栝樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]、本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及栝樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 栝樓二醇（Karounidiol)，mD201-203°C ,主要存在于萌蘆科(Cucurbitaceae)括 樓 Trichosanthes kirilowii Maxim.的種子中，分子式：C3tlH48O2,分子量：440. 71，結(jié)構(gòu)式 為
現(xiàn)代藥理研宄表明，栝樓二醇具有抗腫瘤促進(jìn)作用。能抑制小鼠注入腫瘤促進(jìn)劑TPA 所致炎癥（ID50為0· 4mg/耳）。對于由7, 12-二甲基苯并[α ]蒽（DMBA)和TPA誘發(fā)的小 Μ膚腫瘤也有明顯的抑制作用。
[0003] 通過文獻(xiàn)檢索，國內(nèi)尚未見栝樓二醇用于制備抗腫瘤藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為滿足臨床需要，擴(kuò)大用藥品種，更好地治療腫瘤疾病，應(yīng)用栝樓二醇制備抗腫瘤 藥物。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下： 本發(fā)明所述的栝樓二醇，其制備方法包括以下步驟： (1) 取栝樓種子粉碎，按固液體積比為5 :1. 5-2加入夾帶劑，在壓力22-35MPa，溫度 35-48°C條件下，通入液態(tài)CO2萃取90-180min，在壓力7-9MPa，溫度30-35°C條件下解析，收 集萃取液； (2) 將步驟（1)中得到的萃取液加硅藻土攪拌脫色，過濾得到脫色液； (3) 將步驟（2)中得到的脫色液濃縮至相對密度為1. 12,上中性氧化鋁柱，用石油 醚-乙酸乙酯洗脫純化，得到栝樓二醇粗品； (4) 粗品經(jīng)過制備型高效液相色譜精制得到高純度的栝樓二醇。
[0006] 所述步驟（1)中，夾帶劑為甲醇或乙醇溶液。
[0007] 所述步驟（2)中，硅藻土加入量為藥材量的3-4. 5% 所述步驟（3)中，石油醚-乙酸乙酯的體積比為3:14。
[0008] 所述步驟（4)中，制備型高效液相色譜流動相為甲醇-乙腈-水，體積比為 19:38:45〇
[0009] 栝樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0010] 通過體外腫瘤細(xì)胞體外抑制試驗(yàn)，觀察栝樓二醇的抗腫瘤作用，結(jié)果表明栝樓二 醇對腹水型S180、肝癌及黑愾素瘤Β16均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副 作用小。
[0011] 本發(fā)明的有益效果通過以下實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證： 實(shí)驗(yàn)方法： 1、受試提取物：栝樓二醇提取物 (1)性狀：針晶，味苦。
[0012] (2)規(guī)格：含栝樓二醇彡90%。
[0013] (3)溶劑：乙醇或甲醇。
[0014] (4)儲存條件：4°C，密封保存。
[0015] 2、細(xì)胞株:腹水瘤細(xì)朐株S180、肝癌細(xì)朐株BEL-7404及黑色素瘤細(xì)朐株B16。
[0016] 3、給藥劑量和方法 栝樓二醇組：10mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。
[0017] 陰性對照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0018] 陽性對照組：30mg/kg/天，5-氟尿喃啶肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0019] 灌胃后2h，用HPLC檢測血漿藥物濃度。
[0020] 4、種植瘤模型的建立與給藥 (1)皮下種植：分別將上述細(xì)胞培養(yǎng)至90%融合，收集細(xì)胞，取2 X 10 6細(xì)胞懸液，注射 至小鼠肋下皮下組織，于術(shù)后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計(jì)算藥物對 模型動物存活率的影響。
[0021] (2)脾內(nèi)種植瘤肝轉(zhuǎn)移模型：取2X10 6細(xì)胞懸液注射至小鼠脾包膜內(nèi)，于術(shù)后15 天取脾和肝臟，測量瘤重和肝轉(zhuǎn)移數(shù)。
[0022] (3)給藥方式：種植瘤細(xì)胞同時給藥。
[0023] 5、結(jié)果 結(jié)果如表1、表2和表3顯示，栝樓二醇組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的 作用，可延長實(shí)驗(yàn)小鼠的生存期。
[0024] 表1栝樓二醇對種植瘤的抑制作用（η=20，Σ ±S)


由表1、表2和表3可以看出，栝樓二醇組用藥抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的效果與陽性對照組 基本相當(dāng)，可有效延緩實(shí)驗(yàn)小鼠的生存壽命，其效果明顯優(yōu)于對照組。
[0025] 本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時，將栝樓二醇與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫 瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
[0026] 本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂 肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0027] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 實(shí)施例1 栝樓二醇的制備 取500g栝樓種子粗粉，置于萃取釜中，按固液體積比為5 :2加入甲醇作為夾帶劑，在壓 力22MPa，溫度38°C條件下，通入液態(tài)C02, C02流量為4. 5ml/g生藥/min，萃取120min，在 壓力7MPa，溫度32°C條件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土攪拌脫色，過濾得到脫色液， 濃縮至相對密度為1. 12,上中性氧化鋁柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:8)，用石油醚-乙酸 乙酯3:14洗脫純化，得到栝樓二醇粗品；以體積比19:38:45甲醇-乙腈-水為流動相，粗 品用流動相溶解，注入制備型高效液相色譜儀，控制流速為20ml/min，收集目標(biāo)流分，連續(xù) 制備，冷凍干燥得高純度的栝樓二醇，經(jīng)HPLC檢測，純度95. 1%。
[0029] 實(shí)施例2 片劑：栝樓二醇40g，淀粉135g，鵝去氧膽酸鹽25g，制粒，壓片制成1000片。服用方法： 成人一次1片，一日2次。
[0030] 實(shí)施例3 膠囊：栝樓二醇40g，淀粉135g，殼聚糖25g，混勻，制成1000粒。服用方法：成人一次 1粒，一日2次。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.結(jié)構(gòu)式如下所示的括樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。如權(quán)利要求1所述的括樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，括樓二醇在 肝癌藥物中的應(yīng)用。3.如權(quán)利要求1所述的括樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，括樓二醇 在肝癌藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種栝樓二醇在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，通過體外腫瘤細(xì)胞體外抑制試驗(yàn)，觀察栝樓二醇的抗腫瘤作用，結(jié)果表明栝樓二醇對腹水型S180、肝癌、U937、U14及Lewis黑色素瘤均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。將栝樓二醇與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
【IPC分類】A61P35/00, A61K31/56
【公開號】CN104922134
【申請?zhí)枴緾N201510263173
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年5月22日