PSA減少。在第一個(gè)鑒定的雄激素受體輔激活蛋白ARA70的存在下，HF的確可激活雄激素受體靶基因，例如PSA和MMTV-LTR(表達(dá)雄激素-應(yīng)答元件的報(bào)道基因)。Yeh等，The Lancet，349，852-853(1997)。因?yàn)樵摼C合征經(jīng)常致使雄激素-剝括療法無(wú)效，所以需要開(kāi)發(fā)更好的無(wú)激動(dòng)劑活性的抗雄激素藥物。
酚類(lèi)二芳基庚烷類(lèi)似物(heptanoid)姜黃素(1)是姜黃中的主要色素。姜黃素及其類(lèi)似物表明具有有效的抗氧化劑活性、抗炎活性，Nurfina等，Eur.J.Med.Chem.，32，321-328(1997)；抗腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性，Syu等，J.Nat.Prod，61，1531-1534(1998)；抗促腫瘤活性，Sugiyama等，Biochem.Pharmacol，52，519-525(1996)。Ruby等，CancerLett，94，79-83(1995)和抗血管生成活性(J.L.Arbiser等，Mol.Med.4376(1998))。
據(jù)報(bào)道，兩種環(huán)狀二芳基庚烷類(lèi)似物13-氧代楊梅醇和楊梅酮對(duì)DMBA引發(fā)的和TPA誘發(fā)的小鼠皮膚癌發(fā)生具有有效的抗促腫瘤作用。Ishida等，Cancer Lett，159.135-140(2000)。在目前的研究中，已制備出許多新的姜黃素類(lèi)似物，并在雄激素受體輔激活蛋白ARA70的存在下，用兩種人前列腺癌細(xì)胞系PC-3和DU-145評(píng)價(jià)了它們對(duì)AR的拮抗活性。PC-3細(xì)胞為不表達(dá)功能性AR的雄激素-獨(dú)立性腫瘤細(xì)胞。DU-145細(xì)胞為雄激素-獨(dú)立性腫瘤細(xì)胞，它們也不表達(dá)功能性AR。
發(fā)明概述根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案，本發(fā)明涉及式I化合物本發(fā)明的第一方面為式I或Ia化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中R′和R″各自獨(dú)立選自H、烷氧基和鹵基；Ra和Rb各自獨(dú)立選自H、烷基和鹵基；R1和R2各自獨(dú)立選自H、羥基、烷氧基、硝基、氨基和二烷基氨基；R3和R4各自獨(dú)立選自H、羥基、鹵基、烷氧基和-OR7C(O)R8，其中R7為低級(jí)亞烷基，R8為烷氧基；或R1和R3一起為亞烷基二氧基；或R2和R4一起為亞烷基二氧基；R5和R6各自獨(dú)立選自H、鹵素、硝基和烷氧基；X1為N，或X1為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；且X2為N，或X2為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；條件是其中排除姜黃素。
本發(fā)明的再一方面為式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中；R11和R12各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二烷基氨基；R13和R14各自獨(dú)立選自羥基、烷氧基、-OR18C(O)R19，其中R18為低級(jí)亞烷基或亞烯基，R19為烷氧基和四氫吡喃基；或R11和R13一起為亞烷基二氧基；或R12和R14一起為亞烷基二氧基；R15和R16各自獨(dú)立選自H、鹵素和硝基；
R17為-R20C(O)OR21，其中R20為亞烷基或亞烯基，R21為H或烷基；X3為N，或X3為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；且X4為N，或X4為與H、烷氧基或硝基鍵合的C。
根據(jù)本發(fā)明的還其它實(shí)施方案，本發(fā)明涉及式III化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R25和R26各自獨(dú)立為H或低級(jí)烷基；R27、R28、R29和R30各自為烷氧基；R31為H或低級(jí)烷基。
本發(fā)明的再一方面為式IV化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R41和R42各自獨(dú)立為羥基或烷氧基；和R43和R44各自獨(dú)立為羥基或烷氧基。
本發(fā)明的再一方面為下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
根據(jù)本發(fā)明的再其它實(shí)施方案，本發(fā)明涉及治療癌癥的方法，該方法包括給予有需要的患者治療有效量的上式化合物或姜黃素?？芍委煹陌┌Y的實(shí)例包括但不限于皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、睪丸癌、淋巴瘤、白血病、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、肝癌和前列腺癌。
根據(jù)本發(fā)明的還其它實(shí)施方案，本發(fā)明涉及誘導(dǎo)雄激素受體拮抗劑活性的方法，該方法包括使癌細(xì)胞與雄激素受體拮抗劑有效量的上式化合物或姜黃素接觸。
根據(jù)本發(fā)明的其它實(shí)施方案，本發(fā)明涉及在患有與雄激素有關(guān)病癥的患者中，通過(guò)給予上式化合物或姜黃素誘導(dǎo)雄激素受體拮抗劑活性的方法。與雄激素有關(guān)的病癥的實(shí)例包括但不限于禿發(fā)、多毛癥、行為障礙、痤瘡和其中非常需要抑制精子發(fā)生的不受抑制的精子發(fā)生。
附圖簡(jiǎn)述圖1舉例說(shuō)明姜黃素類(lèi)似物(1-20)的結(jié)構(gòu)；圖2舉例說(shuō)明姜黃素類(lèi)似物(21-44)的結(jié)構(gòu)；圖3A舉例說(shuō)明通過(guò)羥基氟他胺(HF)和選擇的化合物抑制DHT介導(dǎo)的MMTV轉(zhuǎn)錄AR活性；圖3B舉例說(shuō)明通過(guò)羥基氟他胺(HF)和選擇的化合物抑制DHT介導(dǎo)的MMTV轉(zhuǎn)錄AR活性；和圖3C舉例說(shuō)明通過(guò)羥基氟他胺(HF)和選擇的化合物抑制DHT介導(dǎo)的MMTV轉(zhuǎn)錄AR活性。
發(fā)明詳述現(xiàn)在，結(jié)合附圖下文將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更全面的描述，這些附圖進(jìn)一步舉例說(shuō)明本文描述的發(fā)明。但本發(fā)明可以不同的形式實(shí)施，且不應(yīng)視為限制本文中提出的實(shí)施方案。相反，提供這些實(shí)施方案，以便本發(fā)明公開(kāi)的內(nèi)容將本發(fā)明的范圍徹底、完全并全面地提供給本領(lǐng)域技術(shù)人員。
用于本發(fā)明說(shuō)明書(shū)中的術(shù)語(yǔ)僅用于描述具體實(shí)施方案的目的，并無(wú)意限制本發(fā)明。當(dāng)在本發(fā)明說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中使用時(shí)，除非上下文另外明確的指明，單數(shù)形式“一”和“該”將也包括其復(fù)數(shù)形式。
除另有定義外，本文中使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域中普通技術(shù)人員通常理解相同的含義。所有出版物、專(zhuān)利申請(qǐng)、專(zhuān)利和本文中提及的其它參考文獻(xiàn)通過(guò)引用而整體結(jié)合到本文中。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“烷基”或“低級(jí)烷基”是指C1-C4、C6或C8烷基，它們可以為直鏈或支鏈的和飽和或不飽和的。
本文中使用的“姜黃素”是指下式化合物 可用姜黃素或其藥學(xué)上可接受的鹽實(shí)施本文中所述方法。
“環(huán)烷基”在本文中同樣是特定的，且通常為C3、C4或C5-C6或C8環(huán)烷基。
類(lèi)似地，本文中使用的“烯基”或“低級(jí)烯基”是指C1-C4烯基，類(lèi)似地，本文中使用的烷氧基或低級(jí)烷氧基是指C1-C4烷氧基。
本文中使用的“烷氧基”是指直鏈或支鏈、飽和或不飽和氧-烴鏈，包括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“芳基”是指C3-C10環(huán)狀芳族基團(tuán)，例如苯基、萘基等，且包括取代的芳基例如甲苯基。
本文中使用的“鹵基”是指任何鹵素基團(tuán)，例如氯、氟、溴或碘。在某些實(shí)施方案中，優(yōu)選鹵基為氟。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“羥基烷基”是指羥基取代的C1-C4直鏈或支鏈烷基，即-CH2OH、-(CH2)2OH等。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“氨基烷基”是指氨基取代的直鏈或支鏈C1-C4烷基，其中術(shù)語(yǔ)“氨基”是指NR′R″基團(tuán)，其中R′和R″獨(dú)立選自H或以上定義的低級(jí)烷基，即-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2等。
術(shù)語(yǔ)“四氫吡喃基”是指下式基團(tuán) 本文中使用的術(shù)語(yǔ)“氧基烷基”是指氧取代的C1-C4烷基，即-OCH3，本文中使用的術(shù)語(yǔ)“氧基芳基”是指氧取代的C3-C10環(huán)狀芳族基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“亞烷基二氧基”是指通式-ORNO-、-ORNORN-或-RNORNORN-的基團(tuán)，其中各RN獨(dú)立為烷基。
本文中使用的“治療”是指可給予患病患者益處的任何類(lèi)型的治療，包括改善患者的狀況(例如一種或多種癥狀)、延緩疾病發(fā)展、預(yù)防或延遲疾病發(fā)作等。
本文中使用的“藥學(xué)上可接受的”表示根據(jù)疾病的嚴(yán)重性和治療必要性，適合給予患者實(shí)現(xiàn)本文中所述治療，無(wú)不適有害副作用的化合物或組合物。
本文中使用的“抑制”表示部分或完全消除的有效作用。
本文中使用的“雄激素”是指本領(lǐng)域技術(shù)人員通常已知的性激素，包括但不限于睪酮、二氫睪酮和雄甾烯二酮，以及作用機(jī)理與雄激素相似的已知化合物，例如雄激素受體激動(dòng)劑?！靶奂に亍鄙婕凹に鼗蚧衔锘蚱浣M合。
本文中使用的“抗雄激素撤除綜合征”是指特征在于給予抗雄激素療法后，血清前列腺特異性抗原(PSA)濃度無(wú)變化或增加，且在停止抗雄激素療法后，隨后觀察到PSA濃度下降的現(xiàn)象。
本文中使用的“雄激素受體拮抗劑”是指部分或完全抑制雄激素受體激動(dòng)劑活性的化合物。
本文中使用的“與雄激素有關(guān)的病癥”是指其中雄激素或雄激素組合在觀察到的病癥中起作用的病癥。
本發(fā)明主要涉及人患者的治療，但也可用于其它動(dòng)物患者(即哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類(lèi))獸醫(yī)目的的治療。優(yōu)選哺乳動(dòng)物，尤其優(yōu)選人。
如上所述，本發(fā)明的第一方面為式I或Ia化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R′和R″各自獨(dú)立選自H、烷氧基和鹵基；Ra和Rb各自獨(dú)立選自H、烷基和鹵基；R1和R2各自獨(dú)立選自H、羥基、烷氧基、硝基、氨基和二烷基氨基；
R3和R4各自獨(dú)立選自H、羥基、鹵基、烷氧基和-OR7C(O)R8，其中R7為低級(jí)亞烷基，R8為烷氧基；或R1和R3一起為亞烷基二氧基；或R2和R4一起為亞烷基二氧基；R5和R6各自獨(dú)立選自H、鹵素、硝基和烷氧基；X1為N，或X1為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；且X2為N，或X2為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；條件是其中排除姜黃素。
在式I和Ia化合物的某些特定實(shí)施方案中，R′和R″中的至少一個(gè)為烷氧基或鹵基。
在式I和Ia化合物的某些特定實(shí)施方案中，Ra為鹵基，Rb為H、烷基或鹵基，優(yōu)選烷基。
在式I和Ia化合物的某些特定實(shí)施方案中，R1和R2各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二甲基氨基。
在式I和Ia化合物的某些特定實(shí)施方案中，R1和R3一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
在式I和Ia化合物的某些特定實(shí)施方案中，R2和R4一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
在式I和Ia化合物的某些特定實(shí)施方案中，R5和R6各自獨(dú)立選自H、F和硝基。
本發(fā)明的再一方面為式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中
R11和R12各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二烷基氨基；R13和R14各自獨(dú)立選自羥基、烷氧基、-OR18C(O)R19，其中R18為低級(jí)亞烷基或亞烯基，R19為烷氧基和四氫吡喃基；或R11和R13一起為亞烷基二氧基；或R12和R14一起為亞烷基二氧基；R15和R16各自獨(dú)立選自H、鹵素和硝基；R17為-R20C(O)OR21，其中R20為亞烷基或亞烯基，R21為H或烷基；X3為N，或X3為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；且X4為N，或X4為與H、烷氧基或硝基鍵合的C。
在式II化合物的某些特定的實(shí)施方案中，R20為亞烯基。
在式II化合物的某些特定的實(shí)施方案中，R13和R14為四氫吡喃基。
在式II化合物的某些特定的實(shí)施方案中，R11和R12各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二甲基氨基。
在式II化合物的某些特定的實(shí)施方案中，R11和R13一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
在式II化合物的某些特定的實(shí)施方案中，R12和R14一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
在式II化合物的某些特定的實(shí)施方案中，R15和R16各自獨(dú)立選自H、F和硝基。
根據(jù)本發(fā)明的還其它實(shí)施方案，本發(fā)明涉及式III化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中
R25和R26各自獨(dú)立為H或低級(jí)烷基；R27、R28、R29和R30各自為烷氧基；R31為H或低級(jí)烷基。
本發(fā)明的再一方面為式IV化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R41和R42各自獨(dú)立為羥基或烷氧基；且R43和R44各自獨(dú)立為羥基或烷氧基。
本發(fā)明的再一方面為下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 A.具體化合物本發(fā)明范圍中的具體化合物包括但不限于
以下描述本發(fā)明化合物的其它實(shí)例。
B.化合物的合成對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，以下通用合成方法的各種變化形式是顯而易見(jiàn)的，并應(yīng)視為在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
圖1和2顯示姜黃素類(lèi)似物和1，3-二芳基-1，3-二酮基丙烷衍生物的結(jié)構(gòu)。使含次要組分2和3的市售姜黃素(Aldrich)通過(guò)柱層析(硅膠，CHCl3-MeOH)，得到姜黃素(1)、去甲氧基姜黃素(2)和二去甲氧基姜黃素(3)。將1用重氮甲烷處理，得到二甲基化的姜黃素(4)和一甲基化的姜黃素(9)。用碘甲烷和K2CO3將1甲基化，得到三甲基化衍生物10，其中也在C-4位引入甲基。通過(guò)將1-4和組氨酸酰肼、AcOH和p-TsOH一起加熱過(guò)夜，合成化合物5-8。將1用10％Pd-C氫化，得到11-13的混合物。類(lèi)似地，通過(guò)將4和10氫化，分別得到化合物14-16和17-18。將1和氯乙酸甲酯、NaI和K2CO3在丙酮中一起加熱，得到一甲氧基羰基甲基醚18和二甲氧基羰基甲基醚19的混合物，通過(guò)制備TLC(PLC)將它們分離。通過(guò)本領(lǐng)域中已知方法，由苯或香草醛和4-乙酰基-5-氧代己酸乙酯制備化合物21-23。Pedersen等，Liebigs Ann.Chem.，1557-1569(1985)?；衔?1-23組成不可分離的酮-烯醇式互變異構(gòu)體混合物。在我們以前的論文中描述了24-38的合成。Ishida等，Cancer Lett，159.135-140(2000)。Ishida等，Synthesisand Evaluation of Curcumin Analogues as Cytotoxic Agents(細(xì)胞毒藥物姜黃素類(lèi)似物的合成和評(píng)價(jià))。未公布數(shù)據(jù)?；衔?9-44購(gòu)自Aldrich，Inc(Milwaukee，WI)。
C.藥學(xué)上可接受的鹽本文中使用的術(shù)語(yǔ)“活性藥物”包括化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽是保留需要的母體化合物的生物活性，而沒(méi)有不期望毒理學(xué)作用的鹽。此類(lèi)鹽的實(shí)例是(a)由例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等無(wú)機(jī)酸形成的酸加成鹽；和由例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、葡糖酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、抗壞血酸、苯甲酸、鞣酸、棕櫚酸、藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等有機(jī)酸形成的鹽；和(b)由元素陰離子例如氯、溴和碘形成的鹽。
或者，用于制備本發(fā)明組合物的活性藥物可以是活性藥物的藥學(xué)上可接受的游離堿形式。因?yàn)榛衔锏挠坞x堿比鹽難溶，所以用游離堿組合物提供將活性藥物更持續(xù)的釋放至靶區(qū)域。尚未進(jìn)入溶液的靶區(qū)域中的活性藥物不能引起生理反應(yīng)，但可用作逐漸進(jìn)入溶液的可生物利用藥物的貯庫(kù)。
D.藥物制劑姜黃素和本發(fā)明姜黃素類(lèi)似物可作為藥物活性劑使用，且可以采用散裝形式。但更優(yōu)選，這些化合物配制為用于給藥的藥物制劑。可用任何合適的藥物制劑作為載體給予本發(fā)明的化合物。
可配制本發(fā)明化合物以便給藥治療各種病癥。在制備本發(fā)明藥物制劑時(shí)，通常將本發(fā)明化合物及其生理上可接受的鹽或它們的酸衍生物(下文稱(chēng)“活性化合物”)與其中可接受的載體混合。在與制劑中任何其它成分配伍且必須對(duì)患者無(wú)害的意義上，載體自然必須是可接受的。載體可以為固體或液體或二者，優(yōu)選與化合物配制成單位劑量制劑，例如可含0.5％-95％(重量)活性化合物的片劑。可將一種或多種活性化合物加入本發(fā)明制劑中，該制劑可通過(guò)任一熟知的藥劑學(xué)技術(shù)制備，該技術(shù)基本上由使各組分，任選包括一種或多種輔助成分混合組成。
盡管在任何給出的情況中，大多數(shù)合適的途徑將取決于所治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性、所用的特定活性化合物的性質(zhì)，但本發(fā)明制劑包括適合口服、直腸、局部、口頰(例如舌下)、腸胃外(例如皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)或靜脈內(nèi))和透皮給藥的那些。
適合口服給藥的制劑可以離散的單位提供，例如膠囊劑、扁囊劑、錠劑或片劑，它們各自含有預(yù)定量的活性化合物；散劑或顆粒劑；水或非水液體的溶液劑或混懸劑；或水包油或油包水乳劑。此類(lèi)制劑可通過(guò)任何合適的藥劑學(xué)方法制備，這些方法包括使活性化合物和合適的載體(可含有一種或多種上述輔助成分)組合在一起的步驟。
一般而言，通過(guò)使活性化合物與液體或固體微粉載體或二者均勻和充分的混合，然后，如必要使得到的混合物成形，制備本發(fā)明制劑。例如，可通過(guò)將含有活性化合物，任選含有一種或多種輔助成分的粉末或顆粒壓縮或模制，制備片劑?？赏ㄟ^(guò)將任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑和/或表面活性劑/分散劑混合的，自由流動(dòng)形式例如粉末或顆粒形式的化合物，在合適的機(jī)器上壓縮制備壓制片?？赏ㄟ^(guò)將用惰性液體粘合劑潤(rùn)濕的粉狀化合物，在合適的機(jī)器上模塑制備模制片。
適合口頰(舌下)給藥的制劑包括在矯味基質(zhì)通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃芪膠中含活性化合物的錠劑；和在惰性基質(zhì)例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠合化合物的軟錠劑。
適合腸胃外給藥的本發(fā)明制劑適宜包括活性化合物的無(wú)菌水性制劑，優(yōu)選這些制劑與預(yù)定接受者的血液等滲。可通過(guò)皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮內(nèi)注射方式給予這些制劑?？赏ㄟ^(guò)使化合物與水或甘氨酸緩沖劑混合，將得到的溶液滅菌并使其與血液等滲，便利地制備此類(lèi)制劑。
優(yōu)選，適合直腸給藥的制劑以單位劑量栓劑提供。可通過(guò)使活性化合物與一種或多種常規(guī)固體載體例如可可脂混合，然后使得到的混合物成形，制備這些栓劑。
優(yōu)選，適合局部施用至皮膚的制劑采用以下形式軟膏劑、霜?jiǎng)?、洗劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣霧劑或油?？墒褂玫妮d體包括凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇、透皮吸收促進(jìn)劑及其兩種或多種的組合。
適合透皮給藥的制劑可以離散的貼劑提供，該貼劑適合與接受者的表皮保持長(zhǎng)時(shí)間的充分接觸。適合透皮給藥的制劑還可通過(guò)離子導(dǎo)入法釋放(參見(jiàn)例如Pharmaceutical Research 3(6)318(1986))，通常采用活性化合物的任選緩沖的水溶液形式。合適的制劑包含檸檬酸鹽或bis\tris緩沖劑(pH 6)或乙醇/水，并含有0.01-0.2M活性成分。
E.使用方法除本文所述式的化合物外，本發(fā)明還提供有效治療方法。例如，本發(fā)明提供誘導(dǎo)抗腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性、抗促腫瘤活性、抗炎活性的方法。更尤其是，本發(fā)明提供誘導(dǎo)雄激素受體拮抗劑活性的方法。雄激素受體拮抗劑活性是抑制雄激素相關(guān)腫瘤或癌細(xì)胞生長(zhǎng)的有效手段。
可抑制的癌細(xì)胞包括以下癌的細(xì)胞皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、睪丸癌、淋巴瘤、白血病、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、肝癌和前列腺癌。
本發(fā)明還提供在癌癥患者中治療癌癥的方法。這些患者也包括患有抗雄激素撤除綜合征的患者。該方法包括給予患者有效的癌癥-治療量的本發(fā)明的式化合物。該方法可用于治療各種癌細(xì)胞，所述癌包括但不限于皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、睪丸癌、淋巴瘤、白血病、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、卵巢癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、肝癌和前列腺癌。
具有抗雄激素活性的化合物也具有治療雄激素-促使的毛發(fā)病癥例如禿發(fā)和多毛癥的有效治療潛力。抗雄激素化合物還可以為治療有效的雄性避孕形式，其中本領(lǐng)域技術(shù)人員通常已知和理解需要雄激素維持精子發(fā)生。另外，具有抗雄激素活性的化合物可有效治療包括但不限于攻擊性、暴力行為和性侵害的行為障礙?？剐奂に鼗衔镞€可治療有效性治療因激素水平改變引起的痤瘡，該激素包括與痤瘡病癥有關(guān)的雄激素。
盡管本發(fā)明方法可用于其它患者，尤其哺乳動(dòng)物患者包括但不限于馬、牛、狗、兔、家禽、綿羊等的獸醫(yī)目的，但可用本發(fā)明方法治療的患者通常為人患者。如上所述，本發(fā)明提供藥物制劑，該藥物制劑含在藥學(xué)上可接受的載體中的本文中所述式化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽，用于任何合適的給藥途徑，包括但不限于口服、直腸、局部、口頰、腸胃外、肌內(nèi)、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)和透皮給藥。
任何具體化合物的治療有效劑量在化合物與化合物之間、患者與患者之間將有些不同，并將取決于患者的狀況和遞藥途徑。作為一般的建議，約0.1至約50mg/kg劑量將有療效，口服和/或氣霧劑給藥可采用還更高的劑量。關(guān)于較高水平的毒性可將靜脈內(nèi)劑量限制至較低水平，例如最高達(dá)約10mg/kg，基于活性堿的重量計(jì)算所有重量，包括使用鹽的情況。通常，靜脈內(nèi)或肌內(nèi)給藥使用約0.5mg/kg至約5mg/kg的劑量?？诜o藥可使用約10mg/kg至約50mg/kg的劑量。
在以下非限定性實(shí)施例中更詳細(xì)地解釋了本發(fā)明。
實(shí)施例1A.材料和方法含次要組分2和3的市售姜黃素(Aldrich)通過(guò)柱層析(硅膠，CHCl3-MeOH)，得到化合物1-3?；衔?9-44購(gòu)自Aldrich，Inc(Milwaukee，WI)。
二甲基姜黃素(4)將姜黃素(1)的Et2O和MeOH溶液用過(guò)量重氮甲烷的乙醚溶液處理24h。將溶劑真空除去，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析和PLC純化，得到4的黃色針狀物(收率19.8％)；mp 129-130℃(MeOH)(Roughley et al.，J.Chem.Soc.Perkin I，2379-2388(1973))(128-130℃)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.93(12H，s，OCH3x4)，5.82(1H，s，1-H)，6.48(2H，d，16Hz)，6.88(2H，d，J＝8Hz)，7.08(2H，bs)，7.15(2H，bd)，7.61(2H，J＝16Hz)；13CNMR(300MHz，CDCl3)δ55.9，56.0，101.3，109.8，111.1，122.0，122.6，128.1，140.4，149.2，151.0，183.2制備吡唑衍生物(8)向1-4的丁醇和乙醇溶液中加入組氨酸酰肼(1當(dāng)量)、乙酸和p-TsOH。將溶液回流24h，然后將溶劑真空除去。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析和PLC純化。
化合物8黃色粉末(收率17.5％)，
mp 166-168℃(MeOH)；1HNMR(300MHz，CDCl3)δ3.92(6H，s，OCH3x2)，3.94(6H，s，OCH3x2)，6.62(1H，s，1-H)，6.86(2H，d，J＝8Hz)，6.93(2H，d，J＝16Hz)，7.04(2H，dd，J＝8，2Hz)，7.06(2H，bs)，7.05(2H，d，J＝16Hz)；13CNMR(300MHz，CDCl3)δ55.8，55.9，99.6，108.6，111.2，115.8，120.1，129.7，130.6，149.1，149.3；元素分析C23H24N2O4·1·1/4H2O理論值C，66.57；H，6.44；N，6.75。實(shí)測(cè)值C，66.44；H，6.19；N，6.27。
一甲基姜黃素(9)將姜黃素(1)的MeOH溶液用過(guò)量重氮甲烷的Et2O溶液處理24h。將溶劑除去后，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析和PLC純化，得到黃色無(wú)定形固體(收率20％)；mp 89-91℃，[α]D-3.6(c＝1.14，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.93(9H，s，OCH3x3)，5.81(1H，s，1-H)，5.94(1H，bs，OH)，6.49(2H，bd，J＝15Hz)，6.93(1H，d，J＝8Hz)，6.97(1H，d，J＝8Hz)，7.10(4H，m)，7.60(2H，bd，J＝15Hz)；EIMS m/z 382(M*)，HRFABMS 382.1396(M+H+)(C22H22O6理論值382.1416)。
1、4和10氫化(11-18)在H2(45psi)下，用帕爾裝置將原料的EtOAc溶液和10％Pd-C一起振搖過(guò)夜。將溶液過(guò)濾，真空濃縮，得到殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析和PLC純化。
四氫姜黃素(11)白色粉末，
mp 92-93℃(Roughley et al.，J.Chem.Soc.Perkin I，2379-2388(1973)，95-96℃)，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.53-2.58(3H，m)，2.78-2.88(5H，m)，3.87(6H，s，OCH3x2)，5.43(1H，s，1-H)，5.50(2H，s，ArOH)，6.65(2H，d，J＝8Hz)，6.69(2H，s)，6.83(2H，d，J＝8Hz)；13CNMR(300MHz，CDCl3)δ31.3，40.4，55.8，99.8，111.0，114.3，120.8，132.6，144.0，146.4和193.2.
六氫姜黃素(12)白色粉末，mp 87-88℃(Roughley，P.J.et al.，J.Chem.Soc.Perkin I，2379-2388(1973)，78-80℃)，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.60-1.81(2H，m)，2.53-2.97(8H，m)，3.85(6H，s，OCH3x2)，4.06(1H，m，2-H)，6.70(4H，m)，6.80(2H，d，J＝8Hz)；13CNMR(300MHz，CDCl3)δ29.7，31.7，38.8，45.8，49.8，56.3，67.4，111.5，111.6，114.8，114.9，121.2，121.4，133.0，134.2，144.2，144.5，146.9，147.9和211.9.
八氫姜黃素(13)無(wú)色油狀物，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.61(2H，m)，1.75(4H，m)，2.53-2.70(4H，m)，3.80(6H，s，OCH3x2)，3.91(2H，brs)，6.13(2H，s，ArOH)，6.65(2H，d，J＝8Hz)，6.69(2H，bs)6.82(2H，bd，J＝8Hz)，13CNMR(300MHz，丙酮-d6)δ31.1，39.8，42.6，35.6，72.0，111.0，114.3，120.6，133.6，143.6和146.4.
化合物14白色粉末(收率26.0％)，mp 60-61℃，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.56(3H，m)，2.86(5H，m)，3.85(12H，s，OCH3x4)，5.44(1H，s，1-H)，671(4H，m)，6.78(2H，bd)；元素分析C23H28O6·1/4H2O理論值C，68.21；H，7.09。實(shí)測(cè)值C，68.25；H，7.06。
化合物15白色粉末(收率20.0％)，mp 94-95℃，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.65-1.80(2H，m)，2.53-2.84(8H，m)，3.85(12H，s，OCH3x4)，4.05(1H，bs，2′-H)，6.68-7.23(4H，m)，6.79(2H，bd)，元素分析C23H30O6·1/4H2O理論值C，67.88；H，7.55。實(shí)測(cè)值C，67.73；H，7.49。
化合物16無(wú)色油狀物(收率4.2％)，mp 60-61℃，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.55-1.65(4H，m)，1.73-1.82(3H，m)，2.60-2.72(3H，m)，3.86(6H，s，OCH3x2)，3.87(8H，bs，OCH3x2，2，2′-H)，6.72-6.78(4H，m)，6.79(2H，bd)，727(2H，s，OHx2)，EIMS m/z404(M+)，HRFAB-MS m/z 404.219070(M+H)+(C23H32O6理論值404.2198891)。
化合物17無(wú)色油狀物(收率5.9％)，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.10(3H，d)，1.80(1H，m)，2.43-2.82(8H，m)，3.86(6H，s，OCH3x2)，3.87(6H，s，OCH3x2)，3.94(1H，bs，2′-H)*.70-6.78(6H，m)，EIMS m/z 416(M+).
化合物18無(wú)色油狀物(收率6.95％)，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.95(3H，d，1-CH3)，1.52(1H，m)，1.84(2H，m)，2.67(6H，m)，3.83(14H，bs，OCH3x4，2，2′-H)，6.78(6H，m)；EIMS m/z418(M+)，HRFAB-MS m/z 418.236618(M+H)+(C24H34O6理論值418.2355392)。
制備19和20
攪拌下，使姜黃素(1,100mg，0.81mmol)的丙酮(20mL)溶液以及氯乙酸甲酯(2mL)和NaI(20mg)的混合物與無(wú)水碳酸鉀(176mg)一起回流24h。過(guò)濾后，將溶劑除去，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析純化，得到相應(yīng)的乙酸甲酯19和20。
化合物19黃色粉末(收率20.0％)，mp 60-61℃，mp 66-67℃，[α]D-2.4(c＝2.08，CHCl3)；1H NMR(300MHz，丙酮-d6)δ3.73(3H，s，-COOCH3)，3.86(6H，s，OCH3x2)，4.79(2H，s，O-CH2-COO)，5.99(1H，s，1-H)，6.70和6.73(兩者為1H，d，J＝15.3Hz)，6.88(1H，d，J＝8Hz)，6.94(1H，d，J＝8Hz)，717(2H，m)，7.33(2H，m)，7.59和7.61(兩者為1H，d，J＝15.3Hz)，13CNMR(300MHz，CDCl3)d 51.8，55.9，55.9，65.9，101.4，111.2，111.6，114.3，115.9，121.8，122.6，123.0，123.5，127.6，128.7，129.8，140.3，141.3，148.4，149.8，150.0，150.4，169.4，183.4，184.6；元素分析C24H24O8·3/4H2O理論值C，63.50；H，5.66。實(shí)測(cè)值C，63.53；H，5.65。
化合物20黃色粉末(收率20.0％)，mp 141-142℃(MeOH)，[α]D-0.29(c＝5.86，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.80(6H，s)，3.93(6H，s)，4.73(4H，s，O-CH2-COOx2)，5.82(1H，s，1-H)，6.50(2H，d，J＝16Hz)，6.79(2H，d，J＝8Hz)，7.09(4H，bs)，7.58(2H，d，J＝16Hz)，13C NMR(300MHz，CDCl3)d52.3，56.0，66.0，101.4，110.7，113.6，122.0，122.7，129.5，140.1，149.0，149.7，169.0，183.1；元素分析C27H28O10·1/2H2O理論值C，62.18；H，5.60。實(shí)測(cè)值C，62.31；H，5.57。
化合物21黃色無(wú)定形固體(收率3.0％)，
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.58(2H，m)，2.95(2H，m)，7.12(2H，d，J＝15Hz)，7.40(6H，m)，7.60(4H，m)，7.81(2H，d，J＝15Hz)，12.65(1H，bs)；元素分析C22H20O4理論值C，75.84，H，5.79。實(shí)測(cè)值C，75.56，H，5.74。
化合物22黃色無(wú)定形固體(收率25.0％)，元素分析C26H28O8理論值C，66.66，H，6.02，實(shí)測(cè)值C，66.38，H，6.16。
化合物23黃色粉末(收率45.0％)，mp 144-146℃(MeOH)(Pedersen等，Liebigs Ann.Chem.1557-1569(1985)，71-73℃(CH2Cl2))元素分析C24H26O8·2·1/2H2O理論值C，59.87；H，5.23。
實(shí)測(cè)值C，59.94；H，5.11。
通過(guò)將它們的物理光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的那些數(shù)據(jù)對(duì)比，確證1-4、10-13、22和23的結(jié)構(gòu)。Pedersen等，Liebigs Ann.Chem.1557-1569(1985)，Roughley等，J.Chem.Soc.Perkin I，2379-2388(1973)。
B.抑制DHT介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄活性細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染將人前列腺癌DU145和PC-3細(xì)胞保存在Dulbecco極限必需培養(yǎng)基(DMEM)中，該培養(yǎng)基含青霉素(25單位/mL)、鏈霉素(25μg/mL)和10％胎牛血清(FCS)。為了AR反式激活測(cè)定，用AR表達(dá)質(zhì)粒和報(bào)道基因轉(zhuǎn)染PC-3細(xì)胞。由于內(nèi)源性AR輔激活蛋白含量低，故用AR和ARA70的表達(dá)質(zhì)粒和報(bào)道基因轉(zhuǎn)染DU-145細(xì)胞。采用先前Miyamoto等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95，7379-7384(1998)中描述的條件，但略做改進(jìn)。
按照生產(chǎn)商(Qiagen，Chatsworth，CA)的方法，用SuperFect試劑盒進(jìn)行轉(zhuǎn)染。簡(jiǎn)而言之，先將1×105細(xì)胞接種在35-mm皿中，24h后進(jìn)行轉(zhuǎn)染，然后用AR表達(dá)質(zhì)粒(野生或突變型)或pSG5ARA70共轉(zhuǎn)染報(bào)道質(zhì)粒、含MMTV-LTR啟動(dòng)子和AR結(jié)合元件的MMTV-螢光素酶。用PRL-TK作為轉(zhuǎn)染效力的內(nèi)控。在所有轉(zhuǎn)錄激活測(cè)定中，均用pSG5將DNA總量調(diào)至3.0g。轉(zhuǎn)染2h后，將培養(yǎng)基換為DMEM-10％碳吸附血清培養(yǎng)基，14-16h后，用DHT、抗雄激素或測(cè)試化合物處理細(xì)胞。再過(guò)14-16h后，收獲細(xì)胞，用螢光素酶測(cè)定法(Promega，Dual Luciferase Assay System，Madison，WI)測(cè)量螢光素酶活性。按與內(nèi)部螢光素酶陽(yáng)性對(duì)照對(duì)比得到的相對(duì)螢光素酶活性表示數(shù)據(jù)。
C.結(jié)果和討論該工作的目的是研究新姜黃素類(lèi)似物的抗雄激素受體拮抗劑活性。在本文中，報(bào)道了作為抗雄激素受體拮抗劑和抗腫瘤藥物的新姜黃素類(lèi)似物的合成和評(píng)價(jià)。
用兩種不同人前列腺癌細(xì)胞PC-3和DU-145，測(cè)試了47個(gè)姜黃素衍生物(1-47)對(duì)AR的拮抗活性(圖3A-C)。母體化合物姜黃素(1)在所有情況中均無(wú)活性。但是，當(dāng)用經(jīng)野生型AR轉(zhuǎn)染的PC-3細(xì)胞測(cè)定時(shí)，二甲基化姜黃素(4)顯示出顯著的拮抗活性(使DHT誘導(dǎo)的AR活性減少70％)，并比HF活性更強(qiáng)(使DHT誘導(dǎo)的AR活性減少16％，圖3A)。當(dāng)用經(jīng)突變型LNCaP AR和ARA70轉(zhuǎn)染的DU-145細(xì)胞測(cè)定時(shí)，化合物4也顯示出最高的拮抗劑活性(顯示使DHT誘導(dǎo)的AR活性減少45％，圖3B)，表明化合物4是正常和突變型AR的有效拮抗劑。
為在該系列化合物中確定AR拮抗劑活性所需要的結(jié)構(gòu)，用PC-3細(xì)胞測(cè)定系統(tǒng)進(jìn)行構(gòu)-效關(guān)系(SAR)研究。與4相比，一甲基化姜黃素(9)在一個(gè)苯環(huán)的對(duì)位缺少一個(gè)O-甲基，明顯比4活性低(圖3B)。因此，4的雙(3，4-二甲氧基苯基)基團(tuán)對(duì)活性很重要。在4的C-4上引入甲基(10)，導(dǎo)致活性下降(圖3B)。通過(guò)將4氫化得到的化合物14和15與HF的效力相同，使DHT誘導(dǎo)的AR活性減少18％，但與4相比活性相當(dāng)?shù)?圖3A)。將4的β-二酮部分轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的吡唑衍生物8，活性大大下降。另外，含4中存在的二-芳基基團(tuán)但缺少共軛雙鍵的1，3-二(3，4-二甲氧基苯基)-1，3-丙二酮(39)比4活性低(圖3A和3B)，表明共軛雙鍵也對(duì)4的活性有貢獻(xiàn)。這些觀察結(jié)果提示，雙(3，4-二甲氧基苯基)基團(tuán)和共軛β-二酮部分對(duì)活性至關(guān)重要。
圖3C中的數(shù)據(jù)表明有些不同的細(xì)胞測(cè)定系統(tǒng)，其中用用野生型AR和ARA70轉(zhuǎn)染的DU-145細(xì)胞測(cè)定抗雄激素活性。在該測(cè)定系統(tǒng)中，顯示化合物4、20、22、23和39的活性相當(dāng)，或比HF更強(qiáng)的抗雄激素活性?；衔?0和22幾乎等效(分別減少54％和53.8％)，且活性比4略微高(49.9％)。因?yàn)榻S素(1)本身無(wú)活性，所以在酚羥基上引入甲氧基羰基甲基(20)或在C-4上引入乙氧基羰基乙基(22)，在野生型AR和ARA70的存在下，在DU-145細(xì)胞中，對(duì)抗AR活性有很大貢獻(xiàn)。
在該研究中，我們還研究了氟代二芳基庚烷類(lèi)似物24-29和環(huán)狀二芳基庚烷類(lèi)似物30-38化合物的抗雄激素活性?；衔?4-29在兩個(gè)苯環(huán)上具有氟或三氟甲基取代基，但顯示出的活性弱或無(wú)活性。在環(huán)狀二芳基庚烷類(lèi)似物30-38中，化合物30活性最強(qiáng)，其活性幾乎與HF相同(圖3A和3C)。其余環(huán)狀二芳基庚烷類(lèi)似物顯示出弱拮抗活性。
最后，我們制備了許多姜黃素類(lèi)似物，并在3種不同測(cè)定條件下，用人前列腺癌細(xì)胞系，評(píng)價(jià)了它們潛在的抗雄激素活性。在所有測(cè)定中，化合物4顯示出有希望的抗雄激素活性。已鑒定出化合物4、20、22、23和39是新的一類(lèi)抗雄激素藥物。SAR研究表明，雙(3，4-二甲氧基苯基)部分、共軛β-二酮和C-4上的乙氧基羰基乙基在拮抗活性中起重要作用。
實(shí)施例2合成和表征其它姜黃素類(lèi)似物其它姜黃素類(lèi)似物見(jiàn)下表1所示。
表1.姜黃素類(lèi)似物


前述化合物合成如下 用Pedersen等開(kāi)發(fā)的策略對(duì)合成方法進(jìn)行了改進(jìn)。將乙酰丙酮(0.2ml，2mmol)和硼酸酐(100mg，1.4mmol)溶于15ml乙酸乙酯。將溶液在70℃下攪拌0.5小時(shí)。加入5-羥基甲基呋喃(506mg，4mmol)和硼酸三丁酯(1.08ml，4mmol)。將混合物攪拌30min。然后在15min內(nèi)，滴加丁胺(0.3ml，3mmol)的EtOAc(4ml)溶液。繼續(xù)在85℃下攪拌5小時(shí)。然后通過(guò)加入8ml 1N HCl，并在60℃下攪拌0.5小時(shí)，將混合物水解。將有機(jī)層分離。將水層用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)層洗滌至中性，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。將溶劑真空除去。粗產(chǎn)物經(jīng)CombiFlash柱層析純化，用己烷-EtOAc洗脫。得到68mg紅色粉末，收率12％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.67(4H，s)，5.74(H，s)，6.40(2H，d，J＝3.3Hz)，6.53(2H，d，J＝15.3Hz)，6.58(2H，d，J＝3.3Hz)，7.43(2H，d，J＝15.6Hz).
將香草醛(1.52g，10mmol)和硼酸三丁酯(2.7ml，10mmol)溶于8ml乙酸乙酯。攪拌下，向該溶液中加入丙酮(0.37ml，5mmol)。將溶液攪拌10min。滴加丁胺(1ml，10mmol)的EA(5ml)溶液。將溶液在50℃下攪拌數(shù)小時(shí)。加入7ml 1N HCl。將混合物在50℃下攪拌0.5小時(shí)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.94(6H，s)，6.90(2H，d，J＝8.4Hz)，6.95(2H，d，J＝15.6Hz)，7.11(2H，d，J＝1.8Hz)，7.20(2H，dd，J＝1.8Hz，J＝8.4Hz)，7.68(2H，d，J＝15.6Hz).
將乙酰丙酮(3.1ml，30mmol)和硼酸酐(1.5g，21mmol)溶于20ml乙酸乙酯。將溶液在70℃下攪拌1小時(shí)。向該溶液加入香草醛(1.52g，10mmol)和硼酸三丁酯(2.7ml，10mmol)。將混合物攪拌30min。在85℃下，在15min內(nèi)，滴加丁胺(1ml，10mmol)的EtOAc(7ml)溶液。繼續(xù)在100℃下攪拌1小時(shí)。然后在50℃下，通過(guò)加入20ml 1N HCl，并在50℃下攪拌0.5小時(shí)，將混合物水解。將有機(jī)層分離。將水層用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)層洗滌至中性，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。將溶劑真空除去。粗產(chǎn)物經(jīng)閃柱層析純化，用己烷-EtOAc洗脫。得到黃色粉末，收率49％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.16(3H，s)，3.94(3H，s)，5.63(H，s)，6.33(H，d，J＝15.9Hz)，6.92(H，d，J＝8.1Hz)，7.01(H，d，J＝1.8Hz)，7.10(H，dd，J＝8.1Hz，J＝1.8Hz)，7.53(H，d，J＝15.9Hz).
LL-17在80℃下，將LL-1(468，2mmol)和硼酸酐(100mg，1.4mmol)溶于10ml EtOAc。將溶液攪拌1小時(shí)。向該混合物中加入含3，4-二甲氧基苯甲醛(365mg，2.2mmol)和硼酸三丁酯(0.54ml，2mmol)的10mlEtOAc溶液。攪拌0.5小時(shí)后，將哌啶(0.08ml)加入混合物。攪拌2小時(shí)后，在50℃下，加入4ml 0.4N HCl。在50℃下，將混合物劇烈攪拌0.5小時(shí)。將合并的有機(jī)層洗滌至中性，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。將溶劑真空除去。將粗產(chǎn)物純化，得到67.2mg LL-17，收率8.8％。
ESI-MS m/z 381.1(M-1)+1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.94(9H，s)，5.81(H，s)，6.48(2H，d，J＝12.6Hz)，6.87-7.14(6H，m)，7.60(2H，d，J＝12.6Hz).
LL-18制備方法與LL-17的相同，收率50％(以LL-1和4-羥基苯甲醛為原料)。橙色粉末。
ESI-MS m/z 337.1(M-1)+；1H NMR(300MHz，CD3COCD3)δ3.93(3H，s)，5.98(H，s)，6.70(2H，d，J＝15.9Hz)，6.87-6.92(3H，m)，7.19(H，dd，J＝8.4Hz，J＝1.8Hz)，7.35(H，d，J＝1.8Hz)，7.56-7.64(4H，m).
將乙酰丙酮(3.1ml，30mmol)和硼酸酐(1.5g，21mmol)溶于20ml乙酸乙酯。將溶液在70℃下攪拌0.5小時(shí)。加入3-羥基-4-甲氧基苯甲醛(1.52g，10mmol)和硼酸三丁酯(2.7ml，10mmol)。將混合物在70℃下攪拌30min。然后在85℃下，在15min內(nèi)，滴加丁胺(1ml，10mmol)的EtOAc(7ml)溶液。在100℃下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。然后通過(guò)加入20ml 1N HCl，并在50℃下攪拌0.5小時(shí)，將混合物水解。將有機(jī)層分離。將水層用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)層洗滌至中性，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。將溶劑真空除去。將粗產(chǎn)物純化。得到1.04gLL-27-A和248mg LL-27-B。
ESI-MS m/z 367.1(M-1)+；1H NMR(300MHz，CD3COCD3)δ4.01(6H，s)，6.01(H，s)，6.66(2H，d，J＝15.6Hz)，7.03(2H，d，J＝8.1Hz)，7.20(2H，dd，J＝2.1Hz，J＝8.1Hz)，7.26(2H，d，J＝2.1Hz)，7.65(2H，d，J＝15.3Hz).
將乙酰丙酮(3.1ml，30mmol)和硼酸酐(1.5g，21mmol)溶于20ml乙酸乙酯。將溶液在70℃攪拌0.5小時(shí)。加入2，3，4-三甲氧基苯甲醛(1.96g，10mmol)和硼酸三丁酯(2.7ml，10mmol)。將混合物在70℃下攪拌30min。然后在85℃下，在15min內(nèi)，滴加丁胺(1ml，10mmol)的EtOAc(7ml)溶液。在100℃下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。然后通過(guò)加入20ml1N HCl，并在50℃下攪拌0.5小時(shí)，將混合物水解。將有機(jī)層分離。將水層用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)層洗滌至中性，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。將溶劑真空除去。將粗產(chǎn)物純化。得到1.25g LL-32-A和150mg LL-32-B。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.89(6H，s)，3.90(6H，s)，3.94(6H，s)，5.83(H，s)，6.64(2H，d，J＝15.9Hz)，6.71(2H，d，J＝9Hz)，7.31(2H，d，J＝8.7Hz)，7.85(2H，d，J＝16.2Hz).

LL-35制備方法與LL-17的相同，收率55％(以LL-32-A和3，4-二甲氧基苯甲醛為原料)。
ESI-MS m/z 427.2(M+H)+，449.3(M+Na)1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.89(3H，s)，3.91(3H，s)，3.93(3H，s)，3.94(6H，s)，5.83(H，s)，6.51(H，d，J＝15.9Hz)，6.63(H，d，J＝15.9Hz)，6.71(H，d，J＝8.7Hz)，6.89(H，d，J＝8.4Hz)，7.09(H，d，J＝2.1Hz)，7.15(H，dd，J＝1.8Hz，J＝8.7Hz)，7.31(II，d，J＝8.7Hz)，7.61(H，d，J＝15.9Hz)，7.85(H，d，J＝16.2Hz).
LL-36制備方法與LL-17的相同，收率48％(以LL-33-A和3，4-二甲氧基苯甲醛為原料)。
ESI-MS m/z 427.2(M+H)+，449.3(M+Na)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.89(3H，s)，3.90(3H，s)，3.93(3H，s)，3.94(3H，s)，3.95(3H，s)，5.84(H，s)，6.50(H，d，J＝15.6Hz)，6.51(H，s)，6.57(H，d，J＝16.2Hz)，6.88(H，d，J＝8.1Hz)，7.06(H，s)，7.08(H，d，J＝2.1Hz)，7.14(H，dd，J＝2.1Hz，J＝8.1Hz)，7.60(H，d，J＝15.9Hz)，7.96(H，d，J＝15.9Hz).
向丙酮(0.36ml，5mmol)和3，4-二甲氧基苯甲醛(1.66g，10ml)的50ml 0.25M NaOH水溶液中加入1.5ml 25％w/w溴化十六烷基三甲基銨水溶液。將混合物在室溫下劇烈攪拌20小時(shí)，用鹽水稀釋?zhuān)靡宜嵋阴ポ腿?。將乙酸乙酯溶液濃縮，然后進(jìn)行柱層析。得到1.34g亮黃色粉末。收率75％。
ESI-MS m/z 355.2(M+H)1；1H NMR(300MHz，CD3COCD3)δ3.94(6H，s)，3.96(6H，s)，6.90(2H，d，J＝8.4Hz)，6.95(2H，d，J＝15.9Hz)，7.15(2H，d，J＝1.8Hz)，7.20(2H，dd，J＝1.8Hz，J＝8.4Hz)，7.69(2H，d，J＝15.9Hz) LL-46制備方法與LL-17的相同，收率38％(以LL-40和3，4-二甲氧基苯甲醛為原料)。
ESI-MS m/z 483.4(M+H)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.25(3H，t，J＝7.2Hz)，2.32-2.37(2H，m)，2.55(2H，t，J＝7.8Hz)，2.95(0.5H，t，J＝7.8Hz)，3.91-3.97(9H，m)，4.14(2H，q，J＝7.2Hz)，6.70(H，dd，J＝4.2Hz，J＝15.6Hz)，6.84-7.19(7H，m)，7.62-7.76(2H，m)； 在-78℃下，攪拌下，向LDA(0.29ml，2M hex/THF，0.58mmol)的3ml THF溶液中加入3，4-二甲氧基肉桂酮(cinnamone)(100mg，0.48mmol)的THF(3ml)溶液。15min后，加入3，4-二甲氧基肉桂醛(85mg，0.44mmol)的THF(3ml)溶液。將混合物在-78℃下攪拌20min。然后用飽和NH4Cl將混合物淬滅。讓溶液升溫至環(huán)境溫度，用乙酸乙酯萃取。經(jīng)柱層析，得到22mg LL-55。收率13％。
1H NMR(300MHz，CD3COCD3)δ2.93(2H，d)，3.80(6H，s)，3.85(6H，s)，4.13(H，d)，6.25(H，dd，J＝6Hz，J＝15.9Hz)，6.58(H，d，J＝15.9Hz)，6.80(H，d，J＝16.2Hz)，6.88(H，d，J＝8.7Hz)，6.90(H，dd，J＝0.9Hz，J＝8.7Hz)，7.00(H，d，J＝8.4Hz)，7.04(H，d，J＝0.9Hz)，7.25(H，dd，J＝0.9Hz，J＝8.7Hz)，7.34(H，d，J＝0.9Hz)，7.61(1H，d，J＝16.2Hz) 將4-乙氧基(thoxy)羰基乙基姜黃素(153.1mg，0.33mmol)和二氫吡喃(0.73mL，7.32mmol)溶于含PPTS(8.3mg，0.033mmol)的3mL無(wú)水二氯甲烷中。將溶于在室溫下攪拌48小時(shí)。然后將溶液用水洗滌。將溶劑真空除去。粗產(chǎn)物經(jīng)CombiFlash層析純化，用己烷-EtOAc洗脫，得到LL-61(134mg)，收率59％，黃色粉末，mp 60-61℃；ESI MS m/z 635.2(M-1)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.25(3H，t)，1.57-2.17(12H，m)，2.96(0.57H，t)，3.62(4H，t)，3.91(6H，s)，4.13(2H，q)，5.47(2H，t)，6.72(2H，d，J＝15.6Hz)，6.90-7.18(6H，m)，7.44(2H，d，J＝15.6Hz)；
在0℃下，在氮?dú)庀?，?，7-雙-(3，4-二甲氧基苯基)-4-甲基-1，6-庚二烯-3，5-二酮(50.3mg，0.12mmol)的DMF溶液(2mL)加入不含油的NaH的DMF(2mL)懸浮液(10mg，60％，6mg，0.4mmol)中。將溶液在0℃下攪拌30min，然后在室溫下攪拌2h。向該鈉鹽溶液中加入SelectfluoroTM(86.7mg，0.25mmol)的DMF(2mL)溶液。攪拌2h后，將溶液用EtOAc萃取，依次用5％H2SO4(10mL)、飽和NaHCO3溶液(10mL)洗滌。然后將溶劑真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)閃柱層析純化，用己烷-EtOAc洗脫，得到LL-62(25mg)，收率49％，黃色粉末。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.97(3H，s)，3.90(6H，s)，3.95(6H，s)，6.83(2H，d，J＝7.8Hz)，6.87(2H，dd，J＝3Hz，J＝15.6Hz)，6.90(2H，d，J＝1.8Hz)，6.95(2H，dd，J＝1.8Hz，J＝7.8Hz)，7.75(2H，d，J＝15.6Hz)； 將重結(jié)晶過(guò)的姜黃素(1.08g，2.94mmol)和二氫吡喃(2mL，20mmol)溶于含PPTS(74mg，0.29mmol)的30mL無(wú)水二氯甲烷中。將該溶液在室溫下攪拌24小時(shí)。然后將溶液用水洗滌。將溶劑真空除去。粗產(chǎn)物經(jīng)CombiFlash層析純化，用己烷-EtOAc洗脫，得到LL-64B(1.12g)，收率66.8％，黃色粉末；
ESI MS m/z 535.0(M-1)+；1HNMR(300MHz，CDCl3)δ1.57-2.17(12H，m)，3.62(4H，t)，3.91(6H，s)，5.47(2H，t)，5.83(1H，s)，6.50(2H，d，J＝15.9Hz)，7.09-7.16(6H，m)，7.60(2H，d，J＝15.9Hz)；元素分析C31H36O8·1/4H2O計(jì)算值(理論值)C，68.81；H，6.80。
實(shí)測(cè)值C，68.86；H，6.83。
LL-65在0℃下，在氮?dú)庀?，將LL-64B(55mg，0.10mmol)的THF溶液(3mL)加入不含油的NaH的THF(2mL)懸浮液(7mg，60％，4.2mg，0.17mmol)中。將溶液在0℃下攪拌30min，然后在室溫下攪拌2h。向該鈉鹽溶液中加入丙炔酸乙酯(0.02mL，mmol)。攪拌2h后，將溶液用EtOAc萃取，依次用5％H2SO4(10mL)、飽和NaHCO3溶液(10mL)洗滌。然后將溶劑真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)CombiFlash層析純化，用己烷-EtOAc洗脫，得到LL-65(39.4mg)，收率62％，橙色粉末；mp 72-73℃；ESI MS m/z 634.7M+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.34(3H，t)，1.5-2.2(12H，m)，3.62(4H，t)，3.92(6H，s)，4.28(2H，q)，5.49(2H，t)5.96(H，d，J＝15.6Hz)，7.00(2H，d，J＝15.6Hz)，7.08-7.16(6H，m)，7.76(2H，d，J＝15.3Hz)，7.83(H，d，J＝15.9Hz)；元素分析C36H42O10計(jì)算值(理論值)C，68.12；H，6.67。實(shí)測(cè)值C，67.82；H，6.73。
LL-66將LL-65(14.8mg，0.023mmol)和PPTS(5mg，0.02mmol)的EtOH(2.5mL)溶液在室溫下攪拌3h。將溶液真空蒸發(fā)。經(jīng)CombiFlash層析，用己烷-EtOAc洗脫，得到LL-66(10mg)。收率93％，橙色粉末，mp 106-106.5℃；
ESI MSm/z 465.2(M-1)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.34(3H，t)，3.95(6H，s)，4.29(2H，四重峰)，5.96(2H，d，J＝15.6Hz)，6.95(2H，d，J＝8.2Hz)，6.96(1H，d，J＝15.6Hz)，7.05(2H，d，J＝2.1Hz)，7.17(2H，dd，J＝8.2Hz，J＝2.1Hz)，7.75(2H，d，J＝15.3Hz)，7.90(1H，d，J＝15.9Hz).
LL-80合成方法與制備LL-66的相同，收率62％(以1，7-雙(3，4-二甲氧基苯基)-1，6-戊二烯-3，6-二酮為原料)。紅色粉末。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.34(3H，t)，3.95(12H，s)，4.29(2H，四重峰)，5.98(2H，d，J＝15.6Hz)，6.95(2H，d，J＝8.4Hz)，7.00(1H，d，J＝15.6Hz)，7.08(2H，d，J＝1.8Hz)，7.22(2H，dd，J＝8.4Hz，J＝1.8Hz)，7.77(2H，d，J＝15.3Hz)，7.91(1H，d，J＝15.6Hz).
HOJ-7收率3％(以5mmol 2，4-二氟苯甲醛為原料)，黃色粉末，mp 155.5-156℃(正己烷-EtOAc)。
1H NMR(CDCl3)δ5.86(1H，s)，6.68(2H，d，J＝16.0Hz)，6.84-6.96(4H，m)，7.56(2H，m)，7.71(2H，d，J＝16.0Hz).ESI-MS m/z 347[M-1]+.
元素分析C19H12F4O2理論值C，65.52；H，3.47。實(shí)測(cè)值C，65.66；H，3.57。
HOJ-9收率10％(以5mmol 2-氟-4-甲氧基苯甲醛為原料)，黃色粉末，mp 163-165℃(正己烷-EtOAc)。
1H NMR(CDCl3)δ3.84(6H，s)，5.82(1H，s)，6.62(2H，d，J＝16.0Hz)，6.70(4H，m)，7.48(2H，t，J＝8.7Hz)，7.71(2H，d，J＝16.0Hz).ESI-MS m/z 371[M-1]+.
元素分析C21H18F2O4理論值C，67.74；H，4.87。實(shí)測(cè)值C，67.58；H，4.92。
HOJ-10收率9％(以5mmol 2-氟-6-甲氧基苯甲醛為原料)，黃色針狀物，mp 144-145℃(正己烷-EtOAc)。
1H NMR(CDCl3)δ3.82(6H，s)，5.90(1H，s)，6.72(2H，d，J＝16.0Hz)，6.88(2H，m)，7.56(2H，m)，7.00-7.07(4H，m)，7.74(2H，d，J＝16.0Hz).ESI-MS m/z 371[M-1]+.
元素分析C21H18F2O4理論值C，67.74；H，4.87。實(shí)測(cè)值C，67.60；H，4.95。
生物活性以上所示化合物篩選如下，發(fā)現(xiàn)具有下表2中所示抗癌和抗雄激素受體活性。
細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染將人前列腺癌LNCaP和PC-3細(xì)胞分別保存在RPMI培養(yǎng)基和Dulbecco極限必需培養(yǎng)基(DMEM)中。兩種培養(yǎng)基均補(bǔ)充青霉素(25單位/mL)、鏈霉素(25μg/mL)和10％胎牛血清。雄激素受體反向激活測(cè)定是一種雄激素依賴(lài)性報(bào)道基因轉(zhuǎn)錄試驗(yàn)，用該試驗(yàn)作為鑒定潛在抗雄激素的主要篩選方法。先在LNCaP細(xì)胞中進(jìn)行該測(cè)定，LNCaP細(xì)胞表達(dá)臨床上相關(guān)的突變型AR。一旦LNCaP AR反向激活測(cè)定顯示出活性化合物，對(duì)它們抗野生型AR的潛在活性再進(jìn)行檢驗(yàn)。在缺乏內(nèi)源性功能AR的PC-3宿主細(xì)胞中進(jìn)行野生型AR反向激活測(cè)定。
按照我們前述細(xì)胞轉(zhuǎn)染條件(Ohtsu等，J Medicinal Chem 455037-5042(2002)；Ohtsu等，Bioorganic & Medicinal Chemistry 115083-5090(2003))。簡(jiǎn)而言之，將細(xì)胞接種在24孔或48孔組織培養(yǎng)皿中，保持24小時(shí)(PC-3細(xì)胞)或48小時(shí)(LNCaP細(xì)胞)，然后進(jìn)行轉(zhuǎn)染。然后，用報(bào)道基因、含MMTV-LTR啟動(dòng)子和雄激素受體結(jié)合元件的MMTV-螢光素酶和用作轉(zhuǎn)染效力內(nèi)控的PRL-SV40轉(zhuǎn)染LNCaP細(xì)胞。除上述MMTV-螢光素酶報(bào)道基因和PRL-SV40內(nèi)控外，用野生型AR表達(dá)質(zhì)粒pSG5AR轉(zhuǎn)染PC-3細(xì)胞。按照生產(chǎn)商的推薦，用SuperFect(Qiagen，Chatsworth，CA)作轉(zhuǎn)染試劑。在5小時(shí)轉(zhuǎn)染結(jié)束時(shí)，將培養(yǎng)基換為補(bǔ)充10％碳右旋糖酐吸附的、無(wú)雄激素-血清的DMEM或RPMI。24小時(shí)后，用1nM DHT和/或用指定濃度的測(cè)試化合物再處理細(xì)胞24小時(shí)。收獲細(xì)胞，以便用雙螢光素酶測(cè)定系統(tǒng)(Dual Luciferase Assay System)(Promega，Madison，WI)進(jìn)行螢光素酶活性測(cè)定。得到的數(shù)據(jù)用歸一化至內(nèi)部螢光素酶對(duì)照的相對(duì)螢光素酶活性表示。DHT溫育誘導(dǎo)報(bào)道基因顯著表達(dá)。將能顯著抑制該雄激素誘導(dǎo)的報(bào)道基因表達(dá)的測(cè)試化合物鑒定為潛在抗雄激素類(lèi)藥物。
LNCaP細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)定如上所述，LNCaP細(xì)胞含有大量突變型AR，因而當(dāng)溫育雄激素時(shí)，這些細(xì)胞的生長(zhǎng)可被顯著激活。因此用LNCaP細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)定作為替代方法，來(lái)確認(rèn)由上述AR反向激活測(cè)定中鑒定的潛在抗雄激素類(lèi)藥物。應(yīng)用MTT分析，該分析依據(jù)通過(guò)線粒體脫氫酶使無(wú)色底物轉(zhuǎn)化為還原的四唑。該實(shí)驗(yàn)條件詳見(jiàn)文獻(xiàn)(Ohtsu等，Bioorganic &Medicinal Chemistry 115083-5090(2003))。簡(jiǎn)而言之，將細(xì)胞接種在96孔組織培養(yǎng)板中，然后在1nM DHT和/或測(cè)試化合物的存在下，在含10％碳右旋糖酐吸附的血清的RPMI中連續(xù)溫育5天。溫育結(jié)束時(shí)，將MTT(5mg/ml的PBS溶液)給予細(xì)胞，在37℃下保持3小時(shí)。將得到的沉淀溶于溶胞緩沖液，然后用微量培養(yǎng)板讀出器，在595nm波長(zhǎng)處定量測(cè)定。為確保MTT分析得出的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，用一式兩份樣品進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。將對(duì)雄激素誘導(dǎo)的前列腺腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)顯示不良作用的測(cè)試化合物鑒定為潛在的抗雄激素類(lèi)藥物。
表2.姜黃素類(lèi)似物的抗-AR活性
前述用于說(shuō)明本發(fā)明，不應(yīng)視為對(duì)本發(fā)明的限制。本發(fā)明由權(quán)利要求和其中包括的等同權(quán)利要求限定。
權(quán)利要求
1.一種式I或Ia化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R′和R″各自獨(dú)立選自H、烷氧基和鹵基；Ra和Rb各自獨(dú)立選自H、烷基和鹵基；R1和R2各自獨(dú)立選自H、羥基、烷氧基、硝基、氨基和二烷基氨基；R3和R4各自獨(dú)立選自H、羥基、鹵基、烷氧基和-OR7C(O)R8，其中R7為低級(jí)亞烷基，且R8為烷氧基；或R1和R3一起為亞烷基二氧基；或R2和R4一起為亞烷基二氧基；R5和R6各自獨(dú)立選自H、鹵素、硝基和烷氧基；X1為N，或X1為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；且X2為N，或X2為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；條件是其中排除姜黃素。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二甲基氨基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R3一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R4一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
5權(quán)利要求1的化合物，其中R5和R6各自獨(dú)立選自H、F和硝基。
6.一種式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R11和R12各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二烷基氨基；R13和R14各自獨(dú)立選自羥基、烷氧基、-OR18C(O)R19，其中R18為低級(jí)亞烷基或亞烯基，且R19為烷氧基和四氫吡喃基；或R11和R13一起為亞烷基二氧基；或R12和R14一起為亞烷基二氧基；R15和R16各自獨(dú)立選自H、鹵素和硝基；R17為-R20C(O)OR21，其中R20為亞烷基或亞烯基，且R21為H或烷基；X3為N，或X3為與H、烷氧基或硝基鍵合的C；且X4為N，或X4為與H、烷氧基或硝基鍵合的C。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R11和R12各自獨(dú)立選自烷氧基、硝基、氨基和二甲基氨基。
8.權(quán)利要求6的化合物，其中R11和R13一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
9.權(quán)利要求6的化合物，其中R12和R14一起為亞甲二氧基或亞乙二氧基。
10.權(quán)利要求6的化合物，其中R15和R16各自獨(dú)立選自H、F和硝基。
11.一種式IV化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R41和R42各自獨(dú)立為羥基或烷氧基；且R43和R44各自獨(dú)立為羥基或烷氧基。
12.一種下式化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
13.一種藥物制劑，所述制劑包含權(quán)利要求1、6、11或12的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
14.權(quán)利要求13的藥物制劑，其中所述載體為水性載體。
15.一種治療癌癥的方法，所述方法包括給予有需要的患者治療有效量的權(quán)利要求1、6、11、12的化合物，或姜黃素或其藥學(xué)上可接受的鹽。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述癌癥選自皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、睪丸癌、淋巴瘤、白血病、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、肝癌和前列腺癌。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述癌癥是前列腺癌。
18.權(quán)利要求16的方法，其中所述癌癥是結(jié)腸癌。
19.權(quán)利要求16的方法，其中所述患者患有抗雄激素撤除綜合征。
20.一種誘導(dǎo)雄激素受體拮抗劑活性的方法，所述方法包括使細(xì)胞與雄激素受體拮抗劑有效量的權(quán)利要求1、6、11、12的化合物或姜黃素或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述細(xì)胞是癌細(xì)胞。
22.權(quán)利要求21的方法，其中所述接觸步驟在體內(nèi)進(jìn)行。
23.權(quán)利要求21的方法，其中所述接觸步驟在體外進(jìn)行。
24.一種在患有與雄激素有關(guān)的病癥的患者中誘導(dǎo)雄激素受體拮抗劑活性的方法，所述方法包括給予雄激素受體拮抗劑有效量的權(quán)利要求1、6、11、12的化合物或姜黃素或其藥學(xué)上可接受的鹽。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述患者患有禿發(fā)。
26.權(quán)利要求24的方法，其中所述患者患有多毛癥。
27.權(quán)利要求24的方法，其中所述患者患有行為障礙。
28.權(quán)利要求24的方法，其中所述患者患有痤瘡。
29.權(quán)利要求24的方法，其中所述患者為雄性患者，且所述雄激素受體拮抗劑有效量的所述化合物抑制精子發(fā)生。
全文摘要
本發(fā)明涉及能起雄激素受體拮抗劑作用的化合物、含所述化合物的藥物制劑及其使用方法。此類(lèi)用途包括但不限于用作抗腫瘤藥物，尤其用于治療癌癥例如結(jié)腸、皮膚和前列腺癌；和在患有與雄激素有關(guān)的病癥的患者中誘導(dǎo)雄激素受體拮抗劑活性。與雄激素有關(guān)的病癥的實(shí)例包括但不限于禿發(fā)、多毛癥、行為障礙、痤瘡和其中非常需要抑制精子發(fā)生的不受抑制的精子發(fā)生。
文檔編號(hào)C07C205/45GK101076336SQ200580042393
公開(kāi)日2007年11月21日 申請(qǐng)日期2005年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月15日
發(fā)明者K·-H·李, L·林, C·C·－Y·施, C·－Y·蘇, J·伊施達(dá), H·奧特蘇, H·-K·王, H·伊托卡瓦, C·常 申請(qǐng)人:北卡羅來(lái)納查佩爾山大學(xué)