一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，是由按照重量份計的以下原料制備得到的：黃連10?18份，白頭翁11?15份，金銀花8?12份，黃芩13?16份，烏梅10?15份，地錦草10?18份，葛根8?13份；并提供了其制備方法。本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提供的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，具有清熱燥濕、涼血止痢、健脾和胃的功效，對犢牛隱孢子感染具有顯著的治療效果，治愈率83.00%以上，總有效率為93.00%以上，且該組方安全無毒副作用，提供了犢牛隱孢子蟲感染臨床有效治療方法。
【專利說明】一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物及其制備方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及獸用中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0003]犢牛隱孢子蟲病是由隱孢子蟲寄生于犢牛腸道上皮細(xì)胞內(nèi)而引起的原蟲病。臨床癥狀主要表現(xiàn)為精神沉郁，食欲減退，消瘦，虛弱無力，腹瀉，糞便帶有大量纖維素和血液，體溫有時升高，死亡率高達16%?40%，尤以4?30日齡的犢牛死亡率更高，耐過的犢牛，生長發(fā)育長期受阻。剖檢可見，死亡犢牛尸體消瘦，脫水，肛門周圍污穢;主要病變發(fā)生于回腸和大腸，呈現(xiàn)卡他性及纖維素性炎癥;腸絨毛萎縮、脫濟，絨毛刷狀緣中有隱抱子蟲寄生。已經(jīng)成為目前發(fā)現(xiàn)僅次于輪狀病毒的主要腸道疾病。
[0004]自20世紀(jì)80年代人們發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲是引起人類腹瀉的重要病因以來，隱孢子蟲在公共衛(wèi)生方面的作用越來越重要。犢牛隱孢子蟲病首次報道于美國，其后在英國、澳大利亞、加拿大、匈牙利、丹麥、比利時、法國、德國、羅馬尼亞、捷克、前蘇聯(lián)和日本等國被發(fā)現(xiàn)。我國1986年，陳義民等在蘭州首次發(fā)現(xiàn)犢牛隱孢子蟲病，此后北京、江蘇、安徽、河南、廣東、內(nèi)蒙古等地區(qū)均有報道，并且具有較高的感染率。該病主要通過飼料、飲水等經(jīng)口傳播給動物，通過牛奶、飲水、蔬菜等食物經(jīng)口傳播給人，常引起暴發(fā)性流行。2002年，Harper等報道因飲用未經(jīng)高溫消毒的牛奶而引起人隱孢子蟲病暴發(fā)的案例。犢牛隱孢子蟲病已經(jīng)給奶牛養(yǎng)殖業(yè)帶來很大的經(jīng)濟損失，并引起嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。
[0005]基于隱孢子蟲的致病特點，目前還沒有治療犢牛隱孢子蟲病的有效方案，主要以預(yù)防為主。同時，犢牛隱孢子蟲的卵囊對自然環(huán)境和消毒藥的抵抗力很強，給預(yù)防和管理造成了一定的難度，效果往往不顯著。對免疫功能正常的犢牛常采用對癥治療和支持療法(止瀉、補液、營養(yǎng))可以達到治愈的目的。但對免疫功能較低的犢牛常可發(fā)生危機生命的腹瀉。為此，各國研究機構(gòu)都在探索新的防治藥物和治療方法，應(yīng)用中藥治療犢牛隱孢子蟲感染，研制開發(fā)新型安全高效環(huán)保的新獸藥已成為當(dāng)務(wù)之急。
[0006]中獸藥在我國畜牧業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用已有5千多年的歷史，在防治畜禽疾病促進養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中發(fā)揮著積極的作用，其無污染、無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性、不污染動物源性食品的特點，已引起各國學(xué)者的注視，傳統(tǒng)經(jīng)典方劑、新組方、藥物飼料添加劑等中草藥在防治畜禽疾病，特別是防治奶牛疾病方面已成為新藥研制與開發(fā)的熱點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物及其制備方法。
[0008]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連10-18份，白頭翁11-15份，金銀花8-12份，黃芩13-16份，烏梅10-15份，地錦草10-18份，葛根8-13份。
[0009]進一步的，上述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連12份，白頭翁11份，金銀花9份，黃芩14份，烏梅13份，地錦草12份，葛根8份。
[0010]進一步的，上述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連11份，白頭翁12份，金銀花11份，黃芩16份，烏梅14份，地錦草13份，葛根12份。
[0011]進一步的，上述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連13份，白頭翁14份，金銀花1份，黃芩15份，烏梅12份，地錦草11份，葛根9份。
[0012]本發(fā)明的第二個目的是提供了上述一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物的制備方法，按照重量份配比稱取各原料，加10倍原料總重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至溫度60 °C時相對密度1.13，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌月艮，每次80-120ml(即生藥量為80-120mg/次)，每天2次，2天為I個療程。
[0013]根據(jù)犢牛隱孢子蟲病感染的發(fā)病特點，依據(jù)中獸醫(yī)辯證論治的原則，經(jīng)過試驗研究，篩選出了以黃連、白頭翁、金銀花為主藥的中藥組方，該藥具有清熱燥濕、涼血止痢、健脾和胃的功效，在甘肅、寧夏、青海、陜西等地對確診為犢牛隱孢子蟲病感染的病犢牛進行了治療試驗，治愈率為83.08%，總有效率為93.52%，治療期間未發(fā)現(xiàn)犢牛有任何不良反應(yīng)。
[0014]方中黃連、白頭翁清熱解毒、涼血止痢為主藥;金銀花、黃芩清熱燥濕、瀉火解毒為輔藥，烏梅、地錦草澀腸止瀉、涼血解毒為佐藥，葛根止瀉治痢、清胃熱為使藥。以上諸藥合用，共奏清熱燥濕，涼血止痢、健脾和胃之功效。
[0015]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明提供的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，具有清熱燥濕、涼血止痢、健脾和胃的功效，對犢牛隱孢子感染具有顯著的治療效果，治愈率83.00%以上，總有效率為93.00%以上，且該組方安全無毒副作用，提供了犢牛隱孢子蟲感染臨床有效治療方法。
[0016]該藥物發(fā)明還具有以下優(yōu)勢:
1、該中藥組合物的開發(fā)研究，符合農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全體系建設(shè)的原則，符合綠色環(huán)保型農(nóng)業(yè)投入品的要求;符合國際醫(yī)藥生產(chǎn)管理規(guī)范的要求;符合畜牧業(yè)發(fā)展方向和奶業(yè)發(fā)展方向的要求;符合國家獸藥開發(fā)的產(chǎn)業(yè)政策和肉、牛奶食品安全的要求，有益于我國奶業(yè)健康快速的發(fā)展，對生產(chǎn)綠色無公害畜產(chǎn)品具有重要實際意義，符合現(xiàn)代獸藥科技型企業(yè)可持續(xù)發(fā)展和不斷創(chuàng)新的要求。
[0017]2、滿足獨立知識產(chǎn)權(quán)新獸藥和獸用中草藥現(xiàn)代化發(fā)展的需要。
[0018]建國以來，具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的獸用原料藥不超過4個，絕大部分西獸藥制劑仍有依賴于進口原料藥的態(tài)勢，這無疑成為中國獸藥更好更快發(fā)展的瓶頸，因此，開發(fā)擁有獨立知識產(chǎn)權(quán)的安全型新獸藥已是大勢所趨，刻不容緩。根據(jù)國家食品藥品安全和獸藥GMP規(guī)范的要求，在中獸醫(yī)理論指導(dǎo)下，加強獸用中草藥和天然藥物的研發(fā)，使中獸藥生產(chǎn)實現(xiàn)技術(shù)現(xiàn)代化、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)品規(guī)?；?，才能充分發(fā)揮中草藥傳統(tǒng)優(yōu)勢，才能促進獸用中草藥產(chǎn)業(yè)的健康有續(xù)發(fā)展，最終帶動國產(chǎn)獸藥的自身發(fā)展和走向國際化。
【具體實施方式】
[0019]實施例1:
黃連120g，白頭翁I 1g，金銀花90g，黃芩140g，烏梅130g，地錦草120g，葛根80g。
[0020]使用方法:準(zhǔn)確稱取上述藥材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C )，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
[0021]實施例2:
黃連110g，白頭翁120g，金銀花110g，黃芩160g，烏梅140g，地錦草130g，葛根120g。
[0022]使用方法:準(zhǔn)確稱取上述藥材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C )，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
[0023]實施例3:
黃連130g，白頭翁140g，金銀花100g，黃芩150g，烏梅120g，地錦草110g，葛根90g。
[0024]使用方法:準(zhǔn)確稱取上述藥材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C )，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
[0025]實施例4:
黃連10g，白頭翁I 1g，金銀花80g，黃芩130g，烏梅10g，地錦草10g，葛根80g。
[0026]使用方法:準(zhǔn)確稱取上述藥材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C )，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
[0027]實施例5:
黃連180g，白頭翁150g，金銀花120g，黃芩160g，烏梅150g，地錦草180g，葛根130g。
[0028]使用方法:準(zhǔn)確稱取上述藥材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C )，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
[0029]實施例6:
臨床試驗:
按照實施例1的配比，取黃連120g，白頭翁110g，金銀花90g，黃芩140g，烏梅130g，地錦草120g，葛根80g。加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C)，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
[0030](I)犢牛隱孢子蟲感染的診斷:
診斷標(biāo)準(zhǔn):1-8月齡的犢牛，出現(xiàn)精神沉郁，食欲減退，消瘦，虛弱無力，腹瀉，糞便帶有大量纖維素和血液等癥狀，采集新鮮糞便用飽和糖水漂浮法檢查，檢出隱孢子蟲即可確診為隱孢子蟲感染。
[0031]納入標(biāo)準(zhǔn):1-8月齡的犢牛，出現(xiàn)精神沉郁，食欲減退，消瘦，虛弱無力，腹瀉，糞便帶有大量纖維素和血液等癥狀，采集新鮮糞便用飽和糖水漂浮法檢查，檢出隱孢子蟲，無眼觀的明顯脫水現(xiàn)象，且患病?？梢宰灾鞑墒?。
[0032]排除標(biāo)準(zhǔn):患?；加衅渌l(fā)癥，如肺炎、臍帶炎及關(guān)節(jié)炎等，或者已被施予其它治療措施均不納入本試驗研究。其次病原學(xué)檢查，檢出有其他病毒性感染均不納入本試驗研究。再次，精神沉郁，食欲廢絕，脫水嚴(yán)重者，不納入本試驗研究。
[0033](2)臨床治療試驗:
在陜西省、青海省、甘肅省和寧夏回族自治區(qū)的4個奶牛養(yǎng)殖場，進行該中藥組合物治療犢牛隱孢子蟲感染的臨床治療試驗，按每頭每次10ml，每日2次(早晚各I次)，2天為I療程，一般治療2個療程，治療前均未使用任何藥物。共收治患隱孢子蟲感染的犢牛216頭，治愈181頭，治愈率為83.80%，總有效頭數(shù)為202頭，總有效率為93.52%，并在治療期間未發(fā)現(xiàn)犢牛有不良反應(yīng)。
[0034]在甘肅秦王川奶牛養(yǎng)殖場，共收治患隱孢子蟲感染犢牛52例，治愈43例，治愈率82.69%;顯效4例，顯效率7.69%;有效2例，有效率3.85%;無效3例，無效率5.77%;總有效頭數(shù)為49頭，總有效率為94.23%，且未見不良反應(yīng)。
[0035]在西安現(xiàn)代農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)總公司畜牧開發(fā)公司奶牛場，共收治患隱孢子蟲感染犢牛47例，治愈40例，治愈率85.11%；顯效2例，顯效率4.25%;有效2例，有效率4.25%;無效3例，無效率6.38%;總有效頭數(shù)為44頭，總有效率為93.62%，且未見不良反應(yīng)。
[0036]在青海天露乳業(yè)有限公司奶牛場共收治患隱孢子蟲感染犢牛55例，其中治愈46例，治愈率83.64%；顯效2例，顯效率3.64%;有效3例，有效率5.45%;無效4例，無效率7.27%；總有效頭數(shù)為51頭，總有效率為92.73%，且未見不良反應(yīng)。
[0037]在寧夏夏進奶牛繁育科技有限公司奶牛場共收治患隱孢子蟲感染犢牛62例，其中治愈52例，治愈率83.87% ；顯效3例，顯效率4.84% ；有效3例，有效率4.84% ；無效4例，無效率6.45%;總有效頭數(shù)為58頭，總有效率為93.55%，且未見不良反應(yīng)。
[0038]安全性評價:
為了明確治療犢牛隱孢子蟲病中藥組合物的毒副作用，以期對其安全性做出準(zhǔn)確、客觀的評價，為臨床試驗用藥提供科學(xué)依據(jù)，確保臨床用藥安全，進行了毒性試驗。
[0039]按照實施例1配比，準(zhǔn)確稱取上述藥材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至相對密度為1.13(60°C)，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，備用。
[0040]通過對小鼠灌服的LD50試驗表明，以藥物濃度lg/ml和動物耐受的最大給藥容積給藥，無出現(xiàn)死亡，無法測出灌胃給藥方式的LD50，只能表明該中藥制劑口服灌胃的LD50>40000mg/kg體重。通過腹腔注射給藥，在藥物濃度lg/ml和最大給藥容積下，也無小鼠死亡，也無法測出腹腔注射給藥方式的LD50，故認(rèn)為，腹腔注射的LD50>10000mg/kg體重。根據(jù)《獸藥試驗技術(shù)規(guī)范匯編》的結(jié)果評定標(biāo)準(zhǔn)，以及毒理學(xué)評價標(biāo)準(zhǔn)，判定該中藥組方實際無毒。在最大給藥量試驗中，16h內(nèi)4次灌胃給藥，每次以小鼠灌胃給藥的最大給藥容積給藥，除給藥后動物出現(xiàn)稍有不適，不愛活動，采食量下降等癥狀外，在常規(guī)觀察的1d內(nèi)小白鼠的狀況良好，沒有出現(xiàn)異?，F(xiàn)象，且無一只死亡。根據(jù)最大耐受倍數(shù)的計算方式，該制劑相對于犢牛臨床用量的最大倍數(shù)為80倍。
[0041]為了掌握因連續(xù)使用該中藥組方而產(chǎn)生毒副反應(yīng)和嚴(yán)重程度，以及停藥后的發(fā)展和恢復(fù)情況，為擬定臨床安全用藥劑量提供參考。按40000mg/kg組、20000mg/kg組、lOOOOmg/kg組和O劑量組口服灌胃給藥，連續(xù)28d，在大鼠上進行了該中藥組方的亞慢性毒性試驗，在試驗期內(nèi)，高劑量體重減輕明顯外，其余各試驗組小鼠的飲食，行為，糞便均正常，發(fā)育良好，無任何中毒癥狀且血象及血清中CREA、ALT、ALP、AST、TP、ALB的均在正常范圍。這說明該制劑是安全的，為其在臨床上的安全應(yīng)用提供了依據(jù)。
[0042]最后應(yīng)說明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，其特征在于，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連10-18份，白頭翁11-15份，金銀花8-12份，黃芩13-16份，烏梅10-15份，地錦草10-18份，葛根8-13份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，其特征在于，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連12份，白頭翁11份，金銀花9份，黃芩14份，烏梅13份，地錦草12份，葛根8份。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，其特征在于，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連11份，白頭翁12份，金銀花11份，黃芩16份，烏梅14份，地錦草13份，葛根12份。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物，其特征在于，是由按照重量份計的以下原料制備得到的:黃連13份，白頭翁14份，金銀花10份，黃芩15份，烏梅12份，地錦草11份，葛根9份。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的一種用于治療犢牛隱孢子蟲病的中藥組合物的制備方法，其特征在于，按照重量份配比稱取各原料，加10倍原料總重量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，煎液濃縮至溫度60 0C時相對密度1.13，再加水調(diào)至藥液生藥含量為1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天為I個療程。
【文檔編號】A61P33/02GK105853538SQ201610294111
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年5月3日
【發(fā)明人】王勝義, 崔東安, 王慧, 劉永明, 劉治岐, 齊志明
【申請人】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所