含苦參堿的藥物組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明的技術(shù)方案涉及藥物組合物，具體地說是含苦參堿的藥物組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]分泌性腹瀉是一種常見的疾病，其臨床表現(xiàn)為每日大便量超過1L(重者多達10L以上);大便為水樣，無膿血；血漿-糞質(zhì)滲透差；糞便的pH多為中性或堿性；禁食48小時后腹瀉仍持續(xù)存在，大便量仍大于500ml/24h。引起分泌性腹瀉最主要原因是異常的介質(zhì)，各種異常的介質(zhì)可激活小腸和大腸細胞膜上的cAMP，胞內(nèi)cAMP含量劇增，使細胞質(zhì)鈣離子含量增高，導(dǎo)致腸道分泌增加，大量水分、碳酸氫鈉、氯化物和鉀離子喪失。因此開發(fā)治療分泌性腹瀉的特效藥有重要意義。
[0003]研究表明，鈣激活氯通道TMEM16A的過表達是導(dǎo)致分泌性腹瀉的一個重要因素(Ousingsawat J, Mirza M, Tian Y, et al.Rotavirus toxin NSP4 induces diarrhea byactivat1n of TMEM16A and inhibit1n of Na+absorpt1n.Pflugers Arch[J].PflilgersArchiv-European Journal of Phys1logy, 2011，461 (5): 579-589.)。TMEM16A廣泛分布于人的小腸和回腸，研究表明通過抑制TMEM16A的表達，通過施加特異性抑制劑對TMEM16A通道進行抑制，可以有效的減弱腸道收縮的力度和頻率，能有效治療分泌性腹瀉并且可以阻止氯離子的喪失，因此TMEM16A通道是治療分泌性腹瀉的一個重要的藥物靶點。對于我國中醫(yī)醫(yī)藥界來說，查找和研發(fā)能夠治療分泌性腹瀉的特效中草藥用作抑制TMEM16A的特異性抑制劑是義不容辭的緊迫任務(wù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:提供含苦參堿的藥物組合物及其應(yīng)用，是一種用于治療TMEM16A/CaCCs離子通道相關(guān)疾病的藥物，在治療分泌性腹瀉方面效果顯著。
[0005]本發(fā)明解決該技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:含苦參堿的藥物組合物，是由以苦參堿為活性成分，輔以藥學(xué)上可接受的載體組成。
[0006]上述含苦參堿的藥物組合物，所述藥學(xué)上可接受的載體為淀粉、糖粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、甘露醇或其中2?6種的混合物，所述活性成分的苦參堿與輔以藥學(xué)上可接受的載體質(zhì)量比為1: 0.5?1.5。
[0007]上述含苦參堿的藥物組合物，所述藥物組合物的組成方式為口服型給藥。
[0008]上述含苦參堿的藥物組合物，所述藥物組合物的組成方式為口服型給藥的劑型為散劑、顆粒、膠囊、片劑、滴丸或口服液。
[0009]上述含苦參堿的藥物組合物，所述藥物組合物的組成方式為非口服型給藥。
[0010]上述含苦參堿的藥物組合物，所述藥物組合物的組成方式為非口服型給藥的劑型為注射劑。
[0011]上述含苦參堿的藥物組合物，其中苦參堿購自阿拉丁試劑有限公司，CAS號:519-02-8，其他所涉及的成分原料均可通過公知途徑獲得，所述藥物組合物的口服型給藥和所述藥物組合物的非口服型給藥的配置方法均使用藥學(xué)上公知的可接受的形式，其配制方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員所能掌握的。
[0012]上述含苦參堿的藥物組合物的應(yīng)用，作為TMEM16A離子通道抑制劑，用于治療TMEM16A/CaCCs離子通道相關(guān)疾病。
[0013]上述含苦參堿的藥物組合物的應(yīng)用，所述用于治療TMEM16A/CaCCs離子通道相關(guān)疾病是用于治療人的分泌性腹瀉疾病。
[0014]上述含苦參堿的藥物組合物的應(yīng)用，所述用于治療TMEM16A/CaCCs離子通道相關(guān)疾病是用于治療牛、馬、羊、狗、貓、豬或鼠的分泌性腹瀉疾病。
[0015]上述含苦參堿的藥物組合物的應(yīng)用，作為TMEM16A離子通道抑制劑是上述含苦參堿的藥物組合物中的任意一種劑型。
[0016]上述含苦參堿的藥物組合物的應(yīng)用，所涉及的治療操作方法是本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員所能掌握的。
[0017]本發(fā)明的有益效果是:與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明突出的實質(zhì)性特點如下:
[0018](1)本發(fā)明的發(fā)明人通過查詢傳統(tǒng)中醫(yī)藥典籍，發(fā)現(xiàn)中草藥苦參對于“濕熱瀉痢，腸風(fēng)便血”具有良好的治療效果。中藥著作《日華子》中寫道:“殺疳蟲。炒帶煙出為末，飯飲下，治腸風(fēng)瀉血并熱痢”，而通過大量艱辛的研究發(fā)現(xiàn)在治療腹瀉方面起作用的主要是其中的苦參堿。苦參堿是由豆科植物苦參的干燥根、植株、果實經(jīng)乙醇等有機溶劑提取制成的，是一種單一成分生物堿，屬于常見中草藥，對人體副作用小，《中藥大辭典》第二版1758頁，“苦參堿功能主治清熱燥濕，祛風(fēng)殺蟲。主治濕熱瀉痢，腸風(fēng)便血，黃疸，小便不利，水腫，帶下，陰癢，麻風(fēng)，皮膚瘙癢，適度瘡瘍”。
[0019](2)近年來，鈣激活氯通道TMEM16A通道電流的抑制劑相繼被發(fā)現(xiàn)，比如CaCCinh-A01，T16Ainh-A01，DIDS，NPPB等，但鈣激活氯通道TMEM16A電流的抑制劑基本都是化學(xué)合成物，目前在天然產(chǎn)物小分子藥物方面的探索很少，而這些化學(xué)合成藥物對細胞傷害較大，在高濃度下細胞存活時間較短，對于后期藥物研發(fā)是一個非常嚴(yán)重的問題，因此積極開發(fā)對細胞傷害較小的天然產(chǎn)物小分子藥物具有重要意義。
[0020]試驗證明，通過本發(fā)明的含苦參堿的藥物組合對豚鼠回腸平滑肌收縮具有顯著抑制作用，并通過電生理實驗證明其對鈣激活氯通道TMEM16A的外向電流抑制率達90 %，半數(shù)有效抑制濃度在100 μΜ以內(nèi)。這為研制分泌性腹瀉的有效治療藥物打開了一扇大門。
[0021]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的顯著進步如下:
[0022](1)本發(fā)明的含苦參堿的藥物組合能明顯抑制ΤΜΕΜ16Α通道，抑制率可達到90%，為分泌性腹瀉方面的疾病治療提供了潛在的應(yīng)用前景。
[0023](2)本發(fā)明的含苦參堿的藥物組合對ΤΜΕΜ16Α通道的抑制效率與目前所發(fā)現(xiàn)的其它抑制劑相比更高，其半數(shù)抑制濃度在100 μ Μ以內(nèi)。
[0024](3)苦參堿是一種天然產(chǎn)物化合物，是從豆科植物野苦參中提取的單一成份生物堿，來源豐富，屬于常見中草藥，提取簡單，經(jīng)濟實用。
[0025](4)本發(fā)明的含苦參堿的藥物組合配置方法簡單，成本低廉。
[0026](5)本發(fā)明的含苦參堿的藥物組合的應(yīng)用方法簡單，容易操作。
【附圖說明】
[0027]下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明進一步說明。
[0028]圖1為實施例13中，通過激光共聚焦掃描顯微鏡觀察到的轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A的CH0細胞的熒光效果對比圖，其中:
[0029]圖1A與圖1C為不同視野下，未加入Ca2+和苦參堿時，轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A和YFP的CH0細胞熒光圖；
[0030]圖1B為在與1A相同視野下加入600nM Ca2+后，轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A和YFP的CH0細胞熒光圖；
[0031]圖1D為在與1C相同視野下加入100口1苦參堿后的轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道11^116八和YFP的CH0細胞在加入600nM Ca2+后的熒光圖；
[0032]圖2為實施例14中，在加入苦參堿前后，轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A的CH0細胞的電流變化典型電流圖，其中:
[0033]圖2A為未灌流苦參堿的轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A的CH0細胞被600nM Ca2+激活的典型電流圖；
[0034]圖2B為轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A的CH0細胞被600nM Ca2+激活，再灌流苦參堿后的典型電流圖；
[0035]圖3為實施例14中，在轉(zhuǎn)染鈣激活氯通道TMEM16A的CH0細胞被600nM Ca2+激活后，加入含100 μΜ苦參堿的浴液后電流隨時間的變化圖，以及在用無苦參堿的浴液沖洗后電流隨時間的變化圖；
[0036]圖4為實施例15中，Eaet引起豚鼠回腸收縮反應(yīng)增強，